转基因培育抗除草剂水稻

以ｐＡＨＣ２０（含Ｂａｒ基因）和ｐＷＲＧ１５１５（含ＧＵＳ基因和潮霉素抗性基因）以及含Ｂａｒ基因和雪莲凝集素（ＧＮＡ）基因的ｐＣＡＭＢＩＡ３３００ ＲＧ为供体ＤＮＡ,选用水稻品系８７２０３、上农香糯及鄂宜１０５的成熟胚诱导出的愈伤组织及微不定芽为受体材料,分别采用基因枪和根癌农杆菌（ＬＢＡ４４０４,含ｐＡＬ４４０４）导入法进行基因转化;经抗性筛选、ＧＵＳ检测和ＰＣＲ分析。结果表明,外源基因已通过基     

金鱼草基因转化和转基因植株再生

本实验采用根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４（ｐ３５ＳＧＵＳＩＮＴ与金鱼草下胚轴切段共培养,将ＧＵＳ基因导入金鱼草细胞,通过不定芽发生途径获得抗Ｇ４１８再生植株．经ＤＮＡ／ＤＮＡ斑点杂交及ＧＵＳ活性原位组织检测初步证实外源基因ＧＵＳ已整合进金鱼草基因组并得到表达．     

绿色荧光蛋白基因在青蒿转基因芽中的表达

将改良的绿色荧光蛋白（ＧＦＰ）基因,插入到植物表达载体中,构建双ＣａＭＶ３５Ｓ启动子驱动下的植物表达载体ｐＢＩＧＦＰ,在Ｋａｍ浓度为２０ｍｇ／Ｌ的筛选培养基上,用含有ｐＢＩＦＰ质粒的根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４感染青蒿叶片,获得５个抗Ｋａｎ阳性丛生芽系。Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｔｉｎｇ分析表明,外源ＧＦＰ基因已整合到青蒿转基因芽Ｇ－１系的基因组中。在ＯＬＹＭＰＵＳ－ＢＨ２型荧光显微镜下,观察到转基因     

植物表达载体pKC—3的构建及大分子DNA连接策略

以根癌农杆菌双元载体ｐＣＡＭＢＬＡ１３００为基础,先后连接含有马铃薯蛋白酶抑制剂－Ⅱ基因（ＰⅡ）、苏云金杆菌毒蛋白基因（Ｂ．ｔ ｃｒｙＩ（Ａ））及雪花莲外源凝集素基因（ＧＮＡ）的完整表达片段,构建了抗多种稻田害虫的表达载体ｐＫＣ－３,将其导入根癌农杆菌ＬＢＡ４４０４,可进一步用于水稻抗虫基因转化的研究。载体构建进程采用多次的大分子ＤＮＡ片段连接,总结出了一套适合大片段连接转化的可行策略。     

牛生长激素基因在马铃薯中的表达

将牛生长激素基因ｃＤＮＡ 与Ｐａｔａｔｉｎ ＣｌａｓｓＩ启动子及ＮＯＳ３终止子连接,构建了表达载体ｐＰＢＧＴ． 用直接法将表达载体转入农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍ ｅｆａｃｉｅｎｓ） ＬＢＡ４４０４（ｐＲＡＬ４４０４）菌株, 用此菌株转化马铃薯（Ｓｏｌａｎｕｍ ｔｕｂｅｒｏｓｕｍ ）得到再生植株． 经ＮＰＴⅡ活性检测,总ＤＮＡ ＰＣＲ和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔ证明目的基因已整合到马铃薯基因组中．ＲＮＡ 点杂交和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ表明牛生长激素基因已在转基因马铃薯块茎中转录和表达     

蓝藻原生质球渗透稳定剂的研究

蓝藻原生质球渗透稳定剂的研究郭厚良,陈勇,金传荫（武汉大学生物系,４３００７２）（中国科学院水生生物研究所,武汉４３００７２）ＡＳＴＵＤＹＴＯＴＨＥＳＴＡＢＩＬＩＺＥＲＳＩＳＯＬＡＴＩＮＧＯＦＢＬＵＥ－ＧＲＥＥＮＡＬＧＡＬＳＰＨＥＲＯＰＬＡＳＴＳ￥Ｇ...     

矮牵牛花同源异型基因fbp2的克隆及其对烟草花形态的影响

以矮牵牛（Ｐｅｔｕｎｉａ　ｈｙｂｒｉｄａ　Ｌ．）栽培品种为材料,取开放前的花蕾分离ｍＲＮＡ,反转录合成ｃＤＮＡ,以ｃＤＮＡ为模板,通过ＰＣＲ扩增,对获得的目的片段进行序列分析。结果表明,分离的目的片段含有６８６个核苷酸（含有起始密码和终止密码）。核苷酸序列与文献报道相比,同源率为９９．６％,只有３个碱基发生改变,５’端的ＭＡＤＳ盒区域完全相同。将得到的矮牵牛花同源异型基因ｆｂｐ２的ｃＤＮＡ（ｙｆｂｐ２）与ＣａＭＶ３５５启动子和ＮＯＳ３’终止子融合,构建了表达载体ｐＢＢＰ２。表达载体通过农杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ　ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ）ＬＢＡ４４０４（ｐＡＬ４４０４）介导转化烟草（ＮｉｃｏｔｉａｎａｔａｂａｃｕｍＬ．）叶片,在含有１００ｍｇ／Ｌ卡那霉素的抗性培养基上再生成株。对抗性株进行总ＤＮＡＳｏｕｔｈｅｒｎ杂交和总ＲＮＡ的点杂交,证明目的基因已导入烟草细胞中,整合到烟草基因组上,并且在烟草细胞中转录。同源异型基因ｆｂｐ２导入烟草后导致烟草花型改变,在雄蕊上产生了花瓣。     

中国黄耆属一新种

中国黄耆属一新种朱相云,陈家瑞（中国科学院植物研究所,北京１０００－９３）ＡＮＥＷＳＰＥＣＩＥＳＯＦＡＳＴＲＡＧＡＬＵＳ（ＬＥＧＵＭＩＮＯＳＡＥ）ＦＲＯＭＣＨＩＮＡ￥ＺｈｕＸｉａｎｇｙｕｎａｎｄＣｈｅｎＣｈｉａｒｕｉ（ＩｎｓｔｉｔｕｔｅｏｆＢｏｔａｎ...     

生物技术生产生物可降解塑料PHB的前景

生物技术生产生物可降解塑料ＰＨＢ的前景谢安勇,宋艳茹（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＰＲＯＳＰＥＣＴＯＦＰＲＯＣＵＣＩＮＧＰＨＢ,ＡＢＩＯＤＥＧＲＡＤＡＢＬＥＰＬＡＳＴＩＣＢＹＵＳＩＮＧＢＩＯＴＢＣＨＮＯＬＯＧＹ￥ＸｉｅＡｎ－ｙｏｎｇ;Ｓｏ...     

日本血吸虫(中国大陆株)谷胱甘肽转移酶编码区基因的体外扩增、克隆及在原核细胞的高效表达

为表达、获取日本血吸早谷胱甘肽转移酶（ＳｊＧＳＴ）基因工程重组蛋白,以日本血吸虫（中国大陆株）ｃＤＮＡ为模板,设计、合成特定寡核苷酸引物,ＲＴ－ＰＣＲ法扩增ＧＳＴ编码基因序列,将扩增产物连接ｐＧＥＭ－Ｔ克隆载体,再亚克隆到真、原核表达质粒ｐＢＫ－ＣＭＶ中,转染大肠杆菌ＸＬ１－ｂｌｕｅ,经ＩＰＴＧ诱导后用ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分析表达效果。结果 ＲＴ－ＰＣＲ法特异性扩增出日本血吸虫ＧＳＴ编码区基因片段,其     

花粉白化苗高频发生的遗传基础

花粉白化苗高频发生的遗传基础陈纯贤孙敬三（中国科学院植物研究所,北京１０００９３）朱立煌（中国科学院遗传研究所,北京１００１０１）ＧＥＮＥＴＩＣＢＡＳＩＳＯＮＡＬＢＩＮＯＳＦＲＥＱＵＥＮＴＬＹＤＥＲＩＶＥＤＦＲＯＭＡＮＴＨＥＲＣＵＬＴＵＲＥＣｈｅｎＣ...     

发根农杆菌对黄瓜的遗传转化

发根农杆菌对黄瓜的遗传转化施和平李玲潘瑞炽（华南师范大学生物系广州５１０６３１）关键词发根农杆菌,黄瓜,毛状根,冠瘿碱ＧＥＮＥＴＩＣＴＲＡＮＳＦＯＲＭＡＴＩＯＮＯＦＣＵＣＵＭＩＳＳＡＴＩＶＵＳＢＹＡＧＲＯＢＡＣＴＥＲＩＵＭＲＨＩＺＯＧＥＮＥＳＳＨＩ...     

嗜碱细菌NTT36嗜碱基因的亚克隆及其在大肠杆菌和农杆菌中的表达

将大肠杆菌ＨＢ１０１嗜碱转化子中质粒ｐＧＣＡ所携带的嗜碱基因亚克隆至双元载体ｐＢＩ１２１质粒中,构建了植物表达载体ｐＬＧＣ重组质粒。用其转化大肠杆菌ＨＢ１０１获得了能在碱性和卡那霉素抗性平板上生长的转化子,再通过三亲交配法将亚克隆质粒ｐＬＧＣ转化进农杆菌ＬＢＡ４４０４,又获得能在碱性平板和卡那霉素及利福平双抗平板上生长的转化子,Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交结果表明ＨＢ１０１转化子亚克隆质粒ｐＬＧＣ是由来自于嗜碱芽孢杆菌ＮＴＴ３６染色体ＤＮＡ和双元载体ｐＢＩ１２１组成,且农杆菌ＬＢＡ４４０４转化子含有来自大肠杆菌亚克隆转化子的ｐＬＧＣ质粒。     

雪花莲外源凝集素基因转化番茄

将含有雪花莲外源凝集素基因（ＧＮＡ）的质粒ｐＲＳＳＧＮＡ１通过冻融法转化到根癌土壤杆菌９Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ（Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）菌株ＬＢＡ４４０４中。采用叶盘法转化番茄（Ｌｙｃｏｐｅｒｓｉｃｏｎ ｅｓｃｕｌｅｎｔｕｍ Ｍｉｌｌ．）栽培品种“Ｃ８”、“Ａ３９”和“Ａ５３”,获得了含ＧＮＡ基因的４３株转化植物株。通过卡那霉素抗性鉴定、ＮＰＴⅡ基     

根癌农杆菌对甘蓝型油菜的转化及转基因植的再生

用根癌农杆菌共培养法把外源基因导入甘蓝型油菜主要栽培品种“云北２号”,获得转基因植株。所用外植体为带有１－２ｍｍ子叶柄的完整子叶,根癌农杆菌为Ａ２０８ＳＥ（ｐＴｉＴ３７－ＳＥ,ｐＲＯＡ９３）。Ｔｉ质粒ｐＲＯＡ９３带有ＮＰＴⅡ及ＧＵＳ嵌合基因。共培养２天后转到附加２５ｍｇ／Ｌ卡那霉素的分化培养基（ＭＳ＋４．５ｍｇ／ＬＢＡＰ）上。ＡｇＮＯ３和羧苄青霉素促进芽的分化,头孢霉素则有抑制作用。最高转化频率为     

青篙素的研究进展─—生物技术的应用及前景

青篙素的研究进展─—生物技术的应用及前景谢德玉,叶和春,李国凤（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＴＨＥＰＲＯＧＲＥＳＳＯＦＡＲＴＥＭＩＳＩＡＡＮＮＵＡＲＥＳＥＡＲＣＨ──ＴＨＥＡＰＰＬＩＣＡＴＩＯＮＯＦＢＩＯＴＥＣＨＮＯＬＯＧＹＡＮＤＰＲＯＳ...     

抗芜菁花叶病毒转基因甘蓝型油菜的研究

以子叶柄为材料,建立了甘蓝型油菜（ＢｒａｓｓｉｃａｎａｐｕｓＬ．）双低品种的再生体系。通过子叶柄与农杆菌（ＡｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓＬＢＡ４４０４）共培养,将表达载体ｐＢＴｕ中芜菁花叶病毒外壳蛋白（ＴｕＭＶ－ＣＰ）基因以整合方式导入甘蓝型油菜,然后用卡那霉素进行筛选,获得了油菜再生植株。经ＰＣＲ特异性扩增、点杂交和Ｓｏｕｔｈｅｒｎ印迹分析,证明再生植株基因组ＤＮＡ中整合了ＴｕＭＶ－ＣＰ基因。攻毒实验表明,有ＴｕＭＶ－ＣＰ基因插入的工程油菜对ＴｕＭＶ均有不同程度的抗性。     

承德市城市植被历史变迁,现状特点及其经营保护方向

承德市城市植被历史变迁、现状特点及其经营保护方向蒋高明（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＡＳＴＵＤＹＯＮＴＨＥＨＩＳＴＯＲＩＣＡＬＤＥＶＥＬＯＰＭＥＮＴ,ＰＲＥＳＥＮＴＣＨＡＲＡＣＴＥＲＩＳＴＩＣＳＡＮＤＭＡＮＡＧＥＭＥＮＴＯＦＴＨＥＵＲＢＡ...     

转甜菜碱醛脱氢酶基因豆瓣菜的耐盐性

将山菠菜甜苹碱醛脱氢酶（ＢＡＤＨ）基因经根癌土壤杆菌（Ａｇｒｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ ｔｕｍｅｆａｃｉｅｎｓ （Ｓｍｉｔｈ ｅｔ Ｔｏｗｎｓｅｎｄ）Ｃｏｎｎ）ＡＧＬ１介导转入豆瓣菜（Ｎａｓｔｕｒｔｉｕｍ ｎｏｆｆｉｃｉｎａｌｅ Ｒ,Ｂｒ．）ＰＣＲ、Ｓｏｕｔｈｅｒｊ ｂｌｏｔｉｎｇ检测呈阳性的再生植株有４６株,对６株再生植株的ＢＡＤＨ活性和Ｎｏｒｔｈｅｒｎ ｂｌｏｔｉｎｇ检测发现,有５株ＢＡＤＨ酶活性明     

抗寒剂CR－4提高玉米幼苗抗寒力及质膜5＇－核苷酸酶冷稳定性的研究

抗寒剂ＣＲ－４提高玉米幼苗抗寒力及质膜５＇－核苷酸酶冷稳定性的研究孙龙华,简令成,王瑞萍（中国科学院植物研究所,北京１０００４４）ＳＴＵＤＩＥＳＯＦＣＯＬＤ－ＲＥＳＩＳＴＥＲＣＲ－４ＦＯＲＩＮＣＲＥＡＳＩＮＧＣＯＬＤＨＡＲＤＩＮＥＳＳＡＮＤＳＴＡＢＩ...