拟南芥菜的核基因组研究

拟南芥菜的核基因组研究初立业，邵宏波，曲德业（四平师范学院生物工程所四平１３６０００）拟南芥菜（Ａｒａｂｉｄｏｐｓｉｓｔｈａｌｉａｎａ）具有许多不同于其它高等植物的特点，这些特点决定了它作为植物分子生物学的模式植物系统并得到了广泛的研究。目前已经在核...     

用离子束介导外源全DNA转化拟南芥菜的诱变体

植物特别是高等植物在漫长的历史形成过程中所具有的遗传保守性一般很不易打破,但用生物技术方法,目前可以打破,且可创造新的突变体和新物种,由此可达此目的。例如郑州大学离子束生物工程实验室的卞坡博士和华中农业大学食品科技学院的谈重芳先生等利用离子束介导外源全DNA转化拟南芥菜的诱变效应就是例证之一。     

核基因突变引起的拟南芥菜叶片花斑及其机制

细胞核基因突变引起的植物叶片花斑,是研究细胞器（特别是叶绿体）和细胞核之间信息交流的重要材料,也在园艺科学上有重要的应用价值。综述了拟南芥菜IM．VAR1、VAR2、CHM．CUE1、PAC．ATD2和VAR3等8个细胞核基因突变后引起的叶片花斑,主要包括这些基因所编码的蛋白质以及它们突变以后引起花斑的机制。     

拟南芥菜离体培养中愈伤组织的诱导和植株再生的初步研究

以ＧＡＭＢＯＲＧ＇ＳＢ５为基础,附加激素２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ,ＫＴ０．０５ｍｇ／Ｌ,分别以拟南芥菜的胚、根、子叶、下胚轴、营养期和开花期莲座叶为外植体进行培养,有愈伤组织形成;胚外植体先萌发出子叶和根,接着在延伸的下胚轴上长出愈伤组织。若将上述培养基碳源 由蔗糖改为葡萄糖,整个胚外植体都可形成愈伤组织。对莲座叶的培养发现,即使改变２,４－Ｄ深度为２．０ｍｇ／Ｌ,其它成分上进行植株再生的诱导,结     

不同离子剂量介导外源薄荷全DNA转化对拟南芥菜生长发育的影响

在离子束介导外源全DNA转化中,外源DNA包含有供体的所有遗传信息,对受体的影响是多方面的,因此转化效果无法用统一的转化率来衡量,这也增加了转化过程中最佳转化条件的选择难度。本论文的主要工作是根据不同离子剂量介导外源全DNA转化的拟南芥菜在遗传和生理上的变化选择合适的转化剂量。剂量实验结果表明:拟南芥菜种子的剂量-存活率曲线为"马鞍型",在"鞍桥"上选择0.5×1017ions/cm2、1.5×1017ions/cm2和2.5×1017ions/cm2三个有代表性的剂量介导薄荷全DNA转化拟南芥菜,三个转化当代群体的出芽、成苗长势以及表型变异情况有明显的不同,综合分析表明:1.5×1017ions/cm2为离子束介导外源全DNA转化拟南芥菜的合适剂量。     

离子束介导甘蓝全DNA转化拟南芥菜的分子分析

30 keV的Ar+离子束在1.5×1017 ions/cm2的注入剂量下介导外源甘蓝全DNA导入模式植物拟南芥菜,在94株转化当代植株中,有6株表型产生变异。以其中的一株(T-5)作为研究对象,用80条10碱基随机引物对该株和其子代变异株基因组作随机扩增的多态性DNA分析,引物S176 在T-5和其变异子代T-5-2中扩增出了相同分子量的变异新条带T-5S176-620。T-5S176-620的碱基序列和拟南芥菜基因组序列进行同源比对,结果表明该片段不属于拟南芥菜基因组,Southern杂交实验证明该片段来自供体甘蓝基因组。但是,根据T-5S176-620序列设计的引物不能从甘蓝基因组中扩增出预期长度的DNA片段,结合离子束介导外源全DNA转化的特点和过程,探讨了其中可能的机制。     

细菌卤代烷烃脱卤酶基因在拟南芥菜中的高效表达

报道了细菌Xanthobacter autotrophicus编码卤代烷烃脱卤酶基因在拟南芥菜中的高效表达。以土壤农杆菌介导将该基因整合到拟南芥菜基因组中,经数代筛选得到了转基因纯合种子,Northern印迹和气相色谱检测表明,转基因的表达程度很高,酶量占细胞总可溶性蛋白的8%,酶活力达7.8mU·ml^-1提取物。转基因植株在含二氯乙烷的培养基上不能生长。     

拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)子叶中蛋白体形成的超微结构和免疫电镜定位研究

本文对拟南芥菜(Arabidopsis thaliana)种子发育过程中贮藏蛋白的积累和蛋白体的形成进行了超微结构和免疫电镜定位的研究。常规超薄切片的电镜观察表明,在开花后第10天(10 DAF),高电子密度的蛋白质物质开始在子叶细胞的液泡中沉积。这一过程一直延续到种子接近成熟(14 DAF),这时液泡中充满了蛋白质物质,转变成为大的蛋白体。利用了该种植物主要种子贮藏蛋白之一的12 s球蛋白的单克隆抗体作为免疫探针,以蛋白质A-胶体金电镜技术对12 s种子蛋白进行了细胞内定位,证实了在液泡中积累的物质为种子贮藏蛋白。实验结果表明在拟南芥菜中,子叶细胞中的液泡是蛋白体的前体,肯定了蛋白体的发生起源于液泡的观点。本文还对应用胶体金电镜技术进行细胞内定位的某些问题作了初步探讨。     

芥菜类作物的遗传多样性

芥菜类是我国重要的经济作物,遗传资源十分丰富。现就目前国内外芥菜类作物遗传多样性研究的现状进行综述,并着重阐述了芥菜类作物的分类、分布以及遗传多样性研究方法,如形态学分析法、同工酶分析法、RAPD法和RFLP法。同时对芥菜类作物遗传多样性研究存在的问题和今后的研究方向进行了探讨。     

南芥菜花叶病毒卫星RNA及其核酶的结构分析

以提纯的南芥菜花叶病毒(Arabis Mosaic Virus,ArMV)卫星RNA(sArMV)为模板,以合成的DNA寡核苷酸为引物,经过反转录—PCR扩增合成全长的dscDNA。Ds cDNA的两端连接EcoRI Adaptors插入到经EcoRI酶解的脱磷酸化的pUC 9质粒中,转化E．Coli JM83。用32P标记的sArMV为探针进行菌落原位杂交和EcoRI酶解分析,筛选出含有全长cDNA片段的克隆。用Taq TrackRsequcingSystems。脚的序列分析表明：克隆的sAxMV cDNA由300bp脱氧核糖核苷酸组成,与其RNA序列分析的结果相同,含有一个首尾相连的由54个核苷酸组成的核酶,具有完整的垂头状结构及能自我切割5'GUC↓3'的生物功能。     

环境激素DBP对拟南芥体外培养叶片超微结构的影响

报道了酞酸酯类化合物DBP对拟南芥离体培养叶片超微结构的影响。在DBP(1.0mg·L-1)处理第3天即观察到拟南芥叶片叶绿体的超微结构受到破坏。不同浓度的DBP长期处理植株(40d)出现叶片白化、节间短缩等异常现象。在0.01mg·L-1DBP处理40d植株的叶细胞中,叶绿体出现解体,破碎部分呈颗粒状,散落其间,但细胞结构完整;0.1mg·L-1DBP处理后引起叶绿体的进一步解体,叶绿体中类囊体基粒和片层结构解体,细胞出现空洞现象,其它细胞器很少观察到;1.0mg·L-1DBP和2.0mg·L-1DBP处理植株叶片叶绿体中类囊体基粒和片层结构破碎,叶绿体结构也解体,细胞中其它细胞器数目极少。     

南苜蓿组织和原生质体培养及转化试验

主要探讨南苜宿子叶和下胚轴外植体,子叶原生岳体培养中的器官发生及遗传转化。南苜蓿子叶和下胚细外植体培养在附加１ＡＡ０．５－１ｍｇ／Ｌ和细胞分裂素（ＢＡ或ＺＴ）０．５－２ｍｇ／Ｌ的ＭＳ培养基上,在有当照的条件下诱导形成不定芽,进而再生成完整植株。子叶原生质体培养在附加２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ和ＫＴ０．２ｍｇ／Ｌ的Ｂ５液体培养基中,细胞分裂频率可达３０－４１％,原生质全来源的愈伤组织在ＭＳＢ培养基（Ｍ     

芥菜原生质体培养和植株再生

从芥菜无菌苗的下胚轴和子叶游离获得原生质体,在含1.5毫克/升NAA、0.6毫克/升BA和0.5毫克/升2.4-D的DPD液体培养基中静置培养。试验表明,经13℃低温预处理不仅能够提高原生质体的分裂频率,而且能够加速原生质体的发育进程;除木糖外,葡萄糖、甘露醇和山梨醇均可作为原生质体培养初期的渗透稳定剂。来源于下胚轴原生质体的愈伤组织在含3毫克/升BA、0.1毫克/升GA_3或3毫克/升BA的MS培养基上诱导出了芽,含0.05毫克/升IBA的MS培养基上诱导出根,从而获得了完整植株。     

环境激素DBP对拟南芥试管形态发生的影响

报道了酞酸酯类化合物DBP对拟南芥试管形态发生的影响。利用不同浓度的DBF处理拟南芥茎段外植体,切片观察拟南芥茎段试管形态发生过程中脱分化、分化及再分化的变化情况。结果发现：拟南芥茎段外植体在对照组培养基上生长良好,首先是愈伤组织产生,而后愈伤组织块增大,颜色呈淡绿色,生长旺盛,并有分化出芽现象;添加0．01mg／L、0．1mg／L和1．0mg／LDBP,茎段愈伤组织诱导率低,且高浓度时愈伤组织出现褐化、活力差的现象;培养12h、24h、2d、3d、7d、14d、21d和28d茎段显微切片结果显示,DBP具有抑制拟南芥试管形态发生的作用,随着DBP浓度的增加呈现剂量抑制效应。     

云南拟单性木兰的组织培养

1植物名称云南拟单性木兰(Parakmeria yunnanensis Hu). 2材料材料采用茎尖和带腋芽的茎段.     

不同外植体来源和培养条件对拟似棉植株再生的影响

对拟似棉的不同器官(叶、叶柄、茎)在离体培养中的反应以及影响植株分化的各种因素(继代培养时间、激素、光、温度)进行了研究。结果表明:茎段作为外植体效果最佳,并且愈伤组织的诱导能力与茎段切口的面积成正比。外植体的方向性,也就是指茎表皮靠着培养基,切口面暴露于空气中为愈伤组织诱导的重要条件。愈伤组织诱导的最适培养基是MS+2mg/l IAA+1mg/l KT,最佳培养条件是强光(10,000勒克斯)、高温(29±1℃)。在MS+0.1mg/l NAA+3mg/l 2ip+0.5g/l LH分化培养基上,在4,000—5,000勒克斯的光强,28℃条件下,愈伤组织分化成小苗的频率可达20％。     

植物基因起源进化研究取得新进展

动物基因中有很多逆转座基因,但长期以来,由于在拟南芥菜中发现很少的逆转座基因,因而形成了一种认为逆转座在植物基因和基因组进化中并不重要的观念。