离体脊髓电药理学进展

离体 (in vitro) 脊髓实验是脊髓电药理学的一种重要研究方法,与在体(in Vivo)实验比较,它具有许多特殊优点:(1) 可控制神经组织内部药物浓度,获得精确的量效关系;(2) 可人为地改变神经组织周围环境的温度、pH、离子组成等条件;(3) 电活动稳定;(4) 实验中不需麻醉;(5) 无血脑屏障;(6) 可联合开展药理、生理、生化等学科的研究。近二十年来,离体脊髓电药理学进展非常迅速,本文扼要介绍实验原理,并分析几种氨基酸、神经肽和药物对脊髓的作用机制。     

带坐骨神经的蟾蜍离体脊髓标本的制作

离体蟾蜍脊髓标本制作方法简单,反应稳定。由于冷冻麻醉 故手术时不需要麻醉剂和肌松剂。并可严格控制外环境的变化(PH、温度、药物剂量)。施加药物时不受血脑屏障影响,进行神经反射机理研究时不受高位中枢及外周感受器影响,故为进行电药理、电生理学研究的一个较为理想的标本。 本文所介绍的标本带有一条坐骨神经干,尤其利于进行电生理学实验。     

海马脑片抗癫痫药物研究的离体模型

目的：建立离体海马脑片癫痫样放电模型并用于抗癫痫药物研究。方法：在豚鼠海马脑片上灌流青霉素建立颠阗痫样放电的离体模型。并用此模型对抗癫痫药物苯巴比妥钠和苯妥英钠两种药物在不同浓度下对癫痫样放电的对抗作用进行了定量分析,结果：在海马脑片上灌流致痫药物可建立一个较好的离体组织癫痫样放电模型,苯的对抗作用进行了定量分析,结果：在海马脑片上灌流致痫药物可建立一个较好的离体组织癫痫样放电模型。苯巴比妥和苯妥英钠在一定浓度下均有显著对抗癫痫样放电的作用,且与整体实验的结果相一致。结论：本实验建立有离体脑片模型具有实验手段简单,方法灵活,易于建立药物量效关系等优点,可用于抗癫痫药物筛选和研究。     

测定血小板聚集性应注意的问题

近年来,随着分子生物学、药理学等研究工作的深入开展,国内愈来愈多的单位利用血小板聚集实验,探讨血小板在某些血管、血栓病发病机制中的作用和地位;或作为研究中西结合活血化瘀治则的一种手段,观察活血化瘀药的疗效以及阐明药物的作用原理。临床上还可借助该法协助诊断某些血小板疾病如血小板无力症。研究血小板聚集的最理想方法应在体内系统,因为(1)血液在其正常容器——血管内,聚集反应可在生理温度、压力及流量等条件下进行;(2)无需加抗凝剂,可避免抗凝剂干扰;(3)其它血液细胞“照常工作”,能保持红、白细胞等对血小板的影响;(4)所有的血小板都能参与反应。如制备富有血小板血浆(PRP),     

离体叶绿体释氧反应中锰的必需性

近年来,结合离体叶綠体光合作用的研究,已可将光合作用整个过程大致分为三个主要部分:(1)水光解和释氧的释放;(2)光合磷酸化;(3)二氧化碳的固定和还原。可以认为,离体叶綠体加入氧化剂时在光下的释氧反应(即希尔反应),是光合作用水光解和释氧过程在体外的表现,这已在量子需要量(殷宏章等,1961;French等,1945)、光饱和现象(Hill等,1940)、有效光谱成分(陈绍龄,1952)、抑制剂效应(Macdo     

科研新闻

大鼠离体下丘脑制备成功神经生理学的在体实验通过逆向激动法鉴定下丘脑的神经内分泌神经元,由于此法记录的稳定性很差。因此,一般只限于记录细胞外电位。最近,通过离体实验的方法已经记录到稳定的细胞内电位;但在制备下丘脑组织或薄片时,往往改变或破坏了鉴定神经内分泌神经元的通路,使电生理鉴定无法进行。Bourq(?)等最近成功地制备出完整的大鼠离体下丘脑。由于它保留着供鉴定用的传出纤维,因此,适用于对神经垂体和结节漏斗部神经内分泌神经元进行细胞外和细胞内电生理与神经药理学研究。     

不同离体寄主及其成熟度对亚洲柑桔木虱存活的影响

【目的】亚洲柑桔木虱Diaphorina citri Kuwayama的虫口密度及活动与柑桔黄龙病的田间传播、流行有十分密切的关系,寻找合适的室内饲养条件能够便于观察和研究其生物学特性和传病机制。【方法】本文以九里香Murraya exotica(L.)Mant.、酸桔Citrus sunki Hort.ex Tanaka和马水桔Citrus reticulata Blanco.cv.Mashuiju 3种寄主植物不同成熟度离体梢为研究材料,(1)比较亚洲柑桔木虱卵分别在3种寄主植株和离体嫩梢上的孵化率;(2)比较3种寄主不同成熟度离体梢对各龄若虫存活率和蜕皮的影响;(3)比较3种寄主不同成熟度离体梢对成虫存活率的影响。【结果】(1)亚洲柑桔木虱在植株嫩梢上卵的孵化率高于离体嫩梢,九里香表现最明显;(2)低龄若虫在叶片未完全展开的离体嫩梢上存活率最高,而高龄若虫在完全展开的嫩梢上最高;(3)用离体成熟梢饲养柑桔木虱成虫存活率高于离体嫩梢,酸桔和马水桔离体梢饲养的存活率较九里香高。【结论】用寄主植物离体梢饲养的亚洲柑桔木虱卵孵化率和若虫、成虫存活率都较高而且较稳定,该方法可用于这种木虱的室内繁殖中。     

胞二磷胆碱的临床应用

一、前言神经组织含有大量磷脂,它们参与神经组织的构成,还具有与神经功能密切相关的生物活性,当磷脂代谢发生障碍时,脑和脊髓的功能便会发生紊乱而出现各种疾患。Konberg(1953年),Kennedy(1957年)的研究阐明,胞二磷胆碱(以下简称CDP-胆碱)是磷脂代谢的重要前体,是卵磷脂生物合成必需的辅酶。早日修(1961年)从生物化学的角度出发,对动物进行脑外伤实验,发现当动物发生脑外伤时,脑组织     

吗啡降低大鼠脊髓内cAMP的含量

有资料表明,吗啡或脑啡肽可影响脑内 cAMP 与 cGMP 的含量,但对脊髓内 cAMP 与cGMP 的含量有何影响,未见报道。本实验采用放射免疫分析(RIA)方法研究的结果表明,吗啡可使大鼠离体与在体脊髓内 cAMP 的含量明显降低;而对脊髓内 cGMP 的含量则无明显影响;纳洛酮可特异阻断吗啡对脊髓内 cAMP 含量的抑制效应。提示:吗啡的上述作用是通过大鼠脊髓内阿片受体所介导。脑和脊髓内 cAMP 含量的变化可能部分介导了吗啡作用的中枢机制。     

甘氨酸和γ-氨基丁酸对小鼠游离脊髓的初级传入终末兴奋性的作用

本工作在正常离体小鼠(天龄10—15d)脊髓进行。实验结果表明:电刺激邻近记录电极的背根,微电泳GABA及GABA的协同剂Thip、Thiomuscimol和甘氨酸(Glycine)均能引起小鼠脊髓单一初级传入纤维终末的兴奋阈值下降,兴奋性增高,说明终末发生了去极化的变化。同时电泳荷包牡丹碱(Bicuculline)能逆转GABA及其协同剂的去极化作用,但对Glycine的去极化作用无效。而士的宁(Strychnine)能逆转Glycine的去极化作用,对GABA的去极化作用无效。说明在小鼠脊髓初级传入终末存在GABA_A受体及Glycine受体,而且在传入终末区Glycine受体类型可能与脊髓内其它部位的相同。     

植物遗传资源的离体保存

近年来国内外遗传资源学界越来越重视植物遗传资源的离体(细胞和组织培养)保存,因为它可解决营养繁殖材料,产生顽拗型种子的作物和有特殊问题的作物的种质保存问题.现在离体保存研究已涉及330个属648个种(Withers 1986).我国不少学者从事马铃薯、甘薯和草莓等作物的离体保存研究工作,取得了很大进展.国际植物遗传资源委员会(IBPGR)专门设立了离体贮藏咨询委员会,并建立了离体保存数据库.IBPGR和国际热带农业中心(CIAT)正合作拟定中短期离体基因库的运行规范.对植物遗传资源的离体研究内容包括:(1)种质收集;(2)消除病原,确定病害指数和检疫;(3)     

大鼠离体下丘脑制备成功

神经生理学的在体实验通过逆向激动法鉴定下丘脑的神经内分泌神经元,由于此法记录的稳定性很差。因此,一般只限于记录细胞外电位。最近,通过离体实验的方法已经记录到稳定的细胞内电位;但在制备下丘脑组织成薄片时,往往改变或破坏了鉴定神经内分泌神经元的通路,使电生理鉴定无法进行。Bourque等最近成功地制备出完整的大鼠离体下丘脑。由于它保留着供鉴定用的传出纤维,因此,适用于对神经垂体和结节漏斗部神经内分泌神经元进行细胞外和细胞内电生理与神经药理学研究。将大鼠断头后,立即取出大脑和完整的垂体,然后分离出下丘脑,通过颈动脉血管进行离体灌注。在这样制备的下丘脑标本上,可以持续观察逆向激发电位和周期性突触电位达15小时以上。Bourque等首先     

急性神经损伤引起脊髓背角C-纤维诱发电位长时程增强

神经损伤引起神经病性疼痛,表现为持续性痛超敏和痛觉过敏。目前对神经病性疼痛的机制尚缺乏了解。我们以往的工作表明强直电刺激坐骨神经可引起脊髓背角C-纤维诱发电位的长时程增强(long-term potentiation,LTP),该LTP被认为是病理性疼痛的突触模型。本研究的目的在于探讨急性神经损伤是否能在完整动物的脊髓背角诱发出C-纤维诱发电位LTP。在以测试刺激(10～20V,0．5ms)电刺激坐骨神经的同时在脊髓背角用微电极记录C一纤维诱发电位。分别用强直刺激、剪断或夹捏坐骨神经诱导LTP。结果发现：(1)剪断或夹捏坐骨神经都可以诱导脊髓背角C-纤维诱发电位的LTP,该LTP可持续到实验结束(3～9h),在剪断神经前10min用利多卡因局部阻滞坐骨神经则可完全阻断LTP的产生;(2)神经损伤诱导的LTP可被NMDA受体阻断剂AP5所阻断;(3)用单次强直刺激引起LTP后,切断坐骨神经可使LTP的幅度进一步增大,而用多次强直电刺激使LTP饱和后,损伤神经则不能使LTP进一步增大。切断神经引起LTP后,强直电刺激也不能使LTP进一步增大。这些结果表明,急性神经损伤可以诱导脊髓背角C纤维诱发电位LTP,且切断神经能更有效地诱导LTP。该试验进一步支持我们的设想,即脊髓背角C-纤维诱发电位LTP可能在病理性疼痛的形成中起重要作用。     

脊髓缺血再灌流时脊髓神经元的电活动规律

脊髓损伤的救治是神经科学研究的难点 ,目前实验性药物治疗取得了较好的效果 ,但临床应用效果不理想 ,患者功能改善极为缓慢。加强损伤脊髓功能变化规律及其机制的研究十分必要。在脊髓电生理功能的研究方面 ,除大量诱发电位的研究外 ,有关损伤条件下神经元电活动、脊髓损伤电位及损伤电流等研究较少。本实验利用细胞外记录技术 ,观察脊髓缺血及再灌流损伤时脊髓神经元的电活动变化 ,以分析损伤条件下神经元功能的变化规律及其意义。1　材料与方法(1)模型制备　日本大耳白家兔 10只 ,(2 .2 5± 0 .2 5 )ｋｇ ,雌雄不拘 ,以选择性腰动脉阻断…     

外源多氨基芳香族化合物对高温强光下芦苇离体叶绿体叶绿素降解的缓解作用

以甘肃省河西走廊临泽县境内荒漠地区2种生态型芦苇为主要研究材料,研究了在添加多氨基芳香族化合物(Mr856,PAAC)条件下,不同温度、光照强度处理及处理时间对沙芦和水芦离体叶绿体叶绿素相对含量的影响,以探究PAAC对高温强光条件下离体叶绿体可能的保护机理。结果表明:(1)外源PAAC对水芦和沙芦离体叶绿体叶绿素相对含量的影响因环境光照强度、温度和处理时间的不同而异;(2)光照强度对离体叶绿体叶绿素相对含量的影响与温度有关,且随着处理时间的延长而增强,在光照水平为1 000μmol.m-2.s-1下,沙芦叶绿素相对含量在不同温度下均高于水芦;(3)外源PAAC可明显减缓高温强光胁迫下水芦叶绿素相对含量的降低趋势,尤其对强光胁迫下叶绿素相对含量降低的效应更明显。研究结果说明,PAAC可能作为沙芦叶片中具独特分子结构特征的相容性溶质,可减缓高温强光下离体叶绿体叶绿素的降解,对离体叶绿体有一定的保护作用。     

不同年龄大鼠不同脑髓区积聚GABA能力的比较

应用同位素示踪和神经组织离体培育的方法,揭示了不同年龄大鼠 CNS 中七个不同区域积聚 GABA 能力的差异。(1)皮层、海马、尾核、下丘脑积聚 GABA 的能力随年龄增长显著增强;而脊髓、垂体积聚 GABA 的能力随年龄增长而显著减弱。(2)年龄对小脑积聚GABA 的能力无明显影响。(3)七个区域积聚 GABA 能力的总和随年龄增长不断增强。证明CNS 中 GABA 系统功能变化与生长、发育、衰老密切相关。     

自组装短肽在脊髓急性创伤早期减少细胞凋亡的研究

目的 为研究在脊髓急性损伤中,自组装短肽溶液对创伤后神经组织的保护作用及创伤后早期神经组织细胞凋亡的时间分布规律.方法 实验使用了手术切断大鼠脊髓胸段T8至T10作为脊髓损伤动物模型,使用末端脱氧核苷酸转移酶介导生物素标记(TUNEL)技术,检测实验后不同时间点的损伤脊髓组织细胞凋亡情况.结果 伤后2 h,损伤区及邻近段开始出现末端标记阳性细胞;伤后8 h,凋亡阳性细胞数达高峰;同时,自组装短肽实验组细胞凋亡较空白对照组少.结论 自组装短肽溶液对急性脊髓创伤组织具有保护作用.     

一种稳定的心肌细胞电位与心肌收缩力的同时记录方法

同时记录心肌细胞动作电位与收缩力能较全面地分析神经递质、药物或病理因素(如缺氧、心律失常等)对心肌功能的影响。目前国内学者多采用标准微电极在豚鼠离体心脏乳头肌标本上同时记录心肌细胞电与机械活动,在需要较长时间观察递质、药物等因素的作用,或是在观察药物的多个剂量效应时,微电     

高灵敏应变换能器在生理科学的应用

烟鼓记录方法在生理学、药理学、病理生理学的研究中,起着重要的作用。但是,烟鼓法有许多不完善的地方,操作不便,灵敏度低,工作效率低。因此,已难适应现代生理学、药理学等学科的要求。为此,我们于1974年试制成功一种应变换能器,经多年来在记录离体心脏拉力,离体子宫收缩,肠道运动和平滑肌在给药前后拉力变化等方面的实际使用,证明该换能器结构简单,灵敏度高,响应快,性能稳定,是一种便于推广应用的换能器装置。本文着重介绍该换能器的原理装置和制作,以及实验结果。     

软体动物离体神经元电生理研究简介

利用软体动物大神经元探讨中枢神经系统的某些奥秘,具有很多优点:(1)胞体巨大、易于辨认,可借助显微镜直接将微电极刺入胞体或轴索内,也可将微量药物直接滴于神经元表面,进行细胞水平的研究。(2)实验条件较简单,在离体条件下的一定温度范围内,在生理溶液中(不需另外供氧),细胞可稳定地放电达数小时,有利于重复观察药物的作用。(3)可同时暴露神经元胞体及其轴索的起始部,也可同时保留该神经元所支配的内脏器官(如心、肺、肠等),便于研究神经元放电特点、神经元间的相互关系,以及神经元和所支配内脏的关系。(4)各种大神经元对于高等动物神经系统中所公认的突触传递物质(如多巴胺、