环孢菌素8562的研究

中国弯颈霉Ｔｏｌｙｐｏｃｌａｄｉｕｍ ｓｉｎｅｎｓｅ Ｃ．Ｌ．Ｌｉ８５６２培养物用乙酸乙酯萃取,减压浓缩,获粗提品,经硅胶柱层析分离,葡聚糖凝胶ＬＨ－２０纯化,活性炭脱色,得到２个成份,８５６２－成份１,８５６２－成分２,以成分１为主。经紫外光谱、红外光谱、高效液相色谱、质谱、核磁共振氢谱等分析表明８５６２－成分１、８５６２－成份２与环孢菌素Ａ、环孢菌素Ｃ同质。８５６２－成分１的抗真菌试验显示了对     

金顶侧耳酸提水溶性多糖的研究——PC-3的分离、纯化与结构确定

金顶侧耳(Pleurotus citrinopileatus)子实体的3%三氯乙酸提取液经甲醇分级,十六烷基三甲基溴化铵等进一步提纯得到水溶性多糖PC-3。经Sepharose CL-4B柱层析,醋酸纤维素薄膜电泳、聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定,PC-3为均一级份。G.C.与P.C.分析表明,Gal、Man为该多糖的组份,其单糖摩尔比为2.5∶1.0。PC-3的分子量约为67000,比旋光度[α]_D~(18°)=+28°。经核磁共振谱等分析,PC-3不含β型糖苷键。部份酸水解、高碘酸氧化、Smith降解、完全甲基化、G.C.及G.C.-M.S.的分析表明,PC-3是由α(1→6)糖苷键相连的半乳糖构成分子的主链,部分残基C_2上带有分支,每5个Gal残基带有1个侧链,侧链为α(1-2)Man-α(1-2)Man。     

隔山香化学成分的研究

由隔山香根中分离出四种结晶性成分,经元素分析、红外光谱、核磁共振谱和质谱测定,结晶 A 为反式-异莳萝脑,结晶 B 为β-谷甾醇,结晶 D 为异莳萝脑乙二醇,结晶 C 尚待鉴定。     

L-缬氨酸对环孢菌素形成的影响

环孢菌素的生物合成路线受添加外源氨基酸影响。Ｋｏｂｅｌ和Ｔｒａｂｅｒ^［１］报道过,添加与环孢菌素形成有关的特殊氨基酸可以提高环孢菌素某组分所占的比例。如ＤＬ-氨基丁酸能够提高环孢菌素A的产量,而抑制其它环孢菌素组分产生。本文报道添加L-和DL-缬氨酸对环孢菌素的主要成分环孢菌素A形成的影响。     

大理翠雀中的新二萜生物碱

从大理翠雀根中分到五个二萜生物碱成分,其中两个成分分别鉴定为methylly-caconitine(3)和delsemine(4)。另三个成分为新二萜生物碱,命名为大理翠雀碱甲(talitine A)、大理翠雀碱乙(talitine B)及大理翠雀碱丙(talitine C)。经质谱、红外光谱、核磁共振氢谱、核磁共振碳谱等解析,碱乙和碱丙的化学结构分别为(1)和(2),碱甲的结构另文报告。     

山豆根多糖的研究

从山豆根沸水提取物中用 DEAE- Cellulose离子交换柱层析及 Sephadex G- 1 0 0凝胶层析分离纯化得—水溶性多糖 SSP1,SSP1用 TFA全水解的产物经 PL C及 GC分析证明仅含葡萄糖 ,平均分子量为 2 .2 4× 1 0 4 ,比旋光 [α]2 0D=+ 68°( c 0 .75,H2 O) ,经高碘酸氧化、Smith降解、甲基化分析、红外光谱、1H及 13C NMR分析证明其化学结构为以α( 1→ 4)葡聚糖为主链 ,并且每 1 2个主链单元分别在 3- O及 6- O位有分枝的葡聚糖     

中国石蕊属地衣的地理学分析

将中国92种石蕊属地衣划分为8个地理成分：广布成分19种,占总种数的21％,环北极成分32种（35％）,泛热带成分8种（9％）,欧亚成分5种（5％）,东亚-北美成分7种（8％）,东亚成分13种（14％）,中国喜马拉雅成分1种（1％）,中国特有成分7种（7％）。对中国石蕊属地衣所属的主要地理成分的形成进行了初步讨论,提出东亚特有种云南石蕊（Cladoniayunnana）和北美特有种拟胀石蕊（C.transcendens）为一对地理替代种;比蒙氏石蕊（C．Beaumontii）,圆筒石蕊（C.cylindrica）,丛杯石蕊（C.mateocyatha）和大翅石蕊（C.macroptera）等4种为东亚-北美间断分布种。指出中国喜马拉雅成分戴氏石蕊（C.delavayi）及欧亚成分中的细枝石蕊（C.corymbescens）在中国分布的北界是秦岭山脉。     

茄病镰刀菌发酵液中环孢菌素同系物的分离纯化和鉴定

采用有机溶剂萃取、硅胶柱层析、反相制备色谱等方法从茄病镰刀菌FIM116发酵液中分离得到2个环孢菌素同系物,经理化性质和波谱学方法解析,证实其分别与环孢菌素G和环孢菌素T同质。     

实验红鲫C1HD系的生化遗传标记

目的 建立实验红鲫C1HD系生化遗传标记.方法 采用聚丙烯酰胺梯度凝胶垂直电泳法,分析实验红鲫C1HD系与普通红鲫的苹果酸脱氢酶(MDH)和超氧化物歧化酶(SOD)等同工酶.结果 实验红鲫C1HD系和普通红鲫血清蛋白电泳可分离出25条以上蛋白带,分为A、B、C等3个区段.在A、B区段,实验红鲫C1HD系分别具有SP-A1谱带和SP-B1、SP-B3～8谱带,但缺少SP-A2、SP-A3和SP-B2谱带.实验红鲫C1HD系具有8条SOD同工酶电泳谱带,比普通红鲫多出SOD-3、SOD-8两条特征带.两种红鲫均具备MDH-1、MDH-2和MDH-3电泳谱带,且带型一致;普通红鲫额外具备MDH-4和MDH-5两条电泳谱带.结论 血清蛋白SP-A1和超氧化物歧化酶SOD-3、SOD-8电泳谱带可以作为实验红鲫C1HD系的生化遗传标记.     

当归多糖的分离、纯化及单糖成分分析

选取当归为原料,采用水提醇沉法进行多糖提取,经Savage法结合木瓜蛋白酶法脱蛋白,H2O2脱色,透析,DEAE-52纤维素柱分离得到5个级分。经紫外光谱法与葡聚糖凝胶-100(SephadexG-100)凝胶柱层析法鉴定5种成分均为单一成分;通过红外光谱法、薄层色谱法、气相色谱-质谱联用(GC-MS)法分析该五种成分,5级多糖成分均为果胶类多糖;WASP-1可能是吡喃环当归多糖复合物;WASP-2为β-型吡喃环当归多糖复合物;WASP-3既是β-型吡喃环当归多糖复合物,又是α-型D-吡喃环当归多糖复合物;WASP-4为吡喃环当归多糖复合物;WASP-5为β-型当归多糖复合物,可能含有吡喃环;经GC-MS鉴定,WASP-1、WASP-2及WASP-3中单糖组成为山梨糖、阿拉伯糖、葡萄糖、半乳糖;WASP-4中单糖组成为葡萄糖与半乳糖;WASP-5中仅含葡萄糖。     

中国弯颈霉新种及产环孢菌素的研究

对云南省迪庆藏族自治州产的冬虫夏草 Cordyceps sinensis(Berk.)Sacc.进行分离获一纯种,经培养鉴定确为弯颈霉属 Tolypocladium w.Gams 一新种,命名为中国弯颈霉 To-lypocladium sinense c.L.Li sp.nov.。它在几种琼脂培养基上生长形成瓶梗及瓶梗孢于,瓶梗基部呈球形或椭圆形膨大,瓶颈细长而弯曲,瓶梗孢子球形至卵形。其形态特征及生活习性与弯颈霉属其它种类显然不同,故定为一新种。它在蛋白胨葡萄糖培养液中,温度26℃,pH5.2,摇瓶振荡培养12天。发酵液用乙酸乙酯萃取,减压蒸馏,从每升发酵液中获50—80mg 环孢菌素粗品。对几种半知真菌显示了明显的拮抗作用。     

Enzymatic synthesis of cyclosporin A

An enzyme fraction, isolated from crude extracts of the fungus Tolypocladium inflatum, strain 7939/F, is able to synthesize the undecapeptide cyclosporin A. The formation of cyclosporin A was monitored by incorporation of the radiolabeled constituent amino acids of cyclosporin A or by using S-adenosyl-L-[14C-methyl] methionine. The structure of cyclosporin A, synthesized enzymatically in vitro, was confirmed by chromatographic comparison with the authentic compound and by amino acid analyses. Replacement of L-2-aminobutyric acid in the reaction mixture by L-alanine, L-threonine, L-valine, or L-norvaline yields the naturally occurring cyclosporins B, C, D, and G. Also, D-alanine could be replaced by D-serine to yield [D-Ser8]cyclosporin A.     

寄生隐丛赤壳菌Cryphonectria parasitica致病毒素Cp-I的分离纯化和结构分析

寄生隐丛赤壳菌Cryphonectria parasitica菌株经液体培养,石油醚萃取其发酵液获得对板栗带叶嫩枝具有致萎活性的粗提物,以氯仿:石油醚:甲醇(6:2:2)作洗脱剂,粗提物经硅胶色谱分离,共得到3组纯组份,其中第1组份(Cp-I)对板栗幼苗致萎活性较高.质谱、核磁共振和红外光谱测定表明Cp-I分子量为278,化学式为C<,16>H<,22>O<,4>.     

Enhancement of cyclosporin production in a Tolypocladium inflatum strain after epichlorohydrin treatment.

Following treatment of conidia of the cyclosporin producer fungus, Tolypocladium inflatum, with 0.15 M epichlorohydrin, strain M6 was isolated. The new strain exhibited a similar growth rate to the parent organism but more extensive conidiation and several-fold higher overall cyclosporin production. Strain M6 reached titres of 318 mg l-1 cyclosporin A in agar cultures, whereas in liquid medium it produced 140 mg l-1 cyclosporin A and 68 mg l-1 cyclosporin C. It also maintained a steady volumetric productivity of 0.48 mg l-1 h-1 cyclosporin A over 2 weeks of submerged cultivation in maltose-based semisynthetic medium. The new strain holds potential for improved cyclosporin production due to the superior titres and demonstrated capacity to sustain elevated production of cyclosporin for periods greater than the wild type.     

中国弯颈霉培养物的化学成份分析

中国颈霉T.sinense是与冬虫夏草无性型密切相关的真菌。对中国弯颈霉ZN923菌株培养物进行测试,证明其所含化学成分如甘露醇、氨基酸、生物碱、有机酸及甾醇类等与天然冬虫夏草基本相同。红外、紫外吸收图谱也表明两者所含的各类化学成份极为相似。     

Cyclosporin C is the main antifungal compound produced by Acremonium luzulae.

A strain of Acremonium luzulae (Fuckel) W. Gams was selected in screening new microorganisms for biological control of fruit postharvest diseases, especially gray and blue mold diseases on apples and strawberries. This strain manifests a very strong activity against a large number of phytopathogenic fungi. In this work, the product responsible for this antifungal activity was isolated from modified Sabouraud dextrose broth cultures of A. luzulae. It was purified to homogeneity by reverse-phase column chromatography. On the basis of UV, infrared, and 1H and 13C nuclear magnetic resonance spectra, mass spectral analysis, and the amino acid composition of the acid hydrolysates, the antibiotic was determined to be cyclosporin C. Cyclosporin C showed a broad-spectrum activity against filamentous phytopathogenic fungi but no activity against bacteria or yeasts. Its antifungal activity is only fungistatic. In contrast to Tolypocladium inflatum, another cyclosporin-producing strain, A. luzulae, did not produce additional cyclosporins. This was confirmed by in vivo-directed biosynthesis.     

寄生隐丛赤壳菌致病毒素Cp-I的分离纯化和结构分析

寄生隐丛赤壳菌Cryphonectria parasitica菌株经液体培养,石油醚萃取其发酵液获得对板栗带叶嫩枝具有致萎活性的粗提物,以氯仿:石油醚:甲醇(6:2:2)作洗脱剂,粗提物经硅胶色谱分离,共得到3组纯组份,其中第1组份(Cp-I)对板栗幼苗致萎活性较高。质谱、核磁共振和红外光谱测定表明Cp-I分子量为278,化学式为C16H22O4。     

海洋放线菌Streptomyces variabilis strain 6-1次级代谢产物的研究

目的:对来自海洋软珊瑚的链霉菌6-1(Streptomyces variabilis strain 6-1)进行次级代谢产物的分离和鉴定,寻找具有生物活性的化合物,为人类健康服务。方法:采用液体培养基对分自海洋软珊瑚Scleronephthya sp中的链霉菌6-1(Streptomyces variabi-lis strain 6-1)进行发酵培养,用乙酸乙酯对发酵液进行萃取;采用半制备高效液相色谱(semi-preparative HPLC)分离方法对乙酸乙酯萃取物进行分离纯化,得到单体化合物;运用电喷雾质谱(ESI-MS)、核磁共氢振(1H NMR)、核磁共振碳谱(13C NMR)和物理性质对所得单体化合物进行结构鉴定。结果:从海洋链霉菌6-1(strain 6-1)发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离得到3个单体化合物,分别鉴定为:7,4'-二羟基异黄酮(1)、5,7,4'-三羟基异黄酮(2)和丁烯酸内酯-Ⅰ(3)。结论:丁烯酸内酯-Ⅰ是从链霉菌属首次分离得到,化合物1和2均是从Streptomyces variabilis中首次分离得到;变异链霉菌6-1(Streptomyces variabilis strain 6-1)可以作为活性化合物3(丁烯酸内酯-Ⅰ)的重要来源。     

Effect of amino acids on the production of cyclosporin a byTolypocladium inflatum

Summary Cyclosporin A was produced in semi-synthetic and synthetic media byTolypocladium inflatum in suspension culture. L-valine increased the specific production of cyclosporin A by 62% in semi-synthetic media and by 4 times in synthetic media, compared to an unsupplemented control culture. D-valine had no stimulatory effect on the production. L-leucine was also a strong enhancer of drug production in synthetic media. Experiments with different times of addition of L-valine indicated that the amino acid may need to be present in exponential growth phase for optimal production. 4g/l was the optimum concentration of exogenous L-valine. In contrast, exogenous L-methionine and sarcosine tended to diminish the production of cyclosporin A.     

海洋放线菌Streptomyces variabilisstrain 6-1次级代谢产物的研究

目的：对来自海洋软珊瑚的链霉菌6-1（Streptomyces variabilisstrain6-1）进行次级代谢产物的分离和鉴定,寻找具有生物活性的化合物,为人类健康服务。方法：采用液体培养基对分自海洋软珊瑚Scleronephthya sp中的链霉菌6．1（Streptomyces vafiabilisstrain6-1）进行发酵培养,用乙酸乙酯对发酵液进行萃取;采用半制备高效液相色谱（semi-preparative HPLC）分离方法对乙酸乙酯萃取物进行分离纯化,得到单体化合物;运用电喷雾质谱（ESI—MS）、核磁共氢振（1HNMR）、核磁共振碳谱（13C NMR）和物理性质对所得单体化合物进行结构鉴定。结果：从海洋链霉菌6-1（strain6-1）发酵液的乙酸乙酯萃取物中分离得到3个单体化合物,分别鉴定为：7,4’-二羟基异黄酮（1）、5,7,4’-三羟基异黄酮（2）和丁烯酸内酯-I（3）。结论：丁烯酸内酯．I是从链霉菌属首次分离得到,化合物1和2均是从Streptomyces variabilis中首次分离得到;变异链霉菌6-1（Stmptomyces variabilis strain6-1）可以作为活性化合物3（丁烯酸内酯-I）的重要来源。