反义RNA及其在植物学研究中的应用

反义ＲＮＡ最初发现于细菌中,它们是一些较短的、散布的转录产物[1],本身缺乏编码能力,但可以通过碱基配对的方式与靶ＲＮＡ的特定互补区域结合,从而阻抑基因的正常表达,因此,反义ＲＮＡ是高度特异性的基因表达抑制因子。1　自然界中存在的反义ＲＮＡ参与基因表达调控的反义ＲＮＡ是在原核生物中发现的。一些实验结果表明,在质粒的复制、转座子的转座作用及噬菌体的发育进程中,反义ＲＮＡ的调控起着至关重要的作用。ＣｏｌＥ1以及其他相关质粒的复制过程中,ＤＮＡ的延伸起始于一种特殊引物的形成。而这一引物所在的区段,亦可产生与引物本身5…     

基因治疗中的受体介民反义RNA转移技术

在调节特定基因的表达上,反义ＲＮＡ是一种重要的手段。但由于存在降解、非特异性转移及安全性等问题,反义ＲＮＡ在个体基因治疗中无法得到充分利用。受体介导的内吞作用为定向转移反义ＲＮＡ提供一种运载工具,它可以将反义ＲＮＡ定向、高效、低毒、高安全性地转移到靶细胞中发挥作用,因而将大大加快反义ＲＮＡ基因治疗的临床应用。     

反义RNA调节肿瘤细胞O~6-甲基鸟嘌呤-DNA甲基转移酶活性

报道了逆转录病毒载体介导的反义ＲＮＡ对肿瘤细胞Ｏ６－甲基鸟嘌呤－ＤＮＡ甲基转移酶（ＭＧＭＴ）活性的调节作用．构建了三个表达ＭＧＭＴ反义ＲＮＡ的逆转录病毒载体并用它们转染ＨｅＬａＳ３肿瘤细胞,观察细胞在转染前后ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平、ＭＧＭＴ活性及其对ＡＣＮＵ抗药性的变化．发现针对ＭＧＭＴｍＲＮＡ５’端的反义ＲＮＡ能够有效地降低ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平和ＭＧＭＴ活性并使细胞对ＡＣＮＵ的敏感性提高４．６倍;针对ＭＧＭＴｍＲＮＡ全长的反义ＲＮＡ也能在一定程度上调节细胞的ＭＧＭＴｍＲＮＡ水平和ＭＧＭＴ活性并增加细胞对ＡＣＮＵ的敏感性,而针对３’端序列的反义ＲＮＡ对ＭＧＭＴ活性没有调节作用．     

反义基因治疗

除了反义核酸和核酶外,最近又发展了一种新型的反义药物－反义肽核酸（ＲＮＡ）。反义治疗的经验策略是阻断异常基因的表达;随着研究的深入,又发现了以反义药物调整基因表达比例（即调控基因治疗）的反义治疗途径。本文对反义基因治疗的策略,反义药物的设计及稳定性等方面的新思路和该领域的发展与应用前景作了概括介绍。     

RNA的选择性加工对果蝇性别决定的作用

ＲＮＡ的选择性加工是真核生物基因表达调控的重要方式之一,同一种ｍＲＮＡ前体通过ＲＮＡ的选择性拼接可产生几种不同的ｍＲＮＡ,从而翻译出不同的蛋白质。ＲＮＡ的选择性加工对真核生物的发育调控是非常重要的,本文概述其在果蝇（Ｄｒｏｓｏｐｈｉｌａ）的性别决定过...     

爱滋病的反义抑制治疗

爱滋病的反义抑制治疗黄建生，王昌才，任大明（广州第一军医大学生物化学教研室，广州５１０５１５）（复旦大学遗传所国家重点实验室，上海２００４３３）关键词反义ＲＮＡ，爱滋病（ＡＩＤＳ）反义ＲＮＡ是一种与ｍＲＮＡ互补的ＲＮＡ分子，是反义基因的转录产物，它能...     

大肠杆菌中的小分子RNA

迄今为止,已知由大肠杆菌基因组编码的小分子ＲＮＡ（ｓＲＮＡ）除了５ＳｒＲＮＡ和ｔＲ－ＮＡ外,共有１０种,其中大多数是调控ＲＮＡ,可调控细菌的某些代谢过程。１．ｓＲＮＡ的发现用聚丙烯酰胺凝胶电泳分析３２Ｐ标记的大肠杆菌总ＲＮＡ,发现除５ＳｒＲＮＡ和ｔＲ...     

RNA功能研究进展

ＲＮＡ功能研究进展王建勋,陈松森（中国医学科学院基础医学研究所,中国协和医科大学基础医学院,北京１００００５）关键词ＲＮＡ近年来,陆续发现了许多小分子ＲＮＡ,它们广泛存在于各种生物体中,行使与传统功能不同的功能,参与许多生命活动的调控。同时,还发现转...     

反义RNA对人胃癌细胞生长抑制及恶性表型的阻断作用

ｒａｓ原癌基因的点突变是人胃癌发生发展的重要机理之一。利用能表达ｃ－Ｈ－ｒａｓ癌基因反义ＲＮＡ的质粒,导入人胃癌细胞系ＢＧＣ－８２３,研究了ｒａｓ癌基因反义ＲＮＡ对人胃癌细胞生长及恶性表型的作用,结果表明,ｃ－Ｈ－ｒａｓ反义ＲＮＡ可引起ＢＧＣ－８２３生长速率及形态的变化,在半固体培养基中细胞集落形成能力减弱,部分地抑制了ＢＧＣ－８２３在裸鼠体内的致瘤性。ｃ－Ｈ－ｒａｓ反义ＲＮＡ对其ＲＮＡ的过量表达呈特异性抑制作用。     

反义RNA对人胃癌细胞生长抑制及恶性表型的阻断作用

ｒａｓ原癌基因的点突变是人胃癌发生发展的重要机理之一。利用能表达ｃ－Ｈ－ｒａｓ癌基因反义ＲＮＡ的质粒,导入人胃癌细胞系ＢＧＣ－８２３,研究了ｒａｓ癌基因反义ＲＮＡ对人胃癌细胞生长及恶性表型的作用,结果表明,ｃ－Ｈ－ｒａｓ反义ＲＮＡ可引起ＢＧＣ－８２３生长速率及形态的变化,在半固体培养基中细胞集落形成能力减弱,部分也抑制了ＢＧＣ－８２３在裸鼠体内的致瘤性。ｃ－Ｈ－ｒａｓ反义ＲＮＡ对其ＲＮＡ的过量表达     

MDR1反义RNA降低细胞KB_(v200)的耐药性

由ＭＤＲ１基因过度表达所引起的肿瘤细胞对化疗药物的耐药性,是导致化疗失败的主要原因之一．针对ＭＤＲ１中一段包含转录启始位点、翻译启始位点和转录正调控区的序列,设计了反义ＲＮＡ并将其克隆到逆转录病毒载体ｐＬＸＳＮ上．用脂质体包裹载体导入ＭＤＲ１高表达的耐药细胞ＫＢｖ２００中,在反义ＲＮＡ转染的细胞中,ＭＤＲ１在ｍＲＮＡ和蛋白水平的表达都有下降,细胞内药物的浓度有所提高,对长春新碱、阿霉素的耐药性分别下降了６５％和４７％．实验结果表明,反义ＲＮＡ对ＭＤＲ１的表达有抑制作用,从而使肿瘤细胞内的药物浓度升高,其耐药程度下降．     

植物反义寡核苷酸的研究进展

本文介绍了近年来植物中反义寡核苷酸的研究现状,它包括反义ＤＮＡ、反义ＲＮＡ和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ。反义寡核苷酸能特异地桔抗内源或外源基因的表达,这为研究某特定基因功能提供了更为有效的方法。此外也为培育抗病植株、建立植物反向筛选系统,次生代谢调控及农艺性状改良提供了可能途径。     

反义RNA抑制人黑色素瘤细胞表面粘附分子CD44的表达及抑瘤效应

将细胞表面粘附分子ＣＤ４４Ｓ的ｃＤＮＡ反向插入到真核细胞表达载体ｐＭＡＭｎｅｏ－ＣＡＴ和ＭＭＴＶ－ＬＴＲ启动子下游,构成ＣＤ４４Ｓ的反义ＲＮＡ载体．将其用电击法导入ＣＤ４４＋的人黑色素瘤细胞系ＨＭＭ２３９,转录出的反义ＲＮＡ能不同程度地抑制ＨＭＭ２３９表面ＣＤ４４的表达．ＣＤ４４的表达被抑制后,瘤细胞与透明质酸的结合力下降,细胞的体外生长速率不受影响．将其接种裸鼠皮下,发现其致瘤性明显降低     

植物反义寡核苷酸的研究进展

本文介绍了近年来植物中反义寡核苷酸的研究现状,它包括反义ＤＮＡ、反应ＲＮＡ和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ。反义寡核苷酸能特异地拮抗内源或外源基因表达,这为研究某特定基因功能提供了更有效的方法,此外也为培育抗病植株,建立植物反向筛选系统,次生代谢调控及农艺性状改良提供了可能途径。     

《基因调节：反义RNA和DNA生物学》

《基因调节：反义ＲＮＡ和ＤＮＡ生物学》《基因调节：反义ＲＮＡ和ＤＮＡ生物学,（Ｇｅｎｅｒｅｓｕｌａｔｉｏｎ：ｂｉｏｌｏｇｙｏｆａｎｔｉｓｅｎｓｅＲＮＡａｎｄＤＮＡ）由ＲｏｂｅｒｔＰ．Ｅｒｉｃｋｓｏｎ和ＪｏｎａｔｈａｎＧ．Ｉｚａｎｔ编著,１９９２年雷文...     

反义寡核苷酸的非反义作用

反义核酸作为一种调控特定基因表达的手段,是通过与特异ｍＲＮＡ分子上５′翻译区、ｍＲＮＡ启动－编码重叠区、核内ｈｎＲＮＡ剪接供点结合抑制ｍＲＮＡ的翻译、剪接、转运或通过形成ＲＮＡ－ＤＮＡ杂合双链,激活ＲＮａｓｅＨ,降解ｍＲＮＡ来达到抑制靶基因表达的目的...     

反义技术与艾滋病

用反义ＲＮＡ／ＤＮＡ片段阻断或抑制靶基因表达的反义技术近年来在艾滋病的研究中进展迅速,为ＡＩＤＳ的治疗开辟了广阔的前景。     

降钙素／降钙素基因相关肽基因前体RNA的加工

降钙素和降钙素基因相关肽是由一个基因表达出的两种功能完全不同的多肽激素,其基因的表达主要在ＲＮＡ水平上受到调控,前体ＲＮＡ在加工成为成熟ＲＮＡ的过程中,在不同的组织中经过不同的剪接形成不同的ＲＮＡ。其剪接的特异性受到顺式元件和反式因子的调控,基因的ｅｘｏｎ４上游剪接受点和下游ｐｌｏｙＡ位点均存在弱的加工位点,通过增强子序列使之产生选择性剪接,另外,可能存在组织特异的反式剪接因子。     

RNA聚合酶Ⅲ启动子的结构与功能

ＲＮＡ聚合酶Ⅲ (ｐｏｌⅢ )是真核生物催化合成ｔＲＮＡ和 5ＳｒＲＮＡ及一些核小ＲＮＡ和胞质ＲＮＡ必需的酶。ＲＮＡ聚合酶Ⅲ能够识别ｔＲＮＡ基因中一些高度保守的特征性ＤＮＡ序列而启动下游ＤＮＡ的转录 ,这些序列称为ＲＮＡ聚合酶Ⅲ启动子。ＲＮＡ聚合酶Ⅲ启动子不仅广泛存在于真核细胞中ｔＲＮＡ、Ｕ6核小ＲＮＡ(ＳＮＲ6 )等的基因中 ,也是病毒催化合成一些小片段ＲＮＡ如腺病毒ＶＡＲＮＡ所必需的。ＲＮＡ聚合酶Ⅲ启动子因其能在体内外高效快速地转录某些小片段基因 ,已被人们广泛地应用于核酶和反义ＲＮＡ技术中 ,在众多的ＲＮＡ…     

真核细胞中mRNA的降解机制

细胞中不同的ｍ ＲＮＡ 半寿期差异很大,ｍ ＲＮＡ 的稳定性受到多种因素的影响,现在已经发现了许多对ｍ ＲＮＡ 的稳定性有影响的顺式因子和反式因子。大量的研究证明在真核细胞内存在复杂的机制调节ｍ ＲＮＡ 的稳定与降解及其所引起的基因表达。现在可以肯定在真核细胞中至少存在着三种ｍ ＲＮＡ的降解方式：依赖于脱腺苷酸的降解,无义密码介导的ｍ ＲＮＡ 的降解和核酸内切酶的水解。其中依赖于脱腺苷酸的降解方式是细胞内大多数ｍ ＲＮＡ 降解的主要途径。