高温高压灭菌对MS培养基pH的影响

常规蒸气高温高压灭菌明显改变MS培养基的pH值。灭菌前营养液pH在5～7范围时,其平均降低值（-△pH）约为0．56。灭菌前pH为7～8或8～9时,则-△pH分别为0．87和1．13。文中还比较了灭菌时间、培养基体积、琼脂、脱脂棉、PVP、NaCl、CaCl2、蔗糖、活性炭等因素对灭菌过程中MS培养基pH改变的效应。     

培养基灭菌程序的验证

目的:验证培养基的灭菌参数,使培养基的灭菌程序及灵敏度符合要求。方法:以2010年版中国药典中的检查方法为依据,检查培养基的灵敏度。结果:灵敏度检查符合要求。结论:通过此法验证的培养基的灭菌程序是是可行的。     

培养基灭菌程序的验证

目的:验证培养基的灭菌参数,使培养基的灭菌程序及灵敏度符合要求。方法:以2010年版中国药典中的检查方法为依据,检查培养基的灵敏度。结果:灵敏度检查符合要求。结论:通过此法验证的培养基的灭菌程序是是可行的。     

植物组织培养中的外植体灭菌

植物材料的灭菌是植物组织培养工作中的重要环节。它既要求将外植体表面的微生物彻底杀死,又要求尽可能少伤害外植体组织和表层细胞。本文就笔者在教学和科研工作中常用的外植体杀菌剂、杀菌程序及效果作简要介绍,与同行们交流。l常用植物材料杀菌剂1．1乙醇由于乙醇具有脱水作用和一定的溶脂性,所以它能使蛋白质脱水、变性、沉淀及质膜破损、透性增加,使微生物致死,是一种常用的外植体表面杀菌剂。70％（叮,八）的乙醇对细胞具有很强的穿透性和杀伤力,放用乙醇作杀菌剂,灭菌时间不宜过长,约30S即可杀死外植体表面的绝大部分微生…     

影响 培养基PH值变化的因素

植物组织培养基的ＰＨ值一旦外植体植入就开始发生改变,直到达到某一平衡点,不同种的植物有其各自的ＰＨ平衡点。用６种植物（ＰｉｌｏｔｕｓｅｘａｌｔａｔｕｓＤｅｓｓｅｘＬｅｈｍ,ＬｅｃｈｅｎｎｕｌｔｉａｆｏｍａｓｕｓＲ．ＢＲ．,ＲｏｓａｃａｎｉｎａＬ．,Ｍｅｌａｌｅｕｃａａｌｔｅｒｎｉｆｏｌｉａ（Ｍａｉｄｅｎ＆Ｅ．Ｂｅｔｃｈｅ）Ｃｈｅｅｌ,ＡｎｉｇｏｚａｎｔｈｏｓｆｌａｔｉｄｕｓＤＣ．,Ｚｉｅｒｉａｃｙ     

遗传转化选择培养基的改良

用根癌农杆菌（Agrobacteriumtumefacirens）的Ti质粒进行植物基因转移的遗传操作过程中,必须配制含一定浓度卡那霉素（Km）和校等青霉素（Cb）的NBK和MS选择培养基。Km是遗传转化选择剂,Cb是剩余工程菌生长抑制剂k’,两者均不耐高温。高压灭菌后只能待琼脂培养基自然冷却到45”C左右（盛培养基的容器不烫手）时再另加入并摇匀,趁培养基尚未凝固这一段时间内及时分装到50～100ml的三角瓶中。显然,这在实际操作上较为麻烦：（回）培养基高压灭菌后必须随时观察它的温度变化;（2）安排稍有不周就会耽误其它事情;（3）时间太紧迫,…     

培养基琼脂用量计算的商榷

植物组织培养中,大多数采用固体培养基。固体培养基是以琼脂(又称洋菜)为支持物的。目前一些资料中一般报告用培养基琼脂的百分含量来表示培养基的硬度。笔者认为,这种提法不太科学,而应该用胨力强度(又称凝胶强度)来表示琼脂培养基     

胰蛋白酶的高压灭菌

胰蛋白酶在酸性条件下经过高压灭菌,仍有活力.在细胞培养中,以这种方法对胰蛋白酶消毒比常规的过滤除菌更加简便,经济,安全可靠.     

植物组织培养因子与培养基中pH值的关系

MS培养基中添加不同种类和浓度的植物生长调节剂时,灭菌前后培养基中pH值均有一定幅度的下降,pH的变化值(△pH)为-0.2～-0.5,下降幅度因植物生长调节剂的种类和浓度而异;培养基中pH值随材料培养时间的延长而递减,降幅可达1.5,下降幅度与转接材料种类和多少也有关系.     

植物组织培养中琼脂浓度和pH对培养基凝固程度的影响

植物组织培养中多数植物pH要求5.0～6.2,琼脂浓度一般选用7～8mg·L-1,最高可达16 mg·L-1,较低的5 mg·L-1,而我们观察到培养基凝固程度受pH影响较大,适当的降低琼脂浓度不仅可以满足外植体的正常支撑需求,且培养效果更佳.本文研究pH和琼脂浓度对培养基凝固程度的影响,以确定组织培养技术中合理的琼脂浓度.     

不同质的试管塞对高压蒸气灭菌影响的研究

不同质的试管塞对高压蒸气灭菌影响的研究大连市第四医院大连１１６０３１周国华,于伯玲,姜忠云,于秀顺最早的试管塞始于棉塞,后来有人采用软木塞、胶塞,近年来又有厂家生产塑料塞、海绵塞等。我们对五种不同质的试管塞对高压蒸气灭菌的影响进行了研究。１．材料与方...     

培养基灭菌方式对细菌分离效率的影响

自然界蕴含大量未/难培养微生物,分离这些微生物对理论研究和资源开发具有重要意义。本研究使用高压灭菌和过滤除菌方式制备培养基,采用稀释涂布方法,从红树林灰泥样品中分离获得123株细菌,通过16S rRNA基因序列分析对其进行鉴定,进而探究培养基灭菌方式对细菌分离效果的影响。结果表明：过滤除菌培养基生长的单菌落数目（339±82）个显著多于高压灭菌培养基生长的单菌落数目（179±65）个;两种培养基分离细菌的群落结构在门、科和属分类水平上总体相似,但优势类群的数目和少数类群存在差异;过滤除菌培养基分离细菌的Shannon Wiener’s指数、均匀度、新种率、基因多样性均高于高压灭菌培养基,而其与近缘模式菌株相似度的平均值和中位数则低于高压灭菌培养基。因此,过滤除菌培养基分离获得细菌的多样性、均匀性和新颖性均高于高压灭菌培养基。本研究首次探究培养基灭菌方式对细菌分离效果的影响,具有更高分离效率的过滤除菌培养基为未/难培养微生物菌株资源获取提供了借鉴。     

高压蒸汽灭菌对麦康凯琼脂培养基质量的影响

目的探讨高压蒸汽灭菌对麦康凯琼脂培养基主要质量指标(p H、性能)的影响。方法配制p H为6.80、7.00、7.10、7.20、7.30、7.40、7.50、7.60、7.70、7.80的麦康凯琼脂培养基,经高压蒸汽灭菌后进行p H测定,并将大肠埃希菌、金黄色葡萄球菌、鼠伤寒沙门菌和粪肠球菌接种于麦康凯琼脂培养基上,37℃培养24 h,观察不同p H对细菌生长的影响。结果高压蒸汽灭菌后麦康凯琼脂培养基p H降低0.30~0.50。p H为6.78~7.28时,大肠埃希菌生长率≥0.5;p H为6.93~7.39时,鼠伤寒沙门菌生长率≥0.5;不同p H的麦康凯琼脂培养基上金黄色葡萄球菌及粪肠球菌的生长指数均为0。结论高压蒸汽灭菌可影响麦康凯琼脂培养基的p H及性能。     

100～700 mL液体培养基的微波灭菌效果观察

为研究家用微波炉对少量液体培养基的灭菌效果,对100 -700 mL液体培养基采取微波分别进行灭菌,测定其灭菌时间,并对达到灭菌效果的培养基通过接种不同细菌进行质检.结果显示100、200、300、400、500、600、700 mL液体培养基分别在4.5、5.0、7.0、9.0、12.0、19.0、25.0 min达到最有效的灭菌效果.室温保存15 d仍无细菌生长.枯草杆菌黑色变种芽胞菌测试无菌生长.金黄色葡萄球菌、大肠埃希菌及普通变形杆菌在液体培养基里的生长现象、特种后细菌的菌落和形态染色特征及其生化反应均无明显差异.实验表明2 450 MHz,700 W的微波炉对100 - 700 mL的液体培养基不但能快速达到有效的灭菌效果,且营养成分不会被破坏.     

培养基中金属离子络合平衡的微机计算

CalculatingtheConcentrationofMetalIonsinCultureMediumwiththeAidofMicrocomputerZHAObeoHua，SUNDaye（Denytl；w？llOfmp，HdriN～［］jzz；m7’n－－y，Sh八邮M呷050016）现代植物生理学等领域中的实验研究常常采用由整株培养发展到细胞及原生质体培养的体系，特别是在Ca’”信使等功能的研究中更是如此。由于细胞及原生质体培养基中成分复杂，常含有多种金属离子及络合剂，因此在精确研究某一金属离子的生理作用时，为了消除其他离子的干扰，经常遇到几种金属离子与络合剂问络合反应的计算。这种计算非常复杂，有时须借助…     

高压蒸汽灭菌对钛合金内植入物的疲劳的影响

分析了制约骨折手术成功的因素,一是钛合金内植人物经受长期反复高压蒸汽灭菌造成材料疲劳引起断裂;二是AO手术的引起应力集中和疲劳断裂。提出了发展骨内固定植入物的建议。     

植物组织培养前用臭氧对外植体进行消毒灭菌的效果初探

无菌是植物组织培养成功的前提。常用的外植体表面灭菌剂有次氯酸钙、次氯酸钠、过氧化氢 (双氧水 )、溴水、硝酸银、氯化汞 (升汞 )、抗菌素、酒精和异丙醇等。这些灭菌剂用于外植体消毒灭菌时 ,容易造成环境污染 ,效果并不十分理想 ,且易影响外植体的活力 ,导致外植体褐变死亡 ,还有冲洗次数过多、操作复杂等缺点。本文探讨臭氧对外植体消毒灭菌的效果 ,经试验达到了灭菌的目的。　　仪器有上海绿科实业有限公司生产的ＮＱ 1 0 83绿科多功能臭氧发生器 (气体流量 0 .0 0 0 3ｍ3 ·ｈ-1)。实验材料为橡皮树 (Ｆｉｃｕｓｅｌａｓｔｉｃａ)。…     

微波炉对培养基的灭菌探讨

当前,实验室配置培养基通常是采用蒸汽杀菌锅灭菌,这种经典方法不足之处是操作不方便、花费时间多,耗电大且蒸汽杀菌锅不太安全等。这里摸索出一种用微波炉对培养基灭菌的安全快速简便方法。 微波能量对微生物的杀灭机理,目前公认的还是经