Vero细胞在生物工程中的应用及其高密度培养

过去人用生物制品的生产只允许用原代或二倍体细胞。随着这个规定的打破,Vero细胞(非洲绿猴肾细胞)成为异倍体细胞中首先用于人用生物制品生产的细胞基质。Vero细胞所以受到生物工程工作者重视,是由于其自身的优点:①不能合成干扰素,对多种病毒敏感,适于疫苗生产;②猿猴很接近人类,故用该细胞生产的生物制品有减少免疫学问题的可能;③具有多层生长现象,但无致瘤性,适于高密度培养。因而,有关Vero细胞的生物工程正在国内     

Vero细胞无血清培养技术的研究与应用

Vero细胞是世界卫生组织和我国生物制品规程认可的疫苗生产细胞系。随着对疫苗质量和安全性要求的不断提高,用无血清培养基取代含血清培养基培养Vero细胞已成为病毒疫苗生产的一个重要发展趋势。Vero细胞无血清培养的技术关键是研发或选择能支持细胞以贴附培养方式生长的无血清培养基。微载体培养是贴附依赖性细胞系规模化培养和病毒疫苗生产的有效技术途径。我们对Vero细胞无血清培养基的研发、Vero细胞无血清培养及病毒疫苗生产工艺做了讨论,对该领域存在的问题和发展策略进行了展望。     

地高辛标记探针检测生物制品中残余DNA含量

用地高辛标记探针检测由传代细胞系生产的人用精制狂犬病疫苗,重组（CHO细胞）乙肝疫苗,出血热疫苗及痢疾多糖结合疫苗原液中残余DNA含量。结果表明,该方法特异性强,灵敏度高,可用于上述生物制品中残余DNA含量的检测。     

疫苗生产商开始用连续细胞培养代替滚瓶进行生产

Pitman-Moore公司开始用连续培养技术而不是滚瓶,生产疫苗等生物制品,而这正反映了工业化的趋势。这种连续流动固定细胞技术是使细胞生长在Corring玻璃制品公司生产的簿型玻璃管表面。管子排列在一起,使其PH值,流动培养基及氧的消耗由电脑控制。     

动物细胞——细胞生物技术的突破

前言由于看法的转变及技术的发展,在过去几年中,动物细胞培养已成为一项起支配作用的技术。当制造商们由于受通常申请许可证规则的限制,只能使用人类二倍体细胞或原代细胞生产时,动物细胞一直没有成为首选的生产方法。过去,人类生物制品的制造者们总是很羡慕地看着制造兽药的同行们,用 BHK 细胞在8000L 搅拌罐中生产 FMDV(口蹄疫疫苗),希望有一天他们也能使用一种类似的方法。近几年,随着三种重要的生物制品分别由异倍体细胞、肿瘤组织来源的细胞或重组细胞(这类细胞已获准使用,见     

一条快出成果的必由之路──伤寒Vi疫苗协作攻关报告

一条快出成果的必由之路──伤寒Ｖｉ疫苗协作攻关报告党伴（卫生部兰州生物制品研究所,兰州７３００４６）一种伤寒免疫新疫苗──Ｖｉ荚膜多糖疫苗,经过中国生物制品总公司伤寒Ｖｉ疫苗协作组的专家和技术人员五个月的艰苦奋战,于一九九一年七月在卫生部兰州生物制品...     

关于使用非正常细胞生产新产品现场会议的概况

据美国药品和生物制品中心、美国食品和药品管理署JohnC。Petricciani的报告,1984年7月由美国FDA、CDC、NIAID、NHLBI及NCI等单位共同发起一次专家会议,讨论了使用非正常细胞生产新制品的安全性问题。会议回顾了使用细胞生产制品的历史概况,1954年曾规定用于人体的制品不允许使用人肿瘤细胞,只能使用正常动物组织原代细胞。70年代早期,经过长期而充分的争论,接受了人双倍体细     

动物细胞的微囊固定化培养

动物细胞培养的目的是多方面的,如:科研应用;作为病毒的宿主生产疫苗;获得细胞分泌的产物(抗体、干扰素、促红细胞生成素、tPA等)或细胞本身。尽管动物细胞培养的成本和复杂性要大于微生物的培养,但由于真核基因遗传及表达系统有着原核细胞无法替代的优越性:如蛋白质翻译后的加工过程,包括糖基化,二硫键形成,肽键剪切等,致使许多有天然活性的大分子只能借助于动物细胞表达。鉴于生物安全性原因,用动物细胞表达生产的临床应用生物制品更易被接受。 对生物制品日益迫切的需求是动物细胞大量培养技术发展的动力之一。而重组DNA技术与细胞生物     

微载体灌注培养制备Vero细胞狂犬病疫苗

本文研究在生物反应器中用微载体连续灌注培养Vero细胞生产狂犬病毒制备技术。在5L体积的生物反应器中,加入含10g/L微载体的199培养基,接种Vero细胞至细胞浓度达到1×105/mL,培养7d后细胞可生长至6~7×106/mL,然后以感染复数(MOI)为0.01接种狂犬病毒VaG株,接毒后24h开始收获,连续收获12d左右,收获的病毒滴度范围在6.0~8.5logLD50/mL,收获的病毒原液经浓缩、灭活和纯化等步骤制备成疫苗,各项质量指标均达到《中国生物制品规程》2000年版要求。实验表明,用生物反应器微载体灌注培养制备人用Vero细胞狂犬病疫苗小试工艺可行。     

产业动向

“人用禽流感疫苗研制”项目通过验收“人用禽流感疫苗研制”项目近日通过科技部的验收,项目承担单位北京科兴生物制品有限公司和中国疾病预防控制中心已向国家食品药品监督管理局(SFDA)提交了临床研究申请。国务院总理温家宝17日到北京科兴生物制品有限公司,考察了我国人用禽流感疫苗研制的进展情况。参加此次“人用禽流感疫苗研制”的20多位研究人员曾经研制出全球首支进入临床研究,并取得临床成功的SARS疫苗。2004年3月,科兴与中国CDC合作共同启动“人用禽流感疫苗研制项目”,同年5月,科兴从NIBSC得到H5N1疫苗原型株NIBRG-14,1…     

流行性出血热(EHF)疫苗变态反应病理学研究

流行性出血热（ＥＨＦ）疫苗变态反应病理学研究王玉琳等（卫生部兰州生物制品研究所,兰州７３００４６）从制品的安全性角度出发,对兰州生物制品研究所研制的流行性出血热（ＥＨＦ）疫苗进行了变态反应试验,现将其病理学及神经病理学观察结果报告如下：试验采用兰州生...     

植物口服疫苗的研究进展

植物口服疫苗是通过转基因植物生产,通过口服的方式预防疾病的生物制品.作为一种新型疫苗,其研究开始于三十几年前.由于植物口服疫苗可以最大程度地降低传统疫苗的潜在风险,在疫苗生产中具有优势,因此拥有良好的商业生产前景.植物疫苗价格低廉,生产过程安全,可产生与注射疫苗相似效价效果,无论是在控制养殖业抗生素滥用的情况下作为替代...     

冻干腮腺炎活疫苗细胞培养生产工艺研究

报告了冻干腮腺炎活疫苗细胞培养生产工艺研究结果,通过对鸡胚疫苗株的适应培养及对细胞培养生产工艺的试验优化,建立了连续细胞培养多次收获疫苗生产工艺并制备出了冻干细胞培养腮腺炎活疫苗制剂。本生产工艺切实可行,生产成本低、投入产出率高,所用原材料规范、质量易于控制,具有明显的技术优势。生产的冻干疫苗制剂质量稳定可靠,符合中国生物制品规程要求,有利于预防腮腺炎的规模化推广使用     

认真贯彻《药品管理法》 为防病治病提供优质生物制品——一九八六年全国生物制品计划平衡会议在兰召开

<正>一九八六年全国生物制品计划平衡会议在卫生部主持下于一九八五年八月十九日至二十三日在兰州召开。参加这次会议的有:卫生部药政局和防疫局的负责人;卫生部药品生物制品检定所和部属六个生物制品研究所的代表;医科院医学生物研究和输血研究所的代表;全国各省、市、自治区卫生防疫站的代表;还有兰州、昆明民航局的代表共计八十八人。 这是继去年长春计划会议之后的又一次生产、检定和使用相结合的会议。在会议中,各生物制品生产研究单位汇报了一九八四至一九八五年生产及科研情况,检定所汇报了抽检各生产单位的制品质量情况,各防     

细菌类生物制品生物危害程度分类探讨

以卫生部《人间传染的病原微生物名录》为基础,根据细菌类生物制品生产用菌(毒)种的特点以及该病原微生物的传染性、感染后对个体或者群体的危害程度,将生物制品生产用菌(毒)种中结核杆菌与肉毒梭菌分为第二类,灭活疫苗、组分疫苗、类毒素生产用菌(毒)种为第三类;活疫苗与微生态活菌制剂中除芽孢菌与条件致病菌为第三类外,其他为第四类。     

用CaG株毒种制备精制狂犬病疫苗的研究

通过对狂犬病毒aG株在金黄地鼠肾细胞上传代培养,获得一种新型狂犬病毒毒株,即地鼠肾细胞适应株(CaG株)[1].由于该毒种具有生产方法简单,成本低廉,且外源因子污染机率小等优点,因此试用该毒种生产精制狂犬病疫苗.在相同条件下,分别用豚鼠脑毒种和细胞毒种各生产3批病毒原液,经相同纯化工艺制备成精制狂犬病疫苗.经初步检定用细胞毒种制备的疫苗安全性良好,疫苗免疫效价与豚鼠脑毒种疫苗无明显差异.     

逆转录病毒及对生物制品污染的安全问题

自80年代发现引起人类淋巴细胞白血病和艾滋病等疾病的病源体都属于逆转录病毒以来,大量文献对逆转录病毒及其逆转录酶的研究进行了报道.随着人们越来越重视生物制品的外来因子污染问题[1],而对于生物制品如疫苗等的生产用动物源细胞基质逆转录病毒的安全检测一直是WHO以及药品监管部门关注的重点.本文就这方面的研究进展作一综述.     

微载体灌注培养制备Vero细胞狂犬病疫苗

本文研究在生物反应器中用微载体连续灌注培养Vero细胞生产狂犬病毒制备技术.在5L体积的生物反应器中,加入含10g/L微载体的199培养基,接种Vero细胞至细胞浓度达到1×105/mL,培养7d后细胞可生长至6～7×106/mL,然后以感染复数(MOI)为0.01接种狂犬病毒VaG株,接毒后24h开始收获,连续收获12d左右,收获的病毒滴度范围在6.0～8.5log LD50/mL,收获的病毒原液经浓缩、灭活和纯化等步骤制备成疫苗,各项质量指标均达到<中国生物制品规程>2000年版要求.实验表明,用生物反应器微载体灌注培养制备人用Vero细胞狂犬病疫苗小试工艺可行.     

第8届国际疫苗年会简介

第8届国际疫苗年会于2005年5月8～11日在美国巴尔地摩（Baltimore）召开,共有来自35个国家500多名代表参加。会议针对至今尚无疫苗保护的病毒性疾病,如人乳头瘤病毒和单纯疱疹病毒和对正在研究中的疫苗进行了报道。本次会议的报告和讨论议题主要涉及疫苗的基础免疫研究、产品开发、临床试验和规则制定等方面。会议讨论了疫苗研究的最新科技进展和在疫苗开发、生产、有效接种等方面所面临的新机遇和挑战。     

用Vero细胞大量制备传染性法氏囊病病毒

目前传染性法氏囊病病毒疫苗主要是用原代鸡胚成纤维细胞 (ＰＣＥＦ)增殖ＩＢＤＶ进行生产。由于ＳＰＦ种蛋价格高 ,且ＳＰＦ种蛋在取得及培养过程中易被外源病原污染 ,造成产品质量的不稳定 ,生产成本很高[1] 。Ｖｅｒｏ细胞系是一种贴壁依赖性的传代细胞系 ,ＷＨＯ已经批准用Ｖｅｒｏ细胞作为载体进行病毒疫苗的生产。目前已成功地应用Ｖｅｒｏ细胞生产出脊髓灰质炎病毒疫苗和狂犬病毒疫苗[2 ] 。用Ｖｅｒｏ细胞生产传染性法氏囊病病毒疫苗也会有较好的前景。我们已完成了在Ｖｅｒｏ细胞上静止状态下增殖ＩＢＤＶ弱毒株的培养条件研究 ,而…