鸡Zong凝集素的分离纯化与性质研究

鸡Ｚｏｎｇ菌丝体浸取液依次经硫酸铵分级沉淀,ＤＥＡＥ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ＣＬ－６Ｂ离子交换层析和Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００分子筛层析３个主要步骤纯化得到一种凝集素（ＴＡＬ）。纯化的ＴＡＬ在聚丙烯酰胺凝胶电泳上显示一条蛋白质着色带。ＴＡＬ的分子量为８９．４ｋＤ,亚基分子量为３８ｋＤ和５１ｋＤ,提示ＴＡＬ分子由两个不同亚基组成。ＴＡＬ具有供血动物种属专一性,使Ｗｉｓｔａｒ大鼠红细胞凝集所需ＴＡＬ最     

厚果鸡血藤凝集素的纯化及性质

从厚果鸡血藤（ＭｉｌｅｔｉａｐａｃｈｙｃａｒｐａＢｅｎｔｈ．）的种子中分离纯化出一种具强凝集活性和强促有丝分裂原的凝集素。种子经磨粉、浸取、硫酸铵分级、ＤＥＡＥＳｅｐｈａｒｏｓｅ离子交换和ＳｅｐｈａｄｅｘＧ１００分子筛层析,即可获得在ＰＡＧＥ和ＳＤＳＰＡＧＥ上均呈现单一蛋白染色带的凝集素纯品,分子筛层析测得分子量为４０７００,ＳＤＳＰＡＧＥ测得亚基分子量为１９８００;含有１７８％的中性糖。氨基酸组成分析表明,该凝集素富含Ａｓｐ、Ｇｌｕ、Ｔｈｒ、Ｓｅｒ和Ｌｅｕ,同时含有４个Ｔｒｐ,当凝集素浓度为０．４８μｇ／ｍＬ时,即可凝集兔红细胞;对人Ａ、Ｂ和Ｏ型血细胞都能发生凝集,故无血型专一性;其凝集兔红细胞的凝集活性,不能被常见糖类抑制,但可被甲状腺球蛋白、胃粘蛋白和卵粘蛋白所抑制;其凝集活性强烈地依赖于Ｃａ２＋的存在,但Ｍｇ２＋、Ｍｎ２＋、Ｚｎ２＋对其凝集活性全无促进作用;该凝集素是一种强促有丝分裂原,对人外围血中淋巴细胞的转化率高达８４３％,细胞分裂比率可达７８％。     

红花菜豆凝集素的糖结合专一性

经肼解、Ｂｉｏ－Ｇｅｌ Ｐ－２柱层析、ＮａＢ＾３Ｈ４和ＮａＢＨ４还原,制备各种来源的、氚标记在还原末端的、还原末端为Ｎ－乙酰氨基葡萄糖醇的混合寡糖,经Ｂｉｏ－Ｇｅｌ Ｐ－４凝胶柱分离,以及用糖苷酶酶解,制备了各种不同类型的氚标记的寡糖。这些寡糖在固定化的ＰＣＬ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱上亲和层析,根据各种类型寡糖在ＰＣＬ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱上的层析行为,确定红花菜豆（矮生红花变种）凝集素（ＰＣＬ）的     

猪精子凝集素在精卵结合中的作用机制

猪精子凝集素（ＢＳＬ）位于精子头部,既与精子蛋白结合,亦与透明带糖蛋白ＺＰ３结合。并且ＢＳＬ自身分子间亦会聚合。与ＺＰ３结合的片段亦结合于岩藻素－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和柱,但不与胎球蛋白－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ柱结合。该片段具有较强的抑制精卵结合的活性。ＢＳＬ经ＮＢＳ修饰后,血凝活力大大下降,同时推动与精子结合的活性,但不影响它与ＺＰ３的结合。修饰后的ＢＳＬ亦显著抑制精卵结合。表明ＢＳＬ以两个不同的部     

芦荟凝集素的分离、纯化和部分性质的研究

新鲜芦荟叶（Ａｌｏｅ ｖｅｒａ Ｌ．ｖａｒ．ｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｈａｗ．）Ｂｅｒｇｅｒ）于室温用低浓度ＮａＣｌ溶液提取。离心和透析后,经Ｎ－乙酰氨基葡萄糖０Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ亲和层析,分离纯化出芦荟凝集素（ＡＣＬ）。用ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００测表观分子量为３５ＫＤ,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ出现两条色带;染色 ;宽带和较浅的罕带。亚基分子量分别为１５ＫＤ和２０ＫＤ。能专一性凝集兔血细胞和人血红细胞     

棉花凝集素的纯化及性质研究

抗枯萎、抗黄萎病的棉种的浸取液,经硫酸铵分级,纤维素柱、亲和层析后,再经分子筛过滤,获得在ＰＡＧＥ、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ或ＨＰＬＣ柱上均呈现单一蛋白带的棉花凝集素。该凝集素只凝集兔红细胞,对人Ａ、Ｂ或Ｏ型血细胞均不凝集,其凝集活性可被半乳糖或猪甲状腺球蛋白等所抑制。棉花凝集素在６５℃加热５ ｍ ｉｎ,即丧失全部凝集活性;它的凝集活性强烈地依赖于Ｃａ２＋ ;Ｍｎ２＋ 对活性也有促进作用,Ｍｇ２＋ 则无作用。经凝胶过滤或ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测定,凝集素的分子量为６３０００,Ｎ－末端氨基酸为Ｖａｌ。凝集素含有１．５％ 的中性糖,是一种促有丝分裂原,细胞转化率为５０．３％ 。     

青山羊小肠凝集素的分离,纯化及性质研究

报道了青山羊小肠凝集素的分离,纯化及性质研究。青山羊小肠先经过含有疏基乙醇的磷酸缓冲液抽提,然后上Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂ柱及ＤＥＡＥ－ＣＥＬＬＵＬＯＳＥ－２３柱,得到纯化的青山羊小肠凝集素,采用ＳＤＳ电泳法测得其分子量在６６ １００左右,而且该凝集素不含糖,对人Ｂ型血球有专一性凝集作用。半抗原抑制实验表明它对半乳糖（乳糖）有亲和性,其中酸性氨基酸含量较高,组氨酸,蛋氨酸含量较低,该凝集素在胚胎期     

天花粉凝集素的固定化及其应用

制备了天花粉凝集素ＴＫＬ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ的亲和柱,用来分离其它来源物质中与ＴＫＬ相互作用的糖复合物,发现从兔红细胞的血影细胞的抽提物中可以得到分子量为６２ｋＤ,４０ｋＤ等糖蛋白,这可能就是ＴＫＬ凝集兔红细胞的分子基础,从人及骆驼,绵羊血浆中也能得到与ＴＫＬ结合的,分子量不等的糖蛋白,进一步鉴定人血浆ＴＫＬ结合物中含有α１－抗胰蛋白酶等,为从血浆中分离这些糖蛋白提供了较为便利的方法,在寻找天     

天花粉凝集素的固定化及其应用

制备了天花粉凝集素ＴＫＬ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ的亲和柱,用来分离其它来源物质中与ＴＫＬ相互作用的糖复合物,发现从兔红细胞的血影细胞的抽提物中可以得到分子量为６２ｋＤ,４０ｋＤ等糖蛋白,这可能就是ＴＫＬ凝集兔红细胞的分子基础。从人及骆驼、绵羊血浆中也能得到与ＴＫＬ结合的、分子量不等的糖蛋白,进一步鉴定人血浆ＴＫＬ结合物中含有α＿１－抗胰蛋白酶等,为从血浆中分离这些糖蛋白提供了较为便利的方法。在寻找天花粉植物体内此凝集素的内源受体时,探讨了它可能的生理功能。     

洋紫荆凝集素的分离纯化和性质

利用酸化处理的Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ６Ｂ亲和柱从洋紫荆种子中分离纯化出了洋紫荆凝集素（ＢＶＬ）,其比活性比抽提液提高了１５９倍,活力回收率为４９．０％。ＢＶＬ分子量为８１０００,由两个相同的亚基组成。等电聚焦凝胶电注测得其等电点为４．９５。其紫外吸收高峰在２７６ｎｍ处。ＢＶＬ具一定的的热稳定性和酸碱稳定性。Ｎ－乙酰－Ｄ氨基半乳能强烈地抑制ＢＶＬ对兔红细胞的凝集作用。乳糖、半乳糖也有较强的抑制定性。Ｎ     

青山羊（Capra，hircus）小肠凝集素的分离、纯化及性质研究

报道了青山羊小肠凝集素的分离、纯化及性质研究。青山羊小肠先经过含有巯基乙醇的磷酸缓冲液抽提,然后上Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ６Ｂ柱及ＤＥＡＥ－Ｃｅｌｌｕｌｏｓｅ－２３柱,得到纯化的青山羊小肠凝集素。采用ＳＤＳ电泳法测得其分子量在６６１００左右,而且该凝集素不含糖,对人Ｂ型血球有专一性凝集作用。半抗原抑制实验表明它对半乳糖（乳糖）有亲和性。其中酸性氨基酸含量较高,组氨酸、蛋氨酸含量较低。该凝集素在胚胎期出现,出生后几个月达到高峰然后逐渐下降,最后消失。     

大瓶螺凝集素的分离纯化及部分性质研究

大瓶螺蛋白腺经磷酸盐缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－１００和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ凝胶过滤,可获得在不连续ＰＡＧＥ（ｐＨ４．３和ｐＨ８．９）上显示单一蛋白质染色带的大瓶螺凝集素（ＡＧＬ）．该凝集素对人血红细胞无血型专一性,但对Ａ型血红细胞的凝集作用最强．ＡＧＬ的血凝活力可被乳糖或半乳糖所抑制．ＡＧＬ分子中的中性糖含量为０．２４ｍｇ／ｍｇ蛋白质．用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得其亚基分子量为１５０００,且只有一种亚基．ＡＧＬ中Ｃｙｓ和Ｐｈｅ的含量较高,并较耐热．     

红花菜豆凝集素的荧光光谱学研究

利用荧光光谱方法研究了红花菜豆凝集素（Ｐｈａｓｅｏｌｕｓｃｏｃｃｉｎｅｕｓｖａｒ．ｒｕｂｒｏｎａｎｕｓｌｅｃｔｉｎ,简称ＰＣＬ）,结果表明ＰＣＬ分子各亚基中的两个色氨酸（Ｔｒｐ）残基分别位于ＰＣＬ分子表面和分子内。标记了ＤＮＳ的ＰＣＬ荧光偏振研究指出,致使ＰＣＬ在１０ｍｍｏｌ／ＬＳＤＳ条件下失活的主要原因可能是亚基解离。荧光偏振研究还表明,甲状腺球蛋白、甘露聚糖、海参多糖硫酸酯可与ＰＣＬ结合。荧光探针ｂｉｓ－ＡＮＳ与ＰＣＬ的结合可引起明显的荧光增强和发射谱蓝移,表明ＰＣＬ分子中存有疏水区域。结合了的ｂｉｓ－ＡＮＳ还可和ＰＣＬ中的Ｔｒｐ发生能量传递。     

大瓶螺凝集素的分离纯化及部分性质研究

大瓶螺蛋白腺经磷酸盐缓冲液抽提、硫酸铵分级沉淀、Ｓｅｐｈａｄｅｘ Ｇ－１００和Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ ４Ｂ凝胶过滤,可获得在不连续ＰＡＧＥ（ｐＨ４．３和ｐＨ８．９）上显示单一蛋白质染色带的大瓶螺凝集素（ＡＧＬ）。该凝集素对人血红细胞无血型专一性,但对Ａ型血红细胞胞的凝集作用最强。ＡＧＬ的血凝活力可被乳糖或半乳糖所抑制。ＡＧＬ分子中的中性糖含量为０．２４ｍｇ／ｍｇ蛋白质。用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ法测得其亚基分     

猪精子凝集素的纯化,性质及其作用

用胎球蛋白－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ亲和层析和凝胶过滤层析从精子和精浆中分离纯化了猪精子凝集素（简称ＢＳＬ）。ＢＳＬ的血凝活性只被若干糖蛋白和聚糖所抑制。ＢＳＬ的分子量为５６ｋｄ,由分子量分别为１３．６ｋｄ（β）和１６．０ｋｄ（α）的两个不同的亚基以α１β３所组成。ＢＳＬ为糖蛋白,含中性糖３．２％,不含唾液酸。用ＥＬＩＳＡ法测定猪精子中ＢＳＬ的含量及分布,表明７０％嵌入在精子膜中,２５％结合在精子表面,     

猪C1q的分离纯化与鉴定

猪Ｃ１ｑ由猪血清通过ＰＥＧ沉淀优球蛋白、低离子强度透析沉淀、ＩｇＧ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４８亲和层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ－２００凝胶层析等步骤分离纯化,每３００ｍｌ血清可制得９．８ｍｇＣ１ｑ,产率为４６．７％。纯化的猪Ｃ１ｑ在ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上显示出三条染色带,分别在２９、２６、２２ｋＤ处,薄层扫描结果表明纯度达９１％;纯化的Ｃ１ｑ保持了较高活性,终浓度为４μｇ／ｍｌ时仍可使致敏的绵羊红细胞出现明显的凝集现象。猪Ｃ１ｑ－ＥＬＩＳＡ结果表明,动物Ｃ１ｑ代替人Ｃ１ｑ应用于临床检测是可行的。     

从绿藻礁膜（Monostroma nitidum Wittr）分离半乳糖专一的凝集素

礁膜（Monostroma nitidum Wittr）经 25%～80%硫酸铵分级、DEAE-纤维素52离子交换层析和Sephadex G-200凝胶过滤层析,得到纯化礁膜凝集素（Monostroma nitidum lectin,MNL）,在SDS-PAGE上显示单一蛋白染色带. 用Sephadex G-200层析测得其分子质量为66.6 kD, 用SDS-PAGE测得其分子质量为66.2 kD．该凝集素可以凝集人A、B、AB、O型红细胞,且凝集活性相同. 在对人（A、B、AB、O）、兔、鲤、鲫、鼠、羊、鸡、狗的红细胞凝集作用中,兔凝集作用最强．该凝集素在pH 4.00～10.53范围内均有活性,但在pH 5.20～9.40范围内活性最大．经100 ℃热处理30 min后,该凝集素对兔红细胞血凝活性保留25%,活性最大的温度范围为25～55 ℃．MNL被EDTA抑制,最小抑制浓度为3.13 mmol/L,但对 Ca^２＋和Mg^２＋不敏感．该凝集素凝集兔红细胞的作用不被D -果糖、D-甘露糖、D-葡萄糖、蔗糖、麦芽糖、γ-球蛋白、牛甲状腺球蛋白所抑制,但被D- 半乳糖和乳糖抑制,最小抑制浓度分别为5 mmol/L和2.5 mmol/L．     

油麻藤种子中凝集素的纯化及性质的研究

中药常春油麻藤种子中含有Ａ型血专一性的凝集素（ＭＳＬ）．该凝集素可经盐析、离子交换及凝胶过滤进行纯化,当其浓度为０．４９μｇ／ｍｌ时就能凝集人Ａ型血细胞,对人类Ｂ、Ｏ型及兔红细胞无作用．Ｇａｌ,ＧａｌＮＡｃ和胃粘蛋白对ＭＳＬ的凝血活性有强抑制作用．ＭＳＬ含中性糖５．７％,凝胶过滤测得分子量为１３１８００,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量为６６０００和３３０００,表明ＭＳＬ可能由两个不同亚基组成．ＭＳＬ还是一种促有丝分裂原,对人外周血中淋巴细胞的转化率可达７６．２％．     

红花菜豆凝集素的荧光光谱学研究

利用荧光光谱方法研究了红花菜豆凝集素,结果表明ＰＣＬ分子各亚基中的两外色氨酸残基分别位于ＰＣＬ分子表面和分子内,标记了ＤＮＳ的ＰＣＬ荧光偏振研究指出,致使ＰＣＬ在１０ｍｍｏｌ／Ｌ ＳＤＳ条件下失活的主要原因可能是亚基解离。荧光偏振研究还表明,甲状腺球蛋白、甘露聚糖,海参多糖硫酸酯可与ＰＣＬ结合,荧光探针ｂｉｓ－ＡＮＳ与ＰＣＬ的结合可引起明显的荧光增强和发射谱蓝移,表明ＰＣＬ分子中存有疏水区域,结合     

油麻藤种子中凝集素的纯化及性质的研究

中药常春油麻藤种子中含有Ａ型血专一性的凝集素（ＭＳＬ）。该凝集素可经盐析、离子交换及凝胶过滤进行纯化,当其浓度为０．４９μｇ／ｍｌ时就能凝集人Ａ型血细胞,对人类Ｂ、Ｏ型及兔红细胞无作用。Ｇａｌ,ＧａｌＮＡｃ和胃粘蛋白对ＭＳＬ的凝血活性有强抑制作用。ＭＳＬ含中性糖５．７％,凝胶过滤测得分子量为１３１８００,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ测得分子量为６６０００和３３０００,表明ＭＳＬ可能由两个不同亚基组成。ＭＳＬ还