犬干扰素-γcDNA的克隆及其在鼠骨髓瘤细胞(SP2/O)中表达

干扰素(IFN)是由脊椎动物细胞产生的一类分泌型糖蛋白,它具有广谱抗病毒和增强免疫应答的作用[1].干扰素可分为Ⅰ型和Ⅱ型,Ⅱ型干扰素又称为干扰素-γ(IFN-γ)或免疫干扰素,主要由抗原刺激CD4+和CD8+T细胞所产生2].IFN-γ可使Mφ功能亢进,诱导产生特异性抗体,在免疫应答中十分重要[3].     

辅助性T细胞的极化与再极化

激活的ＣＤ4 辅助性Ｔ细胞 (Ｔｈｅｌｐｅｒｃｅｌｌ,Ｔｈ)分化为Ｔｈ1和Ｔｈ2亚群并分别参与不同的免疫应答。Ｔｈ1细胞产生ＩＦＮ γ、ＴＮＦ β和ＩＬ 2并促进对细胞内病原的有效免疫应答 ,但过强的应答导致自身免疫病的发生。Ｔｈ2细胞则产生ＩＬ 4、ＩＬ 5、ＩＬ 6和ＩＬ 1 3并参与清除胞外感染的病原体 ,同时也介导过敏反应。Ｔ细胞亚群的分化及细胞因子表达过程大致可以分为 3个阶段 :( 1 )起始相 ,此过程高度依赖抗原、细胞因子和细胞因子诱导的ＳＴＡＴ因子 ;( 2 )定向相 ,此阶段受亚群特异的转录因子介导 ,在Ｔｈ2细胞为ＧＡＴＡ…     

一种新型的C型凝集素

美国、荷兰、英国科学家新近鉴定了一种新型的Ｃ型凝集素———树突细胞特异性、胞间粘附分子 (ＩＣＡＭ)可获取的非整联蛋白 (ＤＣ ｓｐｅｃｉｆｉｃＩＣＡＭ ｇｒａｂｂｉｎｇｎｏｎｉｎｔｅｒｇｒｉｎ) ,简称ＤＣ ＳＩＧＮ(ＣＤ2 0 9) ,它在免疫调节及免疫缺陷病毒致病过程中的作用日益受到重视。1 .ＤＣ ＳＩＧＮ的结构[1～ 3]ＤＣ ＳＩＧＮ是一种Ｃ型凝集素 ,为 40 4个氨基酸的Ⅱ型跨膜蛋白 ,分子量为 45775,Ｎ末端 40个氨基酸位于细胞质 ,跨膜结构域(ＴＭ)为 2 1个氨基酸 (Ｇｌｙ40 ～Ｓｅｒ6 1位个氨基酸残基 ) ,Ｃ末端 3 4 2个氨基…     

CpG免疫调节序列最新研究进展

细菌等非脊椎动物的ＤＮＡ和人工合成的寡聚核苷酸（ＯＤＮ）中所包含的免疫刺激ＣｐＧ序列（ＣｐＧ－Ｓ）被抗原呈递细胞（ＡＰＣ）摄入后,经由ｐＨ依赖的胞内体酸化,产生活性氧（ＲＯＳ）,然后分别活化转录因子ＡＰ－１和ＮＦ－λＢ,激活细胞因子等基因的表达,从而刺激机体产生免疫应答,包括刺激多种免疫活性细胞分泌细胞因子,使机体产生快速高水平的抗体应答及细胞免疫应答。能产生这种刺激作用的最适序列为ＣｐＧ５’端为     

IκB激酶的结构和功能

ＮＦκＢ是细胞活化和产生细胞因子的重要转录调控因子。在静止细胞胞液中,ＮＦκＢ与ＩκＢ(κＢ的抑制剂)结合,处于失活状态。细胞活化传递的信号激活ＩκＢ激酶(ＩＫＫ),ＩＫＫ催化ＩκＢα(Ｓｅｒ32、Ｓｅｒ36)和ＩκＢβ(Ｓｅｒ19、Ｓｅｒ32)磷酸化,使ＩκＢ与ＮＦκＢ解离后被降解,于是ＮＦκＢ进入核内,调节多种基因转录[1]。1.ＩＫＫ的结构及其与功能的关系ＩＫＫ复合物的分子量约600～900ｋＤ,主要由3个亚单位组成:ＩＫＫα、ＩＫＫβ和ＩＫＫγ[2]。其中ＩＫＫα和ＩＫＫβ组成功能性异二聚体并以二聚体表现活性,在一定条件下(如…     

r－干扰素对喉癌细胞系HEP－2HLA－DR抗原和增殖细胞核抗原表达的影响

本实验用人重组ｒ－干扰素（ｒｈｕ－ＩＦＮ）作用ＨＥＰ－２细胞后ＨＬＡ－ＤＲ抗原和增殖细胞核抗原（ＰＣＮＡ）表达的检测来探讨ｒ－干扰素对ＨＥＰ－２细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原表达诱导作用及体外抗增殖活性。用单克隆抗体ＣＲ３／４３（抗ＨＬＡ－ＤＲ）和Ｋｉ－６７（抗ＰＣＮＡ）。以链霉素一生物素技术（ＬＳＡＢ）检测ＨＥＰ－２细胞ＨＬＡ－ＤＲ抗原和ＰＣＮＡ表达,结果显示：ｒ－ＩＥＮ诱导ＨＬＡ－ＤＲ抗原和抑制ＰＣＮＡ表达其强弱与ｒ－ＩＦＮ剂量有关。资料提示：ｒ－ＩＦＮ不仅对ＨＥＰ－２细胞有细胞毒作用,同时能调节其细胞膜特性,因而在喉癌的治疗中是有效的。     

可溶性55kD人肿瘤坏死因子受体(shTNFR55)在变铅青链霉菌中的分泌表达

从 Ｈｅ Ｌａ 细胞中提取总 Ｒ Ｎ Ａ,采用反转录 Ｐ Ｃ Ｒ 技术,从该总 Ｒ Ｎ Ａ 中扩增了约 ５３０ ｂｐ 的ｓｈ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 基因的 ｃ Ｄ Ｎ Ａ,并克隆至质粒 ｐ Ｕ Ｃ ｍ ｅｌ中酪蛋白酶 ｍ ｅｌ Ｃｌ 分泌信号肽编码序列的下游,构建成含融合基因 ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 的重组质粒 ｐ Ｕ Ｃ ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ．把融合基因 ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 插入链霉菌表达质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ 的多克隆位点,使之位于 ｅｒｍ 强启动子的下游,得到重组表达质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ．经 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交证明重组质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 插入了 ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 基因片段．对重组菌株 Ｓｔｒｅｐｔｏｍ ｙｃｅｓ ｌｉｖｉｄａｎｓ（ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ）的发酵液进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ、受体配基杂交（ Ｌｉｇａｎｄ ｂｌｏｔ）分析、对 Ｔ Ｎ Ｆ 敏感的 Ｌ９２９ 细胞的细胞毒性中和试验表明,可溶性肿瘤坏死因子受体 ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 在链霉菌中得到了分泌表达,表达产物具有生物学活性．表达产物的分子量约在 ２６～２８ ｋ Ｄ 之间．     

趋化因子CX_3C——Fractalkine的结构与功能

趋化因子是一类结构和功能相关的多肽超家族 ,分子量为 7～ 1 5ｋＤ ,分子序列中多数有四个半胱氨酸残基 (Ｃｙｓ或Ｃ)。根据Ｎ末端两个保守Ｃｙｓ的排列方式 ,趋化因子被分为Ｃ、ＣＣ、ＣＸＣ和ＣＸ3Ｃ四个亚家族。Ｆｒａｃｔａｌｋｉｎｅ(ＦＫＮ) [1] 是ＣＸ3Ｃ亚家族的唯一成员。过去认为 ,ＦＫＮ具有趋化功能 ,参与白细胞特别是吞噬细胞和淋巴细胞的游走和活化 ,同时表现有粘附作用 ,介导细胞间粘附。近年的研究发现 ,ＦＫＮ还具有其它多种潜在功能 ,如增强细胞粘附、介导免疫损伤等。1 .ＦＫＮ的结构及其受体ＣＸ3ＣＲ1ＦＫＮ编码基因…     

逆转录病毒介导CD基因在人结肠癌细胞中表达

构建了含有大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶基因（ＥＣ－ＣＤ）的重组逆转录病毒载体ＬＣＤＤＳＮ。经ＰＡ３１７细胞包装后,感染人结肠癌细胞株ＬｏＶｏ。Ｇ４１８筛选得一的稳定表达ＥＣ－ＣＤ基因的细胞克隆ＬｏＶｏ／ＬＣＤＳＮ。ＬｏＶｏ／ＬＣＤＳＮ鹜型ＬｏＶｏ相比,生长曲线无明显差异,细胞形态亦无改变。ＬｏＶｏ／ＬＣＤＳＮ都对５－ＦＵ很敏感（ＩＣ５０约为０．５μｍｏｌ／Ｌ）。表达ＣＤ基因使细胞对基本无毒性的原药５－ＦＣ     

口服Ⅰ型干扰素的研究进展

干扰素（ＩＦＮ）是一类能发挥抗病毒、抗肿瘤、调节免疫功能的蛋白质,也是最早发现,最早基因克隆化和最早被批准应用于临床治疗的细胞因子,研究发现肠外途径注射ＩＦＮ,具有剂量过大和副作用多的缺点,而口服ＩＦＮ能克服上述缺点,同时能产生不同于肠外注射途径产生的生物效应,因此,口服ＩＦＮ的作用机制和临床应用成为当前免疫学研究的新热点。     

关于植物细胞脱分化的研究概况

关于植物细胞脱分化的研究概况许萍张丕方（复旦大学生物系,上海２００４３３）ＧＥＮＥＲＡＬＡＣＣＯＵＮＴＯＦＳＴＵＤＩＥＳＯＮＤＥＤＩＦＦＥＲＥＮ－ＴＩＡＴＩＯＮＯＦＰＬＡＮＴＣＥＬＬＳＸｕＰｉｎｇＺｈａｎｇＰｉ－ｆａｎｇ（ＢｉｏｌｏｇｙＤｅｐａｒｔｍ...     

乌鳢胃肠内分泌细胞的免疫组织化学研究

乌鳢胃肠内分泌细胞的免疫组织化学研究夏立群,王庆堂（同济医科大学组织胚胎学教研室武汉４３００３０）关键词乌鳢,内分泌细胞,免疫组织化学ＰＡＰ方法ＩＭＭＵＮＯＣＹＴＯＣＨＥＭＩＣＡＬＳＴＵＤＹＯＦＴＨＥＥＮＤＯＣＲＩＮＥＣＥＬＬＳＩＮＴＨＥＧＡＳＴＲＯ...     

人白细胞介素22基因的分离及其在大肠杆菌中的克隆与表达

白细胞介素 2 2 (ＩＬ 2 2 )是 2 0 0 0年发现的一种新的人类细胞因子 ,它在多种组织中均有表达 ,包括胰腺、脑 ,肝、小肠、直肠和肾等 .在功能方面 ,ＩＬ 2 2上调肝细胞急性期产物 ,参与炎症反应[1～ 3] ;诱导胰腺相关蛋白ＰＡＰ1 Ｒｅｇ2和ＯＰＮ的高表达 ,表明ＩＬ 2 2参与胰腺免疫功能反应[4 ] ;它对ＣｏｎＡ刺激下Ｔｈ1细胞ＩＦＮ γ的产生没有明显的抑制作用 ,却大大抑制了Ｔｈ2细胞ＩＬ 4的分泌 ,这对于哮喘有潜在的治疗作用[1] .我们利用反转录ＰＣＲ获得了编码ｈＩＬ 2 2成熟蛋白的ｃＤＮＡ ,并构建了高表达载体ｐＢＶｈＩＬ 2 2 ,…     

肿瘤抗原基因转导树突状细胞的研究进展

树突状细胞 (Ｄｅｎｄｒｉｔｉｃｃｅｌｌｓ ,ＤＣ)是体内功能最强的抗原提呈细胞 ,它们的表面表达主要组织相容性复合物 (ＭａｊｏｒＨｉｓｔｏｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙＣｏｍｐｌｅｘ ,ＭＨＣ)分子和共刺激分子 ,为淋巴细胞的活化提供双信号。ＤＣ活化后分泌ＩＬ - 12、ＩＬ - 18及干扰素等细胞因子刺激辅助型Ｔ细胞 (ＨｅｌｐｅｒＴｃｅｌｌｓ ,ＴＨ)增殖 ,促使ＴＨ0 和ＴＨ2 细胞向ＴＨ1细胞分化 ,并强烈激发ＴＨ1型免疫应答[1] ,从而增强机体的抗肿瘤、抗感染、自身免疫性疾病和移植排斥等细胞免疫反应。应用ＤＣ的抗肿瘤实验主要是…     

虎斑颈槽蛇胸腺APUD细胞的免疫组织化学观察

虎斑颈槽蛇胸腺ＡＰＵＤ细胞的免疫组织化学观察ＴＨＥＩＭＭＵＮＯＨＩＳＴＯＣＨＥＭＩＣＡＬＯＢＳＥＲＶＡＴＩＯＮＯＦＴＨＥＴＨＹＭＩＣＡＰＵＤＣＥＬＬＳＩＮＴＨＥＳＮＡＫＥＲＨＡＢＤＯＰＨＩＳＴＩＧＲＩＮＡＫｅｙｗｏｒｄｓＲｈａｄｂｄｏｐｈｉｓｔｉｇｒ...     

人脑源性神经营养因子cDNA在COS7细胞中的表达及活性研究

本文从质粒Ｍ１３ｍｐ１８－ｈＢＤＮＦ中酶切回收人脑源性神经营养因子（ｈＢＤＮＦ）全长基因,构建真核表达载体ｐＣＭＶ４－ｈＢＤＮＦ。利用脂质体的方法转染ＣＯＳ７细胞,对转染后的ＣＯＳ７细胞提取ＲＮＡ进行狭缝杂交分析和免疫细胞化学反应,分别从转录及翻译水平上检测ＢＤＮＦ基因在ＣＯＳ７细胞中的表达。实验还证实在ＣＯＳ７细胞中表达的ｈＢＤＮＦ蛋白可分泌至胞外并可促进中脑黑质细胞的发育和生长,具有良好的生物学活性。     

饲料能量浓度与蛋白质水平对梅花鹿生长的影响

饲料能量浓度与蛋白质水平对梅花鹿生长的影响ＩＮＦＬＵＥＮＣＥＯＦＥＮＥＲＧＹＤＥＮＳＩＴＹＡＮＤＰＲＯＴＥＩＮＬＥＶＥＬＯＦＣＯＮＣＥＮＴＲＡＴＥＤＦＥＥＤＯＮＧＲＯＷＴＨＯＦＳＩＫＡＤＥＥＲ梅花鹿（Ｃｅｒｖｕｓｎｉｐｐｏｎ）为重要的经济动物之一,...     

家蝇体内卵对CAT的摄入和传代的观察

家蝇体内卵对ＣＡＴ的摄入和传代的观察ＩＮＴＡＫＩＮＧＡＮＤＴＲＡＮＳＭＩＳＳＩＯＮＯＦＩＮＪＥＣＴＥＤＣＡＴＧＥＮＥＢＹＨＯＵＳＥＦＬＹＥＧＧＳ关键词ＣＡＴ基因,家蝇,腹腔注射,基因转移ＫｅｙｗｏｒｄｓＣＡＴ－ｇｅｎｅ,Ｈｏｕｓｅｆｌｙ,Ａｂｄｏｍｉ...     

尖锐湿疣患者皮损中白介素2基因表达的研究

为探讨Ｔｈ１ 反应如白介素２ （ＩＬ－２） 产生在尖锐湿疣（ＣＡ） 发病及消退中的作用。本实验采用逆转录——聚合酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ） 技术检测了ＣＡ患者皮损组织ＩＬ－２ 的基因表达, 实验分为三组： 正常对照组（ｎ＝ １０）, 单纯病例组（ｎ＝ １８） 及γ－ 干扰素（ＩＦＮ－γ） 诱导组（ｎ＝ ６）。结果发现正常皮肤组织未检测到ＩＬ－２ ｍ ＲＮＡ, 在１８ 例单纯病例的ＣＡ患者有２ 例皮损ＩＬ－２ ｍ ＲＮＡ阳性, ６ 例ＣＡ患者注射ＩＦＮ－γ前局部皮损未检测到ＩＬ－２ ｍ ＲＮＡ, 而在皮损内注射ＩＦＮ－γ７２ 小时后有４ 例阳性。研究结果提示了ＩＦＮ－γ可诱导Ｔｈ１ 应答, Ｔｈ１ 应答在抵抗人类乳头瘤病毒（ＨＰＶ） 感染及清除ＨＰＶ中可能起着重要作用, 为临床应用ＩＬ－２ 及ＩＦＮ－γ治疗ＣＡ提供了理论依据。     

对横列型气孔的定义的探讨

对横列型气孔的定义的探讨汪乐原（湖北药检高等专科学校,武汉４３００６４）ＡＤＩＳＣＵＳＩＯＮＯＮＴＨＥＤＥＦＩＮＩＴＩＯＮＳＯＦＤＩＡＣＹＴＩＣＴＹＰＥＷａｎｇＬｅ－ｙｕａｎ（ＨｕｂｅｉＤｒｕｇＣｏｎｔｒｏｌａｎｄＭｅｄｉｃａｌＥｘａｍｉｎａｔｉｏｎ...