野生种菸草无菌株的原生质体游离培养技术的改进(英文)

以野生种菸草Nicotiana sylvestris(2n=24)和N. plumbaginifolia(2n=20)的无菌小植株为实验材料,比较了影响原生质体植板率的各种因素,改进了叶肉原生质体的游离和培养,使这两种野生菸草的原生质体植板率分别为40％和70％。使这两种菸草的原生质体培养系统可以用于细胞放射生物学的领域,例如研究突变效应。 对游离原生质体的方法作了改进,其主要优点是不需要撕表皮和离心。先在叶片的上表面轻轻地铺上金刚砂粉末,用刷子刷10—20秒,然后洗去粉末,在质壁分离剂中处理几小时,再在酶溶液里保温培养过夜(16小时),小心地吸去酶液后加入由0.5克分子浓度蔗糖和T_2无机盐组成的溶液,得到原生质体的悬浮液。再将悬浮液移入试管,在上面轻轻地加入培养基,沉淀1—2小时后从溶液界面或上层培养液中分离出原生质体,离心提纯并进行培养。 比较了供试材料的各种因素对原生质体植板率的影响。发现同种供试材料的基因型不同,植板率也有明显差异,因此实验前要筛选好的基因型;籽苗的嫩叶最适合原生质体的游离和培养,挑选2—3厘米长的幼叶为宜。因为这时细胞核有95％左右处于G_1期,并且不存在内多倍性;无菌小植株的培养器皿不要密封;供试材料的培养基中蔗糖浓度尽可能降低,5克/升可能是较好的;供试材料的培养以3,000 lux的低光     

烟草原生质体再生的愈伤组织与冠瘿组织分化的比较

普通烟草(Nicotiana tabacum L.)原生质体培养成植株的研究国内外已有不少报道。我们研究了红花大金元品种的烟草叶肉原生质体培养成植株的条件,并考虑到由根癌土壤杆菌(Agrobacterium tumefaciens)诱导的烟草冠瘿及其畸胎瘤与正常细胞有显著差别,它们在不加任何激素的培养基上细胞能继续分裂,增殖。如果冠瘿及畸胎瘤组织与原生质体再生的愈伤组织在分化芽和根方面也有差别,那末,利用它与正常细胞融合后,有可能提供更多的筛选杂种的条件,我们对这两种细胞在同样条件下分化芽和根的情况作了比较研究。     

水稻离体花粉培养诱导形成植株

被子植物离体花粉培养的研究,近几年在双子叶植物菸草上有了新进展,可使近10％的花粉诱导成为胚状体及植株(Nitsch,1974)。本文首次报道了禾本科植物水稻的离体花粉培养诱导形成植株的研究结果。     

从黄花烟草叶肉细胞原生质体再生植株

用自制的纤维素酶从黄花烟草(Nicotiana rustica L.)的叶肉细胞获得大量有活力的原生质体。应用液体一固体双层培养法将叶肉细胞原生质体离体培养,经生长,分裂,形成愈伤组织,并分化成再生植株。对液体—固体双层培养法与固体平板法进行了比较,黄花烟草的细胞分裂速度前者比后者快。     

利用植物体细胞融合在种间传递胞质雄性不育性

美国康奈尔大学Zelcer等人利用正常的Nicotiana sylrestris和经X射线照射的雄性不育普通菸草的原生质体融合,实现了胞质雄性不育性的种间传递。他们利用X射线可以遏止胞质雄性不育“亲本”原生质体的细胞分裂和甘露醇培养基不利于N.sylvestris原生质体生长的特性,选择出融合产物。为了弥补融合产物频率低的缺点,采用了原生质体喂养层技术。结果从7块愈伤组织得到31株变异株。其中,A组20株,具有N.sylvestris的茎、叶、花的形态特     

大豆子叶原生质体游离和培养因子的研究

大豆悬浮培养细胞原生质体的游离和培 养。3,13,203及遗传操作应用的研究“,7,8,11,15,21,25,已 有报道。近年来,一些学者直接从大豆植株的 不同器官或部位如豆荚组织〔271、幼苗根[261、叶 肉[22,24,和子叶『2,19,游离和培养原生质体获得好 的结果。本试验叙述大豆实生苗和未成熟种子 两类子叶原生质体游离和培养因子的异同,以 利于子叶原生质体遗传操作应用和植株分化的 进一步研究。     

大豆子叶原生质体游离和培养因子的研究

大豆悬浮培养细胞原生质体的游离和培养及遗传操作应用的研究已有报道。近年来,一些学者直接从大豆植株的不同器官或部位如豆荚组织、幼苗根、叶肉和子叶游离和培养原生质体获得好的结果。本试验叙述大豆实生苗和未成熟种子     

光棘豆悬浮细胞原生质体培养再生小植株(简报)

迄今为止,药用植物原生质体培养再生植株的报道还不多。光棘豆(Oxytropis leptophylla)是多年生豆科植物,可饲用,是一种常用的野生中草药。全株入药有清热解毒功能,用于治疗痈疤肿毒。已有研究表明,光棘豆具有离体培养时愈伤组织增殖快、植株再生频率高的特点。进行原生质体培养再生植株的研究将有助于光棘豆的改良和驯化,为其开发利用提供基础。本文首次报道了光棘豆悬浮细胞原生质培养再生小植株的结果。     

天蓝苜蓿原生质体培养再生植株

苜蓿属（Ｍｅｄｉｃａｇｏ）植物多为优质牧草,是进行原生质体培养研究较多的一个属。至今已有１０余种苜蓿属植物进行过原生质体培养的研究,多数获得了再生植株［１～６］。天蓝苜蓿是一种优质牧草、绿肥和药用植物。关于它的体外培养已有一些报道［５,７,８］,但原生质体培养尚未能再生植株。本文以悬浮系为材料进行了原生质体的分离与培养,并经胚状体发生和器官发生两种途径获得了再生植株。１　材料和方法天蓝苜蓿（ＭｅｄｉｃａｇｏｌｕｐｕｌｉｎａＬ．）种子采集于吉林省西部草原。干种子用浓硫酸浸泡３ｍｉｎ,升汞灭菌５ｍｉ…     

红豆草愈伤组织原生质体再生植株

红豆草又名驴豆,是一种耐旱性较强的多年生豆科牧草。其蛋白质含量高,作为饲料适口性好,并且不发生臌胀病,因此被看作是进行体细胞杂交,改良其它豆科牧草的理想亲本。然而要实现这一目标,必须掌握原生质体培养成再生植株的最适条件和规律。曾有过叶片原生质体培养的报道。本研究用我国西北地区种植的红豆草愈伤组织分离原生质体,并培养形成再生植株。     

野生大豆原生质体再生植株

1987年我们首次通过栽培大豆(Glycine max)的原生质体培养得到再生植株,最近又相继从栽培大豆的6个品种的原生质体分别获得再生植株,移栽于土中后均能正常开花结实。至于大豆野生种中的G.canescens和G.clandestina的原生质体培养已有再生植株或形成芽的报道。但在野生大豆G.soja的原生质体培养中仅见胚状结构的形成,迄今未获得再生植株。     

运用生物技术开展水稻育种

近年来,许多学者报道水稻原生质体培养成功并获得其再生植株。这一成就必然打破水稻育种与发展中的生物技术之间的隔墙。本文将介绍这些技术是如何发展的,以及这些技术将如何有助于推动水稻育种。水稻原生质体培养和植株再生许多学者用培养的水稻细胞,能容易地分离得到原生质体,并成功地使分离的原生质体经培养、壁再生、细胞分裂而再生成植株。在此研究中,用于分离原生质体的愈伤组织或悬浮细胞的质量极为重要,因为水稻原生质体的分离和培养     

玉米原生质体再生可育性植株

尽管最近在禾谷类作物原生质体再生植株方面已取得显著进展,但这些再生株往往不育.因而,其有效性受到限制.目前,CIBA-GEIGY公司和DNA植物技术(DNAPT)公司研究人员报道,他们已从玉米原生质体再生出可育性植株.DNAPT公司的L.M.Prioli和M.R.Sonduhl利用热带玉米自交系中快速生长胚胎发生细胞悬浮培养物分离出的原生质体进行了研究.在各种培养条件下,包括在一薄层液体培养基上或玉米细胞的滋养层上的原生质体培养,获得了能产生育性植株的胚胎发生愈伤组织.     

棉花原生质体再生小植株

80年代植物原生质体培养取得突破性进展,水稻、小麦、玉米和大豆等重要农作物先后获得再生植株。但棉花原生质体培养至今仍停留在细胞分裂和形成细胞团阶段,原生质体培养得到愈伤组织仅有一例。本文首次报道从陆地棉柯字棉312品种的细胞悬浮培养系原生质体培养获得再生小植株的试验结果。     

烟草根培养的植株再生

菸草是通过组织培养研究形态发生极为良好的试验材料,以往利用烟草的叶片和茎段等培养曾作过不少工作。但利用烟草根段进行培养则未见报道。为了进一步扩大烟草材料的试验范围及探讨烟草根的脱分化能力、要求的条件及植株再生的规律,本试验用烟草根段进行了培养并经愈伤组织或直接分化出芽两种形式获得植株。     

花烟草原生质体的再生植株

花烟草(Nicotiana alata Link Otto)由于其有明显的形态特点以及含有2n=18个染色体的细胞学特征易区别于普通烟草(2n=48)。这种野生的烟草是组织培养及细胞杂交中的一个有用材料。Bourgin,P.曾由此种烟草的单倍体叶肉原生质体培养出再生植株,但其倍性变     

烟草叶肉原生质体悬滴培养成再生植株

普通烟草(Nicotiana tabacum L.)“革新一号”和“柳叶”的叶肉原生质体悬浮液,在6厘米直径的培养皿皿盖反面滴7—12滴,每滴5—10微升,含200—300个原生质体。皿底内加3毫升0.4M甘露醇溶液以保持湿度。然后置于恒温中培养。经观察叶肉原生质体在NT培养液中,培养7天后发生第1次分裂,12天后形成细胞团,20几天后进一步分裂,形成肉眼可见的愈伤组织。以后将它转移到MS培养基,使其生长到一定大小的愈伤组织,再转移到诱导分化茎叶、根的培养基,获得完整的再生植株。     

烟草叶肉原生质体再生壁形成的培养条件的研究

用EA_3-867纤维素酶分离的烟草(Nicotiana tabacum)叶肉原生质体,在不同培养条件下进行液体浅层培养,用荧光增白剂VBL染色荧光法和低渗冲击法研究了再生壁形成的某些培养条件。结果表明,600～1000米烛光的弱光、10~5个原生质体/毫升的密度以及蔗糖或甘露醇作碳源,有利于壁的再生。     

从棉花胚性细胞原生质体培养获得植株再生

原生质体培养植株再生是进行体细胞杂交与基因工程操作的重要基础工作。近年来,国内外已有一些关于棉花原生质体分离与培养的研究报告,1986年 Firoozabady 报道从陆地棉(Ghirsutum)叶肉原生质体培养获得2—3个细胞的微克隆,1987年 Ka~-     

水稻原生质体培养及植株再生的研究

由粳稻77-170品系及籼稻品种IR-50的细胞悬浮培养物游离的原生质体,用琼脂糖包埋于RY-2培养基中,发生了持续分裂。前者植板率达2.5％以上,二者最后都再生出植株。对游离和培养方法做了如下改进:1)采用两步法,即先用果胶酶,再用果胶酶和纤维素酶的混合酶进行游离,可避免原生质体发生融合并获得高质量的原生质体;2)悬浮细胞培养基中加入ABA有利于原生质体的存活和分裂;3)琼脂糖包埋培养可大大提高植板率;4)用较高渗透压的培养基培养原生质体再生的细胞团及愈伤组织,可提高植株再生频率。由于这两个品种(系)的培养物都已继代一年半之久,再生植株均为白化苗。这是迄今第一个由籼稻原生质体再生植株的报道。