ICP-MS法测定广西金樱根及炮制品中22种金属元素

为建立广西金樱根药材中22种金属元素的电感耦合等离子体质谱(ICP-MS)分析方法,该文对不同产地药材及其炮制品中金属元素含量进行比较分析,评价其药材的质量和优选适当的炮制方法。同时,采用 ICP-MS 法测定22种金属元素含量,绘制其特征金属元素柱状图谱,并采用系统聚类分析和主成分分析对金樱根药材不同产地、不同炮制品的45个样品进行判别研究。结果表明:广西金樱根不同产地药材及其炮制品的45个样品中金属元素含量存在一定差异,其中Al元素含量偏高,经聚类分析和主成分分析将产地分为三类,主成分分析特征元素为Al、Pb、Ba、Zn、As、Sr。该研究通过金属元素在不同产地金樱根及炮制品中的变化规律,发现金樱根醋炙的炮制方法最优,为金樱根的临床安全应用及质量控制提供了理论依据和方法学参考。     

麻黄不同炮制工艺对含量影响

目的:探究麻黄不同炮制方法对麻黄有毒成分含量的影响。方法:分别采用蒸制、清炒、酒炙和醋炙这四种炮制方法对麻黄进行炮制,并测定其不同炮制品的有毒成分生物碱的含量,比较该四种炮制方法对其有毒成为生物碱含量影响。结果:麻黄的各炮制品的生物碱的含量从高到低:清炒醋炙酒制蒸制。结论:蒸制炮制工艺在降低药物的毒性效果优于清炒炮制法、酒炙炮制法及醋炙炮制法,可以作为麻黄的优选炮制方式。     

基于HPLC指纹图谱的亳白芍不同炮制品标准汤剂7个成分含量测定

建立亳白芍不同炮制品标准汤剂HPLC指纹图谱,其中生白芍、炒白芍和酒白芍标准汤剂分别标定16、14和13个共有峰,同时测定亳白芍不同炮制品标准汤剂中7种化学成分(没食子酸、氧化芍药苷、芍药内酯苷、芍药苷、苯甲酸、1,2,3,4,6-五没食子酰葡萄糖和苯甲酰芍药苷)含量,经炒制后标准汤剂中芍药内酯苷和苯甲酸含量升高,氧化芍药苷、芍药苷含量降低,酒白芍标准汤剂中芍药苷含量升高,苯甲酸含量降低,并对含量测定结果进行聚类分析,同一批亳白芍及其炮制品可聚为一类,但聚类距离缩小后生品和炮制品各聚为一类。建立的HPLC指纹图谱和含量测定方法具有良好的重现性,且简便快速,二者结合可直观反映出亳白芍炒制、酒制后的变化差异。     

金樱根化学成分的研究

金樱根为三金片的主要成分,但目前对于金樱根的化学成分和药理作用研究甚少。为了阐明金樱根的物质基础和生物活性,该研究采用硅胶、Sephadex LH-20、MCI gel CHP 20P等柱色谱以及HPLC半制备等方法,对金樱根(Rosa laevigata)的化学成分进行研究。结果表明:从中共分离得到9个化合物,经过波谱数据分析结合文献对照分别鉴定为儿茶素(1),表儿茶素(2),rosamultin(3),sericoside(4),2α,3α,19α,23-tetrahydroxy-urs-12-en-28-oic acid-3-O-β-D-glucopyranosyl ester(5),kaji-ichigoside F1(6),β-D-Glucopyranosyl 3β,19α-dihydroxy-2-oxo-urs-12-en-28-oate(7),胡萝卜苷(8),β-谷甾醇(9),其中化合物2、4、5、7为首次从该植物中分离得到。该研究结果为金樱根在功能医药领域的开发利用提供了理论依据。     

北五味子及其不同炮制品中五味子甲素 和乙素的含量测定

目的:测定北五味子及其不同炮制品中五味子甲素、五味子乙素的含量。方法:采用高效液相色谱法,Spherisorb 10ODS1(4.6mm×250mm,10μm),以甲醇-水(70:30)为流动相,检测波长为254nm。线性范围0.1~0.5μg,相关系数为0.995.平均回收率为100.3%和100.4%,RSD=0.87%和2.85%(n=5)。结果:五味子甲素和乙素在生品、醋炙、炒制、酒炙、蒸炙、蜜炙品中的平均含量分别为0.13%,0.064%,0.052%,0.064%,0.11%,0.13%和0.21%,0.298%,0.238%,0.302%,0.216%,0.214%。结论:方法准确,快速,重现性好,可用于五味子各种炮制品的质量评价。     

补骨脂不同炮制饮片炮制前后化学成分定性定量分析

为探讨补骨脂不同炮制方法下炮制前后化学成分的变化,采用超高效液相色谱-飞行时间质谱联用技术(UHPLC-Q-TOF-MS/MS),对补骨脂生品、清炒品及盐炙品进行化学成分分析,运用超高效液相色谱(UHPLC)对补骨脂中9个成分进行含量测定,结合统计学方法分析炮制前后含量变化。在定性分析中,共鉴定指认38个化合物,建立了补骨脂MS数据库,发现了5个成分存在于生品与清炒饮片,而盐炙品中未发现;在定量分析中,发现补骨脂生品与炮制品(盐炙和清炒)化学成分有显著性差异,并筛选出4个差异标志物(补骨脂酚、补骨脂素、补骨脂宁和新补骨脂异黄酮)。从整体来看,补骨脂生品与炮制品(盐炙和清炒)在化学成分轮廓上存在一定差异。由含量变化推测,在补骨脂的炮制过程中,补骨脂酚和补骨脂素、补骨脂宁和新补骨脂异黄酮可能存在转化。本实验结果与建立的补骨脂MS数据库可为补骨脂炮制机理进一步研究提供数据支撑。     

利用HPLC法测定水稻子粒主要黄酮类化合物

通过建立水稻儿茶素、杨梅素、槲皮素和山奈酚含量的HPLC测定方法,研究水稻黄酮类化合物含量及组成差异,为高黄酮水稻种质资源的定向改良提供理论依据.本研究建立了利用HPLC法测定水稻黄酮类化合物含量的测定方法;水稻糙米的黄酮化合物组成主要以儿茶素和山奈酚的形式存在,不含杨梅素和槲皮素,不同品种儿茶素和山奈酚组成比例及含量存在差异;粳稻含有更丰富的儿茶素,有色稻山奈酚和儿茶素含量大于无色稻;糙米中含有较高的黄酮类化合物,而精米中不含或少含黄酮类化合物.     

不同炮制法对对叶百部中对叶百部碱含量及药效的影响

为了探讨对叶百部经炮制后的对叶百部碱含量的变化,并了解其不同炮制方法以及泡制前后的止咳作用变化,本研究通过正交试验法确定对叶百部蒸炙、酒炙、蜜炙、甘草炙最佳炮制工艺,并通过HPLC法测定对叶百部碱含量,用实验小鼠做止咳研究比较炮制对该药材止咳药效的影响。研究结果表明,对叶百部炮制后其对叶百部碱含量均有不同程度升高,炮制前后对叶百部碱含量由高到低的次序为蒸炙酒炙蜜炙甘草炙生品。泡制时均取采用0.2～0.3 mm厚度的对叶百部药材,按照规定炮制。甘草制对叶百部最佳炮制工艺为用甘草汁与对叶百部比例为60∶100浸润20 min,炮制温度100℃,炒制1次。酒灸炮制对叶百部最佳炮制工艺为用黄酒比百部比例为80∶100浸润20 min,炮制温度120℃,炒制15 min。蒸灸对叶百部最佳炮制工艺为蒸制1 h,蒸制功率为600 w,蒸制2次。蜜炙对叶百部最佳炮制工艺为用蜜水比为10∶10,在120℃下炮制10 min。实验小鼠止咳药效试验表明,给药剂量为0.50 g/kg、0.25 g/kg时,对叶百部蒸灸制品、蜜炙制品、酒炙制品、甘草炙制品均具有显著性差异,均能延长小鼠咳嗽的潜伏期。本研究初步结论说明,对叶百部炮制后其对叶百部碱含量会有不同程度升高,炮制后对该药材的止咳作用提高,即炮制后可增效。     

白喉乌头及其炮制品生物碱成分变化与细胞毒性研究

摘要 目的：比较白喉乌头生品、炮制品生物碱成分的含量变化及其细胞毒性。方法：将白喉乌头生品及哈萨克法炮制品（以下简称"炮制品"）采用高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography，HPLC）分析比较，测定炮制前后各提取液生物碱成分的变化；用MTT比色法分析比较不同浓度白喉乌头生品及炮制品提取液的细胞毒性。结果：白喉乌头经炮制，乌头碱及次乌头碱峰面积显著减少，降低率分别为 45.1 %和 74.5 %；去乙酰高乌甲素峰面积明显升高，升高率为62.2 %；高乌甲素、冉乌头碱及去乙酰冉乌头碱峰面积基本不变；同时，有新的色谱峰产生，说明经炮制有新成分产生；白喉乌头生品及炮制品提取液浓度分别为在5000、2500、1250、625、312.5 μg/mL 给药48 h，与白喉乌头生品提取液相比，其炮制品提取液细胞抑制率明显降低（P＜0.05），白喉乌头生品及炮制品的IC50分别是1826.70 μg/mL、3192.48 μg/mL。结论：白喉乌头经炮制，主要成分的色谱峰面积发生了变化，同时有新色谱峰产生，其毒性成分乌头碱、次乌头碱峰面积明显减少，说明乌头碱、次乌头碱含量减少，通过 MTT 比色法检测细胞毒性，证明其达到减毒目的。     

品种、产地和采收年份对吴茱萸主要活性成分含量的影响

目的:研究吴茱萸品种、产地、采收年份三个因素对药材品质的影响,为吴茱萸药材生产利用提供参考。方法:应用HPLC方法测定吴茱萸果实吴茱萸内酯、吴茱萸碱和吴茱萸次碱的含量,以此为指标考察不同品种、不同产地、不同采收年份吴茱萸药材品质的差异。结果:吴茱萸品种不同成分含量差异大,同地区石虎和疏毛吴茱萸有效成分含量比吴茱萸高。疏毛吴茱萸以广西的柳城和桂林等地含量较高,而石虎以贵州铜仁和湖南新晃等地含量较高。石虎不同采收年份药材含量受天气及树龄影响。结论:吴茱萸药材品质受品种、产地及树龄的影响。     

栽培与野生化血丹不同部位中两种化学成分含量分析

为探讨并分析栽培与野生化血丹植株中不同部位中两种化学成分的含量差异,该研究采用超声法提取、高效液相色谱法(HPLC)测定栽培与野生化血丹根、茎、叶、花、混合样等部位中桃叶珊瑚苷和梓醇的含量,并进行比较。结果表明:(1)桃叶珊瑚苷在栽培与野生化血丹植株内均有分布,含量均以根中最高,其在栽培与野生化血丹植株内的含量表现分别为根>叶>混合样>茎>花、根>混合样>茎>花>叶,栽培化血丹不同部位中桃叶珊瑚苷的含量均高于野生化血丹。(2)梓醇在栽培化血丹的茎中未检出,在栽培与野生化血丹其他部位均有分布,含量均以叶中最高,其在栽培与野生化血丹植株内的含量分别表现为叶>花>混合样>根、叶>混合样>茎>花>根,野生化血丹不同部位中梓醇的含量均高于栽培化血丹。(3)桃叶珊瑚苷和梓醇在栽培和野生化血丹植株不同部位中的含量均存在显著差异(P<0.05),栽培与野生同一部位间总体上无显著差异,为该濒危药用植物资源药用部位选择和合理开发利用提供实验参考。     

金刺梨果实和叶中酚类、Vc含量及其抗氧化能力分析

为了解贵州金刺梨（Rosa sterilis D.Shi）果实和叶片中的活性成分及其抗氧化活性,以贵州普定县金刺梨种植基地的果实和叶片为试材,测定其活性成分含量及其抗氧化活性,并对各项指标进行相关性分析。结果显示：没食子酸、芦丁、槲皮素、儿茶素、鞣花酸、绿原酸、阿魏酸是供试金刺梨果实和叶片的主要酚类成分,金刺梨果实和叶片中活性组分差异显著（P<0.05）,果实中p-香豆酸、总黄酮和抗坏血酸的含量相对较高,而叶片中没食子酸、儿茶素、绿原酸、表儿茶素、阿魏酸、鞣花酸、芦丁、槲皮素和总酚含量均高于果实;金刺梨果实抗氧化活性值均显著高于叶片（P<0.05）;相关性分析发现：总黄酮对总还原力（TRPA）值的贡献极强,抗坏血酸对Fe³⁺还原抗氧化能力（FRAP）值贡献最强,槲皮素对ABTS值的贡献最强,说明金刺梨果实和叶片是一种具有较高开发价值的药食同源资源。     

不同生境三种杜鹃属植物花特征比较

生境影响植物花部特征的分化.为探究不同人为干扰强度生境是否影响杜鹃花特征分化和资源分配,以及不同颜色杜鹃花分布情况,该研究以百里杜鹃保护区高、中、低人为干扰强度生境的马缨杜鹃、迷人杜鹃和露珠杜鹃为实验材料,采用五点取样法统计不同生境杜鹃花的植株数量,游标卡尺测量花部特征,光学显微镜统计花粉数,海洋光谱仪测定花色的反射光...     

黄龙山白桦桦木醇与桦木酸含量研究

为了阐明黄龙山白桦不同生境、不同径级、不同器官桦木醇与桦木酸含量,系统采集了陕北黄土高原黄龙山林场阳坡、阴坡、林缘、孤立木4种生境下的白桦不同径级植株的树皮、树枝和树叶样品,采用超声波辅助提取法提取样品,用高效液相色谱法测定了不同生境、不同径级白桦各器官桦木醇、桦木酸含量。结果表明：（1）不同生境下白桦各器官桦木醇、桦木酸含量均存在显著差异（P＜0.05）,白桦树皮中桦木醇与桦木酸含量、白桦树枝中桦木酸含量在4种生境下均表现为阴坡＞孤立木＞林缘＞阳坡,白桦树叶中桦木醇与桦木酸含量及树枝中桦木醇含量均表现为阴坡＞林缘＞孤立木＞阳坡,总体来看阴坡生境下白桦各器官桦木醇与桦木酸含量都是最高的。（2）在白桦各器官中,桦木醇、桦木酸含量均表现为树皮＞树枝＞树叶。（3）不同生境下白桦各器官桦木醇、桦木酸含量随着胸径的增大均先增大后减小,均在第Ⅱ径级即胸径10.1~20 cm达到最大。研究认为,阴坡生境有利于白桦各器官积累桦木醇、桦木酸;白桦各器官中桦木醇含量较高,桦木酸含量比较低,而以桦木酸为原料的生物制剂已进入临床应用阶段,因此,以桦木醇为原料制取桦木酸是解决桦木酸在天然植物中含量低、提取困难的有效途径;对白桦各器官的采收应注意把握时机,于白桦生长到胸径10.1~20 cm时为最佳采收期。     

Variation in Phenolic Content,Profile, and Antioxidant Activity of Seeds among Different Paeonia ostii Cultivated Populations in China

The purpose of this study was to analyze the phenolic profiles of seeds from fifteen Paeonia ostii cultivated populations in China and identify their relationship with antioxidant activities and associated environmental factors. Thirteen individual phenolic compounds were quantitatively determined by HPLC, and (+)‐catechin was the most abundant phenolic compound in the seeds. Correlation analysis showed that phenolics were the most effective antioxidant compound class by evaluating DPPH, ABTS, and hydroxyl radical scavenging activities as well as ferric reducing antioxidant power. Latitude and annual rainfall had significant effects on the contents of many phenolic compounds, and elevation was only significantly correlated with gallic acid content. Within fifteen P. ostii cultivated populations, the seeds of Tongling population exhibited the highest phenolic contents and strongest antioxidant activities. These results suggest that Tongling population has a relatively high utilization value and a potential for sources of natural antioxidants.     

芦苇腐解土中酚酸类化感物质的水分响应特性研究

芦苇和虉草均具有较强的去污能力,常作为湿地植物配置于同一人工湿地进行污水处理。芦苇作为一种强化感植物对虉草具有较强的化感作用,在自然湿地和人工湿地中均会出现芦苇代替虉草的现象,且这一现象的发生与土壤含水量存在一定联系,此外,芦苇腐解土对虉草的化感抑制效应与腐解土中总酚酸的量密切相关。为了研究芦苇腐解土中主要酚酸类物质的水分响应特性,筛选出其中对水分响应较为明显的酚酸物质种类,该研究采用高效液相色谱法,通过芦苇枯落物腐解土的制备,对不同水分环境下芦苇腐解土中酚酸类物质进行了分离和鉴定。结果表明:芦苇腐解土中可分离出没食子酸、香豆酸、香草酸、丁香酸、对香豆酸、阿魏酸、水杨酸和苯甲酸等8种酚酸类物质,其中香豆酸、苯甲酸和阿魏酸等3种酚酸类物质含量较高。分离出的8种酚酸类物质的含量与腐解土的相对含水量均呈显著线性负相关关系,即随着腐解土相对含水量的上升,酚酸类物质的含量均呈现下降趋势,且各种酚酸类物质对水分的响应趋势均可用线性方程较好地拟合。其中,香豆酸、没食子酸和阿魏酸对芦苇腐解土的水分响应最为明显。因此,可将香豆酸、没食子酸和阿魏酸作为主要调控目标,通过调控湿地土壤中水分含量,削弱芦苇对虉草的化感抑制效应,从而维持人工湿地中虉草芦苇群落的长期稳定共存。     

Production of gibberellins and indole-3-acetic acid by Rhizobium phaseoli in relation to nodulation of Phaseolus vulgaris roots

Similar ranges of gibberellins (GAs) were detected by high-performance liquid chromatography (HPLC)-immunoassay procedures in ten cultures of wild-type and mutant strains of Rhizobium phaseoli. The major GAs excreted into the culture medium were GA₁ and GA₄. These identifications were confirmed by combined gas chromatographymass spectrometry. The HPLC-immunoassays also detected smaller amounts of GA₉- as well as GA₂₀-like compounds, the latter being present in some but not all cultures. In addition to GAs, all strains excreted indole-3-acetic acid (IAA) but there was no obvious relationship between the amounts of GA and IAA that accumulated. The Rhizobium strains studied included nod ^– and fix ^– mutants, making it unlikely that the IAA- and GA-biosynthesis genes are closely linked to the genes for nodulation and nitrogen fixation.The HPLC-immunoassay analyses showed also that nodules and non-nodulated roots of Phaseolus vulgaris L. contained similar spectra of GAs to R. phaseoli culture media. The GA pools in roots and nodules were of similar size, indicating that Rhizobium does not make a major contribution to the GA content of the infected tissue.Abbreviations EIA enzyme immunoassay - GA_n gibberellin A_n - GC-MS gas chromatography-mass spectrometry - HPLC high-performance liquid chromatography - IAA indole-3-acetic acid - Me methyl ester - RIA radioimmunoassay - TLC thin-layer chromatography     

Agrobacterium rhizogenes-mediated transformation of Echinacea purpurea

Summary Echinacea purpurea seedlings were inoculated with several Agrobacterium rhizogenes strains in order to obtain hairy roots. Infection with A. rhizogenes strains LMG63 and LMG150 resulted in callus formation. Upon infection with strains ATCC 15834 and R1601 hairy roots were obtained. Opine detection confirmed transformation of E. purpurea. Comparative HPLC fingerprint analysis of the alkamides from natural plant source, control tissues, and transformed callus and roots indicated that transformed callus and hairy roots might be a promising source for continuous and standardized production of the dodeca-2E,4E,8Z,10E/Z-tetraenoic acid isobutylamide and related amides.Abbreviations HPLC high-pressure liquid chromatography - MS Murashige and Skoog culture medium     

不同生境鱼腥草形态特征及主要有效成分含量差异分析

以不同生境中的鱼腥草为研究对象,分析其形态特征及主要有效成分含量的差异。该文测定了不同生境下主要环境因子指标及鱼腥草的叶长、叶宽、株高、基径、生物量和含水量,用高效液相色谱法测定其各部分主要有效成分金丝桃苷、槲皮苷含量,并对测量结果进行单因素方差分析和相关性分析。结果表明:环境因子会对鱼腥草的形态建成及有效成分积累造成不同影响,适宜的光照强度有利于鱼腥草对有效成分的累积;鱼腥草中有效成分的含量表现出叶茎根的规律。适宜的遮阴处理,既可避免强光照对鱼腥草生长的抑制,又可显著提高有效成分的含量,从而整体增加对鱼腥草有效成分的收益。