14Me V快中子和~(60)Coγ线对人血细胞脱氧核糖核酸(DNA)合成的影响

应用人血在体外接受14MeV快中子和~(60)Coγ线照射后进行培养,以~3氢-胸腺嘧啶核苷(~8H-TdR)作参入实验以反映DNA合成。采用液体闪烁测量法和放射自显影法发现两种射线对DNA合成的影响呈一定的规律性,即随照射剂量的增加,合成率显著降低。经统计处理分别得到中子和γ线的照射剂量和~8H-TdR参入的放射性脉冲数(或标记百分数)的对数值两变量间的直线回归方程,在中子剂量100～400拉德的范围内,中子/γ的R.B.E.为1.45～1.98。     

~(60)Coγ-线对人血淋巴细胞DNA和RNA合成能力的影响

T例人血在体外接受~(60)Coγ-_线照射后进行培养,用~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)和~(14)C-尿嘧啶核苷(~(14)C-UR)作掺入实验,以反映DNA和RNA的合成能力。应用滤膜法收获细胞,液体闪烁计数器测定双标记样品,发现γ-线对DNA和RNA合成的影响有一定规律,即随照射剂量的增加,~3H和~(14)C掺入的放射性呈指数下降。经统计处理分别得到照射剂量和~3H-TdR、~(14)C-UR掺入的放射性计数的对数值两变量间的直线迥归方程。10拉德的照射导致~3H—TdR和~(14)C-UR掺入的放射性计数显著性减少,RNA比DNA合成受抑更明显。     

~(60)钴γ线对骨髓、脾脏造血细胞DNA和RNA合成能力的影响

~(60)钴γ线照射离体的人体骨髓细胞及豚鼠骨髓、脾脏细胞,观察~3H-TdR及~(14)C-UR放射性渗入受抑的情况。实验发现辐射引起渗入活性下降随剂量增高而愈剧,骨髓细胞比脾脏细胞敏感,DNA合成比RNA合成代谢敏感。10拉德剂量导致入骨髓细胞DNA合成能力显著下降。200拉德引起豚鼠骨髓细胞放射性渗入降低48％。     

~(60)Coγ-线对DNA、RNA、蛋白质合成代谢的效应

人血在体外受~(60)co γ-线照射后,用~3H-TdR、~(14)C-UR、~(14)C-缬氨酸和~3H-亮氨酸作掺入实验,分别反映DNA、RNA和蛋白质的合成能力。结果说明γ线对三种大分子合成的影响有一定规律性,即随剂量增加,掺入的放射性呈指数下降,10拉德导致~3H-TdR和~(14)C UR掺入放射性显著减少,四种标记化合物掺入下降的趋势基本一致。     

~(60)Co-γ辐照对中国仓鼠卵巢成纤维细胞DNA和组蛋白合成的影响

本文介绍了~(60)Co-γ辐照对同步的和非同步的CHO细胞的DNA合成和组蛋白合成关系的影响的研究,用~3H-胸腺嘧啶核苷和~(14)C-丙氨酸双标记,未经辐照的和经4Gy～60Gy ~(60)Co-γ辐照的CHO细胞,通过~3H和~(14)C的参入来估价DNA和组蛋白的合成,并用聚丙烯酰胺凝胶电泳鉴定辐照前后组蛋白各组分的变化情况,实验表明: 1)、在4～60Gy剂量范内,无论是同步的还是非同步的CHO细胞其DNA合成和组蛋白合成都受到不同程度的抑制。2)、在辐照后1—3小时,DNA合成和组蛋白合成都受到不同程度的抑制,但辐照后4小时,DNA合成被进一步抑制而组蛋白的合成却逐渐恢复正常,到辐照后48小时组蛋白的合成几乎接近对照水平。3)、16Gy ~(60)Co-γ辐照后8小时,非同步的CHO细胞的DNA合成被抑制的情况比G_1期CHO细胞更为严重。4)、16Gy ~(60)Co-γ辐照S期细胞,在辐照后1—24小时中DNA合成被明显抑制的同时,组蛋白的合成也受到相应的抑制。5)、从未经辐照的和经6、16和60Gy~(60)Co-γ辐照的CHO细胞分别提取全组蛋白,进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,从电泳图谱的变化清楚地看到组蛋白H_1和H_3受辐照影响大于组蛋白H_4和H_(2B)+H_(2A),因此我们推测DNA合成和组蛋白H_1和H_3的关系较之组蛋白H_4和H_(2A)+H_(2B)更为密切。     

转化细胞及腹水癌细胞对生长调节因子敏感性的研究

 本文~3H-TdR参入细胞DNA为指标研究了EGF等生长调节因子对小鼠腹水癌细胞DNA合成的影响,发现不同癌细胞对EGF等生长因子的敏感性有所差异,考虑到这也许与肿瘤细胞自身特性如恶性度有关。为了进一步探讨恶性度与这一敏感性是否相关,我们观察并比较了C_3H10T1/2CL_8(一种来源于鼠胚的正常成纤维细胞,简称NC_3H_(10)及转化的C_3H_(10)T1/2CL_8(用~3H-TdR转化的上述细胞,简称TC_3H_(10))对EGF等生长因子的敏感性。实验证明,细胞恶性转化后,对EGF的敏感性明显降低,~3H-TdR参入率降至原先的1/4以下。用DBcAMP作用于NC_3H_(10)和TC_3H_(10)均能抑制~3H-TdR参入DNA并可抑制EGF诱导的~3H-TdR参入作用。因此,我们认为,有关物理的致癌因素如放射性同位素,像生物、化学的致癌因素一样,亦能引起其转化细胞对外源性生长调节因子敏感性的改变。     

辐射对三种类型的淋巴细胞DNA及RNA合成能力的影响

正常人外周血淋巴细胞,包含不同的亚群,分别执行细胞免疫、体液免疫及维持免疫平衡等重要功能。辐射损伤后免疫功能受抑制。利用同位素双标记技术,以~3H-TdR及~(14)C-UR示踪,观察不同剂量~(60)Co-Υ线照射后,血中三种不同类型的淋巴细胞,在体外培养转化过程中DNA及RNA的合成能力,比较两种标记化合物在不同类型淋巴细胞中的掺入率;并依据辐射对三种不同类型淋巴细胞中,DNA及RNA两种生物大分子合成的受抑程度,反映血     

甲2巨球蛋白对辐照细胞的保护效应

用~3H—TdR掺入办法观察电离辐射对培养的人成纤维细胞的影响。在0—500cGy钻-60γ射线照射剂量范围内,细胞~3H-TdR掺入计数与照射剂量呈线性关系。y=33745.4e~(-0.0036×)。低浓度α_2M对细胞~3H-TdR掺入没有影响,高浓度α_2M能抑制细胞~3H-TdR掺入。4×10~5细胞经钻-60γ射线500cGy照射后加α_2M制剂,细胞~3H-TdR掺入计数与不照射对照组相比有明显升高(P<0.05)。在照射前加α_2M制剂与对照组相比无明显差别。     

γ辐射引起花生和水稻种胚非按时DNA合成效应的研究

用~3H-胸腺嘧啶核苷渗入法,研究受~(60)Co-γ射线各种剂量(10、20、30、40千伦,剂量率836伦/分)照射的花生和水稻种胚萌发早期DNA合成率的变动。结果表明,受γ辐射的花生和水稻种胚出现非按时的DNA合成,用咖啡碱能够抑制这种合成,这种非按时的DNA合成与γ辐射剂量有一定的关系。本研究工作证明了:在上述两种植物的细胞中具有修复DNA损伤的功能。     

~(60)Co γ线对肿瘤病人T、B淋巴细胞转化过程中三种大分子合成的效应

应用植物血凝素(PHA)和脂多糖(LPS)激活淋巴细胞,以氢-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)、碳一尿嘧啶核苷(~(14)C-UR)和碳-缬氨酸作掺入实验,以分别反映T、B淋巴细胞转化过程中的DNA、RNA和蛋白质的合成能力。共测定了50例肿瘤病人,与正常人比较:T淋巴细胞转化能力明显降低,B淋巴细胞转化能力显著增高。经过一个疗程的~(60)Co照射后T细胞转化比照前又显著降低,B细胞转化比照前又显著增高,三种大分子合成都表现同样的规律,反映了辐射抑制T淋巴细胞DNA和RNA合成,相反地刺激了B淋巴细胞的DNA、RNA和蛋白质的合成。以上的辐射效应随照射剂量和照射野的增加而愈益明显。     

5-~(131)碘尿嘧啶在细菌脱氧核糖核酸复制研究中的应用

本文报导了一个用5-~(131)碘尿嘧啶代替[~3H]-胸腺嘧啶进行细菌DNA复制研究的新方法。通过对放射性参入产物的碱(KOH)水解和酶(DNase和RNase)水解的实验证明:5-~(131)碘尿嘧啶与[~3H]-胸腺嘧啶一样能特异地参入大肠杆菌胸腺嘧啶缺陷变异株的DNA,而不能参入其RNA。对氨基酸饥饿同步化的大肠杆菌15T~-,当应用5-~(131)碘尿嘧啶的参入来测定复加氨基酸后的DNA复制起步时间时,获得的结果与使用[~3H]-胸腺嘧啶脱氧核苷参入的结果相一致。天然的DNA碱基成分胸腺嘧啶强烈地竞争性地抑制5-~(131)碘尿嘧啶的参入能力,而天然的RNA碱基成分尿嘧啶则影响很小。此外,5-碘尿嘧啶对大肠杆菌胸腺嘧啶缺陷变异株的生长有抑制作用,但这种抑制要在加入5-碘尿嘧啶后2小时才明显地产生,而5-碘尿嘧啶对大肠杆菌野生株的生长没有影响。实验结果表明:在细菌DNA复制的研究中,5-~(131)碘尿嘧啶参入的方法与使用[~3H]-胸腺嘧啶参入的方法有同样的可靠性,其优点是由于~(131)碘辐射γ射线,故放射性参入样品的制备和测定都比较简便,因而,它比[~3H]-胸腺嘧啶更适合于有关临床和实验室的使用。     

应用显微放射自显影技术对辐射诱发的微核合成DNA研究——Ⅰ.不同照射量的效应

本试验用放射性比度为5μCi/ml的~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)标记经不同照射量辐照的蚕豆根尖细胞,应用显微放射自显影技术,研究微核的DNA合成。试验结果表明,不同照射量的γ射线对细胞及微核合成DNA的影响是明显的。微核细胞及微核的标记率随着照射量的增大而减少,呈线性递减关系。本文还根据微核细胞的标记类型,对微核在细胞遗传工程研究方面的应用价值进行了探讨。     

~(60)钴γ-线离体照射人淋巴细胞诱发的染色体畸变:剂量-效应关系及其与 X-线的比较研究

为了把外周血淋巴细胞中所观察到的染色体畸变量用来估算活体照射的剂量,需要确定离体照射血样本的剂量-效应曲线。继X-线离体照射的刻度实验后,我们又研究了~(60)钴γ-线诱发染色体畸变的剂量-效应曲线,并且比较了这两种辐射的效应,所得的结论如下:1.根据人淋巴细胞的染色体畸变进行生物剂量测定,只有在标准条件下确定的离体剂量-效应曲线才能得出有意义的结果,也就是说,应尽可能地与事故照射时所出现的条件相同。我们的研究表明,细胞遗传学的剂量测定应在37℃照射未受PHA~**刺激的全血,培养的时间应少于54小时。当比较各实验室符合上述条件的剂量-效应曲线时,显然有差异。因此,我们提议在细胞遗传学技术“标准化”之前,各实验室应建立自己的刻度曲线。2.按照世界卫生组织的标准,在分析剂量-效应关系时,以最小二乘方对实验资料作泊森方差和加权回归分析,拟以恰当的模式。如X-线一样,~(60)钴γ-线诱发的双着丝粒体和着丝粒环资料最适于二次多项式,a=0(回归线通过原点),分别为Y_(γ-线)=(0.59±0.94)×10~(-4)D+(4.77±0.40)×10~(-6)D~2和Y_(x-线)=(0.51±0.21)×10~(-3)D+(5.02±0.77)×10~(-6)D~2。这一方程的物理含义是,一些互换畸变由一次击中所产生,而另一些则是由二个分开的击中相互作用所致。当把两种辐射的系数b 和c 作比较时,主要差别在于导致不对称互换畸变的b 项。根据该指数方程.,畸变量的直线成分(即由一击损伤所致)与剂量率无关,而λ值(b/c)即为一击和二击事件的提供量相等时的剂量,此值分别为λ_(γ-线)=12拉德,而λ_(X-线)=100拉德。由此可以设想,在从事~(60)钴γ-线超暴光例子的生物剂量测定时,与X-线相比较,更应考虑到剂量率的问题。双着丝粒体和着丝粒环资料,同样也可拟以幂函数,此时,Y_(γ-线)=1.64×10~(-5)D~(1.79±0.11),而Y_(X-线)=6.50×10~(-5)D~(1.61±0.05)。然而应当指出,资料拟以二次多项式比幂函数更好些,当从畸变量外推至低剂量时尤其是这样。3.鉴于各种辐射诱发的畸变量彼此不一,所以从辐射防护出发,必须分别地确定剂量-效应曲线。这里的工作表明,~(60)钴γ-线诱发畸变的效能比X-线要低。~(60)钴γ-线相对于180kVX-线诱发互换畸变的RBE 不是一个单一值,其RBE 值变动在0.12和0.89之间。从RBE-剂量关系可以看出,在所用的剂量范围(24～488拉德)内,RBE 值随~(60)钴γ-线剂量的增加而上升,随后即趋向于饱和。     

电离辐射对人血淋巴细胞转化能力的影响

电离辐射作用于机体,可以引起一系列变化,但究竟哪些变化是辐射损伤所特有的,而且在较小的辐照剂量即能产生反应,便于早期发现放射损伤,这是人们所关注的问题,是放射医学领域中的一个迫切需要解决的问题。在我们先前的实验中证实,X线照射后血细胞脱氧核糖核酸(DNA)减少,并随剂量增加而显著降低,这是由于DNA合成减少及分解加剧所造成。一般认为,DNA合成的变化是辐射损伤最敏感的指标之一。本实验试就这方面进行探索,采用人血在体外分别接受X线和γ线照射后进行培养,用~3H-胸腺嘧啶核苷作掺入DNA的     

~3H-TdR诱发C_3H/10T1/2细胞恶性转化及其染色体分析

~3H-TdR进入体内后可直接参入分裂细胞的DNA中,造成对DNA的损伤。因此研究其致癌作用不但对其可能造成的污染具有实际意义,在理论上对探讨DNA损伤与细胞癌变的关系也有一定价值。一些作者把~3H-TdR直接注射到动物体内,观察肿瘤的发生率,未对~3H-TdR是否能升高诱发肿瘤发生率得出一致的结论。这可能是由于长期动物实验     

抗肿瘤的细胞静止效应细胞耐放射性研究

此前,我们应用~(125)IUdR 技术证明,带Ehrlich 实体瘤小鼠脾脏细胞在体外对Ehrlich 肿瘤靶细胞的DNA 合成产生明显的细胞静止效应。随着肿瘤的增大,脾脏细胞对肿瘤细胞~(125)IUdR 参入的抑制也愈益增强。这种细胞静止效应是非特异的。在去除胸腺、X-线照射,骨髓重建的带Ehrlich 瘤的小鼠脾脏中也存在着这     

~(60)Coγ线引起上海真厉螨染色体畸变的研究

本文首次报道用~(6O)Coγ线照射一种革螨——上海真厉螨引起的染色体畸变的研究。用~(6O)Coγ线(剂量1—50Krad)照射雌性革螨,引起的染色体畸变类型有:染色体裂隙、断片、微小体、环形染色体、粉碎化和多倍体,染色体断片是最常见的畸变类型,并观察到微核的形成。染色体畸变率随照射剂量增加而增高,辐射剂量与畸变率之间存在密切相关(相关系数为0.85,P<0.025),配得曲线回归方程为Y=3.27+14.49lg(X+1)。     

~(57)Co(钴~(57))—争光霉素参入人食管鳞癌细胞株CaEs-17的增殖周期时相

我国自行筛选的抗肿瘤抗菌素——争光霉素与博莱霉素的理化性质基本相同。~(57)Co-争光霉素A_2+B_2混合品和A_5纯品参人人食管鳞癌细胞株CaEs-17的放射自显影图表明~(57)Co-争光霉素(混合品和A_5)参人到CaEs-17细胞核中,核仁参入很少,胞质不参入。从而在细胞内定位方面说明了争光霉素与DNA结合的特异性。这和博莱霉素与DNA的特异性结合、并与DNA相互作用、而不与rRNA、tRNA、白蛋白结合和作用的结果是一致的。通过~(14)C-TdR与~(57)Co-争光霉素同时参入及先后参入的双标记放射自显影图和显微分光光度计对标记和未标记细胞DNA相对含量测定等方法,证实了~(57)Co-争光霉素(混合品和A_5)参入到带有G_1/G_0期DNA含量的CaEs-17细胞中。     

五肽胃泌素及其类似物对大鼠胃粘膜细胞DNA合成的作用

 利用细胞培养的方法,测定五肽胃泌素(Boc-β-Ala-Trp-Met-Asp-phe·NH_2)、葡萄糖-1-脱氧果糖四肽(GIe-1-Deoxyflu-Trp-Met-Asp-phe·NH_2)及Boc-三肽(Boc-Met-Asp-Phe·NH_2)等胃泌素类似物对~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)参入胃粘膜细胞DNA合成的影响。实验结果表明五肽胃泌素对胃粘膜细胞DNA合成有明显促进作用,而泌酸活性比五肽胃泌素还强的葡萄糖-1-脱氧果糖四肽却没有这种作用。进一步证明胃泌素的营养作用是独立于泌酸活性而存在的,二者有着不同的作用机理。     

大白菜花药培养中花粉早期DNA的合成

应用显微放射自显影技术,在大白菜(Brassica pekinensis Rupr.)花药离体培养初期观察了~3H-胸腺嘧啶核苷(~3H-TdR)掺入花粉核及其DNA复制类型。花粉去分化进入第一次孢子体分裂主要发生在DNA合成的单核和非均等分裂的营养核的花粉粒中。 实验证明花粉的DNA合成在低温预处理过程中已经开始,离体花药培养后,大大促进花粉DNA的合成。花粉单核在培养后24小时~3H-TdR掺入达到高峰,花粉有丝分裂产生两个均等子核的最大数量是在培养后48小时。 讨论了花药体细胞组织——绒毡层和药内壁对花粉核DNA合成的影响。