布鲁氏菌与乙型肝炎感染者血清交叉凝集的实验报告

布鲁氏菌与乙型肝炎感染者血清交叉凝集的实验报告大连市卫生防疫站大连１１６０２１顾聘兰,郭菊玲,孙茂利布鲁氏菌与伤寒、付伤寒、结核、绿脓杆菌、小肠那尔森氏菌、Ｏｘ１９变形菌、Ｑ热立克次体等在血清反应中,已有交叉凝集的报告。但与乙肝病毒感染者血清能否发生...     

血清抗脂阿拉伯甘露糖抗体对活动性肺结核的诊断价值

目的 评价抗ＬＡＭ－ＩｇＧ检测对活动性肺结核的诊断价值。方法 采用ＬＡＭ为抗原,ＤＩＧＦＡ法检测２７５例活动性肺结核,１４５例非活动性肺结核病人,１３５例非结核病人和１５０例健康人血清中的ＬＡＭ－ＩｇＧ。结果 活动性结核病组抗ＬＡＭ－ＩｇＧ阳性率８５．１％,其中菌阳为９３．８％,菌阴组８０．３％,非活动性结核组１２例阳性,非结核组１０例阳性,健康组１１例阳性：血清抗ＬＡＭ抗体诊断结核病的敏感性为８５．１％,特异性９２．３％,准确性９０％,阳性预测值８７．６％,阴性预测值９０．６％。结论 提示血清抗ＬＡＭ－ＩｇＧ测定可用于诊断活动性结核病。     

纯化布氏菌素的研制与应用*

用三氯醋酸和硫酸铵从布氏菌菌液中提取了纯化的布氏菌蛋白衍生物,对动物及布氏菌病病人、布氏菌隐性感染者、布氏菌苗免疫者、肺结核和其他病人及健康人群做皮内变态反应试验。结果证明,该制品具有良好的皮肤变态反应原性,其特异性和敏感性与国际相关标准品完全一致;其显著特点是安全性好,无副作用,非特异性反应也大大低于现行菌素;同时提出了临床判定的阳性参考标准。     

纯化布氏菌素的研制与应用

用三氯醋酸和硫酸铵从布氏菌菌液中提取了纯化的布氏菌蛋白衍生物,对动物及布氏菌病病人、布氏菌隐性感染者、布氏菌苗免疫者、肺结核和其他病人及健康人群做皮内变态反应试验。结果证明,该制品具有良好的皮肤变态反应原性,其特异性和敏感性与国际相关标准品完全一致;其显著特点是安全性好,无副作用,非特异性反应也大大低于现行菌素;同时提出了临床判定的阳性参考标准。     

用ND-O-BSA-IgM-ELISA测定正常人、麻风及结核患者血清抗体水平

目的 用ND-O-BSA-IgM-ELISA测定正常人和麻风及结核患者血清抗体水平以界定大连地区正常临界值及方法的敏感性和特异性.方法 用ND-O-BSA抗原对60例麻风患者,各100例男、女正常人和30例肺结核患者血清进行酶联免疫吸附试验.结果 ND-O-BSA在血清浓度1∶100和临界值取0.14时,ND-O-BSA-IgM-ELISA对麻风患者检测的敏感性为95％,特异性为96.5％;结核患者无一例阳性.结论 ND-O-BSA-IgM-ELISA实验敏感性和特异性均较高,且不存在与结核血清的交叉反应,可用来早期检测麻风杆菌的感染.     

犬体200株布氏菌的判定与特性

先后收到我国一些地区从犬体分离的待检布氏菌200株,经细菌形态、生长特性和血清凝集等初步检查,其中176株疑似布氏菌(85．59％).用单相和粗糙血清检测、s和R群噬菌体裂解试验,证明均为犬种布氏菌。部分菌种作DNA同源性测定与电镜形态观察,发现其基因系列和电镜图像与国际参考菌一致。在R血清反应中,有4.75％菌株无凝集原性。在硫堇和复红染料抑菌试验中,典型株占72．49％;对两种染料均不被抑制者占22．75％。这部分菌和被R／C噬菌体裂解的粗糙羊种菌难以鉴别。     

用亲和层析技术鉴别布氏菌强弱毒差异抗原成分

采用CDI和CCA两种方法活化Sepharose4B,制备亲和层析柱,并对这两种方法的优劣进行了比较。分别用超声液破碎和Ribi机器压榨制备布氏菌强毒M28株和疫苗M25株的可溶性抗原,作为亲和层析柱的配基。抗M28的血清经过M28和M5柱,洗脱液中的抗体再分别和M28、M5抗原反应经电转印检查证实,M28抗原中的一条蛋白带只与M28柱洗脱液反应,不与M5柱洗脱液反应。这种只与M28柱洗脱液反应的蛋白可能即是布氏菌强毒M28株所特有的抗原成分,也就是强毒株和弱毒株的差异抗原成分。     

分枝杆菌枝菌酸合成及其调控

结核病是危害人类健康的重要传染病,每年200多万人死于结核病。耐(多)药菌株的出现、与HIV共感染以及人口老龄化等原因与全球结核病的卷土重来密切相关。枝菌酸是存在于结核分枝杆菌、其他分枝杆菌和许多放线菌的细胞壁中的关键组分,与结核分枝杆菌的致病、毒力和免疫逃避都有关系。枝菌酸在抗结核研究中有着极其重要的地位。结核分枝杆菌枝菌酸的生物合成途径一直是很重要的抗结核药物靶标,异烟肼、乙胺丁醇等抗结核药物都是以此为靶标。深入研究枝菌酸的合成、调控有助于发现更多的药物靶标,为开发结核病控制新措施提供基础。本文综述了结核分枝杆菌枝菌酸的结构与分类、生物合成途径及其调控、作为抗结核药物靶标的前景与应用,以期对枝菌酸有更深入的了解并为新型抗结核药物靶标的发现提供基础。     

副结核分枝杆菌感染的免疫应答与检测方法研究进展北大核心CSCD

副结核分枝杆菌常引起感染牛的产奶量下降、持续性消瘦、顽固性下痢甚至死亡,给畜牧业带来了巨大的经济损失。牛通常在幼年期经口感染该菌并具有一个较长的亚临床期,后期才表现出临床症状,感染前期以细胞免疫为主并伴随着间歇排菌,经过一个2到5年的亚临床期后体液免疫应答增强,同时排菌量明显增加。目前对牛副结核病常用的检测方法有病原学检测方法,基于细胞免疫反应和基于体液免疫反应的检测方法。由于不同方法的反应原理不同,加之副结核分枝杆菌感染动物的特定免疫应答规律,在某一时间内各方法之间敏感性差异较大。本文简要阐述了牛副结核分枝杆菌的传播途径以及牛感染后的免疫应答特点,对牛副结核病的常见诊断方法进行了综述。     

结核分枝杆菌38kDa-U1融合抗原的表达、纯化及其抗原活性测定

由于结核病人抗体反应存在异质性,把单一抗原用于血清学诊断存在阳性率较低的缺陷。为获得适于结核病临床诊断用抗原,本研究将结核分枝杆菌38 ku抗原和尿蛋白(urine protein 1,U1)进行融合表达、纯化并测定其抗原活性。用基因拼接法将结核分枝杆菌编码38 ku抗原和U1蛋白的基因拼接在一起,克隆到pMD18-T上,进一步构建重组质料pET28a-38kDa-U1,并转化E.coliBL21,通过IPTG诱导实现其高效表达,采用亲和层析纯化表达产物。用纯化的融合抗原免疫家兔获得抗血清,用该血清以及活动性肺结核病人血清对纯化产物的抗原活性进行测定。结果成功构…     

结核病阳性血清特异结合蛋白的筛选与鉴定

[目的]从T7噬菌体展示的结核分枝杆菌基因组DNA文库中筛选结核病阳性血清特异结合蛋白。[方法]以饱和硫酸铵法初步纯化的结核病阳性血清为靶分子,对结核分枝杆菌基因组DNA文库进行3轮生物淘选; PCR扩增阳性噬菌体的外源DNA片段,测序后进行BLAST分析;间接ELISA和斑点免疫印迹试验检测阳性噬菌体与结核病阳性血清能否特异结合。[结果]经过3轮生物淘选,与结核病阳性血清特异结合的噬菌体得到明显富集; BLAST结果表明随机挑取的19个阳性噬菌体包括4种不同的序列,其中编码核糖激酶的序列出现次数最多;这些代表性噬菌体均能与结核病阳性血清特异结合。[结论]成功筛选到能与结核病阳性血清特异结合的4种蛋白,其中核糖激酶可能为与结核病阳性血清特异结合的优势抗原。     

血清学诊断中结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶的应用

[目的]在原核系统中表达结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶(phosphoenolpyruvate car-boxykinase PEPCK),并研究该蛋白在诊断结核病人血清抗体中的应用价值.[方法]应用基因重组技术表达重组蛋白结核杆菌磷酸烯醇型丙酮酸羧激酶,经亲和层析法纯化表达产物.用表达的重组蛋白免疫小鼠,研究其免疫学特性.间接酶联免疫吸附试验(Enzyme link immunosorbent assay,ELISA)检测结核病人血清中特异性IgG抗体,并与结核杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒检测结果对比.[结果]试验表明转化入大肠杆菌中的重组质粒能够表达并纯化出相对分子量为72 kDa的重组蛋白;Western blot证实重组蛋白能够与小鼠抗BCG血清发生特异性反应;重组蛋白免疫小鼠后,小鼠血清中的抗体滴度可达1∶1280以上;重组蛋白用作ELISA包被抗原检测病人血清阳性率为17.3%(30/173),其中排菌病人的阳性率为32.5%(13/42),不排菌病人的阳性率为12.9%.该方法结果与结核杆菌抗体胶体金法诊断试剂盒的检测结果相比,敏感性为51.0%,特异性为96.7%.[结论]结核杆菌PEPCK具有较好的免疫原性和抗原性,有可能作为结核病血清学诊断的一组抗原之一.     

对流免疫电泳与其他的血清学试验在诊断人布氏病上的比较(续完)

<正> 结果 细菌学 65个病人中的40人没有接受过抗菌素治疗,进行了血培养;35份是阳性。根据不加CO_2它们就能生长并且根据他们与非特异的布氏羊型血清凝集,全部菌株部鉴定为羊型布氏菌。25份培养证实为布氏羊型生物型Ⅰ,1份证实为布氏羊型生物型Ⅲ,     

复治肺结核患者结核分枝杆菌L型培养结果分析

目的:了解复治肺结核患者的结核分枝杆菌L型培养情况,探讨结核分枝杆菌L型阳性与耐多药的关系。方法:选择180例肺结核患者的痰标本进行结核分枝杆菌培养和结核分枝杆菌L型培养,同时对110例复治组中培养阳性的标本行耐药监测。结果:复治组的L型阳性率为43.6%,初治组的L型阳性率为15.7%,复治组显著高于初治组(P<0.01);菌阳复治组的L型阳性率50%,菌阴复治组的L型阳性率39.4%,菌阳组明显高于菌阴组(P<0.05);L型菌阳性患者的耐药率显著高于L型菌阴性组(P<0.05)。结论:结核分枝杆菌L型阳性是引起结核病复发、耐药的重要原因;MDR-TB与结核分枝杆菌L型感染有关。     

IFN-γ、IL-12及TNF-α在脊柱结核病人血清和病灶中的表达以及对疾病的影响

目的:检测IFN-γ、IL-12及TNF-α在脊柱结核病人血清和病灶中的表达水平,探讨血清和病灶中IFN-γ、IL-12及TNF-α的表达水平与脊柱结核的相关性。方法:2014年12月至2016年3月期间,纳入符合标准的脊柱结核病人46例为实验组,椎体骨折病人48例为对照组。应用ELISA检测两组人群血清中IFN-γ、IL-12、TNF-α的平均浓度;病灶标本免疫组化染色检测其IFN-γ、IL-12、TNF-α的平均光密度值。结果:实验组血清中IFN-γ,IL-12,TNF-α平均浓度分别为26.82±7.81 pg/mL,25.93±12.84pg/mL,68.13±16.24 pg/mL,对照组血清中平均浓度分别为46.89±7.81 pg/mL,49.45±22.38 pg/mL,26.65±10.11 pg/mL;实验组病灶中IFN-γ,IL-12,TNF-α平均光密度值分别为0.273±0.076,0.380±0.054,0.306±0.052,对照组病灶中平均光密度值分别为0.092±0.024,0.183±0.034,0.180±0.031。实验组与对照组血清及病灶中IFN-γ、IL-12及TNF-α的表达水平比较,差异有统计学意义(P0.05)。结论:脊柱结核病人的血清IFN-γ、IL-12浓度呈低表达,TNF-α浓度呈高表达;脊柱结核病人病灶中IFN-γ、IL-12及TNF-α表达增加;检测脊柱结核病人IFN-γ、IL-12及TNF-α血清水平含量能为其机体免疫力的状态、判断结核病情程度和进展及为临床诊断提供参考依据。     

结核病仍是传染病头号杀手

3月24日是第9个“世界防治结核病日”。有关专家呼吁:结核病这个上个世纪曾经猖獗一时的“老”传染病仍然是传染病头号杀手,其防治形势不容乐观。解放军三0九医院全军结核病中心主任王巍告诉记者,今年结核病日的活动主题是“控制结核病,让每一次呼吸更健康”,其目的就是要强调结核病防治的重要性和紧迫性。2000年全国结核病流行病学抽样调查报告显示,我国目前有结核病人500多万,传染性结核病人150万,每年约有13万人死于结核病。结核病死亡在传染病和寄生虫病中仍居第1位。贫困、人口增多、耐药结核病人增多、流动人口的增多以及艾滋病流行,…     

结核菌荧光抗体的制备及其临床应用

本文介绍以无毒人型结核菌菌悬液大剂量(80mg/ml)经皮下多点、静脉注射免疫家兔。获得凝集效价1:160—1:320免疫血清。提取免疫球蛋白制备免疫荧光抗体。用该抗体检查结核菌,其敏感性与荧光素染色和抗酸染色基本相似。与22种抗酸菌和3种非抗酸菌进行交叉试验,除与牛型结核菌、堪萨斯杆菌有交叉反应外,其它被试细菌均呈阴性反应。用该抗体检查肺结核病人痰标本155例,阳性率为43.87%,培养法阳性率27.74%,两法差异显著(P<0.005)。结果表明,结核菌免疫荧光抗体可用做肺结核病细菌学的快速诊断。     

结核分枝杆菌潜伏性感染发生机制的研究进展

结核分枝杆菌是结核病的致病菌,随着全球结核病的再次蔓延及艾滋病的流行,结核分枝杆菌的潜伏性感染日益到重视,本文就该菌潜伏感染动物模型的建立,潜伏性感染中该菌的生物学特性以及潜伏性感染的免疫发病机制等方面的研究进展一综述。     

复治肺结核患者结核分枝杆菌L型培养结果分析

目的：了解复治肺结核患者的结核分枝杆菌L型培养情况,探讨结核分枝杆菌L型阳性与耐多药的关系。方法：选择180例肺结核患者的痰标本进行结核分枝杆菌培养和结核分枝杆菌L型培养,同时对110例复治组中培养阳性的标本行耐药监测。结果：复治组的L型阳性率为43．6％,初治组的L型阳性率为15．7％,复治组显著高于初治组（P〈0．01）;菌阳复治组的L型阳性率50％,菌阴复治组的L型阳性率39．4％,菌阳组明显高于菌阴组（P〈0．05）;L型菌阳性患者的耐药率显著高于L型菌阴性组（P〈0．05）。结论：结核分枝杆菌L型阳性是引起结核病复发、耐药的重要原因;MDR-TB与结核分枝杆菌L型感染有关。     

对流免疫电泳与其他的血清学试验在诊断人布氏病上的比较

<正> 在标准快速血清学试验的比较中使用了65个临床诊断为布氏病的病人的血清。孟加拉红试验与标准试管凝集试验所到结果的相关性很好,而快速平板凝集试验和Coombs (抗球蛋白)试验则较差。用特异的抗——人免疫球蛋白血清吸收病人的血清表明IgM在孟加拉红试验中是有作用的而在Coombs试验中则没有作用。IgG和IgA在这两个试和Co验中都起作用。在凝集试验、孟加拉红试验、Coombs试验中起着最重要的作用的A和M抗原之外,用沉淀试验还检出了布氏其他的抗原部份。在对流——免疫电泳中有一种蛋白质抗原与94％的血清起反应。根据两组血清所得的结果,孟加拉红试验和对流-免疫电泳试验对于诊断临床布氏病是最有希望的方法。由于使用布氏抗原不同试验的性质也不同。