集落刺激因子与动脉粥样硬化

集落刺激因子（ＣＳＦｓ）可通过激活ＬＤＬ受体依赖性和非依赖性途径，使含ＡＰＯＢ－１００的脂蛋白水平降低。另一方面，动脉壁内ＣＳＦｓ则吸引循环单核细胞而聚集、衍化为巨噬细胞，并增强其摄取脂蛋白和酯化胆固醇的能力。提示ＣＳＦｓ对动脉粥样硬化可能具有抑制和促进双重作用。对ＷＨＨＬ兔的整体实验显示，Ｍ－ＣＳＦ能减缓其自发性动脉粥样硬化的进程。对ＣＳＦｓ的进一步研究可能有助于加深对动脉粥样硬化发病机理的认识，进而开辟防治新途径。     

巨噬细胞集落刺激因子用于治疗感染性疾病的探讨

巨噬细胞集落刺激因子（Ｍ－ＣＳＦ）对机体感染性疾病的发生、发展有重要影响。已经在体内外证实Ｍ－ＣＳＦ对某些细菌、真菌和病毒有抗感染作用，有潜在的临床应用价值；但在某些情况下也能加重某些感染性疾病的病情。     

人巨噬细胞集落刺激因子在家蚕中的高效表达

人巨噬细胞集落刺激因子在家蚕中的高效表达秦浚川,邱平,施晓青,朱洁,朱德煦（南京大学生物化学系,国家医药生物技术重点实验室,２１０００８）关键词人巨噬细胞集落刺激因子;家蚕;基因表达人巨噬细胞集落刺激因子（ｈＭ－ＯＳＦ）是一种重要的血细胞生长因子,它...     

粒细胞巨噬细胞集落刺激因子诱导的巨噬细胞外向K+电流的特性

以粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（ＧＭ－ＣＳＦ,１６ｎｇ／ｍｌ）长期（０．５－６ｄ）刺激小鼠腹腔渗了的巨噬细胞,采用全细胞膜片箝技术研究在ＧＭ－ＣＳＦ刺激过程中细胞膜电流的变化,观察到一种ＧＭ－ＣＳＦ诱导的瞬间失活的外向Ｋ电流,该电流在生理电压范围内可发生稳态失活,且当施加０．５ＨＺ的去极化脉冲刺激时其失活具有频率依赖性。该电流对胞外４－ＡＰ高度敏感,胞内Ｃａ＾２＋浓度「Ｃａ＾２＋」升主可抑制其幅度,     

人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子研究进展

hGM-CSF是一种重要的具有免疫调节功能的糖蛋白,在造血调控和免疫调节方面发挥重要作用,具有重要的临床应用价值。总结近些年来各国对hGM-CSF的研究情况,首先对hGM-CSF的基因结构、蛋白分子结构、生物学活性等方面做了详细的介绍;接下来,又从基因转录水平和转录后水平两个方面对hGM-CSF的表达调控做了介绍;最后,对比了利用基因工程技术将hGM-CSF基因在不同生物中的表达情况,详细讲解了优缺点。     

缩短的人巨噬细胞集落刺激因子（M—CSF）在大肠杆菌中…

本文用聚合酶链反应（ＰＣＲ）获得了一个缩短的人巨噬细胞集落刺激因子ｃＤＮＡ基因,并克隆在质粒ｐＡＥＴ３ｄ中,在Ｔ７启动子指导下,在大肠杆菌ＢＬ２ＬｙｓＥ中获得了和一个６组氨酸短肽标签的融合表达。重组的融合Ｍ－ＣＳＦ表达量占菌体总蛋白的１２％,表达产物一部分以不溶性包涵体形式存在,另一部分则以可溶性蛋白存在。经过金属螯合新和层析一步纯化,所得的融合（Ｈｉｓ）６－Ｍ－ＣＳＦ在还原型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上基     

人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子在烟草种子中的表达

TransgenicResearch 2 0 0 2年 1 0月 1 1卷 5期 5 2 1～ 5 31页报道 :种子不仅是高等植物延续生命的重要材料 ,也是人类食物、药品和工业原料的重要来源。近年来已将不同来源包括人类、细菌和病毒的可利用的基因序列表达于植物 ,也试图利用转基因种子蛋白来生产药物。已知人粒细胞 巨噬细胞集落刺激因子 (GM CSF)在调节白血细胞 (粒细胞和单核细胞 )的生成和功能中可发挥重要作用 ,在抗感染中具有重要的临床意义。还发现GM CSF在化疗、骨髓移植、抗癌和抗艾中也具有多种临床应用。因此 ,目前已有一些国家将重组GM CSF用于临床治疗…     

大肠杆菌表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的纯化

对重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）高效表达克隆ｐＺＷ．ＧＭ的表达产物进行了纯化,并对纯化的ＧＭ－ＣＳＦ进行了Ｎ端氨基酸序列分析。人ＧＭ－ＣＳＦ基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在,经过超声破菌、包涵体抽提、凝胶过滤层析、复性、离子交换一系列化步骤,终产物纯度达９９％,按蛋白总量计算回收率达１０％,比活性达１×１０＾７ｕ／ｍｇ蛋白质。通过测定纯化人ＧＭ－ＣＳＦ的Ｎ端１     

人巨噬细胞集落刺激因子（hM—CSF）基因的合成及表达

按照ｈＭ－ＣＳＦ基因的序列,适当采用大肠杆菌的优选密码子,人工合成了Ｍ－ＣＳＦ的基因。在合成中我们采用了分段克隆和顺次克隆的方法,在次级克隆中我们成功地使用多片段分组连接和多片段一次克隆战略,还尝试了多种单链战术,在表达载体的构建中,充分利用人工合成基因的灵活性,通过对Ｎ端６个氨基酸编码的变换及ＳＤ序列－ＡＴＧ间距离的改变,获得了大肠杆菌中高效表达的重组体,表达的蛋白量的变换及ＳＤ序列－ＡＴＧ间距     

重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子包涵体提取、复性和纯化的研究

由基因工程大肠杆菌表达的重组人粒细胞－巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭ－ＣＳＦ）以包涵体的形式存在于细胞中,通过破菌、洗涤获得包涵体,再经过溶解、凝胶过滤、复性、疏水和离子交换柱导析得到了均一的产品,经高压液相和ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳测定纯度均大于９８％,ｒｈＧＭ－ＣＳＦ的比活为３．２×１０＾７ＩＵ／ｍｇ,纯化获得的ｒｈＧＭ－ＣＳＦ为一酸性蛋白,等电点约为５．２,ＮＨ２－末端有２０个氨基酸序列测定结果     

重组人巨噬细胞集落刺激因子的结构与功能

重组人粒细胞──巨噬细胞集落刺激因子(rhGM-CSF) 已经在原核、真核细胞表达并得到纯品,为它的结构与功能研究提供了有利条件．目前国内外对于rhGM-CSF的结构与功能研究主要集中在晶体结构、化学修饰、溶液中构象和稳定性以及突变和分子设计方面．分子结构与功能的关系以及与GM-CSF受体作用机理研究也取得了突破性进展．     

优化mRNA翻译起始区提高人粒—巨噬细胞集落刺激因子在E.coli…

人粒－巨噬细胞集落刺激因子（ｈＧＭ－ＣＳＦ）是一种重要的造血生长因子。利用基因重组技术构建两个ｈＧＭ－ＣＳＦ的Ｅ．ｃｏｌｉ表达菌株,一个为在不改变氨基酸顺序的前提下,对ｍＲＮＡ翻译起始区核苷酸顺序进行优化突变（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｍ））,另一个为未突变的对照（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｎ））。经酶切电泳、ＤＮＡ测序、ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ等未突变的对照（ｈＧＭ－ＣＳＦ（Ｎ））。经酶切电泳、Ｄ     

表达粒细胞巨噬细胞集落刺激因子的非复制痘苗病毒的抗肿瘤效果

构建了表达GM－CSF的非复制型重组痘苗病毒RV△11β75GMCSF。Southern blot证实重组病毒C－K片段间基因缺失,同时插入GM－CSF 基因,GM－CSF可以分泌形式良好表达。Wistar大鼠Walker‘s瘤内注射重组病毒RV△11β75GMCSF后,可以延长荷瘤鼠的生存时间,重组病毒RV△11β75GMCSF修饰的肿瘤细胞裂解物（WRC256）的肿瘤免疫治疗,可以抑制荷瘤大鼠的肿瘤生长,瘤重较对照组减轻,此结果提示,非复制重组痘苗病毒表达的GM－CSF可作为有效的肿瘤免疫治疗佐剂。     

大肠杆菌表达的重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子的纯化

对重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子(rhGM—csF)高效表达克隆pzw．GM的表达产物进行了纯化,并对纯化的人GM—CSF进行了N端氨基酸序列分析。人GM—CSF基因表达产物在大肠杆菌中以不溶性包涵体形式存在,经过超声破菌、包涵体抽提、凝胶过滤层析、复性、离子交换一系列纯化步骤,终产物纯度达99％,按蛋白总量计算回收率达10％,比活性达1×10⁷／mg蛋白质。通过测定纯化人GM—csF的N端l 6个氨基酸序列,与由其DNA序列推导的氮基酸序列完全一致,为大批量重组人GM—CSF的生产创造了条件。     

微生物代谢产物对粒细胞巨噬细胞集落刺激因子产生的影响

目的：观察链脲菌素对粒细胞巨噬细胞集落刺激因子（GM-CSF）产生的影响。方法：使用微生物代谢产物-链脲菌素作诱导剂,培养人骨髓基质细胞株（BMol),用ELISA法检测培养液中GM-CSF的含量结果：链脲菌素可使BMol产生GM-CSF明显增加。结论：微生物代谢产物-链脲菌素是一种很好的诱导剂。     

氧化修饰低密度脂蛋白与动脉粥样硬化

氧化修饰低密度脂蛋白与动脉粥样硬化周永列（浙江省人民医院,杭州３１００１４）关键词氧化修饰低密度脂蛋白,动脉粥样硬化在动脉粥样硬化（ＡＳ）与血浆脂质关系的研究中,血浆低密度脂蛋白（ＬＤＬ）浓度升高被认为是引起ＡＳ的重要危险因素而受到广泛的重视。但是脂...     

缩短的人巨噬细胞集落刺激因子（M－CSF）在大肠杆菌中的表达

本文用聚合酶链反应（ＰＣＲ）获得了一个缩短的人巨噬细胞集落刺激因子（编码３～１４９氨基酸）ｃＤＮＡ基因,并克隆在质粒ｐＥＴ３ｄ中,在Ｔ７启动子指导下,在大肠杆菌ＢＬ２１（ＤＥ３）ＬｙｓＥ中获得了和一个６组氨酸短肽标签的融合表达。重组的融合ｍ－ＣＳＦ表达量占菌体总蛋白的１２％,表达产物一部分以不溶性包涵体形式存在,另一部分则以可溶性蛋白存在。经过金属螫合亲和层析一步纯化,所得的融合（Ｈｉｓ）６－Ｍ－ＣＳＦ在还原型ＳＤＳ－ＰＡＧＥ上基本呈一条均一的蛋白质条带。     

用疏水色谱法复性并同时纯化重组人粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子

目的：建立一种简单、快速复性并同时纯化大肠杆菌表达的重组人粒细胞一巨噬细胞集落刺激因子（rhGM-CSF）的方法。方法：研究rhGM-CSF在疏水色谱（HIC）上的复性和纯化机理,并对固定相和流动相进行选择和优化,包括固定相配基、流动相中盐的种类、流动相pH值、流动相中还原型谷胱甘肽（GSH）和氧化型谷胱甘肽（GSSG）的比例,以及流动相中尿素的浓度。结果：优化后的固定相为PEG600,流动相中的盐为（NH4）2SO4,流动相pH值为7．0,流动相中添加2．0mol／L尿素、1．8mmol／LGSH和0-3mmol／LGSSG。在优化条件下,HIC可使rhGM-CSF在分离纯化的同时得到复性,比活达1．58×10^7U／mg,纯度为95．7％,质量回收率为56．8％。结论：建立的疏水色谱复性和纯化工艺可简化操作步骤,缩短生产周期。     

重组人粒——巨噬细胞集落刺激因子治疗药物性粒细胞缺乏症及急性骨髓衰竭

药物所致的粒细胞缺乏症和急性骨髓衰竭是一种危及生命的严重并发症。合并骨髓增殖不良和骨髓粒系祖细胞耗竭者常有较长时间的粒细胞缺乏期。运用重组人粒—巨噬细胞集落刺激因子（ｒｈＧＭＣＳＦ）治疗３例这类患者,剂量为３００μｇ／天,皮下注射,所有病例３天后中性粒细胞绝对值达０５×１０９／Ｌ以上,中性粒细胞缺乏期平均为５６７天,明显短于文献报道。提示ｒｈＧＭＣＳＦ有助于此类患者中性粒细胞的恢复。