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比较两种荧光探针异硫氰酸荧光素FITC和Cy5标记鹿茸提取物PAEs的最佳方法。用FITC和Cy5分别标记PAEs得到标记物FITC-PAEs和Cy5-PAEs;用SDS-PAGE凝胶电泳检测并比较两种荧光染料标记蛋白分子量的差异;用酶标仪检测在特定波长处OD值计算其标记率;用PC12细胞验证两种荧光染料的生物安全性;将荧光标记物分别与人工胃液和人工肠液共孵育,观察它们在其中的稳定性。结果表明,两种荧光染料标记PAEs蛋白分子量并无明显差异,但FITC-PAEs荧光强度稍强。通过计算标记率表明两种荧光染料均可充分标记PAEs,但Cy5价格昂贵。相比于FITC-PAEs,Cy5-PAEs在人工胃液和人工肠液中稳定性较差。因此,我们选择标记率高,在人工胃液和人工肠液中较为稳定且对机体无毒副作用,价格合理的FITC荧光染料标记PAEs并用于后续实验研究。这为建立蛋白类中药大分子的活性示踪方法,开发口服蛋白类药物奠定基础。 相似文献
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显微玻片标本制作中的代用药品为解决上生物实验课和指导学生开展生物学科技活动中的一些困难,现介绍几种效果较好价廉的显微玻片标本制作中的代用药品,用于玻片标本的染色。1医用紧药水市售的医用紫药水,是指龙胆紫、甲紫、结晶紫这一类性质相同的碱性染料,将其稀释... 相似文献
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[目的]分离获得产漆酶的细菌菌株,研究漆酶的酶学性质并应用于染料脱色.[方法]利用含铜的富集培养基筛选产漆酶细菌;通过形态特征、生理生化试验及16SrDNA序列分析等方法进行鉴定;以丁香醛连氮为底物测定漆酶的酶学性质;通过测定染料在最大吸收波长下吸光值的变化评价漆酶对染料的脱色效果.[结果]从森林土壤中筛选到一株漆酶高产菌株LS05,初步鉴定为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens);菌株LS05的芽孢漆酶以丁香醛连氮为底物的最适pH为6.6,最适温度为70℃;该酶具有较好的稳定性,经70℃处理10h或在pH 9.0条件下放置10d后可保留活性.对抑制剂SDS和EDTA具有一定的抗性,在碱性条件下可有效脱色不同的工业染料,RB亮蓝、活性黑和靛红1h内的脱色率达93%以上.[结论]Bacillus amyloliquefaciens LS05的芽孢漆酶在高温和碱性条件下稳定性强,相对于真菌漆酶具有更好的工业应用特性,可有效用于工业染料废水的处理. 相似文献
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《昆虫知识》1977,(1)
我们用染色标记的方法,对红铃虫的趋光习性进行了试验,效果良好。 一、材料与方法 1.染料 虫胶(漆片)0.25克,碱性品红0.25克(或碱性绿、碱性紫等)和95%酒精100克。先将由胶放入少量酒精内不断摇动,待溶解后加酒精和颜料,因颜料易沉淀,务须过滤后,方能备用。 2.染色 染色笼为长3O厘米、宽30厘米、高4厘米,二面装纱网,一边装绞链,以便开关,另一边留两个直径1厘米的放蛾孔。把当天在指管内羽化的、发育正常、翅展良好的红铃虫雌雄蛾计数放入染色笼内,在通风处用手提超低容量喷雾机将染料透过纱网均匀喷染在各蛾体上,染料不宜过多,并用立体显微镜检查染色情况。 相似文献
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目的:研究染料木黄酮对体外培养乳鼠颅盖骨成骨细胞增殖分化的影响。方法:取乳鼠颅盖骨,采用胶原-胰蛋白酶消化法,进行颅骨成骨细胞培养,取第二代成骨细胞,添加10^-5~10^-7mol/L染料木黄酮,在CO2孵箱中培养48h和72h后MTT比色法测定细胞增殖,培养72h采用^3H-TdR和^H-Pro掺入实验测定DNA和胶原合成。用试剂盒检测细胞裂解液碱性磷酸酶(ALP)活性。结果:染料木黄酮明显增加成骨细胞MTT的吸光度值、^3H-TdR和^3H-Pro的掺入,增加成骨细胞碱性磷酸酶活性。结论:染料木黄酮促进体外培养的乳鼠颅盖骨成骨细胞DNA和胶原的合成,促进增殖和分化。 相似文献
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肥大细胞是大多数脊椎动物疏松结缔组织中常见的细胞 ,常成群地沿着小血管分布。该细胞胞质内充满着粗大的嗜碱性颗粒 ,其颗粒具有水溶性 ,用碱性染料染色时呈现异染性。通常在制作肥大细胞标本时先取皮下组织或肠系膜进行铺片 ,风干后经过固定液固定 ,再用甲苯胺蓝、硫堇等染色方法显示胞质内颗粒 ,然后再经脱水 ,透明和封片等常规操作程序完成标本制作。近年来 ,笔者根据该细胞胞质内嗜碱性颗粒具有异染性和水溶性特点 ,采用以酒精为溶剂的甲苯胺蓝染色液对风干后肥大细胞铺片标本不经固定而直接染色 ,染色后只经一道酒精洗去浮液 ,风干后… 相似文献
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巨噬细胞可作变形运动,并具有吞噬异物的能力。为了观察巨噬细胞,常规方法是,在取材前给活体注射无毒染料如台盼蓝、墨汁或中性红等。在制片中再选用碱性染料复染细胞核。本人采用活体注射台盼蓝后,取其组织块,经碱性品红整块复染,制成观察肝脏、脾脏、淋巴结内巨噬细胞的切片,取得比片染法更满意的效果。方法介绍如下: (一)染料配制 1.1%台盼蓝注射液台盼蓝1克加生理盐水100毫升,经煮沸,过滤备用。 相似文献
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瑞特氏染料是碱性美蓝(亚甲蓝)与酸陛伊红钠盐混合而成的染色粉。当溶于甲醇后即发生解离,分成酸性染料和碱性染料两种。常用于血涂片的染色,染色后能清楚地区分不同种类的白细胞。但如果染料配制或使用不当,则得不到较理想的染色效果。 相似文献
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在初二“生物的遗传”一课中我运用了电脑多媒体教学获得成功,它突破了传统教学不能解决的下述问题:(1)便抽象概念形象化什么叫染色体?书上的解释是:“细胞核内存在着一些容易被碱性染料染成深色的物质,这些物质叫染色体。”这种抽象的、在高倍显微镜下才能看见的物质光靠教师用语言表达,中学生是很难想象并理解的。我们制作了一组动画。图像是:出现一个细胞,从细胞上方开始往下滴一滴淡蓝色的碱性染料,同时伴有声响,使细胞浸在碱性染料中,结果细胞核中部分地方颜色明显变深。这个现象同学很容易就发现了,这时老师告诉同学这… 相似文献
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CFSE标记技术及其在细胞研究中的应用进展 总被引:3,自引:0,他引:3
近年来活体染料CFSE已被广泛应用,其作用机制也逐渐阐明。它不仅应用于细胞增殖的体外实验,也可用于追踪细胞在体内的分裂增殖过程,为细胞免疫和细胞生物学研究开辟了一条新的有效途径。本文综述了活体染料CFSE的性质、工作原理及应用。 相似文献
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樊绘曾 《生物化学与生物物理进展》1985,12(3):36-40
糖胺多糖(Glycosaminoglcan,GAG)是存在于动物结缔组织基质和细胞表面的一类聚阴离子型胞外大分子。GAG和其他生物大分子的结合性质是研究这类多糖结构和功能的重要内容。这种结合以静电作用为基础,但也受立体化学因素的调节。GAG与碱性染料相结合(主要借助静电引力),并引起后者减色(Hypochromism)和异染(Metachromasia)。这一性质已在结缔组织的组化测定、GAG药物分析和GAG空间结构研究等方面逐步得到应用Grant最近对肝素及其解聚物异染性质与生物 相似文献
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摘要:【目的】从南极海泥土壤中分离得到一株高产蛋白酶的放线菌(XE-1),对所产蛋白酶进行纯化以得到具有特殊性质的酶产物。【方法】通过对XE-1的生理生化和16S rRNA 基因序列分析,初步将其确定为灰红链霉菌的变种。利用乙醇沉淀、离子交换、凝胶等方法纯化后,利用冻干浓缩获得其胞外蛋白酶,用SDSPAGE测定分子量并进行性质表征。【结果】得到一种对高浓度的有机溶剂、变性剂、氧化剂耐受的,表观分子量为14 kDa的碱性丝氨酸蛋白酶,进一步分析,其最适pH 8.2,温度为55℃,米氏常数Km和Vmax分别为1.9 mg/mL和973 u/mL 。此蛋白酶活性于25%的有机溶剂为50%-180%的初始活性;在不同浓度的氧化剂中为110%-140%的初始活性,在0.2 mol/L到4 mol/L的变性剂中表现为100%-150%的初始活性。【结论】从南极海洋链霉菌XE-1中分离得到一种耐有机溶剂、变性剂、氧化剂,大小约为14 kDa碱性蛋白酶,其特殊的酶学性质可用于工业生产或药学等领域。 相似文献
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“观察植物细胞的有丝分裂”实验中介绍的染色剂有2种,一种是质量浓度为1%或2%的龙胆紫溶液(将龙胆紫溶解在质量分数为2%的醋酸溶液中配制而成的),另一种是醋酸洋红。很多教师及学生对于以上染色剂的配制有很大的疑问:碱性染料为什么用酸配制?配制好后的溶液是酸性的还是碱性的?如果是酸性的还 相似文献