一种简易革兰氏染色法

我们用简易G染色法,对细菌进行染色,实践证明该方法稳定性好。简单快速,特介绍如下:一、试剂:(一)甲液:结晶紫0.25g,蒸留水加至100ml(二)乙液:碱性品红0.3g,碘化钾0.5g,碘0.2g,用95％酒精加至100ml溶解(可以水浴溶解)。二、方法:     

红铃虫染色标记

我们用染色标记的方法,对红铃虫的趋光习性进行了试验,效果良好。 一、材料与方法 1.染料 虫胶(漆片)0.25克,碱性品红0.25克(或碱性绿、碱性紫等)和95％酒精100克。先将由胶放入少量酒精内不断摇动,待溶解后加酒精和颜料,因颜料易沉淀,务须过滤后,方能备用。 2.染色 染色笼为长3O厘米、宽30厘米、高4厘米,二面装纱网,一边装绞链,以便开关,另一边留两个直径1厘米的放蛾孔。把当天在指管内羽化的、发育正常、翅展良好的红铃虫雌雄蛾计数放入染色笼内,在通风处用手提超低容量喷雾机将染料透过纱网均匀喷染在各蛾体上,染料不宜过多,并用立体显微镜检查染色情况。     

Effect of Different Extraction Methods on Osmanthus Oil Quality

用超临界流体萃取法(SCFE)、可食用石油醚和酒精抽提蒸馏三种不同的抽提方法,提取了咸宁桂花品种——银星的花精油;气质联用(GC-MS)分析不同方法提取精油的香气成分及其相对含量.结果表明:SCFE提取的精油得率最高(0.19％),紫罗兰酮、醇类的相对含量高达36.99％;石油醚浸提结果次之(0.13％),酒精抽提法不可取(0.07％).     

黄原胶发酵培养基优化研究

分别用单因素法和正交试验法对野油菜黄单胞菌J-12的发酵培养基成分进行研究。得到的最优培养基配方为:4％玉米淀粉、0.3％鱼粉、0.3％豆饼粉、0.3％CaCO_3、0.5％KH_2PO_4、0.25％MgSO_4、0.025％FeSO_4、0.025％柠檬酸,接种量5％。在消前pH7.2～7.5,发酵温度28℃,摇床转速180r/min,发酵时间72h的实验条件下,发酵液粘度为8740mPa·s,采用酒精直接沉淀法提取黄原胶的产率达2.91％,产品的丙酮酸含量3.32％。     

VC二步发酵种液质量判定

研究了影响种子质量的各个参数与提高种子质量的途径。结果显示 :在苏云金杆菌 (俗称“大菌”)与氧化葡萄糖酸杆菌 (俗称“小菌”)组成一新组合菌系中 ,种液中菌的浓度对发酵影响较大 ,种液中的 (大菌OD值 - 1 6×小菌OD值 )与发酵速度成正相关 ,可作为种子质量的判定指数。同时对种液的配方进行均匀设计实验 ,结果显示 :适当提高玉米浆、葡萄糖等成分与降低尿素的浓度及调高pH值均有利于种液质量的改善     

荧光素标记检测乙型肝炎病毒表面抗原特异性杀伤性T淋巴细胞方法的探讨

用绿色荧光前体化合物Calcein AM标记靶细胞,经过与杀伤性T淋巴细胞(CTL)效应细胞数小时的孵育,通过分析培养上清中的荧光强度检测CTL效应。通过对一系列标记条件的研究：不同浓度Calcein AM标记靶细胞、不同洗涤缓冲液、不同标记细胞浓度、不同洗涤次数、不同裂解液配方,确定Calcein AM荧光素标记法的最佳条件。用该方法检测乙型肝炎病毒表面抗原的DNA疫苗免疫Balb／c小鼠对P815S细胞的CTL效应,E／T比为10时,杀伤效率接近饱和,达到65％。通过荧光显微镜直接观察杀伤后的P815S细胞,细胞破裂程度与计算出的杀伤效率有一定相关性。     

不同浓度酒精对两种常见细菌生物膜的影响

目的 探讨不同浓度的酒精对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌生物膜形成的抑制作用.方法 配制不同浓度的酒精(1.25％、2.5％、5％和10％),作用于培养24 h形成成熟生物膜的金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌,利用FDA/PI荧光染料染色,在激光共聚焦显微镜扫描生物膜并分析活菌与死菌比例.结果 不同浓度的酒精对两种细菌生物膜的形成均有一定破坏作用,5％、10％浓度酒精对金黄色葡萄球菌生物膜破坏最大,活菌与死菌比例为0.142 ±0.007、0.006±0.001;10％浓度酒精对大肠埃希菌生物膜破坏最大,活菌与死菌比例为5.751±1.779.结论 较低浓度的酒精可抑制金黄色葡萄球菌和大肠埃希菌生物膜的形成,且10％浓度的酒精效果最好.     

黑曲霉HS—16纤维素糖化菌的选育及在酒精发酵中的应用研究

本试验以有一定纤维素酶活力的黑曲霉Ａ．ｎｉｇｅｒＨＳ－００为出发菌株,经紫外光、激光、亚硝基胍复合诱变,选育出糖化稻草纤维素性能优良的Ａ．ｎｉｇｅｒＨＳ－１６菌株,其分解稻草纤维素产生还原糖的能力是出发菌株的５倍,还原糖生成率可达２８％。利用其稻草纤维素糖化液进行酒精发酵,酒化率为８４．８％。本试验还系统研究了影响稻草纤维素糖化的因素,确定了糖化用固体稻草培养基的最佳配方,分析了不同营养对酒精发酵     

固定化酵母酒精生成动力学及其数学模型

本文采用解析法对海藻酸钙为载体,以葡萄糖为底物进行酒精连续发酵的管式反应器内所呈现的固定化K字酵母酒精发酵动力学进行了较为系统的研究,建立了由6个方程组成的酒精生成动力学数学模型,并对此模型进行了应用方面的研究。结果表明：此动力学呈现葡萄糖的反竞争性和酒精非竞争性联合抑制的不可逆特征,其数学模型在所涉及的参数拟合及分别在不同反应器和浓度扩展时的发酵过程所进行的实际校验中,最大的算术平均百分误差为13．8l％,在薯干糖化液的发酵动力学应用中,具有平均差为8．28％之良好预测精度,同时,通过模型中参数式计算得葡萄糖抑制的浓度范围为130—450g／L,而酒精抑制的浓度范围是3．07—16．45％(v／v)。     

不同提取方法对桂花精油品质的影响

用超临界流体萃取法(SCFE)、可食用石油醚和酒精抽提蒸馏三种不同的抽提方法,提取了咸宁桂花品种——银星的花精油;气质联用(GC-MS)分析不同方法提取精油的香气成分及其相对含量。结果表明:SCFE提取的精油得率最高(0.19%),紫罗兰酮、醇类的相对含量高达36.99%;石油醚浸提结果次之(0.13%),酒精抽提法不可取(0.07%)。     

利用葡萄糖废母液生产酒精的研究

选育出两株利用葡萄糖废母液生产酒精的菌株S_(995)和S_8。S_(095)用于70％母液和30％糖蜜混合连续酒精发酵,醪液中酒精份平均可达10.1％。S_8用于50％、70％母液和50％、30％玉米糖化醪混合生产酒精,醪液中酒精份可达12.37％(实验室数据)和10％(实际生产数据)。     

三齿草藤(Vicia bungei Ohwi)凝集素的细胞表面受体研究

应用亲和层析法从三齿草藤(Vicia bungei Ohwi)种子中纯化的三齿草藤凝集素(VBL),可以凝集兔和豚鼠的红细胞,也可凝集人、牛和羊的精细胞,说明这些细胞表面存在有VBL的受体。用FITC和~(125)I进行标记,可得到FITC-VBL和~(125)I-VBL,其生物学活性不受影响。氯胺T法的标记率可达55％;应用FITC-VBL研究牛精细胞和兔红细胞膜上VBL受体的分布,发现二者由胞膜上受体分布据不一致。VBL与牛精细胞结合条件的正交试验表明细胞浓度的影响最大。用不同量的未标记的VBL对~(125)I-VBL与兔红细胞和人精细胞的结合实验,以Scatchard法作图,兔红细胞得一类似于双曲线的凹形曲线,提示该细胞膜上受体的性质有所不同,而人精细胞却有很大差异。若以兔红细胞膜上存在有高低亲和力两种受体进行计算,可求得结合常数和每个细胞上的受体数。应用几种单糖和外源凝集素影响~(125)I-VBL与兔红细胞的结合,当单糖(D-Man,D-Glc)浓度为0.01M时,相对结合率开始急剧下降,单糖浓度若增至0.1M时,其相对结合率仅为40％,而PHA-P和SML浓度为1mg/ml时,相对结合率开始下降,当浓度达10mg/ml时,相对结合率下降至30％左右。     

在组织切片中肥大细胞的证明及迅速记数的简单方法

肥大细胞的选择性染色法如下:1)薄片新鲜组织(3—5毫米厚)于下液固定18—24小时,但标本置于此液至少一周尚无显明害处。配法:福尔马林液10毫升;95%酒精90毫升;醋酸钙1克。2)组织以95%酒精洗2次,每次1小时。3)以常法制做石蜡切片(8—12微米厚),粘片,脱蜡,经纯酒精至95%酒精。4)在室温于下液内染1小时。配法:甲苯胺蓝(toluidine blue)0.25克;70%酒精100毫升;浓盐酸     

多种物质对柑桔大实蝇的电生理活性及田间引诱效果评价

柑桔大实蝇Bactrocera minax (Enderlein)是柑桔类果树的重要害虫,诱杀成虫是防治该虫的一项重要措施。本文应用触角电位仪测定了10种物质不同浓度、7种常见配方及5种改进配方对柑桔大实蝇的电生理原理,2010和2011年在四川和重庆的5个柑桔园对9种配方的田间诱集效果进行评价。结果表明,柑桔大实蝇雌雄成虫对水解蛋白和乙酸的EAG值显著高于红糖、乙醇、甜橙汁、甜橙精油、乙酸乙酯、桔皮粉、柠檬酸和蜂蜜。雌、雄成虫的EAG值随着水解蛋白、乙酸浓度的增高而增大;雌虫的EAG值随乙醇浓度的增高而增大;而其余7种物质的浓度变化对雌雄成虫的EAG值影响较小。配方中,20%水解蛋白的EAG值和田间引诱效果均显著高于其它引诱物质和配方。改进型糖醋酒液分别添加5%水解蛋白和0.2%乙酸乙酯其诱集效果明显提高。本试验结果可为柑桔大实蝇引诱剂配方筛选和田间诱杀提供科学依据。     

激素对香菇子实体生长的生理效应

用五种激素分别配制三种浓度,对香菇(Lentinus edodes)出菇前分批进行了喷洒试验,并对香菇子实体的分化、出菇、产量和品质进行了观察与测定,其中以卅烷醇和赤霉素效果最佳,在适宜的浓度时产量分别提高41.4％和39.7％;吲哚丁酸、C-751激素(环烷酸钠)、萘乙酸次之,但和对照相比也有不同程度的增产效应,而且不降低其原有的营养价值。     

固定化细胞技术发酵玉米醪生产酒精的研究

本文报导了固定化酵母(S.cerevisiae 9064)批次发酵玉米醪生产酒精的研究。采用自制“多层分隔式生物反应器”在最适发酵条件下,成熟醪的终酒精浓度达10％(V/V)左右,发酵时间可由传统发酵的72h缩短到22h左右,酒精生产力提高了3倍。在吨级反应器连续运转试验时,固定化增殖酵母细胞活性稳定性可持续半年以上,PVA—凝胶粒的机械强度和弹性等以及醪液中酒精含量基本保持不变。     

九月份生物各学科实验准备

植物学(实验一和实验二) 材料用具:显微镜(低倍镜)、小块紫色洋葱鳞茎(若无紫色洋葱时,还需准备碘液染色)、内盛清水的小烧杯、吸管、镊子、刀片、牙签(代替解剖针)、载玻片、盖玻片、小片吸水纸、绘图纸,番茄、红色柿子椒各一个(演示用)。示范镜的准备:1.示成熟的番茄果肉细胞:用牙签挑取果肉细胞制成装片观察。2.示辣椒表皮细胞:将柿子椒用小刀切成小块,清除掉果肉制成无色表皮细胞,观察胞间连丝,如用卡宝染液(改良苯酚品红染色液)染色效果更好。卡宝染色液配制方法如下: ①取3克碱性品红,溶于100m170％酒精中,配成母液     

糖醋酒液对梨小食心虫和苹果小卷叶蛾的诱杀作用

糖醋酒液可以诱杀多种害虫,是一种传统无公害防治措施。但在植保上应用的糖醋酒液配方中的糖、醋、酒成分及配比却比较混乱,难于重复和推广应用。试验研究诱杀果树主要害虫梨小食心虫Grapholitha molesta(Busck)和苹果小卷叶蛾Adoxophyes orana Fisecher von Rslerstamm的糖醋酒液最佳配比。结果表明,糖醋酒液配比中乙酸∶乙醇∶水为3∶1∶3∶80是较理想配方,调节不同成分比例对诱虫效果会造成不良影响。试验结果还表明,梨小食心虫雌虫比例会随着糖醋酒液诱虫量的增加而减少。诱虫量小于10头/d时雌虫的比例为88.0%,诱虫量大于30头/d时雌虫比例只有56.1%。     

小地老虎食诱剂糖醋酒液配方筛选及发酵增效作用

【目的】为筛选和规范诱集小地老虎Agrotis ipsilon成虫的最佳糖醋酒液配方及最佳发酵时间,确定发酵液中的挥发物成分。【方法】优选以单一纯物质糖、醋、酒和水进行混配的配方A, B, C和D, 其配比分别为蔗糖(g)∶乙酸(mL)∶无水乙醇(mL)∶纯水(mL)(m/v/v/v)=3∶1∶3∶80, 3∶1∶3∶160, 3∶1∶6∶80和1∶1∶3∶80及常见配方E［白糖(g)∶白醋(mL)∶白酒(mL)∶自来水(mL)= 6∶3∶1∶10(m/v/v/v)］,分别并采用Y型嗅觉仪及GC-MS测试和分析小地老虎成虫对发酵1~15 d后的糖醋酒液的趋性及发酵液中的挥发物成分。【结果】趋性试验结果表明,糖醋酒液B配方对小地老虎诱集效果显著优于A, C, D和E配方,C配方次之。小地老虎成虫对B和C这两种配方发酵8 d发酵液的选择反应率均显著高于对未发酵及发酵5 d和7 d外的其他发酵时间发酵液的选择反应率。挥发物成分组成分析结果显示,糖醋酒液B配方发酵8 d发酵液的挥发物共有41种化合物,主要包括17种烃类化合物、8种醛类化合物、2种酮类化合物、4种醇类化合物、5种酯类化合物和5种醚类化合物。而且发酵8 d的糖醋酒液B配方与其未发酵以及发酵4 d和发酵12 d的糖醋酒液B配方之间的挥发物成分差异较大。【结论】优选并明确单一物质糖、醋、酒和水进行混配的小地老虎食诱剂配方(3∶1∶3∶160, m/v/v/v),其糖醋酒液通过发酵可以产生增效作用,最佳发酵时间为8 d。     

正交试验优化鼠疫活疫苗冻干稳定剂

目的优化皮上划痕用鼠疫活疫苗的稳定剂配方。方法采用正交试验,以鼠疫杆菌冻干存活率为检测指标,分别对乳糖、谷氨酸钠、硫脲和尿素4种成分组成的稳定剂配方,以及乳糖、蔗糖、谷氨酸钠、硫脲和尿素5种成分组成的稳定剂配方进行优化。结果 4种成分组成的稳定剂最佳组合为乳糖7.5%、谷氨酸钠0.5%、硫脲1.0%、尿素0.1%(均为质量分数),此配方可使菌体的冻干存活率达到(68.49±6.19)%;5种成分组成的冻干稳定剂最佳组合为乳糖7.5%、蔗糖7.5%、谷氨酸钠0.5%、硫脲0.5%、尿素0.1%(均为质量分数),此配方可使菌体的冻干存活率达到(74.71±6.34)%,均高于现有稳定剂配方。结论优化的两种稳定剂均对鼠疫杆菌具有较好的保护作用。