植物小孢子母细胞减数分裂过程中胼胝质染色的新方法

利用改良苯酚品红-苯胺蓝压片法, 观察小孢子母细胞减数分裂过程中胼胝质的动态变化。使用该方法简便、快速且省时, 获得的照片颜色鲜艳, 细胞质呈红色, 染色体为深红色, 胼胝质呈黄绿色荧光, 对比明显, 有三维效果。单用改良苯酚品红染液对新鲜材料进行压片, 在蓝光激发下, 细胞质与染色体呈红色荧光, 染色体清晰。实验结果表明, 改良苯酚品红染液可作为荧光染料代替DAPI及H33258等昂贵的核染料, 从而降低实验成本。     

用苯胺蓝压片法观察小孢子和雄配子体发育过程中胼胝质的动态

被子植物有性生殖过程中,大小孢子与雌雄配子体间的转化出现胼胝质壁,已有大量的报道。胼胝质壁的出现对大小孢子的独特分化、转向配子体是必须的,但至目前对于胼胝质消长过程中控制机制仍不明确,进一步的研究是必要的。Rodkiewicz(1970),Kuran(1972)用苯胺蓝对胼胝质的专性反应,在紫外光激发下发出黄绿色荧光来检     

用改良苯酚品红染色液替代醋酸洋红染色液的研究

以往在动物遗传学实验“果蝇唾液腺染色体标本的制作和观察”中,采用醋酸洋红染色液对染色体染色。本文对用改良苯酚品红染色液替代醋酸洋红染色液对果蝇唾液腺染色体染色的问题进行了研究。结果表明,改良苯酚品红染色液对果蝇唾液腺染色体的染色效果与醋酸染洋红染色液的染色效果是相同的。而且用改良苯酚品红染色液还人提高工效,简易节约的优点。因此认为,在对果蝇唾液腺染色体染色中,用改良苯酚品红染色液替代酸酸洋红染色液     

黑麦小孢子母细胞形成和发育过程中细胞胼胝质壁合成的变化

结合戊二醛-饿酸固定,环氧树脂包埋,苯胺蓝-DAPI染色和荧光显微镜观察。研究了黑麦小孢子母细胞的发育过程及其细胞胼胝质壁合成的变化。结果发现,黑麦花药中胼胝质的合成最早出现在造孢细胞晚期,并首先在小孢子囊中央的造孢细胞中沉积,随后向小孢子囊两端的细胞扩展,随着花药的发育,胼胝质在小孢子囊中央的造孢细胞中大量积累并解本,而且,小孢子囊中央的细胞与邻近绒毡层排列的造孢细胞分离并逐渐消失。紧靠绒毡层排列的造孢细胞最后转变成花粉母细胞,经减数分裂,形成小孢子,本研究对胼胝质的功能和形成的机制进行了讨论。     

枸杞胼胝质酶基因克隆及在雄性不育材料中的表达分析

以雄性不育枸杞‘宁杞5号’和正常可育枸杞‘宁杞1号’为材料,提取不同发育时期枸杞花蕾RNA,反转录合成cDNA,利用胼胝质酶的β-1,3-葡聚糖酶属性进行同源克隆和半定量RT-PCR分析.结果表明:(1)所克隆的胼胝质酶基因(LG1)属于植物糖基水解酶第17家族基因,编码344个氨基酸,有5个氨基酸保守区在4种植物的花药β-1,3-葡聚糖酶基因中都存在.(2)LG1在正常可育枸杞花药中高量表达,在雄性不育枸杞花药中表达沉默,但基因序列并没有发生突变.(3)经苯胺蓝染色观察,雄性不育枸杞花药四分体分解受阻与LG1基因表达沉默同步.研究结果提示,LG1基因是受不育基因调控的下游基因,参与了枸杞花粉的败育过程,LG1基因沉默是雄性不育枸杞花粉败育的一个重要原因.     

洋葱小孢子母细胞减数分裂过程中微管分布变化

应用间接免疫荧光标记技术和激光共聚焦扫描显微镜成像技术观察洋葱小孢子母细胞减数分裂过程中微管分布变化。减数分裂之前,小孢子母细胞中的微管较短,呈辐射状,由细胞核表面向四周扩散。减数分裂开始后,细胞质中的一部分微管蛋白聚集成纺锤体微管,控制染色体的分布。进入减数分裂I后期,纺锤体微管变为牵引染色体移向两极的着丝粒微管和连接纺锤体两极的极丝微管。之后,所有微管集中在两个核之间,构成成膜体。然后,微管解聚成微管蛋白弥散在细胞质中。减数分裂I完成后,二分体2个子细胞中的微管蛋白又聚集成2个纺锤体微管,开始减数分裂II过程。经过减数分裂II中期,2个二分体细胞中的微管再次集中在2个细胞核之间形成成膜体,隔离2个细胞核。此后,微管蛋白解聚,弥散分布在小孢子细胞质中。     

烟草小孢子母细胞减数分裂过程中微管分布变化

应用间接免疫荧光标记技术和激光共聚焦扫描显微镜成像技术观察了烟草小孢子母细胞减数分裂过程中微管的分布变化。在减数分裂前期,小孢子母细胞中的微管较短,随机分散在细胞质中。在减数分裂中期,细胞质中微管形成纺锤体,控制染色体的分布。进入减数分裂I后期,部分纺锤体微管将两组染色体拉向两级。在减数分裂Ⅱ中期,细胞中的微管又形成两个纺锤体。在减数分裂Ⅱ后期,纺锤体微管解聚为微管蛋白分散在细胞质中。胞质分裂发生在四个细胞核形成之后,通过细胞核之间的质膜向内缢缩分隔四个细胞核,产生四个小孢子。     

不同浓度的苯酚品红对果蝇唾腺染色体的染色效果

以不同浓度的苯酚品红为染色液,观察其对果蝇唾腺染色体的染色效果,结果表明,8％－12％苯酚品红为染色液,可获得背景清楚,染色体横纹清晰的图像。     

A new fluorescent staining method for callose of microspore mother cells during meiosis

To observe the dynamic behavior of callose of microspore mother cells during meiosis, we developed a convenient, rapid and efficient staining method using an improved carbol fuchsin/aniline blue solution. The stained microspore mother cells during meiosis showed yellowish green callose, red cytoplasm and dark red chromosomes when excited with blue light, which produced a contrasting image with a three-dimensional effect. When stained with only improved carbol fuchsin solution, the cells had red cytoplasm and chromosomes when excited with green light. The improved carbol fuchsin solution can be used to replace other more expensive DNA-specific dyes, such as DAPI and H33258, to reduce experimental costs.     

Regulation of Callose Metabolism in Higher Plant Cells in vitro

Temporary accumulation of callose in suspension-cultured wheat (Triticum timopheevii Zhuk.) cells at the exponential growth phase was correlated with the mitotic index due to the formation of the cell plates in dividing cells. Callose disappeared in expanding cells owing to enhanced activities of endo- and exoglucanases. The exogluconase activity was reduced when the cells were treated with cycloheximide, an inhibitor of protein synthesis. A similar pattern was observed when elicitors experimentally enhanced callose synthesis. Apparently, in such cases, callose behaves as a temporary component repairing the cell wall. We presume that plant cells comprise a universal mechanism for regulating callose synthesis.     

同源四倍体矮牵牛花粉母细胞减数分裂观察

以同源四倍体矮牵牛06P-12为材料,采用常规压片法对花粉母细胞减数分裂过程及染色体行为进行了观察研究,以探明同源四倍体矮牵生育性降低的细胞学原因.结果显示:花粉母细胞减数分裂过程与二倍体基本相同但有其特殊性,主要表现在:终变期染色体的构型复杂,有四价体、三价体和单价体;中期Ⅰ和中期Ⅱ有赤道板外染色体;后期Ⅰ和后期Ⅱ出现落后染色体、丢失染色体、染色体桥及不均等分裂的现象;四分体时期出现一分体、二分休、三分体以及含微核的异常三分体、四分体、多分体.花粉母细胞减数分裂过程中正常细胞平均达78.6%,异常细胞频率平均为21.4%.研究表明,同源四倍体矮牵生育性降低的细胞学原因是减数分裂过程中染色体行为异常.     

黄瓜花粉母细胞减数分裂过程中微核仁现象的研究

在黄瓜(Cucumis sativus L．)高代自交系花粉母细胞减数分裂过程中,首次观察到了微核仁现象。在被观察的430个花粉母细胞(PMCs)中,有279个含有微核仁,占64．9％。微核仁在PMCs中数目变化范围在1～7之间。从细线期到四分孢子期都可观察到微核仁,其数量和大小在分裂的不同时期有所差异,但在第一次和第二次减数分裂时期内的变化趋势相似。在微核仁的周期性变化过程中,染色体的行为正常,并没有发现染色体畸变或染色体桥等现象。将此高代自交材料与3个商品种对照,分别在不同的季节种植在不同的地点,证明微核仁仅在此高代自交系上发生,且不受栽培季节和环境的影响。     

一种简便制作大白鼠精母细胞减数分裂标本的方法

现行普通高中教材中有一个“观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片”的学生实验。笔者认为该实验的设置存在着2方面的缺陷：第1个缺陷是该实验很难体现现行大纲要求“通过设计实验加强学生自我操作能力和创新能力的培养”：第2个缺陷是课本在介绍减数分裂这节内容时,全文都是以哺乳动物为代表进行阐述的．而该实验则是以节肢动物蝗虫为代表进行实验的。针对以上2点缺陷,笔者对此实验进行了改进。