Phagocytose et pinocytose chez les Spongillidae

Résumé Un ensemble de techniques récentes basées sur l'emploi d'un colorant fluorescent en lumière ultra-violette, FITC, a été adapté à l'étude in vivo de la nutrition chez les Spongillides.L'emploi d'Escherichia coli marquées au FITC a permis d'établir que chez Ephydatia fluviatilis et Ephydatia mülleri, la nutrition par les bactéries comporte une série d'étapes en accord avec le schéma proposé par les auteurs qui ont étudié l'ingestion de particules non nutritives comme du carmin et de l'encre de Chine: Les bactéries sont principalement captées au niveau des choanocytes (Fig. 1 à 6). Elles sont ensuite transmises aux archaeocytes, aux collencytes et aux cellules amoeboïdes du mésohyle (Fig. 4 à 10).Dans les cellules du mésohyle, principalement au niveau des archaeocytes, les bactéries ingérées perdent leur morphologie propre (Fig. 6, 11 à 14). Ceci constitue un argument de plus en faveur de l'hypothèse selon laquelle la digestion s'effectue principalement au niveau des archaeocytes. En fin de cycle, certains archaeocytes concentrent les déchets fluorescents qui sont ensuite expulsés dans le système exhalant (Fig. 11, 12).En outre, à l'aide de caséine et de sérum de lapin couplés au FITC, il a été possible de montrer que Ephydatia fluviatilis et Ephydatia mülhri prélèvent des protéines en solution dans le milieu. Elles le font à l'aide des mêmes types cellulaires que ceux qu'elles utilisent pour se nourrir de bactéries: Les protéines fluorescentes sont concentrées par les choanocytes (Fig. 15, 16, 21, 22) puis transmises aux archaeocytes et aux cellules amoeboïdes du mésohyle (Fig. 15 à 20, 25, 26). Les pinacocytes et les spiculoblastes peuvent également concentrer de la caséine marquée, mais dans une moindre mesure (Fig. 23, 24, 29). L'accumulation des déchets suivie de leur expulsion dans le milieu ambiant se fait comme dans le cas des bactéries au niveau des canaux exhalants (Fig. 27, 28).D'autre part, le fait que chez Ephydatia fluviatilis nous n'ayons pas pu mettre en évidence d'activité protéolytique extra-cellulaire, renforce l'idée que la digestion est strictement intra-cellulaire chez les Eponges.

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Phagocytosis and pinocytosis in spongillidsAn in vivo Study of the ingestion of bacteria and proteins labelled with an u. v. fluorescent dye

Summary Several recent techniques using the ultra-violet fluorescent dye FITC, were adapted for the in vivo study of Spongillid nutrition.Studies of the ingestion of FITC-lahelled bacteria by Ephydatia fluviatilis (L.) and Ephydatia mülleri (Lieberkühn) show that the series of steps involved are the same as those proposed by others in their studies of the ingestion by Spongillidae of non-nutritive particles such as carmine and Indian ink: Most of the bacteria are ingested by the choanocytes (Figs. 1–6). They are further transmitted to the archaeocytes, collencytes and amoeboid cells of the mesohyle (Figs. 4–10).In the cells of the mesohyle, principally in the archaeocytes, the bacteria lose their characteristic morphological appearance (Figs. 6, 11–14). This fact supports the hypothesis that the archaeocytes are the main organ for digestion in Spongillidae.Fluorescent wastes are accumulated and rejected in the exhalant channels by some archaeocytes (Figs. 11, 12).Experiments using FITC-labelled casein and rabbit serum proteins demonstrate, in addition, that E. fluviatilis and E. mülleri remove soluble proteins from the surrounding medium. We have further shown that this usually involves the same cell types as those used for ingestion of bacteria: Labelled proteins are concentrated by the choanocytes (Figs. 15, 16, 21, 22); then distributed to the archaeocytes and the amoeboid cells in the mesohyle (Figs. 15–20, 25, 26).There is evidence that pinacocytes and spiculoblasts are also able to concentrate labelled casein, though in a smaller quantity (Figs. 23, 24, 29). Fluorescent wastes are excreted in the surrounding medium through the exhalent channels, after having been concentrated by archaeocytes (Figs. 27, 28).The fact that we were unable to demonstrate the existence of an extracellular proteolytic activity for E. fluviatilis, supports the conclusion that digestion by sponges is strictly intracellular.

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Je tiens à exprimer mes remerciements au Professeur Rasmont pour ses conseils et l'aide qu'il m'a prodiguée tout au long de ce premier travail.     

Evaluation of ammonium hydroxide as preservative for ground meat

Summary Ammonium hydroxide when added at 0.134 to 0.67m to ground-meat, decreased the total number of aerobic bacteria and, to a lesser extent, Gram-negative bacteria at 37°C, 4°C and –20°C. The plate count at the same pH adjusted with 1m NaOH was considerably more than when 0.4m NH₄OH had been used, indicating that NH₄OH was acting as preservative for ground-meat and not the merely changing the pH. The changes in extract release volume, water holding capacity, soluble protein nitrogen and cook out losses were much less in ground meat containing NH₄OH as compared to control (no preservative) or containing NaOH.

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Resumen La adición de hidróxido amónico a concentraciones de 0.134 a 0.67m disminuyó el número total de bacterias aerobias y en menor proporción la cantidad de bacterias gram negativas a 37°C, 4°C y a –20°C. El conteo efectuado a un mismo pH ajustado con NaOH 1m o bien con NH₄OH 0.4m fue considerablemente superior en el primer caso, indicando que el efecto de NH₄OH no era únicamente debido al cambio de pH sino que extracto liberado, en la capacidad de retención de agua, en las proteinas/nitrógeno soluble y las perdidas por cocción fueron menores en la carne picada que contenía NH₄OH comparada con el control (sin preservativo) o con la que contenía NaOH.

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Résumé L'ajout d'ammoniaque de 0.134 à 0.67m à la viande moulue fait décroître le nombre total de bactéries aérobies et, dans une moindre mesure, de bactéries Gram-négatives, tant à 37°C qu'à 4°C et à –20°C. Le comptage sur boîte de Pétri au même pH, obtenu par ajustement au NaOH 1m, révèle des valeurs considérablement plus élevées que lorsque l'ammoniaque 0.4m est utilisé, indiquant par là que c'est bien l'ammoniaque qui agit en tant que préservatif pour la viande moulue et non le seul changement de pH. Les changements en volume d'extrait relâché, en capacité de rétention d'eau, en azote protéique soluble, sont bien moins prononcés dans le cas de la viande moulue contenant de l'ammoniaque que dans le contrôle sans préservatif ou contenant du NaOH.

     

Isolation and characterization of a methanol-utilizing strain ofCandida boidinii from cow dung which is able to grow on paraffin

A methanol-utilizing yeast,Candida boidinii, was isolated from cow dung. It could grow on a medium containing methanol or liquid paraffin as the only carbon source. Its cell yield after 7 days of growth on methanol was 0.34 g g^–1 and on paraffin 0.30 g g^–1. The organism was able to tolerate up to 4% (v/v) methanol.

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Résumé On a isolé une souche deCandida boidinii, levure utilisant le méthanol, à partir de bouse de vache. La souche était capable de croître sur un milieu contenant le méthanol ou la paraffine liquide, comme seule souche de carbone. Le rendement cellulaire après 7 jours de croissance était de 0.34 g par g de méthanol et 0.30 g par g de paraffine. L'organisme était capable de tolérer jusqu'à 4% (v/v) de méthanol.

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This work was carried out while K. Kannan was at the Tamil Nadu Agricultural University.     

Solid state fermentation of apple pomace for citric acid production

Summary A solid state fermentation process is described for the production of citric acid from apple pomace byAspergillus niger NRRL 567. The yields of citric acid varied with the pomace varieties, and were dependent on (1) the amount of methanol present in the pomace, and (2) the fermentation time and temperature. The process yielded as much as 90 g citric acid/kg apple pomace fermented in the presence of 3–4% methanol at 30°C in five days.

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Resumen Se describe un proceso de fermentación en estado sólido para la producción de ácido cítrico a partir de residuos de manzana, utilizandoAspergillus niger NRRL 567. La producción de ácido cítrico varió con el tipo de residuo utilizado y dependió de (1) la cantidad de metanol presente en los residuos y (2) del tiempo y la temperatura del proceso. La fermentación puede producir hasta 90 g de ácido cítrico/kg de residuo de manzana, fermentado en presencia de 3–4% de metanol a 30°C de temperatura durante 5 días.

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Résumé Le procédé de fermentation en milieu solide qui est décrit est déstiné à la production d'acide citrique à partir du marc de pommes parAspergillus niger NRRL 567. Les rendements en acide citrique varient suivant les variétés de pommes et dépendent: (1) de la quantité de méthanol présente dans le marc, et (2) du temps de fermentation et de la température. On peut obtenir jusqu'à 90 g d'acide citrique par kg de marc de pommes fermenté, en présence de 3 à 4% de méthanol, à 30°C et en 5 jours.

     

Effect of temperature,light intensity and dilution rate on the cellular composition of red algaPorphyridium cruentum in light-limited chemostat cultures

Summary The fatty acid, polysaccharide and pigment contents ofPorphyridium cruentum at different growth temperatures, light intensities and dilution rates were studied in light-limited chemostat. The highest biomass yield was obtained at 25°C over the range of dilution rate studied (0.079 to 0.30 day^–1). The production of fatty acids increased with increasing dilution rates. At low dilution rates, the contents of fatty acids at 20°C, 25°C and 30°C were comparable. Temperature did not affect the content of linolenic acid (182) though fatty acids with less than two double bonds predominated at higher temperatures, those with more than two double bonds accumulated at lower temperatures. The yields of arachidonic acid (204) increased under light of higher intensity. The maximum production of extracellular and cellular polysaccharides occured at low dilution rates under high light at 25°C. The amounts of chlorophylla, carotenoids and phycoerythrin all increased in the same proportions with dilution rate, and were highest at 25°C.

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Resumen Se estudió el contenido en polisaccaridos, pigmentos y ácidos grasos dePorphyridium cruentum a distintas temperaturas, intensidades lumínicas y porcentajes de dilución en un quimiostato con luz limitada. La mayor cantidad de biomasa para todas las diluciones estudiadas (0.079 a 0.30 día^–1) se obtuvo a 25°C. A bajas diluciones los contenidos en ácidos grasos a 20°C, 25°C y 30°C eran comparables. La temperatura no afectó al contenido en ácido linolénico (182), sin embargo los ácidos grasos con menos de dos dobles enlaces se acumularon a temperaturas más bajas. La producción de ácido arachidónico (204) se incrementó bajo la mayor intensidad lumínica ensayada. La producción máxima de polisaccaridos celulares y extracelulares se dió a bajas diluciones en condiciones de alta iluminación a 25°C. Las cantidades de clorofila a, carotenoides y ficoeritrina se incrementaron paralelamente al porcentaje de dilución siendo más elevadas a 25°C.

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Résumé On a étudié le contenu dePorphyridium cruentum en acides gras, en polysaccharides et en pigments, en fonction de la température de croissance, de l'intensité lumineuse et du taux de dilution dans un chémostat limité par la lumière. Le rendement le plus élevé en biomasse a été obtenu à 25°C quel que soit le taux de dilution (compris entre 0.079 et 0.30 jours^–1). La production d'acides gras augmente avec l'augmentation du taux de dilution. A des taux de dilution faibles, le contenu en acides gras est indépendant de la température (comprise entre 20 et 30°C). La température n'influence pas le contenu en acide linolénique (182) bien que les acides gras à deux ou plusieurs doubles liaisons s'accumulent à température plus basse. Les rendements en acide arachidonique (204) augmentent sous une lumière de plus forte intensité. La production maximum de polysaccharides tant extracellulaires que cellulaires a lieu à un taux faible de dilution sous une lumière intense à 25°C. Les teneurs en chlorophylle a, caroténoïdes et en phycoerythrine augmentent toutes les trois dans les mêmes proportions avec le taux de dilution et sont les plus élevées à 25°C.

     

Effect of agitation and Tween 80 addition in the continuous alcohol fermentation

Summary While conducting glucose pulse experiments in the continuous production of ethanol byS. cerevisiae ATCC 4126 in a carbon-limited chemostat, a very poor response and incomplete glucose utilisation was observed. This paper reports the modifications made to the original experimental conditions in order to obtain an optimal behavior of the culture. These modifications include minor culture medium adjustments, Tween 80 addition and improved agitation. The new conditions allowed for a 71% increase in alcohol volumetric productivity and almost complete glucose consumption up to dilution rates of 0.2 h^–1.

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Resumen En un estudio mediante pulsos de glucosa en la producción continua de etanol porS. cerevisiae ATCC 4126 en quimiostato limitado por carbono, se observó una respuesta muy pobre y un consumo incompleto de la glucosa.En este trabajo se presentan las modificaciones hechas a las condiciones experimentales originales que permitieron un comportamiento óptimo del cultivo. Dichas modificaciones incluyeron ajustes menores en el medio de cultivo, adición de Tween 80 y mejoras en la agitación. Las nuevas condiciones llevaron a un 71% de aumento en la productividad volumétrica de alcohol y a consumo casi total de la glucosa hastas velocidades de dilución de 0.2 h^–1.

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Résumé Des expériences d'ajouts pulsés de glucose dans la production continue d'alcool parS. cerevisiae ATCC 4126, en chémostat limité en carbone, ont montré une réponse très pauvre et incomplète dans l'utilisation du glucose. Cet article décrit les modifications apportées aux conditions expérimentales originelles en vue d'obtenir le comportement optimum de la culture. Ces modifications incluent des ajustements mineurs du milieu de culture, l'ajout de Tween 80 et une meilleure agitation. Ces nouvelles conditions ont permis un accroissement de 71% de la production volumétrique d'éthanol et la consommation quasi-complète du glucose jusqu'à des taux de dilution de 0.2 h^–1.

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Based on a paper presented at the First Latin American Congress on Biotechnology, Tucumán, Argentina, October 4–8, 1987.     

Il ciclo del batterio simbionte di Blattella germanica (L.)

Résumé L'Auteur a étudié le cycle de la bactérie symbiote deBlattella germanica (L.) au cours de sa transmission éréditaire. Dans la fase de migration ovarienne, les bactéries font issue des bactériocytes de la femelle et franchissent, en un point encore mal connu, la paroi des tubes ovariens pour constituer une couche superficielle autour de l'oeuf.Au cours de la phase embryonnaire les bactéries convergent tout d'abord au centre du vitellus; puis lorsque à partir du mésoderme prennent naissance les lobes adipeux, les bactéries émigrent vers l'embryon, traversent l'entoderme et le sinus épineural et pénétrant dans le cytoplasme de diverses cellules mésodermiques transforment celles-ci en bactériocytes.

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L'argomento di questa ricerca mi è stato suggerito dal Prof. Raffaele Ciferri, ordinario di Botanica in questa Università, come parte a me assegnata di un complesso di ricerche, in collaborazione, sui simbionti del blattidi.     

Characterization of anaerobic non-spore-forming bacteria in municipal sewage sludge and integrated paper-mill waste water

Summary Forty-three isolates of Gram-negative, mesophilic, non-spore-forming anaerobic cellulolytic bacteria were obtained from (i) an anaerobic reactor treating waste water from an integrated paper mill and (ii) an anaerobic sewage-sludge digestor. These isolates were studied for carbohydrate fermentation and fermentation products. By numerical techniques, 22 isolates could be placed in two groups: group A (10 isolates) and group B (12 isolates). The isolates belonging to group A showed degradation of filter paper in 2–7 days. They were slightly-curved long rods and similar toBacteroides cellulosolvens andAcetivibrio cellulolyticus. Acetic acid was produced as major product. The bacteria also produced ethanol, isobutanol, pyruvic and lactic acids. Group B strains degraded filter paper in 4–5 weeks. They were short rods and produced propionic, lactic, succinic and acetic acids as fermentation products. The remaining 21 isolates could disintegrate filter paper in 2–5 weeks. They showed variable fermentation patterns, both as to fermentable carbohydrates and end products. Except for one isolate, which showed obvious similarity toButyrivibrio fibrisolvens, the isolate differed distinctly from reference strains of ruminai origin.

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Caractérisation des bactéries anaérobies non-sporulantes dans la boue résiduaire de station d'épuration des eaux domestiques (boues d'égout) et dans l'eau résiduaire d'une usine intégrale de pâte à papier

Résumé 43 souches de bactéries cellulolytiques Gram-négatives, mésophiles, non-sporulantes, et anaérobies ont été isolées à partir (A) d'un réacteur anaérobie traitant l'eau résiduaire d'une usine intégrale de pâte à papier et (B) de digesteurs anaérobies de boues d'égout. Ces souches ont été étudiées quant à leurs propriétés de fermenter les hydrates de carbone et quant à leurs produits de fermentation. Des techniques numériques ont permis de classer 22 de ces souches dans deux groupes: le groupe A (10 souches) et le groupe B (12 souches). Les souches appartenant au groupe A dégradaient le papier filtre en 2 à 7 jours. Elles se présentaient sous la forme de longs bâtonnets curvilignes et ressemblaient àBacteroides cellulosolvens et àAcetivibrio cellulolyticus. Le metabolite majeur était l'acide acétique. Elles produisaient aussi de l'éthanol, de l'iso-butanol, et des acides pyruvique et lactique. Les souches appartenant au groupe B dégradaient le papier filtre en 4 à 5 semaines. Elles se présentaient sous la forme de bâtonnets courts et produisaient, comme métabolites, les acides propionique, lactique, succinique et acétique. Les 21 souches restantes dégradaient le papier filtre en 2 à 5 semaines. Elles présentaient des profils de fermentation variables tant en ce qui concernait les hydrates de carbone fermentés que les produits finaux. A part une souche qui présentait une similitude évidente avecButyrivibrio fibrisolvens, ces souches différaient de façon marquée d'avec les souches de référence du rumen.

     

Studies on mashing methods for beer brewing with sorghum

Summary Five mashing methods were tested on two varieties of sorghum malt. The highest amounts of reducing sugars were produced in second-stage decoction (13.6 mg/ml) and third-stage decoction (13.8 mg/ml). The downward infusion method yielded the lowest amount of reducing sugar (12.3 mg/ml). The two-stage decoction mashing yielded the lowest amount of protein (1.3 mg/ml). The three-stage decoction mashing showed that increasing the holding time for saccharification and dextrinization increased the reducing sugar (18.6 mg/ml). There was little increase in the protein. A change in conventional temperature resulted in a reduction in the reducing sugar produced. Increase in mash concentration showed a corresponding increase in reducing sugars. In terms of holding time, the upward infusion method showed an increase in reducing sugars with very little change for the downward infusion method. There was no significant change in the protein content of the worts.

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Resumen Se estudiaron cinco métodos de obtención de pulpa para la elaboración de cerveza a partir de dos variedades de malta de sorgo. La cocción en dos y tres fases produjo la mayor cantidad de azúcares reductores (13.1 mg/ml y 13.8 mg/ml, respectivamente.) La menor cantidad de estos (12.3 mg/ml) se obtuvo en el proceso de infusión descendente. La cocción en dos etapas generó la menor cantidad de proteínas. Estudios posteriores sobre la cocción en tres etapas mostraron que un incremento en el tiempo de hidratación, en el cual tiene lugar la saccarinización y dextrinación del almidón, incrementó notablemente la cantidad de azúcares reductores y de forma a penas apreciable la fracción proteica. Cambios en la temperatura convencional del proceso resultaron en una disminución de los azúcares reductores producidos. Al incrementar la concentración de pulpa se obtuvo un aumento paralelo en la producción de azúcares reductores. El estudio del efecto de la variación del tiempo de hidratación en los métodos de infusión mostró que los azúcares reductores aumentaban para el método de infusión ascendente y no experimentaban practicamente ningún cambio para la infusión descendente; asimismo no se observó ningún cambio significativo en la fracción proteica del mosto.

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Résumé Cinq méthodes de brassage ont été testées sur deux variétés de malt de sorghum. La plus grande quantité de sucres réducteurs a été produite dans le deuxième étage de la décoction (13.6 mg ml^–1) et dans le troisième étage de la décoction (13.8 mg ml^–1). Le méthode par infusion à flux descendant a produit la quantité la plus faible de sucres réducteurs (12.3 mg ml^–1). Le brassage par décoction en deux étages a produit la quantité la plus faible de protéines (1.3 mg ml^–1). Des études complémentaires sur le brassage par décoction en 3 étages ont révélé qu'une augmentation du temps de saccharification et de dextrinisation entraînait une augmentation des sucres réducteurs (18.6 mg ml^–1). Il n'y avait dans ce cas que peu d'augmentation de la teneur en protéines. Le changememt de la température conventionnelle a entraîné la diminution de la production de sucres réducteurs. Des études complémentaires sur la durée des infusions à flux ascendant et à flux descendant ont montré une augmentation des sucres réducteurs pour la méthode par infusion à flux ascendant et très peu de changement pour la méthode par infusion à flux descendant. Il n'y a pas eu de changements significatifs dans les protéines du moût.

     

Techniques for the bioassay of Bacillus thuringiensis with Galleria mellonella

Four bioassay techniques are described for use at successive stages in the formation of beecomb protected by Bacillus thuringiensis against attack by larvae of Galleria mellonella. The precision of the assays was closely related to the degree with which the technical conditions could be tailored to minimise sources of variation. An economical and accurate assay with an artificial food medium detected differences of x 1.6 in the innate potency of bacterial products. An assay to test the effect on potency of a natural food, pounded broodcomb, was less precise. Differences of x 2.9 were detected by assay on foundation beeswax designed to investigate survival of bacterial during processing in the wax factory. Replicating the assay with different insect batches greatly improved precision despite variation in susceptibility to the bacteria between the batches, which was largely circumvented by using potency ratios against a standard bacterial preparation. An assay of the final broodcomb, formed from bacteriatreated foundation wax, was much less accurate because of variation in potency in replicate pieces of broodcomb. This series of four assays is satisfactory for research purposes and may be of some use for quality control if a commercial system for protecting beecomb is adopted.

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Résumé Quatre techniques pour les tests biologiques sont décrites pour l'emploi quand on utilise Bacillus thuringiensis comme élément portecteur contre les attaques des rayons de cire par les chenilles de Galleria mellonella, en incorporant des bactéries dans le substrat de cire lors de sa préparation industrielle en vue de servir à la fabrication des rayons à miel.La précision des résultats des tests réalisés dépend étroitement des conditions techniques rigoureuses qui doivent être normalisées afin de réduire les causes de variation.Un test économique et précis avec un milieu alimentaire artificiel a permis de déceler des différences de l'ordre 1.6 x dans l'efficacité des produits bactériens ainsi utilisés.Un test, pour mesurer l'effet d'une nourriture naturelle, comme un broyat de rayon à miel, sur le pouvoir protecteur de la bactérie, s'est révélé moins précis.Des différences d'efficacité de l'ordre de 2.9 x ont été mises en évidence dans un test concu pour préciser les conditions de survie des bactéries au cours de la préparation industrielle des feuilles de cire gauffrée utilisée comme substrat pour les rayons à miel. La répétition du test avec des lots différents d'insectes démontra amplement sa précision, en dépit d'une variation dans la sensibilité de ces différents lots à la bactérie, variation dont il a été tenu compte en exprimant l'efficacité des produits testés par rapport à l'efficacité d'une préparation bactériologique standard testée simultanément sur le même lot d'insectes.Un test effectué avec le rayon à miel, construit par les abeilles à partir de la cire gauffrée ayant recu une incorporation de bactéries lors de sa fabrication industrielle, s'est révélé beaucoup moins précis, en raison de la variation observée dans l'efficacité entre les divers échantillons de rayons.Cette série de quatre essais est satisfaisante pour les besoins de la recherche et elle pourait être utilisée jusqu'a un certain point, pour le contrôle de la qualité de la cire gauffrée manufacturée, si on adoptait commercialement la possibilité de protéger les rayons à miel contre la teigne des ruches.

     

Bacteria on intertidal sand grains

Summary The number of bacteria on the surfaces of intertidal sand grains has been estimated by shaking sand with sea-water, de-ionized water and 0.1 % teepol. Total counts, viable counts, and optical densities of the resultant washings were measured. 0.1 % teepol caused the largest number of bacteria to detach from sand grains, followed by de-ionized water, and lastly by sea-water. Total counts and optical densities were strongly correlated. There was little relation between viable counts and optical densities.The total and viable number of bacteria on the surfaces of sand grains showed great variation, but viable counts varied more than did total. Sand particle size ranged from 0.18 to 0.52 mm diam. Total counts ranged from 25 × 10³ to 259 × 10³/mm² of sand grain surface, that is from 140 × 10⁶ to 1183 × 10⁶/g dry sand; the respective viable counts were 0.2 to 40/mm² and 2.6 × 10³ to 241 × 10³/g. No relationship was observed between bacterial numbers and particle size.Experiments suggest that heavy wave action will remove large numbers of bacteria from the surfaces of sand grains. It is also evident that rain water and run-off from the land will wash bacteria from the surfaces of intertidal sand grains, and at the same time will reduce the flow of interstitial water.

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Résumé On a calculé le nombre de bactéries sur les surfaces des granules de sable, situées entre la marée haute et la marée basse. La méthode de calcul était la suivante: secouer le sable ou dans l'eau de mer, ou dans l'eau déionisée, ou dans le teepol 0.1 % (détersif). On a calculé les comptes totaux, les comptes viables et les densités optiques des produits de lavage ainsi obtenus. C'était le teepol 0.1 % qui a détaché des granules de sable le plus grand nombre de bactéries, l'eau déionisée en a détaché moins, tandis que l'eau de mer en a détaché encore moins. Il est évident qu'une corrélation définie existe entre les comptes totaux et les densités optiques, mais une telle corrélation était beaucoup moins évidente entre les comptes viables et les densités optiques.Le compte total et le compte viable de bactéries sur la surface des granules de sable démontraient de grandes variations, mais ces variations étaient plus extrêmes dans le cas du compte viable que dans le cas du compte total. Les dimensions des parcelles de sable s'échelonnaient de 0,18 à 0,52 mm en diamètre. Les comptes totaux s'échelonnaient de 25 × 10³ à 259 × 10³/mm² de surface des granules de sable, c'est à dire de 140 × 10⁶ à 1183 × 10⁶/g sable desséché; les comptes viables respectifs s'échelonnaient de 0.2 à 40/mm² et de 2,6 × 10³ à 241 × 10³/g. Nul rapport n'était perceptible entre le nombre de bactéries et la dimension des parcelles.Les expériences semblent indiquer qu'une violente activité des ondes peut détacher de grands nombres des bactéries des surfaces des granules de sable. Il est évident que l'eau de pluie et l'eau qui s'écoule de la terre peuvent aussi déplacer les bactéries des surfaces de granules de sable, situées entre la marée haute et la marée basse, et qu'en même temps ces eaux diminueront le mouvement de l'eau interstitieille.

     

Effect of curd-cooking temperatures on the microbiological quality ofayib,a traditional Ethiopian cottage cheese

Ayib was made following traditional methods of curd cooking at 40°, 50°, 60° and 70°C requiring 10 h, 7 h, 145 min and 55 min, respectively. During the natural fermentation of raw milk into sour milk (curd), the count of all groups of microorganisms increased by at least a 100-fold. When the curd was subsequently cooked at 40°C, counts of enterococci and members of Enterobacteriaceae decreased by a 100-fold and lactic acid bacteria and staphylococci by a 100-fold. At 50°C, the count of enterococci, members of Enterobacterlaceae and staphylococci was lower than could be detected (<10² c.f.u./g). Yeasts, moulds and lactic acid bacteria still had counts of about 10⁵ c.f.u./g. The total aerobic count decreased by a 100-fold but was still high (>10⁷ c.f.u./g). At 60°C, yeasts and moulds decreased by 1000-fold and at 70°C they decreased below detectable levels (<10² c.f.u./g). This latter temperature is thus recommended as it results in a less contaminated and saferayib.

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Résumé On a préparél'Ayib selon les méthodes traditionnelies de cuission du lait caillé à 40, 50, 60 et 70°C, ce qui a requis respectivement 10 h, 7 h, 145 et 55 min. Durant la fermentation naturelle du lait frais en lait caillé, le décompte de tous les groupes de microorganismes a crû d'au moins 100 fois. Quand le lait caillé était par la suite cuit à 40°C, le décompte des entérocoques et des membres des Enterobacteriaceae a décru de 100 fois et celui des bactéries lactiques et des staphylocoques de 100 fois. A 50°C, le décompte des entérocoques, membres des Enterobacteriaceae et des staphylocoques était inférieur au seuil de détection (<10² c.f.u./g). Les levures, moisissures et bactéries lactiques avalent toujours un décompte d'environ 10⁵ c.f.u./g. le décompte total aérobie décroissait de 100 fois mais restait néanmoins élevé (>10⁷ c.f.u./g.). A la température de cuisson du lait caillé de 60°C, les levures et les moisissures ont décru de 1000 fois, et à 70°C on décru au dessous du seuil de détection (<10² c.f.u./g). Cette dernière température est donc recommandable car elle résulte en unayib moins contaminé et plus sain.

     

L'excursion en Provence (Sud-Est de la France) de la Societe Internationale de Phytosociologie

Conclusions La Provence apparaît, en définitive, comme un territoire des plus variés aux divers points de vue climatique, édaphique, biotique.C'est une région d'autant plus favorable aux études phytosociologiques que la variété des milieux s'y double d'une brutalité souvent étonnante des contrastes, conduisant à la juxtaposition parfois extrêmement précise d'associations végétales très différentes, dont les limites peuvent alors être cartographiquement figurées avec une très suffisante exactitude.Cette vigueur des contrastes est surtout marquée en Provence calcaire où les divers termes des séries évolutives dérivant du Quercetum ilicis climacique ou y conduisant, se juxtaposent souvent sans transition de quelque importance.Les contrastes sont cependant moins accusés en Provence cristalline et dans la Basse-Vallée du Rhône.En Crau comme en Camargue, les associations végétales se juxtaposent souvent en ceintures parallèles ou concentriques — elles s'individualisent alors facilement —, souvent en mosaïques irrégulières, au grè des variations locales des deux facteurs déterminants: l'eau en Crau, le sel en Camargue.En Provence cristalline, les Maures étant surtout faites de roches se délitant facilement (grès, micaschistes et phyllades) sous un climat chaud et humide, le sol se reconstitue facilement après sa destruction partielle par l'érosion; les contrastes sont moins tranchés; on observe des transitions nombreuses entre les divers termes des séries évolutives, dont les limites ne peuvent être fixées qu'approximativement. Nous y avons notamment abordé le problème de la forêt de chêne-liège dont la signification est loin d'être connue, non seulement en Provence mais sur toute l'étendue de son aire, en Afrique du Nord, en Espagne, au Portugal, en France méridionale, en Italie et dans les Iles de la Méditerranée occidentale.En provence cristalline, il est certain que l'homme en a considérablement assuré l'extension, directement pour l'utilisation du liège, indirectement par la coupe et le feu, et, en bien des points de la Méditerranée occidentale, le chêne-liège se présente comme une essence cultivée.Par ailleurs rien ne permet de mettre en doute son indigénat. Mais, dans les conditions actuelles du milieu en Provence cristalline:le chêne vert est possible partout;dans les conditions naturelles de la concurrence vitale le chêne vert l'emporte sur le chêne-liège.Si, donc, la forêt originelle a comporté le chêne-liège, ce ne peut être qu'à l'état d'essence secondaire et seulement en quelques points où une faible couverture forestière lui permettait de cohabiter avec le chêne vert.Les documents cartographiques au I/20 000^e tendent à montrer, d'aileurs que, dans les conditions naturelles de reconstitution de la forêt ou dans le peuplement naturel des sols neufs (Isthme de Giens), c'est la chênaie de chêne vert, non la chênaie de chêne-liège qui s'installe.Les grandes unités phytosociologiques de la Provence paraissent être maintenant convenablement définies floristiquement; il convient donc d'en poursuivre l'étude écologique, dont certains aspects seulement les plus apparents—mais peut-être pas toujours les plus actifs-, ont été abordés.Notons enfin la démonstration faite, au cours de l'excursion, de la parfaite application possible des méthodes phytosociologiques à l'étude des groupements marins et la nécessité, particulièrement apparente en milieu marin, de considérer tout autant les animaux que les végétaux. L'avenir est bien aux biocénoses dont les grands traits ont été mis en évidence, quant à la côte de la presqu'île de Giens, par Roger Molinier.Reçu par la rédaction le 20. XII. 1958.avec la collaboration de ROGER MOLINIER pour la partie marine et G. TALLON pour la Camargue.     

Acquisition and transmission of bacteria through artificial membranes by leafhopper vectors of Pierce's disease

The leafhopper Graphocephala atropunctata transmitted the bacterium Erwinia amylovora to plant sap enclosed between Parafilm^® membranes after feeding on a suspension of the same bacterium. They did not do so, however, following intrahaemocoelic injection or surface inoculation. The bacterium Lactobacillus hordniae was similarly acquired and transmitted. Various bacteria were recovered from the gut but not from the haemocoel of the leafhoppers. Bacteria transmitted through artificial membranes had identical morphology and colony characteristics as bacteria isolated from the guts of the transmitting leafhoppers. The results of these experiments suggest that bacterial transmission is via egestion during feeding.

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Résumé La cicadelle Graphocephala atropunctata transmet les bactéries Erwinia amylovora, à de la sève maintenue entre des membranes de Parafilm^(r), après alimentation sur une suspension des mêmes bactéries. Il n'y a pas transmission, par contre, après injection intrahaemocélique ou inoculation superficielle. Les bactéries Lactobacillus hordniae sont acquises et transmises de la même façon. Différentes bactéries sont retrouvées dans le tube digestif, mais non dans l'haemocoele des cicadelles. Les bactéries transmises à travers des membranes artificielles sont identiques morphologiquement et ont les caractéristiques des colonies isolées des tubes digestifs des cicadelles vectrices. Les résultats de ces expériences suggèrent que la transmission bactérienne s'effectue par égestion pendant l'alimentation.

     

The microbial loop in a humic lake: seasonal and vertical variations in the structure of the different communities

Seasonal and vertical variations of the main microbial communities (heterotrophic bacteria, autotrophic picoplankton, auto- and heterotrophic nanoflagellates, ciliated protozoa and microalgae) and auto- and heterotrophic activities were estimated in a brown-colored humic and moderately acid lake in central France, the lake of Vassivière. The results demonstrated the dominant role of light in the vertical distribution of autotrophic and mixotrophic microorganisms which are confined to the 0–5 m layer during thermal stratification. The bacterial biomass was high throughout the water column probably because of the great availability of dissolved organic matter. Consequently, the predatory microzooplankton and particularly the various trophic groups of ciliated protozoa, were distributed in the water column according to the vertical distribution of the particular food resources (detritus, bacteria, algae). However, despite the great abundance of algae and bacteria, biomass of flagellated and ciliated protozoa was relatively weak. Most of the phytoplanktonic biomass was filamentous (Diatoms) or colonial (Cyanobacteria) and therefore almost probably difficult to ingest for algivorous microzooplankton. Regarding the low abundance of bacterivorous protozoa, the relation with the special physicochemical properties of this lake is discussed.

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Résumé Les variabilités saisonnière et verticale de l'abondance et de la biomasse des principles communautés de la boucle microbienne (bactéries hétérotrophes, picoplancton autotrophe, protozoaires flagellés auto- et hétérotrophes, protozoaires ciliés, microalgues et microcyanobactéries), et des activités auto- et hétérotrophes, ont été étudiées dans un lac à caractère humique et modérément acide du Massif Central Français, le lac de Vassivière.Le dénombrement des communautés de microorganismes a été réalisé en microscopie inversée et à épifluorescence après mise en oeuvre des fixations et des colorations adéquates. Les activités photosynthétique, photo- et chemohétérotrophes ont été mesurées à partir de l'assimilation de NaH¹⁴CO₃ et d'un mélange d'acides aminés tritiés grâce à une technique de double marquage. Les résultats obtenus mettent en évidence le rôle prépondérant du facteur lumineux dans la répartition verticale des microorganismes autotrophes et mixotrophes, dont l'essentiel de la biomasse est confiné dans la zone 0–5 m en période de stratification, alors que la biomasse bactérienne est élevée sur l'ensemble de la colonne d'eau en raison, sans doute, de la grande disponibilité en matiére organique dissoute. Consécutivement, le microzooplancton prédateur, et notamment les différents types trophiques de protozoaires ciliés, se répartit dans la colonne d'eau selon la distribution verticale des ressources nutritives particularies. Cependant, compte-tenu de l'abondance bactérienne et algae, la biomasse des protozoaires flagellés et ciliésest relativement peu importante. Concernant les espèces algivores, l'essentiel de la biomasse phytoplanctonique est de nature filamenteuse (Diatomées) ou coloniale (Cyanobactéries) est est donc sans doute difficilement ingérable pour le microzooplancton. Enfin, les relations entre les caractéristiques physico-chimiques spécifiques de ce lac et le faible développement des protozoaires bactérivores sont discutées.

     

Relations entre la teneur en sélénium et celle de seize éléments dansHelminthia echioides etTrifolium repens se developpant sur sols argileux

Résumé Nous avons analysé la teneur en sélénium de sols argileux de la région de La Roche-Posay ainsi que celle deHelminthia echioïdes etTrifolium repens qui s'y développent. Sur trente emplacements, la concentration en Se total du sol varie de 1,7 à 4,5 ppm et le pH oscille de 6,1 à 7,2. La teneur en sélénium des plantes est élevée: de l'ordre de 2 à 32,5 ppm, mais aucune corrélation n'a été notée entre ces valeurs et d'une part le pH du sol ou d'autre part la teneur totale en Se du sol.Seize éléments minéraux ont également été dosés. Les deux espèces présentent des concentrations élevées en Al, Fe, Ni, Co et Cr. Les Teneurs les plus fortes en Se ont été retrouées dans les plantes possédant les taux les plus bas en Al, Fe, As et Mn. Chez Trifolium, une corrélation négative est observée entre la concentration en Se et celle en Al (r=–0,44), en Fe (r=–0,47) et en As (r=–0,47). Par ailleurs, des corrélations positives sont obtenues entre les teneurs en Al, Fe et As chez les deux espèces.Une corrélation positive existe entre la teneur en Se et celle en P chez Helminthia, mais chez Trifolium les plus faibles concentrations en Se se retrouvent à la fois dans les échantillons présentant les niveaux les plus faibles et les plus forts en P.Chez l'une ou l'autre des espèces étudiées, des corrélations positives apparaissent entre les teneurs en Se et celles en Co, Mo ou même Mn lorsqu'il est présent à des taux relativement élevés dans la plante.     

The consumption and utilization of the spiral blue-green algae Spirulina platensis in artificial diets by the silkworm, Bombyx mori

The consumption and utilization of various concentrations of the spiral blue-green algae, Spirulina platensis (Nordst.) Geitl., by the fourth-instar larvae of the silkworm, Bombyx mori L., was studied by incorporation into an artificial diet. The silkworms ingested more food on the low algal-powder diets, whereas they digested more efficiently on the high algal levels. The larvae fed on diets containing 30–40% algae had the shortest larval duration compared to those on low algal-powder diets. The freeze-dried powder of S. platensis is well utilized by B. mori larvae when added to artificial diets at levels between 15% and 30%, although the high algal content at 40% was slightly better for the efficiency of conversion of ingested diet into body substance (E.C.I.) and the cocoon production. However, analysis of the protein content in feces indicated an excess of the algal powder at 40%. Measurements of data on the food consumption and utilization in this study proposed that this spiral alga is dietetically utilizable as a protein source for rearing the silkworm in smaller quantities than on a soybean meal.

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Resúmé La consommation et l'utilisation de différentes concentrations de Spirulina platensis par les chenilles de 4ème stade de Bombyx mori, ont été étudiées par incorporation dans un aliment artificiel. Les vers à soie ont ingéré plus d'aliment avec les régimes à faible concentration en algue, tandis qu'ils ont digéré plus efficacement les régimes à haute concentration d'algue. Les chenilles alimentées sur des régimes contenant 30 à 40% d'algue ont eu un développement larvaire plus bref que celles alimentées sur des régimes à faible concentration. La poudre congelée et séchée de S. platensis incorporée aux taux de 15 à 30% dans le régime artificiel est bien utilisée par les chenilles de B. mori, quoiqu'une teneur de 40% soit légèrement meilleure pour l'efficacité de conversion de l'aliment en matière vivante (E.C.I.) et la production de cocons. Cependant, l'analyse du contenu protéique dans les excréments révélait un excès de poudre d'algue à 40%. L'analyse des données au cours de cette étude, sur la consommation et l'utilisation des aliments, montre que S. platensis est utilisable diét étiquement en plus petite quantité que la farine de soja comme source de protéines pour l'élevage du ver à soie.

     

Behavioural variations among strains of Trichogramma spp.: Adaptability to field-temperature conditions

In order to select a candidate strain of Trichogramma sp. for inundative releases against lepidopteran pests in cabbage field-crops in the Netherlands, the parasitization activity of a collection of 60 different Trichogramma spp. strains was studied during 2 h and 24 h exposures at 12°C. Activity and parasitism varied significantly among strains and the two characteristics were not correlated, suggesting the action of two differentially temperature-dependent mechanisms influencing both characteristics. Native strains were characterized by a low activity at 12°C, making their usefulness for inundative releases doubtful. In three strains tested at 12, 17, 20, 25 and 30°C, activity increased linearly with temperature, until nearly all females parasitized at 20 or 25°C. Parasitism increased with increasing temperature to a maximum at 20–25°C and declined at 30°C. Handling time decreased asymptotically with increasing temperature. The results of this study suggest that Trichogramma strains vary in adaptability to low temperature, making this characteristic a useful criterion for evaluation of candidate strains.

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Résumé Afin de sélectionner une souche de Trichogramma sp. (Hymenoptera, Trichogrammatidae) candidate pour des lâchés inondatifs contre les Lépidoptères pestes de chou aux Pays-Bas, l'activité de parasitisation d'une collection de 60 souches différentes de Trichogramma spp. a été étudiée à 12°C pendant des durées d'exposition de 2 h et 24 h. L'activité proportionnelle et le degré de parasitisation des femelles varient significativement selon des souches et ne sont par corrélés. Ceci suggère l'action des deux mécanismes distincts, dépendant de la température et contrôlant independamment chacun de ces processus. Les souches indigènes sont caractérisées par une faible activité à 12°C, mettant en doute leur utilisation pour les lâchés inondatifs. Dans 3 souches testées à 12, 17, 20, 25 et 30°C, l'activité augmente linéairement avec la température, jusqu'a ce que quasi toutes les femelles parasitent les oeufs hôtes à 20°C et 25°C. Le taux de parasitisation augmente avec la température atteignant un maximum à 20–25°C puis diminue à 30°C. Le temps de manipulation d'un oeuf hôte diminue asymptotiquement lorsque la température croît. Les résultats de cette étude suggèrent que la capacité d'adaptation aux températures basses varie selon les souches de Trichogramma. Cette caractéristique constitue un critère utile pour l'évaluation de souches candidates potentielles.

     

Studies on the cellulolytic bacteria and cellulose degradation in a cattle waste-fed biogas digester

Summary Production of acetate, the key substrate for methane formation in anaerobic digesters, is limiting in cattle waste-fed biogas digesters due to the lignocellulosic nature of the substrate. Since the rate of cellulose hydrolysis affects acetate production, and the number and type of cellulolytic bacteria that exist in a cattle waste biogas digester is not known, 110 cellulolytic bacterial isolates belonging to the Bacillaceae, Propionibacteriaceae and Lactobacillaceae, and coryneform bacteria likeCellulomonas, were isolated from different depths of an operating 10³ KVIC type biogas digester. The population of cellulolytic bacteria varied between 2.0×10³ and 1.4×10⁵/g slurry. Some bacterial isolates exhibited higher cellulase activity than others, with acetate as the major end-product. In general, acetate, propionate and butyrate were the common end-products but one isolate was homoacetogenic and a few others produced propionate or butyrate orisobutyrate in small amounts with acetate. Cellulose degradation rate in the digester was dependent upon the cellulose: lignin ratio.

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Resumen La producción de acetato, substancia clave para la formación de metano en digestores anaerobios, es el factor limitante en las plantas de biogás, alimentadas mediante residuos de ganado, debido a la naturaleza lignocelulósica del material de partida. La velocidad de hidrolisis de la celulosa afecta a la producción de acetato, sin embargo, nose conocen ni el tipo ni la cantidad de bacterias que existen en una planta de biogas de dichas características. Se aislaron 110 cepas bacterianas con propiedades celulolíticas que pertenecían a los grupos de Bacillus, Propionibacterias, y coryneformes, (como el géneroCellulomonas). Estudiando la población de bacterias celulolíticas a distintas profundidades de un digestor de biogás del tipo 10³ KVIC, se observó que ésta variaba entre 2.10³ y 1.4 10³ celulas/g de residuo liquido analizado. Algunos de los aislados bacterianos mostraron una mayor actividad celulolitica que otros, siendo el acetato el producto final mayoritario. En general los productos finales más corrientes fueron: acetato, butirato y propionato; sin embargo, una de las cepas aisladas era homoacetogénica y algunas otras produjeron pequeñas cantidades de propionato, butirato oisibutirato junto con acetato. La velocidad de degradación de la celulosa dependía de la relación celulosa: lignina.

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Résumé Dans les digesteurs anaérobies produisant du biogaz à partir de fumier de bovins, la production d'acétate, qui est l'étape essentielle conduisant au méthane, est limitée à cause de la nature ligno-cellulosique de la matière première. Il a été procédé à des prelévements à différentes profondeurs dans un digesteur KVIC en service, et à 110 isolements de bactéries cellulolytiques appartenant aux Bacillaceae, Propionibacteriaceae, Lactobacillaceae et bactéries coryneformes du typeCellulomonas. Les populations de bactéries cellulolytiques dénombrées varient entre 2,0×10³ et 1,4×10⁵ par g. d'échantillon. Certaines des bactéries isolées ont une activité cellulase plus élevée que d'autres, et dans tous les cas l'acétate est le produit prédominant. D'une manière générale, l'acétate, le propionate et le butyrate constituent les produits principaux. Une souche est homo-acétogène. Un petit nombre d'autres produisent, en dehors de l'acétate, de faibles quantités de propionate, de butyrate et d'isobutyrate. La vitesse de dégradation de la cellulose dans le digesteur dépend du rapport cellulose/lignine.

     

Studies on N2-fixing bacteria associated with the salt-tolerant grass,Leptochloa fusca (L.) Kunth

Summary N₂-fixing bacteria were isolated from the rhizosphere of naturally grown salt tolerant grass (Leptochloa fusca). A broad spectrum of diazotrophs was found to be associated with the roots ofL. fusca. the systematic position of the three isolates, NIAB-1, C-2 and Iso-2 was determined by morphological, biochemical and mol % (G+C) DNA contents. Two isolates were identified asKlebsiella pneumoniae (NIAB-1) andBeijerinckia sp. (Iso-2).¹⁵N enrichment studies confirmed the nitrogen fixing ability of the isolates. The effects of different levels of combined nitrogen (NO ₃ ^– & NH ₄ ⁺ ), pH (5.5–9.0) and salt (NaCl) on nitrogenase activity of the isolates were determined at various time intervals. All isolates exhibited nitrogenase activity even in the presence of 5 mmol/l NO ₃ ^– or NH ₄ ⁺ in a semi-solid medium after 24 h of growth. Maximum nitrogenase activity was observed at alkaline pH and all isolates were able to tolerate up to 3% NaCl in the medium.

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Resumen Se han aíslado bacterias fijadoras de N₂ en la rizosfera del hábitat natural de la graminea halófilaLeptochloa fusca. Un amplio espectro de diazotrofos se encontró asociado con las raíces deL. fusca. La posición sistemática de tres aíslados: NIAB-1, C-2 y Iso-2 se determinó utilizando sus características morfológicas, bioquímicas y el % (G+C) molar del ADN. El aíslado NIAB-1 se identificó comoKlebsiella pneumoniae y el aíslado Iso-2 comoBeijerinckia. sp. Estudios mediante¹⁵N confirmaron la habilidad fijadora de N₂ de los aíslados. Se determinaron periodicamente los efectos de distintos niveles de nitrógeno combinado (NO₃ ^– y NH₄ ⁺), pH (5.5–9.0) y sal (NaCl) en la actividad nitrogenásica de los aíslados. Todas las cepas aísladas mostraron actividad nitrogenásica incluso en presencia de 5mmol/l de NO₃ ^– y NH₄ ⁺ en un medio semisólido desqués de 24 h. de crecimiento. La actividad nitrogenásica máxima se observó a pH alcalino y todos loa aíslados eran capaces de tolerar hasta 3% de NaCl en el medio.

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Résumé Des bactéries fixatrices de l'azote ont été isolées à partir de la rhizosphère de l'herbe halotoléranteLeptochloa fusca développée dans les conditions naturelles. Il a été constaté qu'un large spectre de diazotrophes est associé aux racines de la plante. La position taxonomique de 3 souches isolées, NIAB-1, C-2 et Iso-2, a été déterminée par des critères morphologiques et biochimiques et par le pourcentage de (G+C) de l'ADN. Deux souches on été identifiées commeKlebsiella pneumoniae (NIAB-1) etBeijerinckia sp. (Iso-2). Les études d'enrichissement en¹⁵N ont confirmé l'aptitude des souches à fixer l'azote. les effets de différents niveaux d'azote combiné (NO₃ ^– et NH₄ ⁺), de pH (5.5–9.0) et de sel (NaCl) sur l'activité nitrogénasique des souches ont été déterminés à divers intervalles de temps. Toutes les souches présentent une activité nitrogènase après 24 h de croissance en milieu semi-solide, et cela même en présence de 5 mmol/l de NO₃ ^– ou NH₄ ⁺. L'activité nitrogènase maximum est observée à pH alcalin, et toutes les souches tolèrent jusqu'à 3% de NaCl dans le milieu.