阴道毛滴虫的研究 Ⅴ.不同动物血清对牛胎毛滴虫(T.foetus)繁殖率的影响

到目前为止所有培养毛滴鞭毛虫(Trichomonades)的培养基都不能缺少人或动物的血清。Riedmuller氏在1936年首先指出在肉汤加全血的培养基中,血清是促进牛胎毛滴虫在玻皿生长繁殖的主要因素;而经洗涤或是经溶血后的血球就没有这种促进生长的作用。Sprince和Kupferberg 1947年以及Kupferberg,Johnson和Sprince 1948年研究阴道毛滴鞭毛虫(T.vaginalis)的营养要素时发现在人血清中具有两种促进生长的因素:     

抗菌肽体外对结核杆菌的作用初探

将结核杆菌接种于含抗菌肽的苏通氏培养基中 ,在接种后不同时间内取样接种于罗氏培养基上 ,观察结核杆菌在罗氏培养基上的生长情况 ,初步探讨了抗菌肽 (CecropinB)对结核杆菌标准株H3 7RV的作用。结果显示 ,接种 10天后在罗氏培养基上结核杆菌对抗菌肽敏感。说明在体外培养中 ,抗菌肽有一定的抗结核杆菌的作用     

细胞工程

叨1185搅拌生物反应器中用于抗体生产的低蛋白无血清培养基喋】/Bla,y,H.D.…jl Bioteehnol.Lett一1989,11(7)一455一460降自DBA,1989,8(19),8卜11533] 要在搅拌培养槽中大规模生产单克隆杭体(MAbs),必需一种低蛋白无血清的培养基.将杂交瘤l台7.1(^TCC HB58)培养在搅拌培养槽内,以进行培养优化.无血清培养基DIF由Iscove氏和Ham氏F12培养基按卜1组成,再添加10mg/l铁饱和人类转铁蛋白,和10mg/1牛胰岛素.将脂肪酸(FA)鳌合到牛血清白蛋白(BSA)上.对低蛋白培养基IFP来说,BSA一FA可用0.1%PEG 20 000代替.尽管在极低的蛋白含量下,但…     

卡介苗菌株的变化

<正>前言 BCG来源于Nocard从一头患结核性乳腺炎的奶牛分离到的结核杆菌毒性牛型株。在减毒过程中Calmctte(卡氏)和Guerin(介氏)在1908年注意到一个偶然的发现,经培养的结核杆菌粘聚团块中加入牛胆汁很容易地能使粘聚菌块分散。于是,他们发明了一种含甘油的胆汁马铃薯培养基,并且他     

溶组织内阿米巴培养的实验

从1925年伯克(Boeck)等创用洛克氏液蛋血清的阿米巴培养基以来,国内外对阿米巴培养作了诸多改进,使阿米巴培养阳性率得到不断的提高,故目前可作为阿米巴病诊断的一种较为理想的方法。作者对曾采用的马血清-洛克氏液培养基加以改良,即以蛋白胨水代替洛克氏液,制成改良的马血清-胨水培养基(Modified Serum Peptone,M-SP),用于阿米巴培养,取得较满意的结果。现报告如下。     

中华绒螯蟹血细胞原代培养条件的优化

比较了几种常见血细胞培养基(L-15、2×L-15、3×L-15、M199和RMPI-1640)对中华绒螯蟹(Eriocheir sinensis)血细胞原代培养中细胞形态以及存活率的影响,以及在筛选获得的最佳培养基中添加不同比例胎牛血清(FBS)(0%、5%、10%和15%),进一步观察了血清对中华绒螯蟹血细胞培养效果的比较。结果表明,3×L-15培养基培养效果较好,所培养的细胞形态相对完整,数量较多,培养至96 h时血细胞存活率仍大于60%;而其他4种培养基效果较差,培养12 h存活率均低于50%,且细胞形态结构变化明显。以3×L-15培养基为基础,添加不同比例胎牛血清后发现,对细胞存活有显著影响,存活率明显降低。因此,不添加血清的3×L-15培养基对中华绒螯蟹血细胞的生长较为适宜。     

痢疾阿米巴培养的研究痢疾阿米巴在双相培养基内生长的分布情况

自双相培养基内转种痢疾阿米巴之培养物时,都是自培养基的底部取材,因为底部的虫体较多,但究竟在底部的哪一层,沉淀物曲底呢或表层呢?关于这方面的问题尚缺乏参考资料。本文的研究目的是了解痢疾阿米巴在双相培养基的液体部分中生长和分布的情况,作为转种及浓集虫体的参考。一、方法①培养基是洛克——鸡蛋——血清培养基(1):鸡蛋斜面部分分装于试管(16×1.5厘米)内,每管约1.5毫升,斜面高度约4厘米;复盖液为5毫升(洛克氏液∶牛血清=8∶1);米粉1白金耳。②痢疾阿米巴培养48小时后,在培养基试管外壁,用蜡笔划分6个不同的水位标记(图1),即:Ⅰ.沉淀物下层;Ⅱ.沉淀物上层;Ⅲ.沉淀物表层——紧接触沉淀物上层之一薄水膜;Ⅳ.沉淀物上部1—5毫米处;     

一种从土壤样品选择性分离假诺卡氏菌的方法

为提高假诺卡氏放线菌的分离效率,根据其营养特性和对抗生素的敏感性,设计、检验了５种选择性分离培养基;实验检测了模式菌株在不同培养基上的生长情况,结果表明培养基Ｓ１和Ｓ２对假诺卡氏菌生长有显著的选择性。经该方法从韩国、印度尼西亚和中国广西地区不同土样中分离到一收诺卡氏放线菌。     

藏药熏倒牛提取物的抑菌杀虫活性研究

为了探讨藏药熏倒牛乙醇提取物不同极性溶剂萃取部位的抑菌杀虫活性,将熏倒牛乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,所得各萃取部位及水余液部位通过抑菌圈法测定抑菌活性部位,对活性部位采用二倍稀释法测定最低抑菌浓度,采用改良任氏法测定杀灭滴虫活性部位及最低有效杀虫浓度。结果表明熏倒牛乙醇提取物的乙酸乙酯部位对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌有强抑制作用,最低抑菌浓度为0.125 mg/m L,对变形杆菌、粪肠球菌和白色念珠菌的抑制作用也比较强,最低抑菌浓度为0.25 mg/m L。石油醚部位和乙酸乙酯部位对阴道滴虫有明显抑制作用,最低有效杀虫浓度分别为0.5、0.25 mg/m L。说明熏倒牛乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位有较强的抑菌杀虫作用,是熏倒牛的抑菌杀虫活性部位。     

藏药熏倒牛提取物的抑菌杀虫活性研究北大核心CSCD

为了探讨藏药熏倒牛乙醇提取物不同极性溶剂萃取部位的抑菌杀虫活性,将熏倒牛乙醇提取物依次用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇萃取,所得各萃取部位及水余液部位通过抑菌圈法测定抑菌活性部位,对活性部位采用二倍稀释法测定最低抑菌浓度,采用改良任氏法测定杀灭滴虫活性部位及最低有效杀虫浓度。结果表明熏倒牛乙醇提取物的乙酸乙酯部位对金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌有强抑制作用,最低抑菌浓度为0.125 mg/m L,对变形杆菌、粪肠球菌和白色念珠菌的抑制作用也比较强,最低抑菌浓度为0.25 mg/m L。石油醚部位和乙酸乙酯部位对阴道滴虫有明显抑制作用,最低有效杀虫浓度分别为0.5、0.25 mg/m L。说明熏倒牛乙醇提取物的乙酸乙酯萃取部位有较强的抑菌杀虫作用,是熏倒牛的抑菌杀虫活性部位。     

一种从土壤样品中选择性分离假诺卡氏菌的方法

为提高假诺卡氏放线菌的分离效率,根据其营养特性和对抗生素的敏感性,设计、检验了5种选择性分离培养基;实验检测了模式菌株在不同培养基上的生长情况,结果表明培养基S1和S2对假诺卡氏菌的生长有显著的选择性。经该方法从韩国、印度尼西亚和中国广西地区不同土样中分离到一些假诺卡氏放线菌。     

MALDI-TOF MS技术在侵袭性丝状真菌快速鉴定中的应用

目的 探索不同培养基、不同培养时间和不同蛋白质提取方法对侵袭性丝状真菌质谱鉴定准确率的影响,旨在提高基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术鉴定侵袭性丝状真菌的准确率。方法 采用分子生物学方法为金标准,同时运用基质辅助激光解析电离飞行时间质谱技术对所收集临床丝状真菌进行鉴定。根据分子生物学的鉴定结果,去除VITEK-MS v3.0数据库中没有的菌株,其余菌株接种在沙氏葡萄糖琼脂(SDA)、马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)和察氏培养基(CA)3种不同的培养基中,采用2种不同的蛋白质提取方法(甲酸乙腈法和磁珠法),获得了不同培养时间点(2、3、5、7和9 d)的特异性质谱指纹图谱。结果 不同丝状真菌蛋白质提取方法进行比较,甲酸乙腈法总鉴定准确率为79.8%,磁珠法总鉴定准确率为77.5%,2种丝状真菌蛋白质提取方法的质谱鉴定准确率差异无统计学意义(χ²=1.040,P=0.308)。不同培养基进行比较,SDA培养基总鉴定准确率为90.7%,PDA培养基总鉴定准确率为81.4%,CA培养基总鉴定准确率为67.4%,3种不同培养基的丝状真菌质谱鉴定准确率差异有统计学意义(χ     

伊氏锥虫在人胚肺成纤维细胞和在新生鼠肾成纤维细胞型细胞中的体外培养

在HEPES缓冲,含15—20％胎牛血清,100单位青霉素/ml,100微克链霉素/ml的RPMI-1640培养基中,用人胚肺成纤维细胞(KMB)和新生鼠肾成纤维细胞型细胞(ZUKF)作支持细胞,成功地使伊氏锥虫(Trypanosoma evansi)正常动基体株(kinetoplastic strain)和异常动基体株(dyskinetoplastic strain)在37℃含5％ CO_2的二氧化碳培养箱中连续培养达60天以上,并保持其对小鼠的高度感染力和致病力。这是迄今为止首次利用来源于人的细胞作支持细胞连续培养家畜非洲锥虫血液型成功的报告。实验结果表明伊氏锥虫体外培养成功与否对提供支持细胞的宿主是否有感染性无必然的联系。此外,利用Baltz氏等建立的无支持细胞培养系统,我们亦成功地使上述两伊氏锥虫株在体外连续繁殖,并保持对小鼠的高度感染力和致病力。     

对德氏乳杆菌DM8909菌株的发酵工艺研究

德氏乳杆菌 DM890 9菌株是大连医科大学微生态学研究所分离驯化的一株兼性厌氧菌 ,主要用于防治非特异性阴道炎等妇科疾病。本实验通过对德氏乳杆菌 DM890 9菌株进行摇瓶、小型全自动发酵罐和 5 0 0 L发酵罐发酵工艺学研究 ,考察其发酵工艺中试条件。现将研究结果报告如下 :1　材料与方法1.1　菌种　本研究所使用的菌种德氏乳杆菌 DM890 9(L actobacillus debrueckii subsp.lactis)由大连医科大学微生态学研究所提供。1.2　培养基　摇瓶种子培养基、小罐发酵培养基及大罐发酵培养基均采用 L BS培养基。1.3　培养方法1.3.1　摇瓶培养　…     

乳酸杆菌造成的微环境对阴道毛滴虫的影响

目的:研究乳酸杆菌产生的微环境对阴道毛滴虫的影响,为新型微生态制剂的开发提供可靠依据.方法:于滴虫生长高峰期分别将0.25 ml,0.5 ml,1.0 ml,2.5 ml已培养、鉴定好的浓度为3.0×108/ml乳酸杆菌加入到最适pH值肝浸汤培养基中,观察不同乳酸杆菌浓度的培养基中滴虫死亡情况.结果:乳酸杆菌浓度为0.5×108/ml与0.14×108/ml、0.27×108/ml、1.0×108/ml比较,在其浓度为0.5×108/ml时滴虫的死亡率明显要高.结论:体外试验中对阴道毛滴虫生长的抑制作用最强的乳酸杆菌浓度为0.5×108/ml.     

大黄鱼细菌性病原哈维氏弧菌培养特性的研究

弧菌是危害水产养殖动物的最为严重的病原之一.从患病大黄鱼肝脏分离致病的细菌哈维氏弧菌GYC1108-1为材料,对哈维氏弧菌GYC1108-1株的最佳生长条件及培养基优化进行了测定.综合考察不同的培养温度、培养时间、培养基盐度、培养基的pH值对细菌生长的影响,并采用正交实验法,对培养基配方进行优化.结果表明:不同的培养温度、培养时间、培养基盐度、培养基pH值等均会影响细菌的产量.GYC1108-1适宜生长的盐度为1%-5%、pH为5～9.5、温度为15～35℃、在培养基中添加硫酸铜、硫酸氨会明显促进生长;最佳培养条件及培养基成份为:NaCl 2%,pH8.0,温度30℃,蛋白胨1.0%、牛肉膏0.75%、CuSO4 0.3mg/L、(NH4)2SO4 0.1g/L.     

牛肝脏细胞体外培养和传代细胞的初步鉴定

该文采用灌注胶原酶消化法分离牛肝细胞,通过DMEM培养基(含10%胎牛血清)体外连续进行原代和传代培养,观察细胞增殖变化及细胞培养过程中的形态消涨变化情况。该文还对第12代培养细胞的染色体情况及细胞生长情况进行分析,同时采用PAS染色法进行糖原含量鉴定。结果显示,分离的肝细胞群体倍增时间为62.8 h,染色体为60条, PAS染色观察发现,培养细胞质中有大量糖原颗粒。     

马桑菌株的生物学特性

对从湖北、四川、云南等地采集的尼泊尔马桑(Coriaria nepalensis Wall.)根瘤中分离的20株内生菌纯培养物所进行的研究表明,其形态均具有弗兰克氏菌属的特征。在粗细不一的分枝菌丝体上有泡囊和孢囊,有的还有串珠状结构的菌丝体。不同菌株在液体培养基上生长速度很不一致;菌丝体多呈絮状或颗粒状沉淀,个别还呈薄膜状沉淀;绝大多数菌株的菌丝体具有不同色调的色素;在S培养基中大多数都能产生可溶性色素。上述这些培养特征常因培养基成分和培养方式的不同而有差异。大多数菌株的胞壁组分属Ⅱ型,少数菌株为Ⅲ型;全细胞糖型变化很大,20个菌株可划分为6个糖型,而且绝大多数糖型与已知弗兰克氏菌有所不同。此外,有65％的菌株还具有明显的抗菌活性。     

鼠疟原虫蚊期配子生殖的体外培养——在Eagle MEM培养基中发育的观察

为预防疟疾,开展疟原虫生物学、免疫学等方面的研究,从而设想建立疟原虫蚊期(配子生殖、孢子增殖)的体外培养系统。有关鼠疟原虫蚊期配子生殖的体外培养,国内外曾有不少的报道。近年来,国内曾用多种培养基对离体培养鼠动合子进行了初步观察;同时又在鼠疟动合子的形成和离体培养方法上进行了研究;国外学者罗萨利斯-龙奎尔(Rosales-Ronquillo)等在使用含斯氏按蚊细胞原代培养物的Eagle MEM.培养基和鲦鱼上皮细胞系Eagle MEM培养基对离体培养伯氏疟原虫的动合子进行了活体观察;斯皮尔(Speer)也使用了含该种蚊细胞的Eagle MEM培基进行鼠疟     

海藻希瓦氏菌(Shewanella alga)发酵培养基条件优化的研究

目的:优化海藻希瓦氏菌生产河豚毒素的发酵培养基。方法:通过测定菌体密度(用OD600表示)和菌体收获量,研究了部分初始条件及添加不同营养物质对海藻希瓦氏菌生长的影响,采用单因素试验和正交试验对发酵条件进行了优化。结果:最适发酵初始pH为7.5,最适摇瓶装液量为150mL。通过正交试验找出最大影响因素为葡萄糖供应,优化后的培养基最佳配方为:在2216E培养基中添加1.0%葡萄糖、2.5%酵母粉、1.0%磷酸高铁。结论:优化后的培养基培养供试菌,菌体收获量比在2216E培养基中培养增加了2.012g.L-1。