基于CRISPR/Cas9技术构建Plin1基因敲除小鼠模型及表型分析

利用CRISPR/Cas9技术构建纯合围脂滴蛋白(Plin1)基因敲除小鼠模型,并初步分析其表型.针对Plin1基因2号外显子前后序列设计sgRNA并构建表达载体,体外转录获得sgRNA后与Cas9蛋白混合,显微注射至小鼠受精卵中并进行胚胎移植.出生小鼠经测序及PCR基因型鉴定获得Fo代阳性小鼠;令Fo代小鼠与野生型小...     

驱动蛋白-1在小鼠脂肪组织糖脂代谢中的作用研究

目的:本文旨在探讨动物体内水平驱动蛋白-1在脂肪组织糖、脂代谢中的作用。方法:通过Cre/Loxp重组系统构建脂肪组织特异性敲除驱动蛋白-1的小鼠模型,在生理水平观察驱动蛋白-1表达缺陷对小鼠糖代谢、脂代谢和脂肪因子分泌的影响。结果:与六月龄对照组小鼠相比,同月龄驱动蛋白-1敲除小鼠的体重、脂肪组织重量和空腹血糖水平没有显著差异,但是其血清胰岛素水平显著升高;使用葡萄糖耐量试验(GTT)和胰岛素耐量实验(ITT)对小鼠的糖代谢水平进行评估,结果显示驱动蛋白-1敲除小鼠表现为葡萄糖不耐受、胰岛素不耐受;进一步血清检测显示驱动蛋白-1敲除小鼠表现为高甘油三酯血症和血清脂联素水平降低。结论:驱动蛋白-1在脂肪组织中参与调节糖、脂代谢过程,其表达或功能障碍是2型糖尿病等代谢性疾病的一个重要的发病因素。     

SGK1 抑制剂改善糖代谢紊乱的作用研究

目的:观察血清和糖皮质激素诱导的蛋白激酶1(serum and glucocorticoid-induced protein kinase1,SGK1)抑制剂对db/db小鼠糖代谢紊乱的改善作用,初步探讨该作用是否与改善脂肪组织功能紊乱有关。方法:将db/db小鼠随机分为db/db组、抑制剂组,同时设db/m组,db/db组、db/m组小鼠给予普通饲料喂养,抑制剂组小鼠给予含SGK1抑制剂的饲料喂养,干预8周。观察体重、摄食量、空腹血糖(fasting blood glucose,FBG)、糖化血红蛋白(glycosylated hemoglobin,Hb A1C),干预8周后行腹腔葡萄糖耐量试验(intraperitoneal glucose tolerance test,IPGTT)、腹腔胰岛素耐量试验(intraperitoneal insulin tolerance test,IPITT)。酶联免疫吸附测定(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)法检测血清空腹胰岛素(fasting insulin,FINS)水平,计算胰岛素抵抗指数(homeostasis model assessment of insulin resistance,HOMA-IR)及胰岛素敏感性指数(insulin sensitivity index,ISI)。实时定量荧光PCR(real-time PCR)法检测脂肪组织中SGK1、脂肪细胞因子m RNA表达水平。结果:干预8周后,抑制剂组体重、FBG、Hb A1C、IPGTT、IPITT均低于db/db组(P0.05),摄食量无明显差异。与db/db组相比,抑制剂组血清FINS有下降趋势,HOMA-IR明显降低,ISI明显升高(P0.05)。SGK1抑制剂干预治疗后,脂肪组织中SGK1、单核细胞趋化因子-1(monocyte chemotactic protein-1,MCP-1)、凝血酶元激活因子的抑制因子-1(plasminogen activator inhibitor 1,PAI-1)m RNA表达下降(P0.05),脂联素(adiponectin)m RNA表达无明显变化。结论:SGK1抑制剂干预治疗可一定程度改善db/db小鼠糖代谢紊乱,该作用可能部分与改善脂肪组织功能紊乱有关。     

基于NLRP3-神经递质通路初步探究知母总皂苷对肥胖小鼠脂肪组织的调控机制

观察知母总皂苷(saponins from Anemarrhena asphodeloides Bge.,SAa B)对C57BL/6J肥胖小鼠的干预作用,探讨其通过NLRP3-神经递质通路对肥胖小鼠脂肪组织的调控机制.采用高脂饲料喂养7周建立小鼠肥胖模型,将造模成功的小鼠随机分为阳性药氯吉兰组(3 mg/kg)、SA...     

阿利克仑抑制血管紧张素原-肾素双转基因高血压小鼠心肌成纤维细胞增殖

本研究旨在观察阿利克仑(aliskiren)在血管紧张素原-肾素(AGT-REN)双转基因高血压(double transgenic hypertension,d TH)小鼠心肌成纤维细胞(cardiac fibroblasts,CFs)增殖中的作用。将培养的AGT-REN d TH小鼠CFs分为高血压组(d TH)和阿利克仑干预组;另培养同品系野生C57B6小鼠CFs作为对照(WT)。采用MTT法观察不同浓度阿利克仑(1×10~(-6)、1×10~(-7)、1×10~(-8)、1×10~(-9) mol/L)对d TH小鼠CFs增殖的影响;选取1×10~(-7) mol/L阿利克仑作用d TH小鼠CFs 24 h,羟脯氨酸试剂盒定量检测细胞胶原含量;Western blot法检测细胞I、III型胶原蛋白表达,观察细胞胶原合成变化;Western blot法检测α-SMA表达,观察细胞转化;DHE检测细胞内活性氧表达,Western blot法检测细胞内NADPH氧化酶蛋白表达,观察细胞内氧化应激反应的改变。结果显示,随年龄增长,AGT-REN d TH组小鼠血压及血浆Ang II水平均呈明显升高趋势,与WT组小鼠相比,CFs增殖明显。1×10~(-6)、1×10~(-7)、1×10~(-8) mol/L阿利克仑均能抑制AGT-REN d TH小鼠CFs增殖。1×10~(-7) mol/L阿利克仑使d TH小鼠CFs表达α-SMA减少,胶原合成及I、III型胶原蛋白表达下降,活性氧表达减少;同时,阿利克仑降低了d TH小鼠CFs内NADPH氧化酶NOX2及NOX4的蛋白表达。阿利克仑抑制AGT-REN d TH小鼠CFs增殖、表型转化及胶原合成,这一过程可能与其抑制细胞内氧化应激反应有关。     

TYRO3~(-/-)AXL~(-/-)MER~(-/-)小鼠骨髓细胞mRNA的差异表达谱

TYRO3、AXL和MER受体是受体酪氨酸激酶亚家族之一,广泛地表达在哺乳动物神经、免疫、生殖、血液等系统多种细胞中,促进细胞存活、增殖和分化。本研究利用基因芯片技术筛选基因敲除的TYRO3~(~(-/-))AXL~(-/-)MER~(-/-)小鼠骨髓细胞中差异性表达的m RNA,并进行生物信息学分析。与正常小鼠骨髓细胞相比,TYRO3~(-/-)AXL~(-/-)MER~(-/-)小鼠骨髓细胞中差异表达基因探针共1 363条,其中表达上调的基因探针499条、下调的基因探针864条。GO功能富集分析发现上调的基因主要参与免疫反应,下调的基因主要参与造血。KEGG Pathway富集分析发现上调的基因主要参与细胞粘附分子和抗原呈递等信号通路。Real-time PCR验证5个差异基因,与芯片中表达变化趋势一致。因此TYRO3、AXL和MER受体共同参与调控机体的免疫反应和血细胞分化。     

运动经FoxO1-脂噬通路缓解ApoE-/-小鼠高脂血症的研究

目的 脂噬是一种针对脂肪的选择性自噬,受FoxO1调控.运动作为调节脂代谢紊乱疾病的有效手段,其在高脂血症的作用是否与FoxO1-脂噬过程有关,目前尚无报道.本研究通过两种运动方式干预高脂血症模型小鼠,检测脂肪组织中脂噬相关指标的变化,以探究运动缓解高脂血症的可能作用机制.方法 选取C57BL/6J小鼠作为野生对照组(...     

C1型尼曼-匹克病小鼠生长繁殖及血液生理生化指标的测定分析

目的测定SPF级C1型尼曼-匹克病小鼠(Npc1~(-/-)小鼠)的生长繁殖及血液生理生化指标,为开展NPC1病人的研究提供理论性的基础资料。方法 (1)选取0~77日龄Npc1~(-/-)、Npc1~(+/-)和Npc1+/+小鼠雌雄各40只,定期称重并绘制生长曲线;(2)Npc1~(-/-)小鼠由Npc1~(+/-)小鼠交配繁殖产生,统计Npc1~(+/-)小鼠连续4代的繁殖数据;(3)检测60日龄Npc1~(-/-)和Npc1+/+小鼠的血液生理生化指标。结果 (1)Npc1~(-/-)小鼠的体重在7周前随着日龄的增加而增加,7周后随着日龄的增加而减少,直至11周左右死亡。Npc1+/+和Npc1~(+/-)小鼠的体重均随着日龄的增长而逐渐增加,两者之间并没有显著差别。4周后雄性比雌性体重增加明显比雌性小鼠快;(2)Npc1~(+/-)小鼠不同代内交配分娩间隔、窝产仔数、离乳仔数、离乳仔数中雌雄数量及阳性数量差异无显著性(P0.05),而第2代的离乳率明显大于第1代(P0.05);(3)Npc1~(-/-)和Npc1+/+小鼠血液生理指标中平均红细胞血红蛋白含量(MCH)和平均过氧化物酶指数(MPXI)差异有显著性(P0.05),其余差异无显著性(P0.05)。生化指标中尿素(UREA)差异有极显著性(P0.01),而天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、葡萄糖(GLU)、乳酸脱氢酶(LDH)、钾(K)和铜(Cu)等差异有显著性(P0.05),其余差异无显著性(P0.05)。结论 (1)Npc1~(-/-)、Npc1~(+/-)和Npc1+/+小鼠的生长曲线因基因型和性别的不同而存在差异;(2)Npc1~(+/-)小鼠不同代的繁殖能力差异无显著性;(3)Npc1~(-/-)和Npc1+/+小鼠的部分血液生理生化指标差异有显著性。     

LFA-1缺失诱导小鼠的CD3+细胞上调

淋巴细胞功能相关抗原-1(lymphocyte function-associated antigen 1,LFA-1)是白细胞上的重要粘附分子。本研究旨在探讨LFA-1缺失(LFA-1~(-/-))后小鼠血液、骨髓、脾脏中血液细胞分类和T细胞亚群的变化。本研究采用LFA-1~(-/-)小鼠转基因小鼠,经PCR鉴定其基因型;采用全自动血液检测仪测定血液细胞分类。为进一步了解淋巴细胞亚群的变化,采用流式细胞仪检测LFA-1~(-/-)和对照组小鼠血液、骨髓、和脾脏中T淋巴细胞亚群。结果表明,LFA-1~(-/-)小鼠血液中白细胞总数增多;在骨髓,血液和脾脏中CD3+T淋巴细胞增多。根据研究结果推测LFA-1可能调控CD3+细胞的分化。     

磷脂酶D缺失对小鼠抗烟曲霉感染过程的影响研究

目的揭示宿主磷脂酶D(phospholipase D,PLD)应对烟曲霉感染过程中的重要作用和可能机制。方法应用滴鼻方式使野生小鼠和磷脂酶D双基因敲除小鼠(pld1~(-/-)pld2~(-/-))感染烟曲霉孢子后,取小鼠肺组织、抽取支气管肺泡灌洗液,应用组织匀桨与菌落计数的方法检测小鼠肺组织中烟曲霉负荷,采用eBioscience公司的多因子检测试剂盒检测肺泡灌洗液中炎症因子分泌情况;分离两种小鼠的骨髓细胞并诱导分化为成熟巨噬细胞(BMDM),制霉菌素法检测其吞噬和杀死烟曲霉孢子的能力。结果感染烟曲霉孢子6 h后,pld1~(-/-)pld2~(-/-)小鼠肺部真菌负荷显著高于野生小鼠,其肺泡灌洗液和肺泡巨噬细胞中均存在大量孢子,肺泡灌洗液中炎症因子浓度显著升高;体外实验证明pld1~(-/-)pld2~(-/-)小鼠的BMDM细胞吞噬和杀死烟曲霉孢子的能力显著减弱。结论小鼠pld1基因和pld2基因同时敲除导致其巨噬细胞的吞噬和杀死烟曲霉孢子的能力显著减弱,进而可能降低小鼠抗烟曲霉感染的能力。同时机体可能通过分泌大量的炎症因子以招募其他免疫细胞杀灭烟曲霉孢子。     

荷瘤小鼠脾脏功能紊乱型CD8~+T细胞数量的分析研究

目的分析荷瘤小鼠与正常小鼠脾脏功能紊乱型CD8~+T细胞(Tim-3~+/PD-1~+ CD8~+T细胞)的数量比例,预测肿瘤患者功能紊乱型CD8~+T细胞的情况,为改善肿瘤的免疫治疗提供参考。方法设置荷瘤小鼠组与正常小鼠组,每组各3只,分别从两组小鼠脾脏中提取分离获得CD8~+T细胞,用FITC标记的PD-1抗体、PE标记的Tim-3抗体与CD8~+T细胞共孵育,孵育后经流式细胞术检测获得数据,并分析结果。结果正常小鼠组脾脏CD8~+T细胞占脾脏T淋巴细胞总数百分比为7.7%,荷瘤小鼠组脾脏CD8~+T细胞占脾脏T淋巴细胞总数百分比为1.2%,两组的CD8~+T细胞数量有明显差异性(χ~2=0.299,P=0.02);正常小鼠组脾脏功能紊乱型CD8~+T细胞占CD8~+T细胞总数的百分比为1.17%,荷瘤小鼠组脾脏功能紊乱型CD8~+T细胞占CD8~+T细胞总数的百分比为1.17%,两组数据差异无统计学意义(χ~2=0.00,P=1.00)。结论荷瘤小鼠与正常小鼠脾脏组织中功能紊乱型CD8~+T细胞的数目无明显差异。     

京尼平对小鼠棕色和白色脂肪组织UCP1表达的影响

目的:棕色脂肪组织活化和白色脂肪组织棕化是改善减肥的良好策略。本研究利用冷刺激作为阳性对照,观察京尼平对小鼠脂肪组织活化与棕化的作用。方法:8周龄雄性C57BL/6J小鼠30只,随机分为正常对照组、京尼平组、冷刺激组, 每组10只。京尼平组小鼠腹腔注射给予京尼平处理(15 mg/(kg·d),连续9 d),对照组用生理盐水处理,冷刺激组小鼠在室温(22℃±2℃)下处理4 d后,置于4℃环境中进行冷刺激处理5 d(24 h/d)。检测各组小鼠每天摄食量、体重和体温变化,取肩胛下区、腹股沟区及附睾周围部分脂肪组织观察形态学的变化,测定棕色脂肪组织、皮下白色脂肪组织以及内脏白色脂肪组织解偶联蛋白1(UCP1)的表达。结果:与正常对照组相比,京尼平组小鼠白色脂肪湿重下降16%,冷刺激组下降28%,均有明显差异(P＜0.05);京尼平组和冷刺激组白色脂肪组织颜色变深,HE染色显示脂肪细胞内的脂滴变小,数量增加;京尼平组小鼠的皮下、内脏白色脂肪组织和棕色3种脂肪组织中的UCP1表达量均明显增加(P＜0.05)。结论:京尼平通过上调UCP1的表达促进棕色脂肪组织活化和白色脂肪组织棕化,此效应是京尼平降脂减轻体重的作用机制之一。     

维生素E对2,3,7,8-四氯二苯并二噁英急性染毒小鼠卵巢内分泌及其结构的影响

为研究维生素E对2,3,7,8-四氯二苯并二噁英(TCDD)染毒小鼠生殖内分泌功能和卵巢的影响,设计了急性染毒实验。将24只4-5周龄的健康雌性小鼠(Mus musculus)随机分为对照组、TCDD(30μg/kg)染毒组和染毒同时给予100mg/kg维生素E组3组。通过放射免疫法测定小鼠血浆孕酮、雌二醇含量的变化,显微镜下计数卵泡数量并观察其形态变化。结果表明,TCDD能导致小鼠血浆孕酮含量的降低及卵巢结构的紊乱、卵泡数量的减少。100mg/kg的维生素E能明显对抗急性TCDD染毒引起的雌鼠孕酮含量和卵泡数量降低,缓解TCDD引起的小鼠卵巢形态结构的病变;TCDD染毒和维生素E对小鼠血浆雌二醇含量均没有明显影响。结果表明,维生素E对TCDD引起的内分泌功能紊乱以及卵泡数量降低有拮抗作用。     

MiR-186-5p对3T3-L1前脂肪细胞增殖分化的影响研究 *

目的 探究miR-186-5p对小鼠3T3-L1前脂肪细胞增殖,分化的影响及其潜在的分子机制.方法: qRT-PCR检测miR-186-5p在不同周龄小鼠白色脂肪组织及3T3-L1前脂肪细胞增殖分化过程中的表达变化;通过脂质体将miR-186-5p mimics,inhibitors转染入增殖液或分化液培养的3T3-L1细胞后,利用CCK-8,EdU和qRT-PCR检测3T3-L1前脂肪细胞增殖变化,油红O染色观察其脂滴形态;通过生物信息软件TargetScan和双荧光报告系统分别对miR-186-5p靶基因进行预测和确认.结果: (1)miR-186-5p在1~6周龄小鼠的白色脂肪组织及3T3-L1前脂肪细胞自然分化过程中表达量均逐渐上调.(2)与阴性对照相比,mimics或inhibitors转染分别显著地促进或抑制了miR-186-5p的表达.(3)过表达miR-186-5p后,3T3-L1前脂肪细胞的增殖速率减慢,脂滴增大增多;而抑制miR-186-5p后,3T3-L1前脂肪细胞增殖速率增快,脂滴数量减少,且粒径变小.其中过表达miR-186-5p显著地降低了野生型Wnt5a和Mapk1 3'-UTR活性,而突变相应的绑定位点可解除该抑制作用.结论: miR-186-5p可抑制3T3-L1前脂肪细胞增殖,且通过直接靶向Wnt5a和Mapk1以促进其分化为成熟脂肪细胞.     

白藜芦醇对高脂饲养小鼠脂肪组织氧化还原状态及血脂的影响

本研究旨在探索白藜芦醇(RSV)对不同程度肥胖小鼠脂肪氧化应激状态和血脂的影响。高脂日粮(HFD)处理12周的昆明小鼠分为3类:肥胖抵抗(DIO-R)、中体重(Med)和肥胖(DIO),分别饲喂HFD、HFD+0.3 g/kg RSV和HFD+0.6 g/kg RSV日粮18周,并以正常日粮小鼠为对照。结果表明,0.6 g/kg RSV处理可显著降低DIO小鼠体重、腹脂率,显著提高脂肪组织抗氧化能力,改善血脂。0.3 g/kg RSV处理对DIO-R小鼠也有类似趋势,但0.6 g/kg RSV处理引起DIO-R小鼠脂肪组织抗氧化能力下降、血脂紊乱。总之,RSV在不同程度肥胖小鼠具有剂量特异性的氧化应激调控作用。     

Irgm 1参与动脉粥样硬化斑块的形成

目的:探讨免疫相关GTP酶1(Irgm 1)对小鼠血管动脉粥样硬化(AS)斑块形成的影响。方法:高脂饲料喂养野生型(WT)、ApoE~(-/-)Irgm 1~(+/+)和ApoE~(-/-)Irgm1~(+/-)小鼠3个月,建立AS模型;取小鼠主动脉弓,免疫荧光染色方法观察WT和ApoE~(-/-)Irgm 1~(+/+)小鼠血管AS斑块中Irgm 1的表达情况及部位;Western blot方法检测WT和ApoE~(-/-)Irgm 1~(+/+)小鼠血管AS斑块中Irgm 1蛋白表达情况;Q-PCR方法检测WT和ApoE~(-/-)Irgm 1~(+/+)小鼠血管AS斑块中Irgm 1 m RNA表达情况;油红O染色观察ApoE~(-/-)Irgm1~(+/+)和ApoE~(-/-)Irgm1~(+/-)小鼠血管AS斑块形成情况;结果:与WT组相比,ApoE~(-/-)Irgm 1~(+/+)组小鼠主动脉弓AS斑块中Irgm 1+细胞明显增多,Irgm 1+细胞主要位于血管AS斑块的表面;与WT组相比,ApoE~(-/-)Irgm 1~(+/+)组小鼠血管AS斑块中Irgm 1蛋白表达显著增多(P0.001),Irgm 1 m RNA表达显著增多(P0.01);与ApoE~(-/-)Irgm1~(+/-)组相比,ApoE~(-/-)Irgm1~(+/+)组小鼠主动脉弓AS斑块面积显著增大(P0.01);结论:Irgm 1能够促进血管AS斑块的形成。     

小鼠结直肠自发肿瘤模型的建立

目的:建立小鼠结直肠自发肿瘤模型。方法:用雄性Ap~(Mn/ )基因突变小鼠与雌性BubR1~( /-)基因敲除小鼠交配。得到的子代小鼠,按基因型分为Wild Type,BubR1~( /-),Apc(Mn/ ),和BubR~(1 /-)Apc(Mn/ 4)组,每组7只,观察各组肠组织肿瘤数目、大小和位置,行HE染色后观察病理学改变,并用免疫组化染色法研究各组结直肠β-catenin的表达。结果:①BubR1~( /-)Apc(Mn/ )组小鼠结直肠肿瘤的发病率显著增加,较Apc(Mn/ )组有显著差异(P=0．008)。②BubR1或Apc单独缺失组小鼠结直肠中β-catenin蛋白除在细胞膜表达外,在细胞质也有弱阳性表达;而BubR1~( /-)Apc(Mn/ )组小鼠结直肠β-catenin的表达水平明显增高,且多为细胞质表达和(或)膜浆共表达,部分合并细胞核表达。结论建立小鼠结直肠自发肿瘤模型对于筛选抗肿瘤药物和研究肿瘤发生机制具一定的应用价值。     

Forskolin引起大鼠脂肪细胞内脂滴重塑(英文)

脂肪组织是人体的主要能量储库,甘油三酯贮存在细胞内脂滴(lipid droplets, LDs)中,越来越多的研究表明脂滴是细胞内代谢活跃的细胞器。本研究旨在探讨forskolin长时间刺激脂肪分解过程中脂滴形态和脂滴表面perilipin家族蛋白的改变。以Sprague-Dawley (SD)大鼠附睾脂肪垫来源的分化脂肪细胞为研究对象,给予1μmol/L forskolin慢性刺激24 h,采用比色方法测定培养基中甘油的浓度;采用尼罗红染色观察细胞内脂滴形态的变化;采用荧光定量PCR检测perilipin家族蛋白mRNA水平的改变;采用免疫印迹和免疫荧光染色观察蛋白水平以及蛋白的亚细胞定位。结果表明,1μmol/L forskolin孵育24 h可以持续刺激脂肪分解。伴随着脂肪分解的进行,细胞内脂滴形态逐渐发生改变,细胞内聚集存在的大脂滴逐渐减少,位于细胞周边的小脂滴逐渐增加,最终细胞内大脂滴全部消失,取而代之的是在细胞质中弥散存在的微小脂滴。在脂肪分解过程中,perilipin家族蛋白水平也发生明显变化。分化成熟的脂肪细胞几乎没有Plin2蛋白表达,而forskolin慢性刺激可以显著增加Plin2蛋白以及mRNA的水平,增加的Plin2蛋白特异性结合在脂滴表面。Forskolin慢性刺激对Plin3的mRNA水平无显著影响,但可以显著降低Plin1、Plin4和Plin5的mRNA水平。以上结果提示,在forskolin慢性持续刺激脂肪分解过程中,脂滴形态和perilipin家族蛋白均发生显著改变。     

中链脂肪酸受体GPR84对小鼠糖脂代谢的影响

目前,全球肥胖及肥胖引发的并发症如2型糖尿病、心血管疾病等患病率呈上升趋势,并逐渐成为一个重大的公共卫生问题.与肥胖相关疾病的发病机制是由多种因素共同作用的结果,游离脂肪酸受体在其中就扮演着重要角色.G蛋白偶联受体84(GPR84)是中链脂肪酸(C9-C14)受体,其在糖脂代谢方面的功能尚不清楚.因此,探究中链脂肪酸受体GPR84在小鼠糖脂代谢方面的作用,具有重要意义.本文利用高脂饲料在GPR84野生型(WT)和基因敲除型(GPR84~(-/-))小鼠中诱导肥胖模型.研究发现,在常规饲料(normal chow,NC)喂养组和高脂饲料(high-fat diet,HFD)喂养组,与WT小鼠相比,GPR84~(-/-)小鼠在体重、摄食量、葡萄糖耐量、胰岛素敏感性、空腹血糖值、血清中胰岛素含量、组织器官重量、脂质合成与脂肪酸氧化、白色脂肪形成方面无显著性差异;在血脂水平,GPR84~(-/-)小鼠与WT小鼠相比,甘油三酯、低密度脂蛋白胆固醇、高密度脂蛋白胆固醇无显著性差异;但是在高脂饲料喂养组,GPR84~(-/-)小鼠总胆固醇浓度显著性降低.同时,我们发现,在HFD组,与WT小鼠相比,GPR84~(-/-)小鼠肝脏中B类Ⅰ型清道夫受体表达显著上调.综上所述,中链脂肪酸受体GPR84在高脂诱导的肥胖模型中不影响小鼠糖脂代谢,但可能在由高胆固醇引起的高胆固醇血症发挥一定的功能.     

内皮特异性miR-342-5p敲除致小鼠内皮损伤和心血管功能紊乱

摘要 目的：我们前期研究发现有氧运动促进内皮细胞等分泌miR-342-5p,miR-342-5p通过外泌体富集至心肌细胞后发挥心脏保护作用。本研究的主要目的是明确内皮来源的miR-342-5p在心血管功能调控中的作用。方法：我们构建了内皮特异性miR-342-5p敲除小鼠,通过心脏超声检测和血管收缩舒张功能检测观察了该小鼠心血管功能的变化;培养血管内皮细胞,通过对细胞存活率检测、相关蛋白的表达检测等方法对miR-342-5p发挥心血管保护作用的机制进行探究。结果：内皮miR-342-5p敲除致小鼠运动能力降低、心脏收缩功能不变,但舒张功能紊乱。且内皮miR-342-5p敲除致小鼠血管口径变小、微血管密度降低和血管内皮功能紊乱。内皮miR-342-5p敲除致小鼠心血管功能紊乱的机制与其引起的内皮细胞损伤有关。敲低miR-342-5p致内皮细胞中caspase 9水平增加,引起内皮细胞活性降低和凋亡增加。结论：这些结果进一步证实了内皮细胞来源的miR-342-5p在心血管功能中的重要作用,提示miR-342-5p在防治心血管疾病中的潜在应用。