六种鼠乳酸脱氢酶和超氧化物歧化酶位点变异的研究

用电泳比较分析了鼠科动物６个种的组织ＬＤＨ同工酶的Ａ、Ｂ、Ｃ亚基和ＳＯＤ同工酶位点的种属差异。结果表明,ＬＤＨ的Ａ和Ｂ亚基在进化上的可变性程度不同。在被分析的２个属共６种鼠中,首次发现Ｂ亚基的结构具有属的特征,同属的鼠种Ｂ亚基泳动度相同,在垂直凝胶电泳板上处于同一泳动线上。不同属的鼠其Ｂ亚基泳动度不同,家鼠属的鼠Ｂ亚基比姬鼠属的泳动快;Ａ亚基的结构既有属的特性,更具有种的特征,同属不同种的鼠Ａ亚基泳动速度不同,表现为ＬＤＨ同工酶带的间距不同。ＬＤＨ的Ｃ亚基结构因鼠种不同而异,由Ｃ亚基组成的ＬＤＨ－Ｘ带黄毛鼠位于自身的ＬＤＨ－３和ＬＤＨ－４之间,社鼠和褐家鼠此带位于自身的ＬＤＨ－４和ＬＤＨ－５之间,白腹巨鼠此带位于自身的ＬＤＨ－５以外的阴极端,与黑线姬鼠此带的位置特征相同。ＳＯＤ同工酶带只表现种的差异,其３条带泳动速度的改变具有协同而变的共同特点。被分析的鼠种经配对法比较生化特征的相同程度,初步表明黄毛鼠亲缘上与褐家鼠比较近,白腹巨鼠亲缘上又比其余３种鼠更近于姬鼠属。     

六种鼠组织中过氧化物酶和酯酶变异的比较

本文研究姬鼠属（Ａｐｏｄｅｍｕｓ）２种鼠和鼠属（Ｒａｔｕｓ）４种鼠的心组织过氧化物酶和肝组织酯酶同工酶等位基因的变异。结果表明,６种鼠心组织过氧化物酶皆为４条区带,其中社鼠和白腹巨鼠的酶带泳动速度略快于褐家鼠和黄毛鼠的酶带;鼠属４种鼠的酶带间距大致相同,而姬鼠属的酶带间距略大于鼠属,这种谱型的区别就所分析的６种鼠而言,可以认为是该同工酶表现的属间区别。肝组织酯酶区带较多,其酶带数和泳动速度的差异具有明显的种间特征;泳动最快的酶带在姬鼠中是２条,在鼠属中是１条,可以认为是属间特征的区别。从９项生化指标的异同作动物配对比较,表明褐家鼠与黄毛鼠亲缘上较近,社鼠与白腹巨鼠亲缘上也较近,而且白腹巨鼠在进化上可能要比其余３种鼠属动物更接近于姬鼠属     

三种鼠科动物血浆超氧化物歧化酶和乳酸脱氢酶以及血浆蛋白成分的比较分析

本文利用SOD和LDH在一块凝胶板上同时显色的优点,电泳分析黑线姬鼠(Apodemus agrarius)、褐家鼠(Rattus norvegicus),黄胸鼠(Rattus flavipectus)血浆SOD和LDH同工酶以及血浆蛋白成分。结果表明,LDH为有色区带,SOD为无色透明区带,而且SOD比LDH泳动快,两类区带互不重迭,以致3种鼠血浆中SOD和LDH的图谱清晰可辨。由于黑线姬鼠的SOD和LDH的泳动度不同于其余2种鼠,周此3种鼠的图谱各具特征。3种鼠血浆蛋白中的前清蛋白和铁传递蛋白区带数和泳动度亦具有明显差异,说明上述酶分子亚基和血浆蛋白分子的化学结构不同,成为种间差异在分子水平上典型的表现。     

玉米苹果酸脱氢酶基因的分离与结构分析

以一个玉米（ＺｅａｍａｙｓＬ．）杂种一代超亲表达的ｃＤＮＡ片段为探针,从玉米幼苗期ｃＤＮＡ文库中筛选到一个全长１２８７ｂｐ的ｃＤＮＡ克隆。序列分析表明,该ｃＤＮＡ编码细胞质苹果酸脱氢酶,推导的氨基酸序列与龙须海棠（Ｍｅｓｅｍｂｒｙａｎｔｈｅｍｕｍ　ｃｒｙｓｔａｌｌｉｕｍ　Ｌ．）及拟南芥（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓ　ｔｈａｌｉａｎａ（Ｌ．）Ｈｅｙｎｈ．）同一编码基因的氨基酸序列同源性分别为９０％和８４％。这是禾谷类作物中首次克隆的编码细胞质苹果酸脱氢酶的完整基因。     

西方蜜蜂六个亚种苹果酸脱氢酶Ⅱ基因的遗传差异

研究了西方蜜蜂Apis mellifera 6亚种-浙农大1号意蜂（ZND A. m. ligustica）、东北黑蜂（A. m. ssp.）、卡尼鄂拉蜂（A. m. carnica）、喀尔巴阡蜂（A. m. carpatica）、高加索蜂（A. m. caucasica）和乌克兰蜂（A. m. acervorum）苹果酸脱氢酶Ⅱ的基因型频率、基因频率和杂合纯合度。浙农大1号意蜂、喀尔巴阡蜂和高加索蜂的纯合度较高,但浙农大1号意蜂等位基因c频率最高,喀尔巴阡蜂等位基因b频率最高, 高加索蜂等位基因a频率最高;东北黑蜂、卡尼鄂拉蜂和乌克兰蜂是高度杂合的亚种,但东北黑蜂等位基因a、b、c的频率差异较小,卡尼鄂拉蜂和乌克兰蜂主要存在a、c两个等位基因,b出现频率很小;6亚种的基因型频率、基因频率和杂合纯合度都有极显著差异。这些差异将从遗传和生化角度为西方蜜蜂6个亚种的鉴别提供依据。     

深黄被孢霉苹果酸脱氢酶基因的克隆和表达

目的 通过对深黄被孢霉（Mortierella isabellina）M6-22中MDH基因的分离鉴定,为深入了解苹果酸脱氢酶（MDH）的生理特性、结构和功能奠定基础,并进一步探讨生物体中MDH的代谢作用。方法 通过基因克隆的方法以深黄被孢霉的cDNA为模板,PCR扩增获得苹果酸脱氢酶基因MIMDH1。结果 测序结果显示该序列长990 bp,分别编码329个氨基酸。序列分析表明该序列与瓜笄霉菌（Choanephora cucurbitarum）MDH的相同性高达77%。将MIMDH1片段连接到表达载体pET32a(+)中构建重组表达质粒pET32aMIMDH1并转化至大肠埃希菌BL21中诱导表达,SDS-PAGE电泳检测在50 kD左右有一条蛋白表达条带,经镍柱亲和层析纯化和酶活分析结果显示所纯化的重组蛋白酶活高达379.28 U/mg。结论克隆的cDNA序列MIMDH1是一个新的苹果酸脱氢酶基因,所编码的蛋白具有MDH的活性。     

甘蔗细胞质型苹果酸脱氢酶基因的克隆及其表达分析

对甘蔗(Saccharum officinarum L.)叶片全长cDNA文库进行测序,获得了1个细胞质型苹果酸脱氢酶(cMDH)基因的全长cDNA序列,命名为Sc-cMDH。生物信息学分析表明,该基因全长1314 bp,开放阅读框为999 bp,编码332个氨基酸。Sc-cMDH与其他植物cMDH的氨基酸序列同源性高达86.5%～97.0%。Sc-cMDH包含典型的NAD+结合基元T11GAAGQI17和催化基元I184WGNH188,还有相当保守的6个半胱氨酸残基,因此推断该基因为细胞质型NAD-MDH。定量PCR分析结果表明,该基因在甘蔗叶片和根中的表达量高于茎。     

西葫芦(Cucurbita pepo L.)花粉壁和非壁蛋白中苹果酸脱氢酶的研究

西葫芦(Cucurbita pepo L.)花粉的壁蛋白和非壁蛋白中都存在苹果酸脱氢酶(EC 1.1-1.37)。壁蛋白苹果酸脱氢酶对OAA的K_m值为30.3μM,最适pH值为8.0。非壁蛋白苹果酸脱氢酶对OAA的K_m值为83.3μM,最适pH值为8.5。在0.05～0.3 M氯化钠浓度范围内,壁蛋白苹果酸脱氢酶和非壁蛋白苹果酸脱氢酶的活性都受到抑制。这种抑制作用随氯化钠浓度提高而增强。0.2 M氯化钾对酶活性的抑制作用与0.2 M氯化钠的抑制作用完全相同。0.1～0.8 M的蔗糖对壁蛋白苹果酸脱氢酶和非壁蛋白苹果酸脱氢酶活性也具有抑制作用。     

温度对蜥蜴血红蛋白及血浆总蛋白浓度的影响

研究在不同实验温度下驯化的荒漠沙蜥（Ｐｈｒｙｎｏｃｅｐｈａｌｕｓ）和密点麻蜥（Ｅｒｅｍｉａｘ　ｍｕｌ－ｔｉｏｃｅｌｌａｔａ）的血红蛋白浓度、血浆总蛋白浓度以及血浆清蛋白与球蛋白比例的变化，结果表明；在５℃下驯化的两种蜥蜴的血红蛋白浓度都很低；而在１５℃～３０℃之间驯化的蜥蜴血红蛋白浓度较高且比较稳定；３５℃时蜥蜴的血红蛋白浓度则下降。在同温度下密点麻蜥的血红蛋白浓度高于荒漠沙蜥。同种蜥蜴中，雄性的血红蛋白浓度高于雌性。两种蜥蜴的血浆总蛋白浓度均随驯化温度的升高而增加；荒漠沙蜥在２５℃、密点麻蜥在２０℃～２５℃时，血浆清蛋白与球蛋白的比例基本相等，高于或低于此温度时，清蛋白的比例上升，球蛋白的比例则下降。     

臭鼩酯酶和苹果酸脱氢酶同工酶的电泳研究

用聚丙烯酰胺凝胶薄层(o.5毫米)等电聚焦电泳分析了臭鼩(Suncus m．murinus) 心肌、骨骼肌、肾脏、脾脏、肝脏和脑6种组织器官的酯酶和苹果酸脱氢酶同工酶。结果表明臭鼩6种组织的酯酶同工酶分别具有11—24条酶带,存在着明显的组织特异性。实验还发现其酯酶同工酶存在异型酶。臭鼩6种组织的苹果酸脱氢酶同工酶则未发现存在明显的组织特异性。     

野生大家鼠和实验大白鼠血红蛋白和乳酸脱氢酶同工酶的比较研究

本文对野生大家鼠（Ｒａｔｕｓｎｏｒｖｅｇｉｃｕｓ）和Ｗｉｓｔａｒ品系实验大白鼠的血红蛋白（Ｈｂ）及组织的乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶进行了电泳分析,结果表明,两种鼠均表现了Ｈｂ的多态性,其中ＨｂＩ型都含有８个成分,各成分的泳动率相同。两种鼠的心脏ＬＤＨ同工酶都含有ＬＤＨ１,ＬＤＨ２,ＬＤＨ３和ＬＤＨ５,而且各谱带泳动率相近似,其余组织ＬＤＨ谱带泳动率有明显的差异,表现了组织和种（或品系）的特异性。从电泳图谱上发现Ｗｉｓｔａｒ大鼠ＬＤＨ５（Ａ或Ｍ亚基纯合体）出现亚带,而ＬＤＨ１（Ｂ或Ｈ亚基纯合体）则未发现,可确定变异是由于Ａ或Ｍ亚基位点发生突变,出现等位基因而导致。对褐家鼠的ＬＤＨ４出现亚带也进行了讨论     

基于SOD和EST同工酶的19种苔藓植物种间关系排序分析

采用聚丙烯酰胺凝胶电泳的方法, 获得了金华北山苔藓植物19 个种之间酯酶(EST)、超氧化物歧化酶(SOD)的同工酶酶谱。将19 个种苔藓植物的酶谱进行量化后, 采用主成分分析(PCA)方法, 比较了19 个种种间关系的差异特点。研究表明, 苔藓植物具有很高的遗传多样性, 以同工酶酶谱资料为基础, 应用主成分分析方法能够比较直观和有效地反映出苔藓植物分类群间的系统关系。     

磁处理水对鲫鱼血清蛋白和乳酸脱氢酶同工酶的影响

本试验采用聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,比较分析了经磁处理水饲养的鲫鱼血清蛋白谱带和ＬＤＨ同工酶谱带。结果表明：其血清蛋白和乳酸脱氢酶（ＬＤＨ）同工酶的电泳谱带与对照相比有明显差异。血清蛋白谱带平均变化率为３２．５％,ＬＤＨ同工酶谱带平均变化率为１０％。两种谱带均以饲养１０ｄ的变化率最高。结果提示了磁处理水对鲫鱼最佳影响时期。     

硫胺素水平对团头鲂幼鱼生长、肝组织沉积量及血液生化指标的影响

为研究硫胺素对团头鲂幼鱼生长、组织沉积量和血液生化指标的影响,试验采用单因素浓度梯度设计,配制了6组等氮等能的半纯合饲料,各组硫胺素含量分别为0、0.51、0.98、1.59、2.13和2.68 mg/kg。选取团头鲂幼鱼720尾[初重为（0.30±0.01）g],按随机原则分为6组,每组4重复,各重复30尾,日投饵3次,饲喂8周后采集样品。结果表明,与对照组相比,0.98、1.59、2.13、和2.68 mg/kg添加组的增重率和特定生长率均显著提高（P < 0.05）。1.59和2.13 mg/kg硫胺素添加组的成活率显著高于对照组（P < 0.05）。随着饲料中硫胺素含量的升高,血浆葡萄糖含量呈现先下降后上升的趋势,血浆葡萄糖水平在1.59 mg/kg时为最小值（P < 0.05）。对照组与0.51 mg/kg硫胺素组相比血浆中丙酮酸含量差异不显著,但显著高于其他试验组（P < 0.05）。以团头鲂幼鱼的增重率和肝脏硫胺素沉积量为评价指标,进行双折线回归分析,饲料中硫胺素适宜添加水平分别为1.48和1.84 mg/kg。     

高原鼠兔褐色脂肪组织成分及功能的季节动态

本文研究了高原鼠兔(Ochotona curzoniae)褐色脂肪组织(BAT)的化学组成及BAT线粒体蛋白含量的季节性变化。结果表明:BAT脂肪含量春季最高,夏季最低;水分含量则夏季显著高于春冬季,蛋白含量冬季最高,夏季较低;BAT线粒体蛋白含量春冬季高于夏秋季。在季节性环境驯化过程中,随着温度降低,BAT功能活性增强,有利于动物的生存适应。