高效液相色谱法测定五味子乙素含量

采用高效液相色谱法,测定了五味子果实中五味子乙素的含量,检测波长为254 nm,标准曲线线性关系R²为0.9907,相对标准偏差为0.48%,平均加样回收率为99.14%。结果表明,此方法准确度较高,为五味子生药及成品药中五味子乙素含量测定提供了一种切实可行的方法。     

RP-HPLC法测定怀槐中染料木素和芒柄花黄素含量

怀槐(Maackia amurensis Rupr.et Maxim.)广泛分布于中国东北三省及内蒙古等地,尤以黑龙江省为多.怀槐作为民间药,其茎、枝可治疗风湿性关节炎; 叶、枝皮可治疗肿瘤; 内皮可治疗深度伤口及久不愈合的溃疡.另外,怀槐树皮在民间还作为祛风湿、消炎、镇痛、健胃、止血等药广泛应用,疗效甚佳.从怀槐的根、枝、叶、果实和心材中分别分得异黄酮、生物碱、NC442类化合物,据报道,其中的异黄酮类化合物表现出对心血管系统的复合作用和明显的抗肿瘤活性[1].作者在对怀槐进行系统的化学成分研究过程中,分离鉴定了9个异黄酮类化合物[2,3],并进行了抑制肿瘤细胞增殖作用研究[4],其中,染料木素(genistein)对胃腺癌细胞(BGC)增殖有一定程度的抑制作用,芒柄花黄素(formononetin)则对白血病细胞(HL-60)增殖有一定的抑制作用.染料木素和芒柄花黄素作为马鞍树属(Maackia Rupr.)植物中普遍存在的2个异黄酮类化合物,其活性研究日益受到重视.采用HPLC法测定染料木素等异黄酮类化合物含量在大豆等其他植物中曾有文献报道[5].为了尽早开发怀槐资源,同时为其资源的综合利用提供科学依据,本文采用HPLC法对怀槐不同部位的染料木素和芒柄花黄素2个有效成分进行了含量测定.     

高效液相色谱法测定月饼中的苯甲酸

关于月饼的苯甲酸检测没有明确的处理和检测方法,按照国标GB/T5009.29-2008的要求第一法气相色谱法和第二法液相色谱法进行检测。气相色谱法前处理涉及有机溶剂的重复萃取,操作时间较长,比较麻烦,液相色谱法也没有明确月饼的前处理方法。本文结合液相色谱法中的试样处理中的方法,对月饼的检测,采用了样品粉碎均匀称样后90度水浴30分钟的方法,加蛋白质沉淀剂定容过滤后直接进样,缩短了检测的时间,提高了工作的效率,适合大批量处理样品。     

高效液相色谱法测定黄瓜皮中绿原酸含量

目的:建立高效液相色谱法测定黄瓜皮中绿原酸含量的方法.方法:采用Zorbax Eclipse XDB-C18色谱柱(150 ×4.6 nm,5 μm);流动相:甲醇- 0.4%磷酸溶液(25∶75);流速:1.0 ml·min-1;检测波长:326nm;柱温:30℃.结果:绿原酸的线性范围为0.0111～0.1332 ...     

反相高效液相色谱法测定血浆游离氨基酸

本文报告了采用高效液相色谱法反相梯度洗脱,邻苯二甲醛和β-巯基乙醇柱前衍生化,荧光检测分血浆游离氨基酸。实验采用线性洗脱,在50分钟内可同时测定18种氨基酸,血浆样品的预处理简单,衍生化反应的时间仅需1分30秒,血浆样品的实际进样量少于1μl。本测定方法的精确度高,各个氨基酸保留时间的变异系数平均为0.89%±0.45%(SD),峰面积的变异系数平均为2.06%±1.76%(SD),各个氨基酸的浓度在15—150μmol/L的范围中,线性关系的相关系数平均为0.985±0.0305(SD)。准确性好,各个氨基酸的回收率平均为97.6%±5.1%(SD)。实验还讨论了氨基酸分离时溶液pH值、柱温、离心速度等因素对分析结果的影响。     

高效液相色谱法测定浓缩苹果汁中棒曲霉素

建立了高效液相色谱法 (HPLC)测定浓缩苹果汁中棒曲霉素含量的方法。用乙酸乙酯提取浓缩苹果汁中棒曲霉素 ,碳酸钠水溶液净化提取液 ,蒸干乙酸乙酯层 ,其残留物用醋酸缓冲液溶解。棒曲霉素的含量测定采用HypersilODS (5 μm ,2 5 0mm×4 6mmi d)色谱柱 ,流动相V(乙腈 ) :V(醋酸盐缓冲液 ) :V(水 ) =5 :3:2 ,流速 1ml min ,检测波长 2 76nm。结果表明 :棒曲霉素浓度与峰面积有很好的线性关系 ;用HPLC测定浓缩苹果汁中棒曲霉素的含量可操作性强、准确度高 ,棒曲霉素回收率高达 99 2 %,重现性好 (RSD为 0 4 %) ;灵敏度高最小检出量为 10 μg L。     

高效液相色谱法测定可口革囊星的ACE活性

目的利用高效液相色谱法测定可口革囊星虫酶解物中具有抑制血管紧张素转化酶(ACE)活性的活性肽。方法用HPLC测定血管紧张素转换酶抑制肽活性,在该色谱条件下,可通过测定由ACE水解马尿酰组氨酰亮氨酸后产生的马尿酸峰面积或含量得到酶解液的活性。结果酶解物在质量浓度为0.48mg/ml时对ACE的抑制率为17.62%。结论可口革囊星虫蛋白经碱性蛋白酶水解后得到的酶解物活性较高。     

反相高效液相色谱法测定万寿菊中的玉米黄质

用反相高效液相色谱法测定万寿菊中的玉米黄质。以丙酮与石油醚提取色素,色谱柱Kromasil(C184.6 mm×150mm),乙腈∶甲醇∶二氯甲烷(体积比为70:20:10)为流动相,在450 nm下检测玉米黄质。结果表明,玉米黄质的质量分数为0.158%,玉米黄质的回收率是94.7%~98.1%,平均回收率为96.4%(RSD=1.36%)。该方法简便、准确,有良好的重现性,技术参数指标符合食品理化分析的要求。     

反相高效液相色谱法测定血清中γ-氨基丁酸

建立一种高灵敏度的氯甲酸芴甲酯柱前衍生荧光检测反相高效液相色谱法测定血清中γ-氨基丁酸的方法.内标为己氨酸, 固定相为Shim-Pack CLC-ODS(M), 4.6 mm×150 mm, 填充料为5μm; 流动相采用二元梯度洗脱, A相为0.05 mol/L醋酸钠缓冲液∶水∶四氢呋喃∶冰乙酸(250∶100∶15∶2.2), B相为乙腈∶甲醇(4∶1).系统研究了pH值、反应时间、离子强度及衍生化试剂用量对衍生化反应的影响, 确定最佳反应条件和最佳色谱条件.方法的精密度为批内变异系数＜4.6%,批间变异系数＜6.1%;最低检出限(信噪比＝2)为3.1 nmol/L;线性范围为50～1000 nmol/L, γ²＝0.9992;平均回收率为97.1%.     

大鼠血浆中洛伐他汀的HPLC测定及药动学研究

目的:探索采用高效液相色谱法测定大鼠血浆中洛伐他汀浓度的方法。方法:血浆样品采用环已烷-二氯甲烷(3.5:1,V/V)提取,HPLC条件为色谱柱采用XTerra(?)MSC18柱(150×2.1 mm,5μm),流动相为乙腈-水(63L37,V/V),柱温35℃,检测波长为238nm。结果:大鼠血浆中洛伐他汀在0.01～5μg/mL线性范围内线性关系良好,最低检测浓度为0.01～g/mL,方法的提取回收率为81%～95%,日内、日间RSD均小于9.55%;药代动力学结果表明洛伐他汀在雌雄大鼠体内的Tp、Cmax和AUC均有显著性差异(p<0.05)。结论:建立的HPLC方法简便、灵敏度高,重现性好,药动学研究表明洛伐他汀在大鼠体内存在性别差异。     

Radioimmunoassay of Free Genistein in Human Serum

Two radioimmunoassay (RIA) systems for genistein have been established, based on polyclonal antibodies against genistein-4′-O-(carboxymethyl)ether-bovine serum albumin and genistein-7-O-(carboxymethyl)ether-bovine serum albumin conjugates. The sensitivities of assays were 4.44 and 10.4 fmol (1.2 and 2.8 pg)/tube, respectively, the intraassay coefficients of variation ranged from 3.54 to 9.30%, the interassay C.V. varied from 6.72 to 19.7%, depending on the type of method and on genistein concentration. The cross-reactivities with other chemically related compounds (with exception of genistein derivatives at the position used for construction of the immunogen) were 5.5 and 6.1% for daidzein and 3.9 and 0.04% for formononetin in RIAs using reagents prepared through positions 4′- and 7- of genistein, respectively. The method was used for measurement of genistein levels in 26 omnivore subjects and in three volunteers after consumption of a meal prepared from 125 g of cooked whole soybeans. The values obtained in ether extracts from human sera were almost identical for both RIA systems, indicating that both RIAs measure the same entity.     

RP-HPLC法测定银黄冲剂中黄芩苷在大鼠体内的血药浓度及药代动力学研究

采用高效液相色谱法测定银黄冲剂中黄芩苷在大鼠血浆中的浓度,并研究其药代动力学。色谱柱为D iamonsilTMC18(250 mm×4.6 mm,5μm)柱,流动相:甲醇-磷酸二氢钠缓冲液(pH 2.6),体积比为52:48,检测波长275 nm,流速:1.0 mL/m in。结果血浆中黄芩苷在0.05~20μg/mL范围呈良好的线性关系,r2=0.9997,最低定量限为6 ng/mL。大鼠按1.6 g/kg灌胃银黄冲剂后,黄芩苷的血药浓度时间曲线符合口服吸收有滞后时间的二房室模型,主要药动学参数为t1/2:0.17 h,Vd:2.65 L,K12:5.36/h,K21:0.71/h,Ke:4.25/h,AUC:2.01μg.h/mL。HPLC测定黄芩苷的血药浓度操作便捷,灵敏度高,适用于黄芩苷的药代动力学研究。     

高效液相色谱法测定大鼠血浆中来那度胺的浓度及其药动学* 龚

摘要目的：建立高效液相色谱法测定大鼠血浆中来那度胺的浓度。方法：色谱柱采用Venusil ASB C18 column (4.6 mm× 250 mm, 5 μm) 购自于博纳艾杰尔科技有限公司。样品采用梯度洗脱,流动相为乙腈和0.05%甲酸溶液,流速为1.0 mL/min,检测波长为 254 nm,以沙利度胺为内标。结果：来那度胺血药浓度的线性范围为0.1-5 滋g/mL,最低检测限为0.1 μg/mL,三个浓度的QC 样品 (0.2, 1 and 5μg/mL)的提取回收率分别为78.8± 3.8, 80.1 ± 3.2 and 79.1 ± 7.6 %。结论：此方法准确、简便、灵敏度高,对来那度胺 的血药浓度测定和药物代谢动力学研究极具价值。     

Effect of Reaction Temperature on the Determination of Rat Serum IgE by the Avidin-Biotin Method

We established an avidin–biotin method for the sensitive determination of rat IgE and found that a non-specific signal was generated depending on the reaction temperature. When the sera of rats immunized or not with ovalbumin (OVA) were fractionated in a hydroxyapatite column and OVA-specific IgE was determined by the avidin–biotin method at 4°C or 37°C, OVA-specific IgE peaks were detected at 37°C, even with nonimmunized rats, but not at 4°C.     

高效液相色谱法测定酵母中麦角固醇含量

本文建立了酵母中麦角固醇含量高效液相色谱测定方法。其色谱条件为,色谱柱HYPersilBDSC185u反相柱,流动相为甲醇:水(97∶3),紫外检测波长为283nm。酵母样加碱乙醇皂化、提取、洗涤、蒸干、定量测定。结果表明:标准曲线范围是002—08mg/ml线性良好,最低限量为001mg/ml;日内及日间RSD(n=4)分别在21～40%和24～48%,回收率为960～980%。本方法操作简便、准确、可靠。     

两种柱前衍生反相高效液相色谱法测定血液和尿液中游离氨基酸

建立以PITC法和AQC法为柱前衍生试剂测定血液和尿液中游离氨基酸含量的测定方法。采用Waters-e2695操作系统,色谱柱为Shim-vp,ODS(250mm×4.6mm,5μm)(日本,岛津公司),以甲醇/乙腈/水和醋酸钠溶液(pH 6.5)为流动相,梯度洗脱。分别采用紫外和荧光检测器对血液和尿液中游离氨基酸进行含量测定。结果显示,两种衍生化方法灵敏度好、分离度高,具有良好的线性范围(r>0.990 0),准确度高(平均回收率为75.1%～127.0%),进样精密度好(RSD为0.12%～3.42%)。PITC法在尿液中游离氨基酸含量测定中显示了良好的测试准确性;而AQC法测定尿液中组氨酸、苏氨酸、脯氨酸超出线性范围,需要对尿样的前处理进行深入研究。     

HPLC测定葡萄中活性物质—白藜芦醇的含量

采用ＨＰＬＣ法测定葡萄中白藜芦醇的含量。用以Ｃ１８ＯＤＳ为流动２相,检测波长为３０７ｎｍ。在此条件下,样品溶液的进样量在０．２８６－２８．６ｍｇ／Ｌ时,白藜芦醇５的含量与峰面积呈良好的线性关系,回收率为１２３．８５％。     

反相HPLC法快速测定S-苯基-L-半胱氨酸

建立了用反相HPLC法分析测定S-苯基-L-半胱氨酸的方法,操作简便、结果准确。方法的RSD为1.9%,加标回收率为97%~102%。     

HPLC法测定宁夏枸杞中法荜枝苷的含量

本文采用高效液相色谱法,建立宁夏枸杞中法荜枝苷的含量测定方法。色谱条件:Diamonsil C8柱(150mm×4.6 mm,5μm);流动相为A:乙腈-水-醋酸(5∶94.5∶0.5),B:乙腈-水-醋酸(72∶27.5∶0.5),梯度洗脱。流速:1 mL/min;柱温:30℃;检测波长:346 nm。结果表明,在0.1～10μg/mL范围内线性关系良好,相关系数r=0.9998(n=8)。法荜枝苷的平均回收率为99.1%,RSD为1.55%。该方法准确可靠,可用于测定宁夏枸杞中法荜枝苷的含量,为宁夏枸杞开发利用提供理论依据。