非钙依赖性磷脂酰胆碱特异的磷脂酶C与肝癌γ-GT的关系

非钙依赖性磷脂酰胆碱特异的磷脂酶Ｃ与肝癌γ┐ＧＴ的关系吴兴中卢虹（上海医科大学生物化学教研室,上海２０００３２）关键词磷脂酰胆碱特异的磷脂酶Ｃ;γ－谷氨酰转肽酶;肝细胞肝癌磷脂酶Ｃ在细胞信息传递过程中起重要作用,磷脂酰肌醇特异的磷脂酶Ｃ（ＰＩ－ＰＬＣ...     

磷脂酰胆碱特异性磷脂酶C的研究

随着人们对信号转导认识的逐步加深,各种磷脂酶在信号通路中的作用也日渐受到重视,并日趋明了。其中磷脂酶Ａ２（ＰＬＡ２）、磷脂酰胆碱特异性磷脂酶Ｄ（ＰＣ－ＰＬＤ）的基因已克隆,对磷脂酰肌醇特异性磷脂酶Ｃ（ＰＩ－ＰＬＣ）也有较深了解,而对磷脂酰胆碱特异性磷...     

异搏定对小鼠肝癌腹水瘤细胞系PI—PLC活性的影响

本文采用６１５近交系小鼠肝癌腹水瘤Ｈｃａ－Ｆ２５ＣＬ－Ａ２细胞,测定钙拮抗剂异搏定作用前后磷脂酰肌醇特异的磷脂酶Ｃ（ＰＩ－ＰＬＣ）活性的变化,并与同样处理的瘤株内钙恒稳的有关指标相比较。结果表明经异搏定处理后的Ａ２细胞ＰＩ－ＰＬＣ活性显著降低,并在钙恒稳的指标基本呈现相应的平等变化趋。提示ＰＩ－ＰＬＣ可能参与肿瘤细胞内钙恒稳的变化过程,异搏定的作用可能与磷脂酰肌醇信号传导系统相关。     

磷酸－Tyr－Sepharose吸附法测定HL－60细胞中磷脂酰肌醇－3－激酶

 磷酸－Ｔｙｒ－Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ吸附法测定ＨＬ－６０细胞中磷脂酰肌醇－３－激酶黄才,梁念慈（广东医学院医用生化研究所,湛江５２４０２３）磷脂酰肌醇－３－激酶（ＰＩ－３－Ｋ）催化磷脂酰肌醇（ＰＩ）和磷脂酰肌醇－４－磷酸（ＰＩ－４－Ｐ）的磷酸化分别生成磷...     

黄瓜细胞中水杨酸的信号传递研究

应用放射性标记、薄层层析和阴离子交换柱层析技术,证明黄瓜（ＣｕｃｕｍｉｓｓａｔｉｖａＬ．）细胞中存在肌醇脂质信使系统,并且水杨酸（ＳＡ）能够促进肌醇磷脂代谢,激活磷脂酶Ｃ（ＰＬＣ）,促进磷脂酰肌醇降解,导致第二信使肌醇１,４,５三磷酸（ＩＰ３）和双酰甘油（ＤＡＧ）含量增加,表明ＳＡ信号传递有可能通过肌醇脂质信使系统的介导来完成。ＳＡ的生理功能尤其在诱导植物抗病性中的作用很可能是通过肌醇脂质信使系统介导的。     

糖基磷脂酰肌醇专一的磷脂酶D

糖基磷脂酰肌醇专一的磷脂酶Ｄ余明琨,龚隽（中国科学技术大学研究生院北京１０００３９）关键词糖基磷脂酰肌醇－磷脂酶Ｄ,糖基磷脂酰肌醇锚蛋白８０年代中期,Ｍ,Ｃ．Ｌｏｗ和Ｍ,Ａ．Ｄａｖｉｔｚ等阐明了蛋白质漂浮在双脂膜“海洋”上的一种独特形式。这种形式是蛋...     

胰岛素介体产生机制的探讨

胰岛素介体－肌醇磷酸多糖,被认为是胰岛素的第二信使,存在于细胞膜上的糖肌醇磷脂是产生该介体的前体,经胰岛素或磷脂酰肌醇特异性的磷脂酶Ｃ（ＰＩＰＬＣ）水解,产生介体和二酰甘油（ＤＧ）。本实验以人红细胞为材料,用＾３Ｈ同位素标记、有机溶剂提取、薄层层析及放射性自动计数等方法,分析胰岛素或ＰＩＰＬＣ作用于红细胞后前体和ＤＧ的变化情况,以推测介体的产生机制。结果显示：胰岛素使红细胞膜上及释放至胞外上清的前     

磷脂酶C-γ2与信号转导

细胞间信息传递及细胞外信号对靶细胞的调控,多年来一直是生物学和医学界研究的焦点。随着Ｃａ２＋和二酰基甘油（ｄｉａｃｙｌｇｌｙ－ｃｅｒｏｌ,ＤＡＧ）第二信使地位的确定,对磷脂酶Ｃ（ＰＬＣ）的研究引起了人们的关注。ＰＬＣ可水解磷脂酰肌醇４,５－二磷酸（ｐｈｏｓ－ｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ４,５－ｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ＰＩＰ２）产生肌醇１,４,５－三磷酸（ｉｎｏｓｉｔｏｌ１,４,５－ｔｒｉｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ＩＰ３）和ＤＡＧ。ＩＰ３可导致细胞内储存Ｃａ２＋的释放。因此,ＰＬＣ处于Ｃａ２＋和Ｄ…     

磷酸脂酶C—γ的信号传递研究进展

信号分子磷脂酶C－γ（PLC－γ）被蛋白酪氨酸酶（PTK）激活催化水解磷脂酰肌醇4,5－二磷酸（PIP2）生成第二信使分子肌醇三磷酸（IP3）和二酰基甘油（DAG）,参与受体酪氨酸激酶（RTK）介导的细胞分列、抗原与免疫细胞受体结合引起免疫反应及卵细胞受精等过程中的信号传递。     

诱发肝癌过程中脂类和磷脂酶动态变化的相关性

研究了二乙基亚硝胺诱发大鼠肝癌过程１,２－甘油二酯（ＤＡＧ）,磷脂和磷脂酶的动态变化及其相互关系,高效薄层层析发现肝中ＤＡＧ在第８周出现第一高峰,以后维持高于正常的水平,１４周进一步增高,但以后下降,磷脂组分测定发现只有磷脂酰胆碱（ＰＣ）和肌醇磷脂类（ＰＩｓ）在诱癌过程中降低,有可能成为ＤＡＧ的来源,但ＰＣ可能是主要的,因ＰＩｓ减少的量远小于ＤＡＧ增加的量,进一步用酶偶联比色法测定ＰＣ专一性磷脂酶     

GM_3抑制人白血病J6－2细胞肌醇磷脂代谢循环

采用无载体￣（３２）Ｐ和［￣３Ｈ］肌醇标记磷脂,观察了促分化剂神经节苷脂ＧＭ＿３对人单核样白血病Ｊ６－２细胞肌醇磷脂代谢的影响,ＧＭ＿３抑制［￣（３２）Ｐ］Ｐｉ和［￣３Ｈ］肌醇掺入Ｊ６－２细胞磷脂酰肌醇（ＰＩ）,促进［￣（３２）Ｐ］Ｐｉ和［￣３Ｈ］肌醇掺入磷脂酰肌醇－４,５－二磷酸（ＰＩＰ＿２）,抑制［￣（３２）Ｐ］Ｐｉ掺入磷脂酸（ＰＡ）,抑制［￣３Ｈ］肌醇掺入三磷酸肌醇（ＩＰ＿３）．ＧＭ＿３的上述作用均为浓度依赖性的,随ＧＭ＿３浓度的提高而增强．上述结果表明,ＧＭ＿３抑制Ｊ６－２细胞的肌醇磷脂代谢循环．     

DOPE、DOPC对重组去脂肌质网Ca~(2+)-ATPase活力和构象的影响

经磷脂酶Ａ２ 去脂的肌质网Ｃａ２ ＋ － ＡＴＰａｓｅ 重组于不同比例的二油酰磷脂酰胆碱（Ｄｉｏｌｅｏｙｌｐｈｏｐｈａｔｉｄｙｌｃｈｏｌｉｎｅ,ＤＯＰＣ） 和二油酰磷脂酰乙醇胺（Ｄｉｏｌｅｏｙｌｐｈｏｐｈａｔｉｄｙｌｅｔｈａｎｏｌａｍｉｎｅ,ＤＯＰＥ） 形成脂酶体,研究了不同磷脂环境中Ｃａ２ ＋ － ＡＴＰａｓｅ 的ＡＴＰ 水解和Ｃａ２ ＋ 转运活力。结果表明,ＤＯＰＣ 和ＤＯＰＥ 分别有利于ＡＴＰ 水解和Ｃａ２ ＋ 的转运,ＤＯＰＥ 可以增强Ｃａ２ ＋ － ＡＴＰａｓｅ 的ＡＴＰ水解和Ｃａ２ ＋ 转运之间的偶联效率。利用内源荧光、荧光淬灭及Ｆｏｒｓｔｅｒ 能量转移原理测定Ｃａ２ ＋ －ＡＴＰａｓｅ 相应的构象变化, 发现随着ＤＯＰＥ／ ＤＯＰＣ 比例的改变使Ｃａ２ ＋ － ＡＴＰａｓｅ 构象发生相应的变化。     

人参茎叶皂甙对创伤小鼠活化T细胞内磷脂酰肌醇代谢的影响

研究了人参茎叶皂甙（ＧＳＬ）对创伤小鼠活化Ｔ细胞内磷脂酰肌醇代谢的影响。结果显示,ＧＳＬ体内应用（５０ｍｇ·ｋｇ￣（－１）·ｄ￣（－１）,伤后０─３ｄ）对创伤小鼠活化Ｔ细胞内三磷酸肌醇（ＩＰ＿３）、游离Ｃａ￣（２＋）、钙调素（ＣａＭ）、ＣａＭ依赖的蛋白激酶（ＣａＭ－Ｐｋ）、蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）水平的降低具有明显的逆转效应,并可明显降低创伤小鼠血清、巨噬细胞、Ｔｓ细胞对各指标的抑制活性。ＧＳＬ（１．０─１００ｍｇ／Ｌ）在体外也可明显提高创伤小鼠活化Ｔ细胞内ＩＰ＿３、Ｃａ￣（２＋）、ＣａＭ、ＣａＭ－ＰＫ及ＰＫＣ水平。上述结果表明,ＧＳＬ可逆转创伤小鼠活化Ｔ细胞内磷脂酰肌醇代谢的降低。     

槲皮素对完整HL-60细胞中肌醇磷脂转换的抑制作用

槲皮素对完整ＨＬ┐６０细胞中肌醇磷脂转换的抑制作用康铁邦梁念慈（广东医学院医用生化研究所,湛江５２４０２３）肌醇磷脂信使系统在生物信号的跨膜传递方面起重要作用,并与细胞增殖及肿瘤形成有密切联系［１～５］,有报道：肿瘤细胞或组织中磷脂酰肌醇４－激酶（Ｐ...     

佛波酯促进CRBH7919细胞中磷脂酰胆碱水解及其酶学基础

用佛波酯（佛波醇－１２－豆蔻酸－１３－乙酸酯,ＰＭＡ）作用大鼠咒９细胞,发现ＰＭＡ能促进ＣＲＨＢ７９１９细胞中磷脂酰胆碱（ＰＣ）水解,此效应出现在ＰＭＡ作用细胞１５分钟后,且具有ＰＭＡ浓度依赖性。分析ＰＣ水解产物,发现ＰＣ主要水生成胆碱而不是磷酸胆是一步测定膜结合磷脂酰胆碱专一性的磷脂酶Ｄ（ＰＣ－ＰＬＤ）活性,结果显示１００ｎｍｏｌ／ＬＰＭＡ作用细胞１０分钟即激活ＰＣ－ＰＬＤ,至３０分钟ＰＣ－ＰＬ     

磷脂酶A2的生理机能新说

磷脂酶Ａ２的生理机能新说杜晓燕周元聪（中国科学院上海生物化学研究所,上海２０００３１）关键词磷脂酶Ａ２生理机能磷脂酶Ａ２（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＡ２,ＥＣ３．１．１．４）,简称ＰＬＡ２。它能水解甘油磷脂的第二位酯酰键,生成溶血磷脂和脂肪酸,如下式...     

蛋白激酶和D—鞘氨醇对人肝癌细胞磷脂酶D活力的调节

为了研究蛋白激酶Ｃ（ＰＫＣ）和酪氨酸激酶（ＴＰＫ）对７７２１人肝癌细胞中磷脂酰胆碱（ＰＣ０专一性磷脂酶Ｄ（ＰＬＤ）的调节,测定了各种ＰＫＣ和ＴＰＫ抑制剂和ＰＫＣ抗体对该细胞中ＰＬＤ活力的影响。结果发现：４种ＰＫＣ抑制剂Ｃｈｅｌｅｒｙｔｈｒｉｎｅ,Ｈ－７,ＣａｌｐｈｏｓｔｉｎＣ和星形孢菌素（Ｓｔａｕｒｏｓｐｏｒｉｎｅ）,以及２种ＴＰＫ抑制剂Ｔｙｒｐｈｏｓｔｉｎ４６和木质异黄酮（Ｇｅｎｉｓｔｅｉｎ）ｆ     

儿茶素诱导的拟南芥根细胞膜脂变化

儿茶素是一种可以短时间内杀死植物细胞的植物毒素,由于具有强的植物毒性,儿茶素是开发除草剂的理想化合物,它可以诱导植物根系统的死亡。为了研究植物根细胞膜脂对化学胁迫的响应规律,我们运用高通量的脂类组学方法检测了拟南芥根中膜脂分子的组成,比较了儿茶素处理下拟南芥野生型（WS）及磷脂酶Dδ缺失突变体（PLDδ KO）根中膜脂分子的组成情况、膜脂含量、双键指数及碳链长度值。结果发现,儿茶素处理拟南芥根90min后,二半乳糖基二酰甘油（DGDG）、单半乳糖基二酰甘油（MGDG）、磷脂酰甘油（PG）、磷脂酰胆碱（PC）及磷脂酰肌醇（PI）的总含量在WS与PLDδ KO植株根中都显著下降,磷脂酰乙醇胺（PE）和磷脂酰丝氨酸（PS）在WS中下降,在PLDδ KO中上升。儿茶素处理导致PLDδ KO植株的PC/PE比值显著下降,WS植株PS碳链长度显著增加。上述结果说明儿茶素处理后,磷脂酶Dδ缺失突变体膜不稳定性增加,PLDδ KO植株对儿茶素胁迫更加敏感。     

异搏定对小鼠肝癌腹水瘤细胞系PI-PLC活性的影响

本文采用615近交系小鼠肝癌腹水瘤H_(ca)-F_(25)/CL-A_2细胞,测定钙拮抗剂异搏定作用前后磷脂酰肌醇特异的磷脂酶C(PI-PLC)活性的变化,并与同样处理的瘤株内钙恒稳的有关指标相比较。结果表明经异搏定处理后的A_2细胞PI-PLC活性显著降低,并与钙恒稳的指标基本呈现相应的平行变化趋势。提示PI-PLC可能参与肿瘤细胞内钙恒稳的变化过程,异搏定的作用可能与磷脂酰肌醇信号传导系统相关。     

G蛋白－肌醇磷脂途径及其与高血压的关系

作为第二信使的三磷酸肌醇（ｉｎｏｓｉｔｏｌ－１,４,５－ｔｒｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ＩｎｓＰ３）主要经２种途径形成：Ｇ蛋白偶联受体和酪氨酸激酶偶联受体。两类受体激活各自相应的磷脂酶Ｃ（ｐｈｏｓｐｈｏｌｉｐａｓｅＣ,ＰＬＣ）而水解磷脂酰肌醇－４,５－二磷酸（ｐｈｏｓｐｈａｔｉｄｙｌｉｎｏｓｉｔｏｌ－４,５－ｂｉｓｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ＰｔｄＩｎｓ４．５Ｐ２）形成ＩｎｓＰ３和二酯酰甘油（ｄｉａｃｙｌｇｌｙｃｅｒｏｌ,ＤＧ）。ＩｎｓＰ３形成后动员储存钙和促进外源性钙内流。近年来的研究证实,Ｇｑ是调节ＰＬＣ－β１活性的特导性Ｇ蛋白,Ｇｑ系列α亚单位包括Ｇαｑ、Ｇα１１、Ｇα１４、Ｇα１５和Ｇα１６。高血压的重要病理基础是动脉血管壁的痉挛和增殖,许多血管活性物质可以促使血管平滑肌细胞的收缩和增生,同时伴有细胞内ＩｎｓＰ３产生增加．但高血压并不能造成Ｇｑ量的持续改变。