DNA芯片技术在毒理学和药物安全性方面的应用

传统检测毒物和药物的方法往往剂量大、历时长、耗费多 ,并且大多数情况下只能起到初筛的作用。ＤＮＡ芯片技术可以用来分析整个基因组水平基因的表达 (同时可以检测上千个基因 ) ,它作为一种新兴的方法应用于毒理学检测 ,有着Ｎｏｒｔｈｅｒｎ印迹和原位杂交等方法无可比拟的优势。通过ＤＮＡ芯片分析实验组和对照组基因表达的差异可以对与某种疾病相关的毒性因素进行分类、整理 ,为该病的预防和治疗提供有效的信息支持。ＤＮＡ芯片技术在毒物的毒性大小及相互影响的研究中将发挥更大作用。1 .ＤＮＡ芯片技术的基本原理ＤＮＡ芯片也被称为…     

序列依赖的DNA局域结构和DNA弯曲

单晶Ｘ射线衍射技术分析表明,ＤＮＡ双螺旋并不是理想的均匀螺旋,而是存在明显的局部偏差。一般认为ＤＮＡ双螺旋携带着两种遗传信息：其一,遗传信息本身,以三联体密码写成,用来确定蛋白质顺序;其二,选择性表达指令,诸如转录调控过程中基本因子,活化子等识别有特定碱基顺序的ＤＮＡ区。后者或许就是靠ＤＮＡ螺旋结构的局部偏差和弯曲。理解这种偏差和弯曲的根源,并提出从ＤＮＡ序列预测其局域结构和弯曲的模型已成为人们关注的重点。１ＤＮＡ的局域结构１．１ＤＮＡ局域结构参数的定义Ｄｉｃｋｅｒｓｏｎ［１］等按照１９８８年在…     

DNA芯片制作原理及其杂交信号检测方法

文章讨论了ＤＮＡ芯片的制作原理和杂交信号的检测方法。依其结构,ＤＮＡ芯片可分为两种形式,ＤＮＡ阵列和寡核苷酸微芯片。ＤＮＡ芯片的制作方法主要有光导原位合成法和自动化点样法。ＤＮＡ芯片与标记的探针或ＤＮＡ样品杂交,并通过探测杂交信号谱型业实现ＤＮＡ序列或基因表达的分析。适应于ＤＮＡ芯片的发展,同时出现了许多新型的杂交信号检测方法。主要有激光荧光扫描显微镜、激光扫描共焦显微镜、结合作用ＣＣＤ相机的荧光     

生物芯片与分子生物学

生物芯片（Ｂｉｏｃｈｉｐ）的概念源于计算机芯片,是近十年来才发展起来的一项分子生物学技术。目前的ＤＮＡ芯片有两类①片上原位合成寡核苷酸点阵芯片（ＯＮＡ）;②用微量点样技术制成ｃＤＮＡ点阵芯片（ＣＤＡ）。生物芯片广泛应用遗传病的早期诊断、肿瘤癌基因突变、病原体基因变异和多态性分析以及耐药试验等。本文就生物芯片的原理及其应用前景作一综述。     

小鼠细胞因子相关基因表达检测寡核苷酸芯片的制备及分析

生物芯片技术用于基因表达谱研究是近年来发展起来的一项新技术 ,该方法本质上是基于对一玻璃片或膜表面上固定的ｃＤＮＡ或寡核苷酸的分子杂交 ,这一新技术可同时测定成千上万个基因的作用方式 ,几周获得的信息用其它方法可能要几年才能得到 ,是以定量方式同时监测大量基因相对表达的强有力的新方法[1 ,2 ] 。国内外目前主要采用ｃＤＮＡ芯片进行基因表达的检测 ,芯片制备所用的ＤＮＡ探针一般为已知基因ｃＤＮＡ克隆的ＰＣＲ扩增产物或ＥＳＴ的扩增产物[3～ 8] 。对基因的表达检测来说 ,ｃＤＮＡ芯片技术是一条非常适用的检测方法 ,但在有…     

用基因表达谱芯片研究人正常肝和肝细胞癌中差异表达的基因

以基因表达谱芯片对人正常肝及肝癌组织基因表达的差异性进行了研究比较。奖４０９６条人ｃＤＮＡ用点样仪点在特制玻片上制备成表达谱芯片;利用肝和肝癌组织的ｍＲＮＡ通过逆转录方法,将Ｃｙ３和Ｃｙ５２种荧光分别标记到两种组织的ｃＤＮＡ上,制备成ｃＤＮＡ探针,并与表达谱芯片进行杂交及扫描,重复４次实验,通过计算机数据处理判定基因是否在上述２种组织中有表达差异,筛选出差异表达的基因共９０３条。基因芯片技术可同时     

DNA芯片技术

ＤＮＡ芯片技术是近年出现的ＤＮＡ分析技术,其突出特点在于高度并行性、多样性、微型化和自动化［１～５］。高度的并行性不仅可大大提高实验的进程,并且有利于ＤＮＡ芯片技术所展示图谱的快速对照和阅读。多样性是指在单个芯片中可以进行样品的多方面分析,从而大大提...     

DNA分子结构上的长度单位为什么用A（埃）来表示

ＤＮＡ分子结构上的长度单位为什么用Ａ（埃）来表示景前进（湖北省广水市职业高中，４３２７００）著名的ＤＮＡ双螺旋结构模型是１９５２年由华森（Ｗａｓｔｏｎ，Ｊ·Ｄ）和克里克（Ｃｒｉｃｋ，Ｆ·Ｈ·Ｃ）创立的。他们根据ｘ射线衍射图象的研究指出：图示上ＤＮＡ双...     

安捷伦和Caliper联手推出DNA1000芯片实验室(LabChip)试剂盒快速准确地测定DNA片段的大小和含量

安捷伦科技和Ｃａｌｉｐｅｒ公司日前宣布 ,推出ＤＮＡ 10 0 0芯片实验室 (ＬａｂＣｈｉｐ)试剂盒 ,用于ＤＮＡ片段的自动分析 ,测定片段大小及浓度。作为芯片实验室 (ＬａｂＣｈｉｐ)系列试剂盒中的新成员 ,可以让分子生物学研究人员使用Ｃａｌｉｐｅｒ科技公司开发的独特的芯片实验室技术 ,快速精确地分析ＰＣＲ产物和小片段限制性酶解产物。快速、简便、洁净ＤＮＡ 10 0 0芯片实验室 (ＬａｂＣｈｉｐ)试剂盒不仅是有ＤＮＡ 5 0 0芯片实验室 (ＬａｂＣｈｉｐ)试剂盒的分辨率 ,而且片段大小范围也适合于大多数ＰＣＲ片段 ( 2 5到 10 0 0个…     

DNA芯片技术及其应用

ＤＮＡ芯片技术及其应用安海谦卢圣栋（中国医学科学院基础医学研究所医学分子生物学国家重点实验室）ＤＮＡ芯片（ＤＮＡＣｈｉｐ）又被称为生物集成模片,ＤＮＡ阵列或寡核苷酸微芯片（Ｂｉｏ－Ｃｈｉｐ,ＤＮＡａｒｒａｙｓ,ａｌｉｇｏｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｍｉｃｒｏｃｈｉｐ）等。这项技术是由位于美国旧金山以南的ＳａｎｔａＣｌａｒａ的一个新兴生物技术公司Ａｆｙｍｅｔｒｉｘ首先发展起来的。它是受到在固相支持物上...     

DNA序列信息的一种新的测度

根据信息理论给出了测度ＤＮＡ序列信息的一种新的方法,获得ＤＮＡ序列４个层次的信息量测度：Ｉｂ,Ｉｆ（１）,Ｉｆ（２）ａｎｄＩｆ（３）,这４种信息测度可分别用来测度ＤＮＡ的碱基序列、密码子序列、编码蛋白质序列和功能蛋白质序列的信息量。从Ｍ．ｅｄｕｌｉｓ的线粒体基因组中两个较短的编码蛋白质的ＤＮＡ序列和使用具有不同倍性的间并密码子组组成的模拟ＤＮＡ序列中所获得计算结果表明,这些信息测度确实能用来揭示所     

端锚聚合酶(Tankyrase)和端粒

端粒是真核细胞染色体末端的一个特殊结构 ,由一段具有特定重复序列的ＤＮＡ和端粒结合蛋白组成 ,是维持染色体结构稳定的重要因素。端粒ＤＮＡ的复制不是由ＤＮＡ聚合酶完成的 ,而是由端粒酶 (ｔｅｌｏｍｅｒａｓｅ)催化合成后添加到染色体的末端。正常细胞随着细胞分裂活动的进行 ,端粒ＤＮＡ逐渐缩短 ,当缩短到一定程度时 ,染色体结构被破坏 ,细胞进入衰老期并以死亡而告终。但当细胞发生癌变时 ,由于端粒酶的重新激活 ,这种端粒ＤＮＡ随分裂活动发生渐进性缩短的趋势受到阻遏 ,使正常细胞转化成具有无限分裂能力的永生化恶性细胞。研究…     

分析整个基因组的新方法——DNA芯片技术

ＤＮＡ芯片技术是一种新近发明的可用于基因组分析的技术。其优势在于,它可为一些由多个基因控制的性状诸如致病微生物的毒力、人类对心脏病的敏感性等提供一种更为快速而准确的研究方法。与现今所使用的Ｓｏｕｔｈｅｒｎ杂交等技术相比,ＤＮＡ芯片技术可利用已知基因组...     

DNA芯片技术

ＤＮＡ芯片技术利用固定化在固体表面的高密度ＤＮＡ分子微点阵来进行生化分析。从生物体中提取的样品ＤＮＡ或ＲＮＡ作为靶分子,荧光或其它方法标记后,与微点阵上互补的探刈杂交,从而产生异源双链。因为在微点阵上,某一特定位置年的核苷酸序列是已知的,所以通过对微点阵每一位点的荧光强度进行检测,便可能样品进行定性及定量分析,检测技术包括激光共聚焦扫描和电耦合设备（ＣＣＤ）成像等等。ＤＮＡ芯片根据控针成分的不同大     

失眠最怕“怕失眠”

有许多人总是爱说自己失眠了，睡不着觉。其实，很多时间他们并不是睡不着觉，而是混淆了失眠与失眠感，失眠不能凭感觉，失眠自己说了不算。     

外源DNA在体内的吸收与降解

外源ＤＮＡ在动物体内的吸收与降解研究已经受到了关注[1、2 ] 。由于基因治疗与ＤＮＡ疫苗的飞速发展 ,经常要通过一定的方式将外源的ＤＮＡ导入到动物体 ,然而对于它们的吸收与降解机制到目前为止仍然不是十分清楚。用基因治疗疾病时 ,须解决外源基因在动物体内的吸收与降解问题 ,尤其是大量外源ＤＮＡ质粒在动物体内的吸收与降解问题。外源ＤＮＡ的吸收与降解研究已成为一个热点 ,目前主要集中在肠胃道吸收降解和细胞吸收降解两个方面。1 .外源ＤＮＡ在肠胃道中的吸收与降解最有可能让外源ＤＮＡ进入动物体的就是肠胃道 ,在每天的进食中 …     

基因表达谱芯片在肿瘤基因组学中的应用

表达谱芯片 ,是指将几千个基因特异的探针或其ｃＤＮＡ片段固定在一块基因芯片上 ,对来源于不同个体 (正常人与患者 )、不同组织、不同细胞周期、不同发育阶段、不同病变、不同刺激 (包括不同诱导、不同治疗手段 )下的细胞内的ｍＲＮＡ或逆转录产物ｃＤＮＡ进行检测从而大规模对这些基因表达的个体特异性、组织特异性、发育特异性、分化阶段特异性、病变特异性、刺激特异性进行综合的分析和判断。基因表达谱芯片研究基因在不同组织或细胞、不同发育阶段中基因表达的改变 ,通过基因表达的改变进而阐明基因的功能。1 .杂交信号检测原理用不同…     

用PCR方法证实HIV—1感染性病毒颗粒携带有前病毒DNA

用多聚酶链反应（ＰＣＲ）为检测手段，证明了成熟的人免疫缺陷病毒Ⅰ型（ＨＩＶ－１）可携带前病毒ＤＮＡ。用细胞病毒裂解液处理病毒样品或在病毒样品中只加磷酸盐缓冲液（ＰＢＳ）代替细胞裂解液，结果发现只有病毒裂解液处理样品后才能检测到特异ＤＮＡ。完整的病毒颗粒对ＤＮＡ酶不敏感，而只有在病毒裂解以后才能对ＤＮＡ酶敏感。当靶细胞膜上的ＣＤ４受体被特异的单克隆抗体覆盖后不能吸附病毒时，ＤＮＡ也不能被检测到，而且     

陆桥说错了吗?

大陆漂移说创立的初期,一篇记述巴西和非洲产有相同的动物化石的文章曾起过举足轻重的作用。令人惋惜的是,用古生物学上的事例,来说明现在以大西洋相隔的南美洲巴西和非洲彼岸曾经可能是相连接的,并不是古生物学家,而是气象学家魏格纳。这个令人深思的例子,常常被人们用来说明思路对科学研究的重要作用。为什么古生物     

具有修复功能的尿嘧啶—DNA糖苷酶

具有修复功能的尿嘧啶－ＤＮＡ糖苷酶刘丽贲昆龙（中国科学院昆明动物研究所免疫学实验室,昆明６５０２２３）关键词尿嘧啶－ＤＮＡ糖苷酶尿嘧啶ＤＮＡ修复在真核或原核生物中,尿嘧啶都不是正常ＤＮＡ的组分。但是,在下列两种情形下,尿嘧啶会成为ＤＮＡ的成分;①当细...