泡球蚴在小鼠体内发育过程的组织学观察

泡球蚴病(Alveococcosis,又称多房棘球蚴病)是一种严重危害人体健康的寄生虫病。在我国流行于甘肃、宁夏、新疆、青海及四川西部等地区。病原为多房棘球绦虫(Echinococcus multilocularis Leuckart,1863),并已先后在四川野犬(朱依柏等,1983)与宁夏红狐(李维新等,1983)肠内查到成虫。1984年8月,作者又在四川甘孜县大塘坝区剖杀野犬16只,其中4只查到多房棘球绦虫,除1犬仅发现7条成虫外,其余3只均达数千条。为了解本病发生过程,探索化疗药物筛选与疗效考核指标,作者等取成虫孕卵节片口饲感染小鼠,建立了动物模型。本文报告泡球蚴在小鼠肝内由…     

青海鼠体内首次发现猫泡尾带绦虫蚴

1985年1月至1987年8月,选市区东、西、南、北以及市内五个调查点,调查对象为城市居民、机关、工厂,学校、商店等;对市郊区野鼠进行流行性出血热调查中,相继发现所捕获的小家鼠及褐家鼠肝脏上有数量不等的包囊物,经对270余条虫体的观察鉴定,确认为带尾蚴(Cysticercus fasciolaris)。现报道如下: (一)不同鼠种的感染情况小家鼠16.22％(163/1005);褐家鼠25.30％(105/415);长尾仓鼠7.41％(2/47)。5只子午沙土鼠未见感染。 (二)不同生境的感染情况 在各种生态     

日本血吸虫在小鼠体内发育形态的扫描电镜观察

日本血吸虫童虫在移行和发育过程中体形发生了明显的演变,并形成了口吸盘和排泄孔,同时也伴随着许多细微结构的改变。这些改变包括:体褶和体嵴数量及高度的增加、体棘数目和位置的改变、感觉器数量和分布的变化。     

重组泡球蚴Em18蛋白不同纯化方法的比较

目的：比较不同方法纯化重组泡球蚴Em18的效果。方法：进一步对BL21-pET41a-Em18重组菌的诱导表达条件进行摸索优化,采用改良的超声程序破碎大肠杆菌细胞,分别经不同的纯化方法进行蛋白纯化,通过SDS-PAGE对纯化结果进行比较分析,Western blot进行活性鉴定。结果：①在菌液OD600为0.8-1.0,加IPTG终浓度为1 mmol/L,37℃诱导3h,rEm18-GST重组蛋白得到成功高表达,在相对分子量为50kDa处有表达条带。②超声程序为：工作3 s,间歇4s,功率200~300W,超声体系中加入溶菌酶和蛋白酶抑制剂作用,可促进大肠杆菌细胞的破碎,降低目的蛋白的降解;加入终浓度为1%的Triton-X100作用可增加融合蛋白的可溶性。③通过比较不同方法纯化重组泡球蚴Em18的效果表明采用单纯His柱纯化可获得浓度高、纯度高的rEm18-GST重组蛋白。Western blot分析表明该蛋白能与泡型包虫病（AE）患者血清特异性反应。结论：建立了一种纯化原核表达Em18融合蛋白的较为经济和有效的方法,得到大量有生物学活性的Em18融合蛋白,为包虫病诊断试剂盒的研制奠定基础。     

棘球蚴囊液对小鼠脾细胞IL-17及Smad2表达的影响

目的:观察细粒棘球蚴囊液对体外培养BALB/c小鼠脾细胞白介素(IL)-17和Smad2基因表达的影响.方法:制备小鼠脾细胞悬液,接种于48孔培养板中进行培养,以不加任何干预为对照组,囊液处理组为实验组.定时取样提取总RNA,经反转录成cDNA后用实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测IL-17和Smad2基因的表达.结果:小鼠脾细胞IL-17表达在囊液处理6h和12h后升高(1.000±0.207 VS 3.672±0.746和1.000±0.154 VS 5.525±0.843),差异有统计学意义(P＜0.05);小鼠脾细胞Smad2表达在培养1h后升高(1.000±0.077 VS 2.069±0.098)在12h后降低(1.000±0.110 VS 0.247±0.011),差异有统计学意义(P＜0.05);协同分析发现IL-17基因与Smad2基因的表达变化呈现负相关(P＜0.01),相关系数r=-1.结论:细粒棘球蚴囊液对小鼠脾细胞IL-17和Smad2基因的表达具有上调作用,推测其可能与宿主抗棘球蚴感染的机制有关.     

地塞米松对小鼠肠道菌群及脏器的影响

目的 应用聚合酶链式反应-变性梯度凝胶电泳(PCRDGGE)技术及苏木精-伊红染色法(HE染色法)探究地塞米松对小鼠肠道菌群和脏器的影响。 方法 选用SPF级Balb/c小鼠10只,随机分为实验组和对照组,每组5只。实验组每日灌胃1.228 5 mg/kg地塞米松,对照组不做任何处理。观察小鼠体质量、行为、皮毛和粪便等的变化。28 d后,无菌条件下取小鼠粪便提取细菌基因组DNA,应用PCRDGGE技术进行肠道菌群多样性及差异性分析;取小鼠肺、脾、肝、小肠、盲肠等进行HE染色,观察其脏器变化情况。 结果 与对照组相比,实验组小鼠体质量有明显降低,肺指数升高,脾指数下降;PCRDGGE结果表明实验组小鼠肠道菌群的多样性明显增加,优势菌群发生转变;实验组小鼠脏器出现了明显的炎症反应。 结论 服用地塞米松使小鼠肠道菌群的构成和多样性发生了显著改变;引起了小鼠脏器的炎症反应,可能会对小鼠生长发育产生影响。     

马来丝虫微丝蚴低温保存及其后在中华按蚊体内继续发育的观察

低温保存微丝蚴,可为广泛深入开展丝虫和丝虫病的实验研究提供虫源,具有重要意义。近年来,由于冷冻技术的不断改进,采用多种冷冻保护剂及控制冷冻速度的方法,大大提高了微丝蚴冷冻后的活力。迄今,国外已有不少实验报道,经冷冻不同期后的微丝蚴仍能继续在相应的昆虫宿主体内发育到感染期幼虫即Ⅲ期蚴(Obiamiwe and Mac Donald,1971;Ham et al.,1979、1981;Miajas and Townson,1980;Lok et al.,1983;Lowrie,1983)。国内对微丝蚴低温保存的研究尚未见报道。我们于1983年9月份以来,对马来丝虫(Brugia malayi)微丝蚴进行了低温保存及其后活力的观察,初步结果简报于下:     

异盘并殖吸虫在小鼠体内发育及宿主转换的研究

在我国,引起人体患病的并殖吸虫有卫氏并殖吸虫(Paragonimus westermani)、斯氏狸殖吸虫(Pagumogo-nimus skrjabini)以及尚未引起人们足够重视的异盘交殖吸虫(Paragonimus heterotremus)三种。自从1965年广西那坡县发现异盘并殖吸虫疫源地和一例痰中查见虫卵的患者以来,泰国、老挝等地也分别报告了该虫引起游走性皮下结节与在肺内检获成虫的病例。异盘并殖吸虫对人体的致病性、宿主关系及传播方式等问题,引起了人们的关注。近年来,卫氏并殖吸虫和斯氏狸殖吸虫在非正常宿主体内的发育及宿主转换的研究,日趋深入。研究结果表明,此两种并殖吸虫病均可由转续宿主介导或经宿主转换而传播。异盘并殖吸虫在这方面的研究,迄今尚未涉及。为此,我们以小鼠为动物模型,进行了宿主转换的研究。     

葡萄糖对小鼠胚胎体外发育的影响

通过在CZB培养液中添加不同浓度葡萄糖及在胚胎发育的不同阶段加入葡萄糖,对小鼠胚胎进行体外培养,以探讨葡萄糖在小鼠早期胚胎体外发育中的作用。其结果表明,小鼠胚胎在含糖CZB与在无糖CZB中培养比较,4-细胞发育率无差异;各浓度葡萄糖组囊胚率显著高于无糖组,其中3.0mmol/L浓度组囊胚细胞数显著高于其余组;实验二：2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加葡萄糖囊胚率显著提高。上述结果证明,在小鼠胚胎体外培养中加入葡萄糖不会导致2-细胞阻滞;葡萄糖浓度增加至10mmol/L对小鼠胚胎无毒性作用,其最适浓度为3.0mmol/L;2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加葡萄糖是必要的。关键词 葡萄糖;小鼠;2-细胞阻滞;胚胎;体外发育     

FKBP52对小鼠前列腺发育的影响

目的通过FKBP52基因敲除小鼠模型探索FKBP52在小鼠前列腺发育过程中的作用。方法分别对胚胎第17．5天、新生的和出生后3周的野生型和FKBP52基因敲除小鼠的前列腺进行切片HE染色,观察不同发育时期里野生型和FKBP52基因敲除小鼠前列腺发育的异同。结果（1）小鼠前列腺发育的起始不依赖于FKBP52基因的参与;（2）随着胚胎的发育,FKBP52在雄鼠前列腺发育中的作用逐渐显现出来,即FKBP52的缺失会导致前列腺叶发育受阻,最终不能形成成熟的前列腺。结论FKBP52在小鼠前列腺的发育过程中具有重要作用,它不参与前列腺的发育起始过程,但其缺失会导致前列腺发育受阻,即不能形成成熟的前列腺。     

蕨菜黄酮对小鼠体内丙二醛含量的影响

采用硫代巴比妥酸法(TBA法)测定小鼠血清和肝组织中丙二醛(malondialdehyde,MDA)的相对含量.结果表明,蕨菜黄酮可降低小鼠血清及肝组织中MDA含量.对于血清,随着饲喂的蕨菜黄酮量的增加,MDA相对含量降低的程度越显著,150mg/kg组与300mg/kg组相比,MDA相对含量差异达到极显著水平(P＜0.01);对于肝组织,随着蕨菜黄酮量的增加,MDA相对含量逐渐降低,但当蕨菜黄酮量达到一定值(150mg/kg)后,再继续加入蕨菜黄酮量,则对MDA相对含量的影响与150mg/kg组相比无显著差异.说明在本实验条件下,饲喂蕨菜黄酮有明显改善小鼠机体代谢合成,具有清除体内氧自由基功能以及增强机体抗氧化功能等保健作用.     

在小鼠体内培育肾脏

人和猪胚胎干细胞所发育而来的肾脏现在已可成功地生长在小鼠体内。如果该成果可以成功地应用于人类 ,这将允许医生置换受损器官 ,而无需捐献者。以色列科学家使用一月龄幼鼠作为发育肾脏的宿主 ,以避免对胚胎干细胞产生免疫排斥反应。胚胎干细胞也可以适应宿主 ,降低以后发育过程中产生免疫排斥反应的机率。如果使用的干细胞太不成熟 ,它们将不能发育成所需的细胞型 ,但是若过于成熟 ,宿主就会对发育成的肾脏产生排斥反应 ,因此必须精确地选择一个适当的移植时机。在宿主体内发育成熟的肾脏可以很好地产生尿液 ,但是它不能与排泄系统相连接…     

脂联素在应激状态下对小鼠卵泡发育的影响

目的:利用饥饿刺激探讨应激状态下脂联素缺失对小鼠卵泡发育的影响。方法:C57BL/6、脂联素半缺失(APN+/-)、脂联素全缺失(APN-/-)三种基因型小鼠以正常进食量的一半给予饥饿刺激,建立应激模型,30天后处死小鼠取卵巢,计数三种基因型小鼠各级卵泡数目。结果:1经过30天饥饿后饥饿组小鼠体重下降与初始体重比较有统计学意义(P0.001),应激模型建立。2应激状态下三种基因型小鼠卵巢重量未见统计学差异(P0.05)。3正常饮食组三种基因型小鼠各级卵泡比例未有统计学差异(P0.05)。饥饿后C57BL/6小鼠原始卵泡比例为(47±2.966)%,APN+/-原始卵泡比例为(36.5±1.555)%(P0.05),APN-/-原始卵泡比例为(36.8±2.200)%(P0.05);C57BL/6闭锁卵泡比例为(12±1.225)%,APN+/-闭锁卵泡比例为(19.75±1.887)%(P0.01),APN-/-闭锁卵泡比例为(20±0.8367)%(P0.001),与野生型闭锁卵泡比例比较差异有统计学意义。结论:饥饿刺激下脂联素缺失小鼠原始卵泡消耗增加,而闭锁卵泡的发生增加,处于生长状态的卵泡减少,提示在应激状态下脂联素水平的下降可导致卵泡成熟的过程受阻。     

高尔基体对小鼠卵母细胞体外发育进程的影响

目的初步探讨高尔基体在小鼠卵母细胞体外发育进程中的作用。方法布雷菲德菌素A（Brefeldin A,BFA）处理小鼠未成熟,成熟卵母细胞,利用特异性标记物阻COP标记高尔基体。激光扫描共聚焦显微镜观察BFA处理对高尔基体产生的影响;同时。观察并比较不同处理组小鼠未成熟／成熟卵母细胞的体外成熟率、孤雌激活率、体外受精率及2-细胞率。结果GV期卵母细胞经BFA处理后,高尔基体的形态和分布发生明显改变。其体外成熟率（2．5％）与对照组（70．4％）比较统计学差异显著（P〈0．001）;洗掉BFA后,其体外成熟率（67．2％）与对照组无统计学差异（P〉0．05）。另外,成熟卵母细胞经BFA处理后。其体外受精率及2．细胞率均与对照组差异无统计学意义（P〉0．05）。结论小鼠卵母细胞体外成熟的正常进行需要高尔基体主导的膜运输。而体外受精和受精卵卵裂过程中不需要功能性的高尔基体。     

饼形碘泡虫在草鱼苗体内发育各阶段的显微及超微结构

饼形碘泡虫是一种引起草鱼苗肠道疾病的病原体,主要寄生在草鱼苗前肠的绒毛固有膜内。通过光学显微镜、电子显微镜观察,在不同日龄的病鱼组织中可见到单核营养体,核分裂,多核营养体及孢质分割的单产孢体或双产孢体,极囊形成,孢壳组合及孢囊产生等过程。在27-30℃的水温中,该寄生虫在鱼体内发育成熟需要12-15天。透射电镜观察到成熟孢子有丰富的粗面内质网,糖原体,近极囊处各有一个略呈三角形的核,两个黑色的圆形体。极囊内极丝为4-5圈。通过扫描电镜观察到孢子的缝脊较凸出,每办孢壳各有一极丝孔。从裂开的孢子里还见到细胞质。     

内蒙古西伯利亚棘球绦虫和多房棘球绦虫泡状蚴在小白鼠发育成熟的比较

The alveolar echinococcus is one of the most dangerous worm parasites in man. Rausch and Schiller reported a new species, Echinococcus sibiricensis n. sp. from arctic fox, Alpex logopus, on St. Lawrence Island of Alaska, USA. According to the view of Vogel, the sibiricensis form is only a geographical race or subspecies of Europe Echinococcus multilocularis. So far, the two names, Echinococcus multiocularis multilocularis and Echinococcus multilocularis sibiricensis, existed in many references and text books. We have found the adults of Echinococcus sibiricensis and Echinococcus multilocularis from sand foxes, Vulpes corsac and their larval stages (alveolar echinococcus) from field voles, Microtus brandti in the Hulunbeier Pasture of Inner Mongolia, northeastern China in 1985 and 1998-1999. Two types of metacestodes with quite different styles of early development of E. sibiricensis and E. multilocularis were found from field voles and laboratory experimental white mice. As one characteristic of alveolar E. multilocularis, the capsules are produced by the exogenous budding of germinal cell layer together with cyst wall. The protoscoleces grow from germinal cells on germinal cell layer. The peduncles of early protoscoleces attached to the germinal cell layer on the inner surface of capsule wall(Plate I, Figs. 1-2). Some protoscoleces in reticular structure were linked with the inner surface of capsule wall (Plate I, Fig. 3) in livers of mice in 9.5th month postinfection. In 14th month old alveolar multilocularis, large number of mature protoscoleces in reticular structure were still linked to the inner surface of capsule wall (Plate I, Figs. 4-8). The cavities of some capsules were filled with protoscoleces in meshes of reticular structure which were also linked around with the inner surface of capsule wall (Plate I, Fig. 9). The superficial surface of livers of positive field voles and experimental mice never showed any hyperemic phenomenon. The superficial surfaces of livers and lungs of positive field voles and experimental mice infected with alveolar E. sibiricensis were highly hyperemic. The metacestodes of E. sibiricensis composed of mother cyst, undifferentiated embryonic cysts and small brood capsules. Cavities of all cysts were fully filled with germinal cell masses. Host reaction appeared to be very strong, all cysts were surrounded by thick connective tissue and dense leukocytes (Plate II, Fig. 10). All alveolar vesicles were found located in lungs tissue of experimental mice. Large germinal cell masses metastasized out from undifferentiated embryonic cysts into host lung tissue, where germinal cell masses developed into accumulation of early protoscoleces (Plate II, Figs. 11-12). Early protoscoleces of alveolar E. sibiricensis were seen earliest in mice lung tissues on 101-104th days after infection. Many small capsules in different sizes and different shapes containing mature protoscoleces and reticular structure (Plate II, Figs. 13-15) were found in lungs of mice in 9th month after infection. Only in one experimental mouse infected with alveolar E. sibiricensis in 8.5th month postinfection, both its lung and liver existed alveolar cysts; the capsules in liver were surrounded by very thick connective tissue of the host, and there were some protoscoleces in their cavities (Plate II, Figs. 16-18).     

葡萄糖对ICR小鼠胚胎体外发育的影响

研究葡萄糖在小鼠早期胚胎体外发育中的作用。实验1将6—8周龄的ICR雌鼠超数排卵后与公鼠交配,收集1-细胞放入含0(对照组)、0.5、1、3、5、10mmol/L葡萄糖的CZB中培养;实验2将从超排的ICR雌鼠输卵管内收集的1-细胞放入无糖CZB中培养,分别于1细胞、2细胞、4细胞、桑椹胚阶段移入含3.0mmol/L葡萄糖(最适浓度)的CZB中,培养24h后又移回到无糖CZB中(桑椹胚阶段除外)继续培养以及整个胚胎培养过程均在含糖CZB中,对照组胚胎培养全程均在无糖CZB中。每组胚胎于37℃、5%CO2培养箱中培养120h,每24h在倒置显微镜下观察胚胎发育情况,分别计算2-细胞率、4-细胞率、桑椹胚率、囊胚率和孵化率,并进行囊胚细胞计数。结果显示,小鼠胚胎在含糖CZB中与在无糖CZB中4-细胞发育率无差异;含糖CZB中囊胚率显著高于对照组;3.0mmol/L浓度组囊胚细胞数显著高于其余组;2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加葡萄糖囊胚率显著高于对照组,1-细胞至2-细胞、桑椹胚及其以后阶段添加葡萄糖囊胚率与对照组无差异。实验证实,在ICR小鼠胚胎体外培养中加入葡萄糖不会导致2-细胞阻滞;葡萄糖浓度增至10mmol/L对ICR小鼠胚胎无毒性作用;ICR小鼠胚胎体外培养的最适葡萄糖浓度为3.0mmol/L;2-细胞至4-细胞、4-细胞至桑椹胚前添加葡萄糖是必要的。     

内蒙古西伯利亚棘球绦虫和多房棘球绦虫泡状蚴在小白鼠发育成熟的比较

本文报道人兽共患的泡状肝包虫病原,西伯利亚棘球绦虫Echinococcus sibiricensis (Rausch andSchiller, 1954)泡状蚴和多房棘球绦虫Ech inococcusmultilocularis ( Leuckart, 1863)泡状蚴在KM株小白鼠发育成熟过程比较观察的结果.此两虫种泡状蚴的发育成熟过程仍然和它们早期发育的规律(唐崇惕等,2001)相同.虽然它们成熟的泡囊都被着生在网状结构中的许多原头节所充满,但是在多房棘球绦虫9-14个月的泡状蚴,仍然可以见到它们的原头节和网状结构都是起源于泡囊囊壁内表面的胚细胞层,并且始终保持与该层的联系.而西伯利亚棘球绦虫泡状蚴在鼠肺脏或肝脏的各泡囊中的原头节和网状结构是由可移动的胚细胞团发育生成,它们与泡囊囊壁没有如前者样的联系.西伯利亚棘球泡状蚴在各别小白鼠肝脏也能发育成熟,但不正常,宿主反应异常强烈.     

旋毛虫在小鼠体内发育及T淋巴细胞亚群变化的动态观察

目的观察IL-2对感染旋毛虫小鼠免疫功能的影响及旋毛虫在小鼠体内的发育。方法小鼠感染旋毛虫后,分别采用ELISA和流式细胞仪检测小鼠不同时期外周血中IL-2含量、CD4^＋及CD8^＋T淋巴细胞的百分率。取小鼠不同部位肌肉观察旋毛虫的发育和分布。结果小鼠感染旋毛虫后1～5周IL-2的含量较正常组明显增加。小鼠感染旋毛虫后1～6周,CD4^＋T细胞较正常组明显减少,CD8^＋T淋巴细胞明显增多,CD4^＋／CD8^＋比值明显下降。旋毛虫幼虫主要分布在小鼠的膈肌,其次为咬肌,舌肌最少。结论IL-2对感染旋毛虫小鼠早期具有一定的免疫抑制作用,小鼠感染旋毛虫后21d即可检出旋毛虫,35～42d密度达最高。     

不同发育时期小鼠胚泡表面Lewis寡糖抗原的表达

在胚泡表面表达的Lewis寡糖抗原 (LewisX ,LewisY)在胚胎发育以及着床过程中起重要作用 .应用免疫印迹和免疫荧光等方法对着床前小鼠胚泡表面的Lewis寡糖抗原进行分析 .结果发现 :小鼠胚泡LewisX寡糖蛋白有 2 7kD、2 9kD、6 8kD和 80kD 4种 ,LewisY寡糖蛋白有 70kD和 90kD 2种 ;2种寡糖抗原均在 8细胞时期开始表达 ,其中 ,LewisY寡糖抗原在胚泡表面的表达持续升高 ,直至胚泡着床 ;而LewisX寡糖抗原的表达则在桑椹期后逐渐降低 ,但仍在胚胎期的囊胚腔侧的顶端可见有部分表达 ;应用RT PCR的分析结果显示 ,LewisX合成的关键糖基转移酶FUT9基因在 4细胞及桑椹期高表达 ,到胚泡期虽然强度明显减弱 ,但仍有表达 ;而LewisY合成关键酶FUT1基因在 4细胞未见表达 ,在桑椹和胚泡阶段均有表达并逐渐升高 ,表达趋势与相应寡糖的表达趋势基本一致 .结果说明 ,在小鼠胚泡表面表达的Lewis寡糖抗原的表达受到相应糖基转移酶基因转录的调控