新的水稻谷蛋白α—1亚基缺失突变体

从水稻受精卵MNU处理后代中获得4个谷蛋白α－1亚基缺失突变品系。SDS－PAGE和IEF分析表明这些突变体在共同缺失1条pI6.82多肽的同时,或形成新的多肽,或其他多肽表现量增加,这些突变体是由结构基因控制的,IEF分析同时显示2条多肽pI6.82和pI8.58源自同一条谷蛋白前驱体。这4个突变体对于改良水稻谷蛋白品质、研究谷蛋白生物合成遗传调控机制以及揭示谷蛋白基因功能是不可多得的研究材料。     

D-葡萄糖苷酶抑制剂的研究

用高灵敏度的荧光法研究了13种糖类化合物对α或β-D-葡萄糖苷酶的抑制作用．实验结果表明：5-氨基-5-脱氧-D-吡喃葡萄糖-1-磺酸铵盐（1）、5-氨基-5-脱氧-D-吡喃葡萄糖-1-磺酸（2）、5-氨基-5-脱氧-D-葡萄糖-1．亚硫酸加成物（3）等三种氮杂糖对α或β-D-葡萄糖苷酶均呈现竞争性抑制作用．化合物（1）的Kiα＝372μmol／L;Kiβ＝6．38μmol/L．化合物（2）的Kiα＝34．4μmol／L;Kiβ＝6．84μmol／L．化合物（3）的Kiα＝47．2μmol/L;Kiβ＝11．9μmol/L．上述三个化合物对β-D-葡萄糖苷酶的抑制作用都强子α-D-葡萄糖苷酶．尤其对化合物（1）,其Kiα／Kiβ＝58．3,表明其抑制糖苷酶活性有较好的选择性．     

滇皂角中一个新三萜皂苷GS-C′

从滇皂角Gleditsia delavayi Franch荚果的水溶性部分分离到一个含有8个糖基的三萜皂苷。运用光谱方法鉴定其结构为：3－O－β－D－吡喃木糖基（1→2）－α－L－阿拉伯吡喃糖基（1→6）－β－D－葡萄吡喃糖基－28－O－β－D－吡喃木糖基（1→3)-β-D-吡喃木糖基（1→4）－α－L－鼠李吡喃糖基（1→2）－[α－L－鼠李吡喃糖基（1→6）]－β－D－葡萄吡喃糖基刺囊酸（GS－C′）。应用2D NMR谱,包括TOCSY,^1h-^1H COSY,HMQC,HMQC-TOCSY,HMBC和ROESY谱,全归属了其氢和碳的化学位移。     

前体、诱导子及抑制剂对紫杉烷生物合成的促进作用研究

研究了前体、诱导子和抑制剂对中国红豆杉细胞培养生产紫杉烷的促进作用。结果表明,向培养基中加入30mg/L 3-甲基－2－丁烯－1－醇,2mmol/L苯甲酸钠,10mg/L矮壮素,100μmol/L茉莉酸甲酯,0.1mmol/L丝氨酸,可以使紫杉醇含量增加1141.1%;加入0.1mmol/L苯甲酸钠,80μmol/L茉莉酸甲酯,0.1mmol/L丝氨酸可以使2α,5α,10β,14β－四乙酰氧基－紫杉－4（20）,11－二烯含量增加134.6%;25mg/L矮壮素,100μmol/L茉莉酸甲酯,0.5mmol/L丝氨酸可以使1β－羟基巴卡亭I含量增加95.2%;5mg/L3－甲基－2－丁烯－1－醇,10mg/L矮壮纱,40μmol/L茉莉酸甲酯,可以使14β-(2-甲基丁酰氧基）－2α,5α,10β－三乙酰氧基－紫杉－4（20）,11－二烯的含量增加76.4%。     

多荚草皂甙D和E的结构

从石竹科植物多荚草（Polycarpon prostratum(Forssk)Aschers.et Schwein.ex Aschers）的全草中分离得到了2个新的柴胡皂甙类化合物：prostratoside D和E。它们的结构过波谱方法分别鉴定为3－O－{β－D－xylpoyranosy-(1→2）－β－D－glucopyransoyl-(1→4）－[β－D－glucopyranosyl-（1→2）]-α－L－arabinopyranoside}－saikogeninD和3-O-{β－D－xylpoyranosy-(1→2）－β－D－glucopyransoyl-(1→4）－[β－D－glucopyranosyl-（1→2）]-α－L－arabinopyranoside}－saikogeninG。     

中国特有药用植物铁破锣中的新皂甙类成分

从铁破锣（Beesia calthaefolia(Maxim.)Ulbr.根茎中分离得到5个化合物（1－5）,经化学和波谱学方法鉴定,其中2个为有机酸－铁破锣酸（beesic acid,9-phenyl-2E,4E,6E,8E-nontetraenoic acid,1)和香草酸（2）;3个为齐墩果酸型三萜皂甙：oleanolic acid-3-o－α-Larabinopyranosyl-－28－O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4）-β-D-glucopyranosyl-（1→6）-β-D-glucopyranosyl ester(3),hederasaponin B(oleanolic acid-3-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α－L-arabinopyranosly-28-Oα-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→6）－β－D－glucopyranosyl ester,4)和铁破锣皂甙Q（beesioside Q,oleanolic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→3）－α－L-rhamnopyranosyl-(1→2)-α-L-arabinopyranolsyl-28-O-α-L-rhamnopyranosyl-(1→4)-β-D-glucopyranosyl-(1→6）－β－D－glucopyranosyl ester,5)。化合物1系首次从自然界中分离得到,化合物5为新化合物。     

无患子中两个新的大戟烷型三萜皂甙

从无患子科无患子（Sapindus mukorossi Gaertn.)根中分离到两个新的大戟烷型三萜皂甙SapimukosideA（1）和SapimukosideB（2）。运用波谱和化学方法鉴定它们的结构为3－O－α-L鼠李吡喃糖基－（1→2）-[α-L－阿拉伯吡喃糖基－（1→3）]－β－D－葡萄吡喃糖基－21,23R－epoxyl tirucall-7,24R-diene-3β,21-diol(1)和3－O－α-L－鼠李吡喃糖基－（1→6）－β-D-葡萄吡喃糖基21,23R-epoxyl tirucall-7,24R-diene-3β,21-diol(2)。     

龙舌兰发酵叶汁中的一个新甾体皂苷

从龙舌兰（Agave americana)的发酵叶汁中分离到一个新甾体皂苷。结合波谱和化学方法,新化合物的结构鉴定为替告皂苷元3－O－α－L－鼠李吡喃糖基－（1→3)－β-D-葡萄吡喃糖基－（1→2）-[β-D-葡萄吡喃糖基－（1→3)-β－D－葡萄吡喃糖基－（1→4）－β－D－半乳吡喃糖苷。     

弯蕊开口箭中的新甾体配糖体

从百合科植物弯蕊开口箭（Tupistra Hook,f．）的根茎中分离得到4个新的甾体配糖体,分别命名为弯蕊苷（wattoside)B-E(1-4),其中,3个多羟基呋甾型配糖体,另1个为强心苷,经化学降解和光谱分析,其化学结构分别鉴定为：22－0－甲基－25（R,S）,－呋甾烷－1β,3β,4β5β,22ξ,26β－六醇－26－O－β－D－葡萄吡喃糖苷（1）：22－O－甲基－26－O－β－D-葡萄吡喃糖基－25（S）－呋甾烷－5－烯－β,3β,22ξ,26β－甲醇－3－0－[O-β-D-葡萄吡喃糖基（1－4）]－β－D-半乳吡喃糖苷（2）;22－0－甲基－25（S)-呋甾烷－1β,2β,3β,4β,5β,22,26β－七醇－26－O-β－D－葡萄吡喃糖苷（3）和夹竹桃苷元－3－O－[O-β-D-葡萄吡喃糖基（1－2）]－α－L－鼠李吡喃糖苷,弯蕊苷E为开口箭属植物中首次分离到的强心苷。     

川麦冬中的新Ｃ２７甾体甙

从百合科植物川麦冬（Ophiopogon japonicus Ker-Gawl.)块根中分离得到４个Ｃ２７甾体甙类化合物,其中两个为新化合物：ophipojaponin A(1)和Ｂ（２）。它们的结构通过波谱和化学方法鉴定为：pennogenin3-O-[２′－acety-α－L-rhamnopyranosyl(1→2)]-β－D-xylopyranosyl(1→3)-β－D-glucopyranoside(1),26-O-β－Ｄ-glucopyranosyl-(22ξ,２５Ｒ）,－３β,14α,２２ξ,26-tetrahydroxyfurost-5-ene 3-O-α－Ｌ－rhamnopyranosyl(1→2)]-β－Ｄ-xylopyrano-syl(1→3)-β－D-glucopyranoside(3)and ruscogenin 1-O-[α－L-rhamnopyranosyl(１→２）]-β－D-xy-lopyranosyl(1→3)-β－D-fucopyranoside(4)。     

G蛋白,蛋白激酶C和Na^＋—H^＋交换在内皮素—1诱导培养心肌细胞肥大反应中的

内皮系-1（ET-1）是一种强的生长因子,并诱导心肌细胞肥大反应。在本实验中,我们探讨了G蛋白、蛋白激酶C（PKC）和Na＋－H＋交换在ET-1诱导的培养新生大鼠心肌细胞肥大反应中的作用。ET-1（10－10～10－7mol／L）促进3H－亮氨酸掺入,增加细胞蛋白质的含量和心肌细胞的表面积,且呈剂量依赖性,它们的EC50分别为5．2×10-10,5．2×10－10和7．3×10－10mol／L。用蛋白激酶C（PKC）抑制剂,Staurosporin（2nmol／L）预处理心肌细胞,可完全阻断ET-1诱导的心肌细胞的这些肥大反应,而蛋白激酶C激动剂,佛波酸酯（PMA）（10－8～10－6mol／L）呈剂量依赖性促进心肌细胞的肥大反应。用Na＋－H＋交换抑制剂,氨氯毗咪（10-4mol／L）预处理心肌细胞,可抑制ET－1诱导的心肌细胞肥大反应,但不影响PMA诱导的心肌细胞肥大反应。百日咳毒素（150ng／ml）预处理心肌细胞,可明显抑制ET－1诱导的心肌细胞肥大反应。这些结果提示,ET-1诱导的培养新生大鼠心肌细胞肥大反应是与百日咳毒素敏感的G蛋白相耦联,蛋白激酶C和Na＋．H＋交换可能在ET-1诱导的心肌细胞肥大反应中是重要的细胞内信使转导途径。     

长缘厚朴中的新配糖体

从长缘厚朴（Magnolia rostrata W.W.Smith)干燥树皮的乙醇提取物中分离得到一个新的配糖体,1,1'－联苯－6',8',9'-三羟基－3－丙基－4－O－β－D吡喃葡萄糖苷（1）,以及6个已知的苯丙素类配糖体,3,4－二羟基－烯丙基－3－O－α－L－吡喃鼠李糖（1→6）β－D－吡喃葡萄糖苷（2）,3,4－二羟基－烯丙基苯－3－O－α－L－吡鼠李糖（1→2）β－D－吡喃葡萄糖苷（3）,sinapaldehyde(E)-O-β-D-glucopyranoside(4),syringaresinol-di-O-β-D-glucopynanoside(5),A阿克苷（E）（6）,IcarisideE5(7),经光谱和化学方法鉴定其结构。     

Ⅰ型胶原基因启动子研究进展

Ⅰ型胶原由α1（Ⅰ）链（COL1A1）与α2（Ⅰ）链（COL1A2）组成,人COL1A1与COL1A2基因的启动子都已鉴定并克隆。调节转录的核因子有Sp1、NE－1、AP－1、CBF、NF－κB、C－myb、c-Krox、BFCOL1、Zf9、Sp3、Smads、TGP、Egr-1、TWIST与NP／NMP4等。在COL1A1和／或COL1A2基因启动子上已鉴定出TGFβ、糖皮质激素、TNFα、IFNγ与视黄酸等的应答元件。     

南蛇藤种油中的倍半萜成分

从南蛇藤种油中分离了六个β－二氢沉香呋喃倍半萜,通^1HNMR,^13和单晶X－线射线衍射鉴定,它们的结构是：1α,6β－二乙酰氧基－9β－苯甲酰氧基－β－二氢沉香呋喃（1）,1α,6β－二乙酰氧基－9β－肉桂酰基－β－二氢沉香呋喃（2）,1α－乙酰氧基－6β,9β－二苯甲酰氧基－β－二氢沉香呋喃（3）,1α,2α－二乙酰氧基－9β－肉桂酰氧基－β－二氢沉和时呋喃（4）,1α－羟基－2α－乙酰氧基－9β－肉桂酰氧基－β－二氢沉香呋喃（5）和1α－乙酰氧基－2α羟基－9β－肉桂酰氧基－β－二氢沉香呋喃（6）。化合物2,5和6是首次从南蛇藤中分离得到。     

表达ST1-LTB-α-β融合蛋白基因工程菌株的构建及其免疫原性分析

采用分子生物学技术构建了含有ST1-LTB-α-β融合基因的重组菌株BL21（DE3）（pETST3LTBαβ）,SDS-PAGE和Western blotting分析表明ST1-LTB-α-β融合基因在大肠杆菌中得到了高效表达,融合蛋白分子量约为110kD;20L发酵罐培养得到的最佳诱导条件为：重组菌株以1％接种量、5L／min通气量培养3h后加终浓度为0．03mol／L的乳糖诱导,通气量升至12．5L／min继续培养6h,表达量占菌体总蛋白的38．53％;表达的ST1-LTB-α-β融合蛋白无毒性但具有免疫原性。可以抵抗大肠杆菌和产气荚膜梭菌的感染;构建的重组菌株BL21（DE3）（pETST3LTBαβ）有望作为预防仔猪腹泻基因工程疫苗的候选生产菌株。     

白花刺参中两个新三萜皂甙

从著名藏药白花刺参（Morina nepalensis var.alba Hand.-Mazz)的水溶性部分分离到2个新三萜皂甙-刺参甙K（1）和刺参甙L（2）,以及一个已知三萜皂甙mazusaponinⅠ（3)。应用波谱和化学方法,刺参甙K和刺参甙L的结构分别鉴定为3-O-α-L-arabinopyranosyl-（1→）-β-D-xylopyranosyl siaresinolic acid(1)和3-O-β-D-glucopyranosyl-(1→3)-α-L-arabinopyranosyl siaresinolic acid28-O-β-D-glucopyranosyl-(1→6)-β-D-glucopyranoside(2)。     

一种新4/3型α-芋螺毒素突变体的合成及功能研究

目的：合成难溶的新4/3型α-芋螺毒素Eb1.3突变体Eb1.3［ΔR1,W13M］,并初步测定其与烟碱型乙酰胆碱受体亚型的结合作用。方法：采用Fmoc-固相法合成线性肽Eb1.3［ΔR1,W13M］,通过空气氧化折叠和磺化产物折叠获得含二硫键的折叠产物,利用两步折叠法测定其二硫键连接方式,双电极电压钳技术检测其药理活性。结果：Eb1.3［ΔR1,W13M］线性肽经折叠生成的主产物Ⅰ的二硫键排列方式为少见的C1-C4、C2-C3,而非典型的C1-C3、C2-C4,线性肽磺化后再经GSH交换可加速折叠,10 μmol/L的产物Ⅰ对乙酰胆碱受体α3β2亚型的抑制率为28.97%±8.44%。结论：新4/3型α-芋螺毒素Eb1.3突变体Eb1.3［ΔR1,W13M］形成非典型的二硫键C1-C4、C2-C3,产物Ⅰ对乙酰胆碱受体α3β2亚型具有一定的结合活性。     

中药金樱子的化学成分

从中药金樱子（Rosa laevigata Michx.）的果实是分离到7个化合物,经理化性质和波谱分析分别确定为β－谷甾醇（1）、胡萝卜甙（2）、乌苏酸（3）、2α,3β,19α,23－四羟基乌苏－12－烯－28酸（4）,2α,3β,19α,23－四羟基乌苏－12－烯－28酸28－O-β-D-吡喃葡萄糖苷（5）,2α,3β,19α,23－三羟基乌苏－12－烯－28酸（6）和4',5,7－三羟黄酮醇－3－O－β-D-（6”－O－（E）－p－羟基苯丙烯酰）吡喃葡萄糖苷（7）,其中化合物4、5、7为首次从金樱子果实中分离得到。     

重楼排草的化学成分研究

从报春花科植物重楼排草（L.Paridiformis Frach）的全株中分离得到了7个化合物。应用各种理化方法及光谱分析鉴定其化学结构。分别鉴定为：希克拉敏A-3-O-｜β-D-吡喃木糖基．（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→4）-[β-D-吡喃葡萄糖基-（1→2）]｜}-α-L-吡喃阿拉伯糖苷（1）、3β-O-[β-D-吡喃木糖基-（1→2）-β-D-吡喃葡萄糖基-（1→4）]。[β-D-吡喃葡萄糖基-（1→2）]-α-L-吡喃阿拉伯糖基-16α-羟基-13β,28-环氧-齐墩果烷（2）、异鼠李素-3-O-[β-D-吡喃鼠李糖基-（1→）β-D-吡喃阿拉伯糖苷]（3）、槲皮素-3-O-[β-D-吡喃鼠李基-（1→4）-β-D-吡喃阿拉伯糖苷]（4）、β-香树素（5）、β-香树素乙酸酯（6）、三十二烷醇（7）。其中1、2、3、4均为首次从本植物中分离得到。     

应用SDS—PAGE显示小分子多肽技术的探讨

为探讨显示小分子多肽技术,应用SDS－PAGE寻找更简单,快捷的分析小分子多肽的方法。采用8％,T,3％C的丙烯酰胺浓缩胶和含6mol/L脲（或含24％的甘油）的16％T,6％C的丙烯酰胺分离胶 的双层不连续SDS－PAGE和三羟基甘氨酸电泳缓冲液显示蛋白分子量标准（2．512－16．949KD）和待测样品,并对蛋白分子量标准在这两种分离胶中进行了回归分析。结果表明在这两种条件下均能显示分子量小至2．512KD的多肽;多肽样品在含脲和在含甘油的2L－T－SDS－PAGE中均有较好的显带,蛋白分子量标准的直线回归系数分别为r=-0.966和r=-0.964,它们是显示小分子多肽和估测其相对分 子质量及对多肽分子进行进一步分析和更为简便易行的方法。