肌肽的生理活性及其检测方法研究进展

论文简述了肌肽的化学性质和物理特性,综述了肌肽具有的缓冲pH、螯合金属离子、抗氧化及抑制非酶糖基化等生理活性,阐述了比色法、高效液相色谱法、毛细管电泳法等肌肽的检测方法,对于深入研究肌肽的生理功能及其应用有一定的参考价值.     

L-左旋肌肽诱导人肾癌Caki-2细胞凋亡的体外研究

目的:研究L-左旋肌肽诱导人肾癌Caki-2细胞凋亡的作用及可能机制。方法:常规培养肾癌Caki-2细胞,以1×10~4/mL的密度接种,取对数生长期Caki-2细胞分为L-左旋肌肽5、20、50 mM处理组和空白对照组,分别采用L-左旋肌肽5、20、50 mM和生理盐水处理24、48h后,采用MTT法检测各组Caki-2细胞的增殖情况,采用流式细胞法检测各组细胞周期和细胞凋亡情况,采用Western blot方法检测各组Caki-2细胞caspase-3、Bcl-2及HIF-1α蛋白的表达情况。结果:与空白对照组相比,L-左旋肌肽5、20、50 mM处理组在24 h和48 h的细胞存活率均显著降低(P0.05),且其对Caki-2细胞的生长抑制作用呈现明显的时间-剂量依赖关系,其中50 mM L-左旋肌肽处理Caki-2细胞48 h后,细胞存活率最低。L-左旋肌肽5、20、50 mM处理组在作用48 h后,Caki-2细胞随着L-左旋肌肽作用浓度的增加,Bcl-2和HIF-1α的蛋白表达水平依次降低(P0.05),而caspase-3蛋白表达水平逐次提高(P0.05)。结论:L-左旋肌肽在体外可抑制人肾癌Caki-2细胞的增殖,并诱导人肾癌Caki-2细胞的凋亡,其作用机制可能与抑制HIF-1α表达及激活caspase-3表达相关。     

肌肽棉酚对绵羊精子运动及超微结构的影响

肌肽促进绵羊精子运动增强,直线运动精子数目增多;棉酚则强烈抑制精子运动并使精子的运动方式发生改变;肌肽与棉酚混合处理精子,肌肽可不同程度抵消棉酚对精子产生的有害作用。但当棉酚完全抑制精子运动后,再加入肌肽则不能使精子恢复运动。电镜观察,肌肽对绵羊精子超微结构无任何不良影响;棉酚同造成精子严重损伤,导致生物膜系统损害、轴丝崩解、线粒体螺旋鞘紊乱等。本文通过肌肽,棉酚加入的时序不同,探讨两者对绵羊精子     

肌肽在血管性痴呆治疗中的应用及研究进展

血管性痴呆是临床发病率排在第二位的认知障碍性疾病,以白质损伤引起的认知功能障碍和胶质细胞的激活为主要病理表现。目前临床上药物治疗疗效有限,且不能有效逆转损伤、减缓疾病的进程,因此,对新药物的研发存在迫切的需求。肌肽(β-丙氨酰-L-组氨酸)是由β-丙氨酸和L-组氨酸两种氨基酸组成的天然二肽,能够由外周进入神经中枢系统,转变成组氨酸后成为组胺,是体内组胺的天然储存库,对急性脑缺血损伤发挥保护作用。近年研究发现肌肽对血管性痴呆的保护作用不是通过肌肽-组氨酸-组胺的途径,而是通过抑制兴奋性氨基酸毒性、氧自由基的产生、胶质细胞的激活以及髓鞘的退化发挥保护作用,由此证明肌肽对于血管性痴呆有着潜在的临床治疗作用。本文针对肌肽对血管性痴呆治疗的研究进展进行综述。     

肌肽对绵羊精子无氧酵解的影响

在无氧条件下,绵羊精子通过酵解途径获得能量,代谢结果产生大量乳酸,本实验通过测定精子悬液中果糖摄取以及乳酸生成量,研究肌肽、棉酚对绵羊精子酵解途径的影响,结果表明：４ｍＭ肌肽对绵羊精子酵解有显著增强作用,并能刺激精子对果糖的摄取。１２μＭ棉酚对绵羊精子无明显抑制,棉酚能部分抑制肌肽对精子的酵解作用。     

肌肽、丙氨酸和组氨酸抗氧化性的比较研究

肌肽是一种发现于脊椎动物骨骼肌和大脑中的二肽(β-丙氨酰-L-组氨酸).为了探讨肌肤的抗氧化性与其结构之间的关系,试验研究了肌肽、丙氨酸和组氨酸对DPPH自由基的清除作用和对牛血清白蛋白(BSA)氧化修饰的抑制作用.结果表明肌肽对DPPH自由基有显著的清除效果(P＜0.01),组氨酸清除率低于肌肤,而丙氨酸基本无清除自...     

肌肽对低氧所致大鼠血管内皮细胞损伤的保护作用

目的：研究肌肽对低氧所致大鼠血管内皮细胞损伤的影响。方法：建立低氧条件下大鼠血管内皮细胞损伤模型,用MTT法观察肌肽对低氧损伤的血管内皮细胞活性的影响,测定细胞培养基中LDH活力,并对细胞骨架进行考马斯亮蓝R-250染色观测其细胞结构。结果：浓度为10mmol/L～20mmol/L肌肽孵育血管内皮细胞6h后,可以抑制缺氧12h和24h引起的血管内皮细胞活性下降,同时减少LDH的释放,保持细胞骨架完整。结论：肌肽对低氧所致的血管内皮细胞损伤具有保护作用。     

肌肽通过调节JNK和NF-kappaB通路抑制高糖诱导的心肌细胞凋亡

高血糖症是糖尿病并发心血管疾病的重要危险因素. 高血糖诱导产生的活性氧（ROS）能够引起糖尿病心肌病.我们的前期工作已经证实,肌肽对高糖环境下细胞凋亡具有保护作用,但其机制尚未明确.为研究肌肽对高糖诱导的大鼠心肌细胞凋亡的抑制作用及相关信号机制,以高糖诱导心肌细胞H9c2为模型,采用Brdu-ELISA法检测细胞增殖过程中DNA合成情况,流式细胞术检测细胞凋亡率,免疫印迹实验检测JNK/c-Jun、NF-κB的磷酸化水平,RT-PCR检测TNF-α的mRNA表达. 实验结果显示,肌肽能够提高高糖损伤的H9c2细胞增殖能力,降低心肌细胞凋亡,抑制高糖激活的JNK、c-Jun和NF-κB磷酸化水平及TNFα的mRNA表达. 上述结果表明,肌肽拮抗高糖诱导的心肌细胞凋亡机制与抑制p-JNK /p-c-Jun、p-NF-κB水平和TNF-α表达有关.     

肌肽对离体培养的鸡肝细胞的影响

研究了肌肽对离体培养的鸡肝细胞的影响。实验采用胶原酶原位二步灌流法获得鸡肝细胞,再用不同浓度的肌肽(①2 μmol L、②2 0 μmol L、③2 0 0 μmol L ,④2 0mmol L)分别进行处理。结果表明,1 )在各个时期,含2 0 μmol L肌肽的实验组肝细胞生长均好于对照组(0 μmol L肌肽) ,而且在48和72h时二者差异显著(P <0 0 5 ) ;2 ) 2 0mmol L肌肽能显著提高肝细胞的分泌白蛋白的功能(P <0 0 5 ) ;3 )添加肌肽的各实验组上清液中丙二醛(MDA)含量在2 4和48h时均低于对照组;4)添加2 0mmol L肌肽的实验组与对照组相比,能维持无血清培养肝细胞的形态达8d。表明了肌肽对鸡肝细胞增殖和分泌白蛋白有促进作用,同时可以保护肝细胞对抗过氧化,保护细胞形态。     

VE和L-肌肽对大菱鲆幼鱼生长、抗氧化、非特异性免疫及血清生化指标的影响

实验以大菱鲆（Scophthalmus maximus）幼鱼[（14.00±0.02）g]为研究对象,采用2×4双因素设计,设2个VE水平（0和75 mg/kg）和4个L-肌肽水平（0、50、100和200 mg/kg）,研究VE和L-肌肽对其生长、抗氧化、非特异性免疫及血清生化指标的影响。实验共分8组,每组3个重复,每个重复46尾鱼,实验周期为8周。结果显示:（1）在饲料中添加75 mg/kg VE显著提高了大菱鲆幼鱼增重率（WGR）和特定生长率（SGR）（P < 0.05）,L-肌肽添加量≤100 mg/kg对实验鱼生长性能无显著影响（P>0.05）,添加量为200 mg/kg时鱼体WGR、SGR和蛋白质效率（PER）显著降低,饲料系数（FCR）显著升高（P < 0.05）;（2）VE和L-肌肽对血清谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-PX）、过氧化氢酶（CAT）活性和丙二醛（MDA）含量及肝脏总抗氧化能力（T-AOC）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和MDA含量均具有显著的交互作用（P < 0.05）,在VE 75 mg/kg水平下,L-肌肽添加量为50和100 mg/kg时血清GSH-PX活性最高,L-肌肽添加量为100和200 mg/kg时血清CAT活性最高且与添加量为50 mg/kg差异不显著（P>0.05）,添加100 mg/kg肝脏T-AOC和SOD活性达到最高且50 mg/kg组的SOD与100 mg/kg组差异不显著（P>0.05）,主效应结果显示,VE显著提高了血清T-AOC、SOD及肝脏CAT活性（P < 0.05）,L-肌肽显著提高了血清T-AOC（P < 0.05）;（3）VE和L-肌肽对血清补体C3和LZM活性交互作用显著,在75 mg/kg VE水平下,L-肌肽添加量为50 mg/kg时,补体C3水平最高（P < 0.05）,主效应显示,VE和L-肌肽对血清总蛋白（TP）影响均不显著（P>0.05）;（4）添加VE显著降低了血清总胆固醇（TCHO）和甘油三酯（TG）含量（P < 0.05）,添加L-肌肽显著降低了血清TG含量,且在L-肌肽50 mg/kg时达到最低。综合考虑大菱鲆幼鱼[（14.00-39.43）g]的生长性能、抗氧化性能、非特异性免疫及血清生化指标得出,在实验配方条件下（鱼油70 g/kg,大豆卵磷脂10 g/kg）,添加VE 75 mg/kg时,L-肌肽的适宜添加量为50 mg/kg。