Rel/NF-κB与神经系统疾病

自从 1 986年真核细胞核转录因子Ｒｅｌ/ＮＦ κＢ被发现以来 ,对它的研究就一直方兴未艾。Ｒｅｌ/ＮＦ κＢ参与一系列病理和生理过程反应 ,如免疫反应、炎症反应等 ,在细胞的生长、分化、粘附、凋亡等过程中也具有十分重要的作用。1 .Ｒｅｌ/ＮＦ κＢ信号转导通路在静息状态时 ,Ｒｅｌ/ＮＦ κＢ与抑制蛋白ＩκＢ结合 ,抑制其核转位信号 ,使之以无活性形式存在于胞浆中 ;胞外刺激信号如活性氧介质 (ＲＯＩ)、细胞因子、神经递质、病毒、ＵＶ、内质网超载等通过转导激活ＩＫＫ上游激酶ＭＥＫＫ 1或ＮＩＫ而使ＩＫＫ复合物活化 ,在酪蛋白激…     

IκB激酶的研究进展

ＩκＢ激酶的研究进展陈红清（中国医学科学院、中国协和医科大学皮肤病研究所,南京２１００４２关键词ＩκＢ激酶信号转导转录因子中κ基因结合核因子（ＮＦ－κＢ）由属于癌基因ｒｅｌ表达的Ｒｅｌ蛋白家族的２个亚基组成,最常见的形式是由ｐ６５（Ｒｅｌ－Ａ）和ｐ５...     

核因子-κB的研究进展

机体对损伤及微生物入侵进行防御反应时,活化的核因子－κＢ（ＮＦ－κΒ）可诱导细胞合成各种生物大分子。细胞处于静息状态时,ＮＦ－κＢ与κＢ抑制蛋白（ＩκＢｓ）结合形成三聚体存在于细胞质内。当细胞受到外界因素刺激时,ＮＦ－κＢ与ＩκＢｓ分离,ＮＦ－κＢ进入细胞核内,其亚基形成环状结构与ＤＮＡ接触,启动基因转录。随后,新合成的ＩκＢｓ又与ＮＦ－κＢ结合返回细胞质。不同的ＩκＢｓ亚型发挥不同的生理功能。同时,对ＮＦ－κＢ的生理功能也作了介绍。     

NF—κB／REL激活的信号机制

ＮＦ－κＢ／ＲＥＬ蛋白是进化学上高度保守的一种免疫反应介质。多种不同的刺激信号都可激活核转录因子参与细胞的生长,分化,发育,凋亡,粘附及炎症反应,激活ＮＦ－κＢ的信号机制十分复杂。不同的刺激信号,不同的细胞种类,以及细胞不同的状态所涉及的ＮＦ－κＢ激活的具体信号通路有可能不同。随着一些ＩκＢ家族成员激酶的鉴定及其相关敲剔基因模型的建立,人们对ＮＦ－κＢ激活的信号机制有更深入,全面的认识。     

IκB激酶的结构和功能

ＮＦκＢ是细胞活化和产生细胞因子的重要转录调控因子。在静止细胞胞液中,ＮＦκＢ与ＩκＢ(κＢ的抑制剂)结合,处于失活状态。细胞活化传递的信号激活ＩκＢ激酶(ＩＫＫ),ＩＫＫ催化ＩκＢα(Ｓｅｒ32、Ｓｅｒ36)和ＩκＢβ(Ｓｅｒ19、Ｓｅｒ32)磷酸化,使ＩκＢ与ＮＦκＢ解离后被降解,于是ＮＦκＢ进入核内,调节多种基因转录[1]。1.ＩＫＫ的结构及其与功能的关系ＩＫＫ复合物的分子量约600～900ｋＤ,主要由3个亚单位组成:ＩＫＫα、ＩＫＫβ和ＩＫＫγ[2]。其中ＩＫＫα和ＩＫＫβ组成功能性异二聚体并以二聚体表现活性,在一定条件下(如…     

IL-1预刺激对反义IRAK-1寡核苷酸抑制NF-κB活化的影响

实验分为白介素－１（ＩＬ－１）预处理组和非预处理组,脂质体介导反义ＩＬ－１ 受体相关激酶－１（ＩＲＡＫ－１）寡核苷酸（ＯＤＮ） 转染ＨｅｐＧ２ 细胞,用ｗ ｅｓｔｅｒｎ 杂交分析ＩＲＡＫ－１ 表达水平,以夹心酶联免疫吸附测定法检测ＮＦ－κＢ含量． 结果表明,ＩＬ－１ 非预处理组反义ＩＲＡＫ－１ ＯＤＮ不能抑制ＩＲＡＫ－１ 表达和ＮＦ－κＢ活化,而预处理组ＩＲＡＫ－１ 表达和ＮＦ－κＢ活化受到明显抑制． 反义ＩＲＡＫ－１ ＯＤＮ 对ＮＦ－κＢ活化的抑制作用具有时间（５～２４ ｈ）和剂量（１～８ μｇ）依赖性． 说明ＩＬ－１ 预刺激在反义ＩＲＡＫ－１ ＯＤＮ抑制ＩＬ－１ 诱导的ＮＦ－κＢ活化中起决定性作用．     

EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞中通过NFκB促进Igκ表达

利用已建立的受四环素调控ＬＭＰ１表达的鼻咽癌细胞系,用受ＣＭＶ启动子调控的ＮＦκＢ报道基因质粒ｐＮＦκＢ－ｌｕｃ的荧光素酶表达分析ＮＦκＢ的活性,并以核蛋白的Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹方法观察ＬＭＰ１表达前后核内ＮＦκＢ组分ｐ６５量的改变,用全蛋白Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析Ｉｇκ蛋白质的表达等方法,探讨在鼻咽癌中,ＥＢ病毒ＬＭＰ１蛋白是否通过核转录因子ＮＦκＢ促进免疫球蛋白κ轻链（Ｉｇκ）基因的表达。结果显示     

NF—κB与TNF诱导的细胞凋亡

不同类型的细胞对于ＴＮＦ－α诱志的细胞凋亡的敏感性可以有很大差别,但是多数的细胞在同时给予蛋白质合成抑制处理时会对ＴＮＦ－α变得非常敏感。有学者认为有一个基因或一组基因在ＴＮＦ受体活化后被诱导而传导细胞凋亡信号。近期的研究表明,一种被ＴＮＦ激活的ＮＦ－κＢ转录因子在这一过程中起部分的作用。     

人类嗜T细胞白血病Ⅰ型病毒TAX蛋白对NF—kB转录因子的作用

人类嗜Ｔ细胞白血病Ⅰ型病毒（ＨＴＬＶ－Ⅰ）是成人Ｔ细胞白血病（ＡＴＬ）的致病因子,其编码的ＴＡＸ蛋白的反式激活在白血病形成中有重要作用。ＮＦ－ｋＢ是细胞活化和产生细胞因子的重要转录调控因子。正常情况下,ＮＦ－ｋＢ因子与抑制性蛋白ＩＫＢ结合,形成复合物存在于胞质中。ＴＡＸ蛋白可与ＩＫＢ激酶γ（ＩＫＫγ）直接结合,而后启动ＴＡＸ对ＩＫＫα和ＩＫＫβ的结合,并使之发生磷酸化。后者使ＩＫＢ蛋白降解,ＮＦ－     

转录因子NF-κB p50基因的克隆、表达及抗p50抗体的制备

利用ＤＮＡ重组技术,将转录因子ＮＦ－κＢｐ５０基因片段插入ｐＧＥＸ－２Ｔ质粒载体,经ＤＮＡ序列分析证明克隆的正确性．将重组的ｐＧＥＸ－２Ｔ／ｐ５０转化入大肠杆菌ＪＭ１０９,表达出ｐＧＥＸ－２Ｔ／ｐ５０融合蛋白．经ＷｅｓｔｅｒｎＢｌｏｔ检测证实表达产物对抗ｐ５０ｃ的抗体呈特异性反应,表明克隆的正确性,并成功地应用纯化的ｐ５０蛋白制备了免疫血清．为进一步对ＮＦ－κＢ的功能进行研究打下了良好的基础     

T细胞中IL-3基因表达调节的转录因子初探

主要利用凝胶迁移率试验和抗体超迁移试验,以ｈＩＬ－３基因５′侧翼含κＢ位点的序列为探针,探究ＮＦ－κＢ是否参与了ｈＩＬ－３基因的表达调节．结果表明,在Ｊｕｒｋａｔ细胞和人外周血Ｔ淋巴细胞中,都存在与此序列特异结合的可诱导蛋白;ＮＦ－κＢｐ６５亚基的单抗对ＤＮＡ－蛋白复合物的形成没有影响．这些结果揭示：正常细胞和肿瘤细胞中,确存在可特异识别ｈＩＬ－３基因５′侧翼的κＢ顺序的蛋白因子,而且该蛋白因子的表达是可诱导的;但ＮＦ－κＢ并未参与ＩＬ－３基因的表达调节．     

NF—κB与疾病

NF－κB是一种多极性基因调控性能的转录因子,能够激活若干个炎症反应、机体免疫反应及多种细胞因子的基因转录过程,从而控制它们的生物合成。本文综述了近年来国外对NF－κB的研究进展,对NF－κB的结构组成、激活途径、生物学功能及其与多种疾病的关系作一介绍。     

书评

书评ＢＯＯＫＲＥＶＩＥＷＳ￥／／Ｓ．Ｃ．Ｔｅｎｇ：ＦＵＮＧＩＯＦＣＨＩＮＡ．ＥｄｉｔｅｄｂｙＲｉｃｈａｒｄＰ．Ｋｏｒｆ．Ｆｉｒｓｔｅｄｉｔｉｏｎ，１９９６．ＩＳＢＮ０－９３０８４５－０５－６．Ｍｙｃｏｔａｘｏｎ，Ｌｔｄ．Ｐ．Ｏ．Ｂｏｘ２６４．Ｉｔｈａ...     

NF-κB荧光素酶报告基因系统的构建及验证

为了定量检测NF-κB的活化效果及筛选与NF-κB活化调控相关的药物,通过去除逆转录病毒载体pQCXIP原有的CMV启动子,并分别插入NF-κB增强子序列及荧光素酶NanoLuc报告基因序列,构建了一种新的含有NF-κB增强子序列和NanoLuc(NLuc)报告基因序列的表达载体,并进一步建立受NF-κB调控的稳定表达NLuc荧光素酶的细胞系。酶切鉴定及测序结果表明成功构建了重组质粒pQCXIP-NF-κB-NLuc;NF-κB信号通路的刺激物肿瘤坏死因子TNF-α作用于构建的稳定表达NLuc的细胞系后出现特异性的荧光素酶反应,且该酶反应与TNF-α的刺激呈良好的时间、剂量依赖性,该结果表明受NF-κB调控的稳定表达NLuc荧光素酶的细胞系构建成功。实例验证中,NF-κB抑制剂雷公藤甲素对此细胞系NLuc荧光素酶表达的抑制呈剂量效应。综上,本实验构建的受NF-κB调控的稳定表达NLuc荧光素酶的报告基因系统可用于NF-κB的活化效果的定量检测及筛选与NF-κB活化调控相关的药物,具有研究和应用价值。     

JNK／SAPK信号传递途径与细胞应激反应

ｃ－ＪｕｎＮＨ２－末端激酶（ＪＮＫ）又称为应激活化蛋白激酶（ＳＡＰＫ）,是有丝分裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）家族成员之一。大量研究证实,ＪＮＫ／ＳＡＰＫ信号传递途径在细胞应激反应中起重要作用。ＪＮＫ／ＳＡＰＫ信号传递途径的激活促进细胞凋亡发生,其机制与诱导ＦａｓＬ表达、调控凋亡相关基因差异表达和改变细胞内Ｃａ＾２＋环境与激活ｃａｓｐａｓｅｓ家族在关。在某些情况下,ＪＮＫ／ＳＡＰＫ信号传递途径的激活     

核转录因子-κB与疾病治疗

核转录因子－κB是一种广泛存在的核转录因子,实验证实NF－κB的过度活化与多种疾病相关。本文综述了近年研究获得的在疾病状态下抑制NF－κB过度活化从而缓解病症的几种方法。     

IκB激酶的激活及其在NF-κB活化过程中的作用

在NF-κB二聚体活化过程中,IκB激酶（IKK）通过对抑制性蛋白κB(IκBs)的磷酸化而扮演关键的角色.IKK复合物在胞浆内有多种存在形式,其中,IKK-α、IKK-β两者氨基酸序列52%的同源性,空间构象相似,常为催化亚单位,而IKK-γ则为调节亚单位,它们以不同的方式活化IκBs.核因子κB诱导激酶（NIK）与丝裂原活化蛋白激酶激酶激酶-1（MEKK₁）均为IKK的上游激酶,NIK可引起IKK-α Ser176、IKK-β相应位点的磷酸化,而MEKK₁主要引起IKK-β的活化.通过级联反应,使IκBs磷酸化而与NF-κB解离,致使NF-κB被激活并易位入核,启动免疫及炎症相关的基因转录.     

NF-κB与肿瘤发生及药物筛选

NF-κB是一类能特异性地识别结合DNA的Rel类蛋白质二聚体转录因子。在静息细胞中 ,NF-κB与抑制性蛋白IκBs结合形成复合物 ,并被滞留于细胞质中而处于非活化状态 ;当细胞受到各种胞内外刺激时 ,IκBs被迅速地降解 ,NF-κB得以释放并进入细胞核 ,从而发挥其转录调节功能。NF-κB通过调控众多靶基因的转录表达而在免疫、炎症反应、细胞增殖与凋亡及肿瘤发生等许多生理学过程中发挥重要作用。介绍了NF-κB活化的调控机制 ,并对NF-κB信号通路在肿瘤发生等相关过程及其在药物筛选中的作用进行了探讨。     

NF-κB在调控肿瘤细胞凋亡中的作用

细胞凋亡在维持细胞动态平衡和机体稳定方面发挥重要作用。核转录因子κB(nuclear factors κB,NF-κB)参与细胞生长、分化及炎症反应等基因表达调控,同时参与了肿瘤的发生、发展及转移,一度被认为是肿瘤治疗的靶点之一。近年来研究发现,NF-κB活化在炎症诱发的肿瘤形成中发挥重要作用,但同时发现NF-κB活化也可发挥促凋亡作用,抑制肿瘤发生发展。对NF-κB在肿瘤形成中两方面作用的认识,为肿瘤临床治疗提供理论依据。     

EB病毒LMP1在鼻咽癌细胞中调控核转录因子κB活性研究

为了探讨ＥＢ病毒潜伏膜蛋白１（ＬＭＰ１）的致瘤机制,对鼻咽癌细胞中ＬＭＰ１通过核转录因子ｋＢ（ＮＦｋＢ）介导的信号传导途径在鼻咽癌变中的意义进行了研究。利用ＬＭＰ１受四环素衍生物强力霉素诱导表达的鼻咽癌细胞Ｔｅｔ－ｏｎ－ＬＭＰ１ＨＮＥ２,通过ＮＦｋＢ报道基因分析法、凝胶迁移率分析（ＥＭＳＡ）及细胞集落形成率等方法,结合硫代磷酸反义寡核苷酸阻断技术,证实ＬＭＰ１增强鼻咽癌细胞ＮＦｋＢ的ＤＮＡ结合活性