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草鱼生长激素单抗免疫亲和柱的制备及初步应用 总被引:2,自引:0,他引:2
用纯化的草鱼生长激素单克隆抗体联剂CNBr活化的Sepharose 4B凝胶上制成约10ml的亲和层析柱,用该柱一步纯化了重组鲤鱼生长激素基因的表达产物。偶联有13.65mg单克隆抗体的亲和柱一次强纯化得到约0.7mg重组鲤鱼生长激素。酶联免疫受体测定表明它具有强烈的生物学活性,SDS-PAGE表明它为一蛋白带,分子量约为22000。 相似文献
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大鳞大马哈鱼垂体生长激素的分离、纯化与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
应用ConA-Sepharose 4B亲和层析、凝胶过滤及离子交换层析等技术从大鳞大马哈鱼(Oncorhynchus tshawytscha)垂体中分离纯化了具有生物活性的生长激素(sGH)。用放射受体测定法(RRA)检测sGH组分的生物活性,结果表明纯化的8GH制品具有与兔肝细胞GH受体结合的生物活性。用放射免疫测定法(RIA)和酶联免疫吸附测定法(ELISA)分别检测了另两种垂体激素-催乳激素(PRL)和促性腺激素(GTH)在纯化的sGH制品中的残留量均在0.5%以下。用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳SDS-PAGE评价sGH制品的电泳纯度并测定了其分子量为22000左右。等电聚焦电泳表明该种鱼GH由等电点分别为6.3和6.6的两种形式的分子组成。 相似文献
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磷酸酪氨酸蛋白专一抗体的制备和纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
以偶联磷酸化酪氨酸的牛血清白蛋白(BSA)作为免疫原免疫兔获得抗血清。自抗血清中分离获得抗体。自酪胺合成磷酸酪胺,并偶联到溴化氰活化的Sepharose4B上。抗体经磷酸酪胺-Sepharose 4B亲和柱纯化,所得抗体专一性强,Dot blot显示:抗体仅对酪氨酸磷酸化的蛋白质包括酪氨酸磷酸化的血清白蛋白,溶菌酶,卵清蛋白起抗原抗体反应,而不识别非酪氨酸磷酸化的溶菌酶,卵清蛋白,也不识别作为免疫 相似文献
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用纯化的草鱼生长激素单克隆抗体偶联到CNBr活化的Sepharose4B凝胶上,制成约10ml的亲和层析柱.用该柱一步纯化了重组鲤鱼生长激素基因的表达产物.偶联有13.65mg单克隆抗体的亲和柱一次可纯化得到约0.7mg重组鲤鱼生长激素.酶联免疫受体测定表明它具有强烈的生物学活性,SDS-PAGE表明它为单一蛋白带,分子量约为22000. 相似文献
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草鱼α2巨球蛋白的分离纯化与若干特性 总被引:2,自引:0,他引:2
α2 M是动物体内重要的血浆蛋白之一,195 5年Schultze从人的血清中首次分离纯化出α2 M这一位于电泳α区的蛋白质(郑远旗等,1994 )。α2 M作为一种非特异性的蛋白酶抑制剂在免疫、疾病发生和发展中的作用日益受到重视,尤其在鱼类免疫系统中α2 M起着非常重要的作用。但鱼类α2 相似文献
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儿茶酚胺类药物对草鱼生长激素分泌的影响 总被引:2,自引:1,他引:2
本文研究了儿茶酚胺类药物对草鱼生长激素水平的影响。腹腔注射儿茶酚胺合成抑制剂α-甲基-对-酪氨酸(α-MPT,5μg/gb·w和50μg/gb·w)显著降低草鱼鱼种血清生长激素水平,腹腔注射儿茶酚胺能神经毒素6-羟多巴胺(6-HODA,5μg/gb·w和50μg/gb·w)也显著降低草鱼鱼种血清生长激素水平。阿卟吗啡(APO,7.1mg/Kgb·w和12.5mg/Kgb·w)通过背大动脉插管注入草 相似文献
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草鱼催乳素抗血清的制备与鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
应用从草鱼垂体中分离纯化的催乳素免疫兔子制备了特异抗血清。用常规酶联免疫吸附测定法检测表明该抗血清与马哈鱼生长激素及促性腺激素完全没有交叉反应,而与草鱼生长湟级向弱交叉反应。免疫细胞化学染色表明该抗血清主要与草鱼垂体前叶催乳素细胞发生结合反应,与垂体间叶细胞有微弱染色反应,但与神经垂体琢垂体后叶细胞则完全没有免疫结合反应。 相似文献
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草鱼生长激素非竞争式酶联免疫吸附测定法的建立及鉴定 总被引:9,自引:0,他引:9
应用草鱼生长激素(gcGH)单克隆抗体及多价兔抗血清建立了草鱼GH非竞争式酶’联免疫吸附测定ELISA系统。用正辛酸法对腹水单抗进行了分离纯化,获得了高纯度的单抗制备物。聚丙烯酸胺凝胶电泳表明纯化的单抗由分子量分别为55kD和25kD的两条蛋白带组成。用纯化单抗铺底,用兔抗血清作后续抗体建立了一种测定草鱼GH的非竞争式双抗夹心ELISA方法。交叉试验表明该测定系统只与草鱼GH和基因重组鲤生长激素(rcGH)具有剂量依存的结合反应,而与大马哈鱼生长激素(sGH)、牛生长激素(bGH)、大马哈鱼促性腺激素(sGtH)、及黑鲢促性腺激素(bscGtH)等均无交叉反应。该 ELISA方法的灵敏度可达0.8ng/ml,组内变异系数为 5.9 %,组间变异系数为7.6%,回收率达90%以上。初步应用表明,鲤和团头鲂垂体抽提液、草鱼血清、鲤血清及鲫血清在该测定系统中有剂量依存的反应曲线,而大口鲶、黄颡鱼、中华鲟及黄鳝鱼垂体抽提液及大口鲶、胡子鲶和罗非鱼血清在该测定系统中没有交叉反应。 相似文献
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饥饿状态下草鱼生长激素的分泌 总被引:11,自引:2,他引:11
以两种规模草鱼为对象,研究了饥饿对其生长激素的影响。检测由背大动脉导管抽取的连续血样的结果表明;饥饿状态下草鱼(体重为0.5-1.0kg)生长激素分泌仍是间歇性的,但饥饿明显提高其总体生长激素平均值、基础生长激素平均值和其最大峰值。对于草鱼鱼种(体重为25.30g),饥饿也明显提高其血液中生长激素水平,但草鱼种的肥满度系数和血糖浓度却。在体外灌流实验中,饥饿的草鱼种脑垂体碎片生长激素基础分泌值明显高于正常投喂的对照组。这些结果表明:饥饿状态下草鱼生长激素分泌增强。 相似文献
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根据已报道的草鱼免疫球蛋白IgM、IgZ 和IgD 的序列设计表达引物进行PCR 扩增, 将扩增片段克隆至表达载体pET-32a, 并在大肠杆菌Rosetta-gami (DE3)中进行诱导表达。利用亲和层析法纯化表达的重组蛋白, 然后免疫日本大耳白兔, 获得兔抗IgM、IgZ 和IgD 的抗血清。经免疫印迹检测, 表明IgM、IgZ 和IgD的表达产物能够被兔多克隆抗体特异性识别。应用兔抗草鱼IgM 和IgZ 的多克隆抗体, 对草鱼多种器官、组织提取的总蛋白进行免疫印迹检测, 在肠、头肾、中肾、皮肤、脾脏、脑、鳃和血液中都检测到IgM 和IgZ的表达。
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草鱼生长与台湾棘带吸虫囊蚴内种群的关系 总被引:11,自引:0,他引:11
通过对草鱼鳃上台湾棘带吸虫囊蚴内种群的研究发现,随着草鱼的生长。其感染率,下蚴的平均密度都下降,其感染强度也呈下降的的趋势;草鱼鳃上囊蚴的频率分布,表明有大量的囊蚴寄生于少数草鱼鳃上,多数草鱼感染少量的囊蚴;囊蚴在草鱼不同组鳃片上的分布具有相同的变化规律; 相似文献
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胃肠道是一个复杂的消化系统, 每一部分都具有独特的生理特征。酸碱度(pH)是消化道重要的生理指标之一, 其对营养物质的消化、吸收和肠道微生物的生长等具有重要影响。为了研究草鱼在食物消化过程中, 肠道的酸碱度变化, 测定了草鱼肠道食物糜、肠液和黏膜的pH。结果显示, 随着食物的消化, 它们的pH都有下降的趋势。肠道食物糜pH在6.86±0.24到8.43±0.10之间, 肠液pH在7.14±0.22到8.63±0.02之间, 相同时间点相同肠段两者之间的pH差异很小, 并且在实验期间两者的pH变化趋势相同。黏膜pH在6.23±0.04到6.7±0.13之间, 为弱酸性。除了时间点12h外, 相同时间点和相同肠道部位黏膜的pH与食物糜、肠液的pH相比均有显著性差异(P<0.05)。分析发现草鱼摄食食物的pH与上述三相的pH之间均有显著性差异(P<0.05), 研究结果为草鱼消化生理及营养学研究提供了基础资料。 相似文献
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