流行性乙型脑炎病毒荧光抗体染色方法的研究

近年来免疫荧光技术在荧光抗体的结合及去除非特异性染色等方面有了很大改进,并已较广泛地试用于临床诊断。本文报道用免疫荧光染色方法检查流行性乙型脑炎(以下简称乙脑)病毒的初步结果。     

流行性乙型脑炎脑外途径的中和试验

探用1株皮下致死力鞍高的毒株(京伟研1),实验动物用3週龄小白鼠而髓重需一致(7—9克)作皮下途径的中和试验,结果较脑内途徭的中和试验敏感。此种方法適用於检查抗體合量较少的血清,例如检查疫苗注射後的抗體滴度及用於不顯性感染调查研究。     

我国流行性乙型脑炎病毒毒力和抗原性的研究

流行性乙型脑炎(乙脑)病毒的毒力,多与毒株的大小空斑数的比例有关;同株内大斑小斑的特征各异。60年代和80年代的乙脑毒株,其毒力无明显差异。单克隆抗体(McAb)51～8对15株乙脑病毒的中和指数(log10)为:6.05～6.25者3株,5.08～5.67者5株,4.0～4.67者4株,1.95～3.83者3株。这种差别与毒株的分离年份和地区无关。多克隆抗体(PcAb)的中和指数(log10):5.0～5.33者11株,4.0～4.73者4株。可见McAb能较好地反映乙脑毒株的抗原性差别。文中讨论了毒力检查和McAb抗原分析的流行病学和免疫学意义。     

西安市流行性乙型脑炎流行病学特征分析

利用传染病报告系统报告数据和生物媒介监测,分析西安市流行性乙型脑炎(乙脑)的流行情况、宿主仔猪病毒感染率和生物媒介蚊子密度。西安市乙脑1951—1984年期间发病率为8.80/10万,1984年计划免疫实施后发病率开始呈大幅度下降趋势,80年代平均3.78/10万,90年代平均2.62/10万,2001—2007年期间发病率平均0.39/10万,呈明显阶段下降趋势。生物媒介显示西安蚊虫以淡色库蚊为主,仔猪乙脑病毒感染率较低。防止乙脑应采取提高接种率、灭蚊和加强乙脑疾病监测系统的综合性预防措施。     

流行性乙型脑炎减毒株的研究进展

本文介绍了流行性乙型脑炎病毒株的研究简史,并着重阐述了现用减毒活疫苗株ＳＡ_（１４）－１４－２的生物学特点、分子生物学、免疫效果及其机理。     

流行性乙型脑炎活疫苗细胞免疫检测方法的探索

本文建立了流行性乙型脑炎活疫苗细胞免疫检测方法。采用纯系Ｂａｌｂ／ｃ（Ｈ－２ｄ）小鼠制备效应细胞,以同一品系Ｂａｌｂ／ｃ（Ｈ－２ｄ）小鼠原代肾细胞为靶细胞。当效靶细胞比例为２０∶１,杀伤时间为４小时,ＭＴＴ反应时间为４小时,细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤作用最强。利用该法对乙脑活苗和死苗免疫小鼠进行了ＣＴＬ活性测定,结果表明该法重复性好,活苗诱导ＣＴＬ杀伤作用强于死苗     

中国流行性乙型脑炎病毒分子生物学特性研究

为了从分子水平了解中国流行性乙型脑炎(乙脑)病毒与国外分离株的差异,对1949年以来在中国乙脑主要流行地区分离的19株乙脑病毒的PrM-C区及E蛋白基因区的核苷酸序列进行了对比研究,以期了解不同时间不同地区在中国流行的乙脑病毒的分子差异.结果显示:病毒生物学初步鉴定显示,病毒感染BHK细胞后56h所有细胞均发生病变,约50%以上细胞脱落(CPE( ));3日龄乳鼠接种病毒72h之内死亡;所有病毒均与乙脑病毒(A2株)抗血清发生阳性反应,但反应强度不同,提示所有病毒均为乙脑病毒.病毒PrM-C(456～695)区核苷酸序列与各个国家及地区、各个基因型以及各个年代的73株乙脑病毒相应序列,用Woan-Ru Chen建立的方法进行基因分型分析,结果显示,所有19株中国分离的病毒均属于基因型Ⅲ型,与国外相关文献所报道的乙型脑炎病毒中国分离株的基因型相符.以乙型脑炎病毒疫苗株P3株为标准,对各病毒E蛋白500个氨基酸序列进行分析.各毒株核苷酸差异在0和4.2%之间,氨基酸差异在0和4.0%之间.所有核苷酸差异均为碱基的替换,无论核苷酸或氨基酸均无插入或丢失.大多数核苷酸变异在氨基酸编码的第三位,属于沉默突变,不引起氨基酸变化.18株病毒E蛋白活性结构域与疫苗株P3株相比共有247个氨基酸的差异,平均每株病毒有12.35个氨基酸的差异,有11株病毒(SA14、TLA、CZX、CBH、G35、GSS、LYZ、SH-3、YLG、YN、ZMT)在该区的差异数低于这个平均值.而在超过这一平均数的7个病毒株(A2、HA-3、47、CH-13、CTS、LFM、ZSZ)中,LFM、ZSZ、47与疫苗株相比较分别有16～20个氨基酸的差异,相对其它17株病毒而言,差异较为明显.以上线索提示,现有的乙型脑炎灭活疫苗在理论上可以覆盖包括现存病毒在内的毒株.     

流行性乙型脑炎抗原重复浸清试验初步结果

1．按照Casals氏醋酮乙醚浸渍法制乙型脑炎病毒抗原过程中,将病毒鼠脑组几重复以生理鹽水浸渍制作抗原。 2．经第2次浸出的抗原舆初次浸出者分别做補髓结合试验,结果在效价上无顯著的差刖亦无抗補體的理象的发生。 3．此种第2次漫出抗原,在抗原敏感性测定及抗原特異性的的试验,均初步证明可供宝際補體结合试验的应用。因而在不增加成本及复稚步骤条件下,可加倍抗原的产量供应。