角类肥蛛体躯不同部位酯酶同工酶的比较分析

运用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法对角类肥蛛(Lariniodes cornuta)头胸部和腹部的酯酶同工酶酶谱进行了比较分析。结果表明,角类肥蛛的酯酶是单体酶,头胸部和腹部的酯酶酶谱差异显著。腹部的酯酶呈现4个位点:Est-1、Est-2、Est-3、Est-4。Est-1和Est-4位点为纯合基因型,Est-2和Est-3位点为杂合基因型。头胸部的酯酶仅表现出2个位点:Est-2和Est-3,且这2个位点是纯合基因型。不同个体之间头胸部的酯酶没有明显差异,Est-2b和Est-3a可以作为鉴别角类肥蛛的特征酶带;腹部的酯酶则存在明显的个体差异,在Est-2和Est-3位点的基因杂合度为h2=h3=0·4779。由此可见,酯酶同工酶可以作为角类肥蛛遗传变异的分子标记,是研究个体间遗传差异、居群的遗传结构以及种间进化关系的基础。     

大蒜体细胞胚发育分化中特异蛋白和某些生理生化变化（简报）

用改良的MS培养基培养大蒜体细胞胚,获得了稳定且数量较多的成熟胚;用双向电泳分离出5个可能与大蒜胚胎发育有关的特异蛋白质多肽;大蒜酯酶由3个位点的基因控制,其中位点1（Est-1）中的2个复等位基因Est-1e和Est-1f总是连锁表达;位点2种的Est-2b表达产物似可用作大蒜体细胞胚胎发育时期的分子标记;大蒜体细胞胚发生前后,有2个多糖累积高峰,可溶性蛋白的累积仅在球形胚期有1个高峰。     

五唇兰胚胎发生与几种同工酶变化的相关性研究

用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法研究了五唇兰（Phaius tankervilliae Lindl.）授粉后合子形成过程中同工酶的变化情况。结果发现,有些位点在这一发育过程中始终表达,如Est-2、Est-4、AAT-3;球形胚形成时,Est-1、Est-3消失;Pgi-3只在合子形成时出现。同工酶位点的变化说明五唇兰受精后合子的形成是相关基因时序性表达的结果。     

湘西盲高原鳅群体同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)对洞穴鱼类--湘西盲高原鳅(Triplophysa xiangxiensis)群体遗传多样性进行了研究.对其肌肉、心脏、肝脏、脑、脾脏和肾脏等6种组织中的乳酸脱氢酶(LDH)、苹果酸脱氢酶(MDH)、苹果酸酶(ME)、酯酶(EST)、醇脱氢酶(ADH)、谷氨酸脱氢酶(GDH)和葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G-6-PDH)等7种同工酶进行分析,检测到26个座位,其中多态座位4个(Ldh-3、Ldh-4、s-Mdh、m-Mdh),多态座位比例为15.38%,观察杂合度0.0398,预期杂合度0.0411,Hardy-Weinberg遗传偏离指数(D)为-0.0316,存在杂合子缺失.结果表明,湘西盲高原鳅群体群体遗传多样性较低,纯合度较高.     

驼背鲈不同组织5种同工酶表达的差异

运用聚丙烯酰胺垂直梯度凝胶电泳法研究了驼背鲈(Cromileptes altivelis)6种组织(肌肉、心脏、肝脏、肾脏、脑、脾脏)中的5种同工酶(酯酶、乳酸脱氢酶、苹果酸脱氢酶、苹果酸酶、天门冬氨酸氨基转移酶),并对其同工酶位点及其酶谱表型进行了分析。结果表明,驼背鲈的5种同工酶系统具有不同程度的组织特异性。酯酶检测到3条酶带,由3个基因座位编码。乳酸脱氢酶检测到5条酶带,由3个基因座位编码,其中C位点具有组织特异性。苹果酸脱氢酶检测到3条酶带,由1个基因座位编码,6组织均有相同的3条酶带,组织差异性不显著,而且只发现了上清液型,线粒体型的苹果酸脱氢酶没有发现。苹果酸酶有4条酶带,由2个基因座位编码。天门冬氨酸氨基转移酶在6种组织都有发现,只有一条酶带。     

糙皮侧耳乳酸脱氢酶鉴定及其菌丝高温胁迫下表达特征分析

乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）可催化丙酮酸与乳酸（lactic acid,LA）之间的可逆转化，为探索乳酸脱氢酶基因在糙皮侧耳（Pleurotus ostreatus）菌丝体高温胁迫响应中的作用，在糙皮侧耳（P. ostreatus）菌株CCMSSC00389基因组中鉴定获得了8个乳酸脱氢酶编码基因。生物信息学分析结果显示，3个基因编码D型乳酸脱氢酶，5个基因编码L型乳酸脱氢酶。氨基酸序列比对、系统发育、三维结构和亚细胞定位分析显示，3个D型乳酸脱氢酶的同源性较高，可能属于细胞色素C依赖的D型乳酸脱氢酶，D-LDH2和D-LDH3位于线粒体中；5个L型乳酸脱氢酶的氨基酸序列同源性较低，并按电子受体和亚细胞定位的不同分为3个类型。通过检测36℃、40℃高温胁迫下乳酸脱氢酶基因的表达量变化，明确D-ldh3、L-ldh5和L-ldh7表达特征相同，L-ldh6和L-ldh8的表达特征相同，D-ldh1、D-ldh2和L-ldh4则表现出不同的基因表达趋势，表明乳酸脱氢酶基因对不同高温胁迫温度的响应方式存在差异。高温胁迫条件下，乳酸脱氢酶总酶活性降低，胞内乳...     

人精子特异性乳酸脱氢酶结构和功能的计算生物学分析

精子特异性乳酸脱氢酶（lactate dehydrogenase,LDH）,又称乳酸脱氢酶C4（lactate dehydrogenase C4,LDH-C4）,特异性地存在于哺乳动物发育成熟的睾丸组织中,与精子的生成、代谢、获能等有密切关系. 根据GenBank数据库中人LDH-C4氨基酸序列（P07864）,利用PROSITE数据库预测人LDH-C4的功能基序|利用Clustalw2、TreeView1.6.6进行LDH-C4进化树的构建|利用I-TASSER软件预测人LDH-C4的二、三、四级结构以及功能位点. 结果表明：在190~196位有1个LDH活性位点,该位点为脊椎动物各亚型乳酸脱氢酶共有的催化位点,为进化中的1个保守序列|从进化树来看,LDHC和LDHB的亲缘关系比较近|人LDH-C4与小鼠LDH-C4的二级、三级结构具有很高的相似性|LDH-4属乳酸脱氢酶 苹果酸脱氢酶（LDH-MDH）超家族中的LDH-(cd05293）家族的成员,属于NAD依赖性酶,拥有LDH-1家族具备的基本结构特点. 以上结果为研究LDH-C4基因突变对其功能的影响打下基础.     

凝结芽胞杆菌IPE22中乳酸脱氢酶基因的克隆表达与特征分析

Bacillus coagulans IPE22是一株重要的乳酸生产菌,对其乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)基因进行克隆、表达和生物信息学分析十分必要。以B.coagulans36D1序列信息(Gen Bank:CP003056.1)设计引物,PCR扩增获得B.coagulans IPE22中LDH(Bc-LDH)基因,构建重组表达质粒并转化Escherichia.coli BL21(DE3)中进行诱导表达,针对Bc-LDH的氨基酸序列进行生物信息学特征分析。经基因片段核酸电泳分析和SDS-PAGE电泳验证,Bc-LDH基因成功实现克隆表达。Bc-LDH为等电点5.41的亲水性蛋白质,具有多个糖基化和磷酸化位点,二级结构以不规则卷曲,α-螺旋和延伸链为主要结构元件。Bc-LDH具有NADB-Rossmann和Ldh-1-C超家族功能结构域,包含23个氨基酸组成的跨膜结构域,且不同乳酸生产菌中LDH均具有高度保守的活性位点。蛋白质相互作用预测显示,Bc-LDH与细胞内丙酮酸激酶和NAD结合苹果酸蛋白的互作最为密切。     

用蛋白质及同功酶醋酸纤膜电泳法对近交系小鼠进行遗传监测

本文报道了纯系小鼠遗传质量监测的一种简便而精确的方法——蛋白质及同功酶醋酸纤膜电泳法,并用此法检查确定了我国4个近交系小鼠[津白1(TA1)、津白2(TA2)、615和AMMS1]在Hbb(血红蛋白β链)、Es-1(血清酯酶-1)、Es-2(血清酯酶-2)、Es-3(肾酯酶-3)、Id-1(异柠檬酸脱氢酶-1)和Ldr-1(乳酸脱氢酶调节体-1)6个位点等位基因的分布。同时对我国常用的9个品系共15个封闭群的纯系小鼠在以上6个位点生化标记基因的纯合程度也进行了检查,发现两个封闭群有3个位点的标记基因发生变异。最后对检查结果和方法进行了探讨。     

三个品种豚鼠血液蛋白多态性的比较分析

目的比较分析白毛黑眼（WHBE）豚鼠和DHP豚鼠、花色豚鼠三个品种豚鼠在13个血液蛋白位点上的多态性。方法采用垂直板浓度和pH均不连续的聚丙烯酰胺凝胶电泳法对WHBE豚鼠、DHP豚鼠和花色豚鼠的66只个体的后白蛋白（Po）、前转铁蛋白1（Prt1）、前转铁蛋白2（Prt2）、转铁蛋白1（Tf1）、转铁蛋白2（Tf2）、后转铁蛋白（Ptf）、慢α球蛋白（Sag）、红细胞酯酶（Es）、血清酯酶1（Est1）、血清酯酶3（Est3）、血红蛋白α（Hbα）、血红蛋白β（Hbβ）和白蛋白（Alb）共13个蛋白位点进行了电泳及染色,再利用电泳图谱对各蛋白位点基因频率、平均杂合度和遗传距离进行计算,然后结合聚类分析。结果 Tf1、Tf2、Ptf、Est1和Es在三个豚鼠品种中表现为多态,其中Tf1可作为识别WHBE豚鼠的遗传标记。Po、Prt1、Prt2、Sag、Est3、Hbα、Hbβ和Alb等位点在三个豚鼠品种中的表型一致。Hardy-Weinberg平衡状态分析表明,Es为DHP豚鼠的高度不平衡位点。Ptf为花色豚鼠的高度不平衡位点。在WHBE豚鼠中,Tf1为高度不平衡位点,Est1为不平衡位点。在三个豚鼠品种中,所检测的13个蛋白位点的平均杂合度的排列顺序为：花色豚鼠（0.350 1）〉WHBE豚鼠（0.339 0）〉DHP豚鼠（0.313 5）。聚类分析结果表明,花色豚鼠和WHBE豚鼠的遗传遗传距离最近（0.064 3）,DHP豚鼠与花色豚鼠的遗传距离最远（0.179 2）。结论利用这些蛋白位点可以有效鉴别WHBE豚鼠、DHP豚鼠和花色豚鼠血液蛋白的遗传多态性。