根癌农杆菌介导转录因子CBF1基因对草莓的转化

以草莓(Fragaria ananassa Duch)品种“达斯莱克特“(Darselect)为试材,用根癌农杆菌介导的方法,将转录因子CBF1基因导入草莓叶盘细胞,经多次筛选获得了转基因植株.转化植株经PCR检测,证实了CBF1基因已经整合到草莓的基因组中.以电解质渗透法检测了植株的抗寒性,结果显示转基因草莓的抗寒能力较未转化植株有明显提高,且不同转基因株系之间提高程度有着差异.     

果实香气形成及其影响因素

综述了苹果(Malus domestica Borkh.)、草莓(Fragaria ananassa Duch.)、香蕉(Musa paradisiaca)、甜瓜(Cucumis melon L.)和番茄(Lycopersicon esculentum L.)等果实香气的化学成分、主要合成途径及其影响因素.果实的香气物质主要包括酯类、醇类、酮类、醛类、萜类和挥发性酚类物质等,这些物质主要由脂肪酸、氨基酸和次生代谢产生.品种、成熟度、乙烯、环境和栽培措施(光照、砧木、套袋和灌溉等)以及采后贮藏条件均影响果实香气的形成.     

我国野生草莓资源的初步研究

草莓是一种重要的小浆果,其果实营养丰富,风味鲜美,经济价值极高。全世界的草莓属植物大约有50个种,分布比较广泛的有16种,除了风梨草莓广为栽培外,其它均为野生种。我国野生草莓资源极为丰富。据俞德浚教授记述,原产于我国的草莓属植物有7个种,它们是:森林草莓(Fragaria vesca)、东方草莓(F.orentalis)、黄毛草莓(F.nilgerrensis)、五叶草莓(F.pentaphylla)、纤细草莓(F.gracillis)、西南草莓     

洋蘑菇的栽培

一、洋蘑菇在我国的栽培簡况洋蘑菇是屬真菌门,担子纲、伞形目、伞形科环状伞菌屬。学名为Psalliota campestris Fr. 蘑菇为蔬菜中的佳品,味鮮美。我国人民常讲“山珍海味”,菌类可为“山珍”代表。     

栽培草莓叶绿体分离与cpDNA的提取方法

以栽培草莓‘红颊’(Fragaria×ananassa Duch.‘Benihoppe’)新鲜幼嫩叶片为材料,利用高盐-低pH的缓冲液结合Percoll密度梯度离心分离纯化叶绿体,再用SDS-蛋白酶K法提取叶绿体DNA(cpDNA)。经荧光显微镜、琼脂糖凝胶电泳和PCR扩增检测,结果表明:该方法分离的草莓叶绿体完整性高,叶绿体DNA质量好,纯度高,能够满足后续基因组测序等实验的基本要求,为草莓属及其他草本植物cpDNA的提取提供参考。     

栽培草莓潜在印记基因FaTRG-31的克隆与特征分析北大核心CSCD

在前期通过筛选获得草莓候选印记基因FaTRG-31(turgor-responsive protein 31)的基础上,以八倍体栽培草莓‘红颜’(Fragaria×ananassa Duch.‘Benihoppe’)为材料,对FaTRG-31基因的编码序列进行克隆、生物信息学、组织表达、启动子和印记特性分析,以揭示该基因的作用机理,为草莓印记基因表达调控及生物学功能研究奠定基础。结果显示:(1)草莓FaTRG-31基因开放阅读框(ORF)全长999 bp,编码332个氨基酸,含有典型的Asn-Pro-Ala(NPA)基序和6个跨膜结构,定位于细胞质膜,属于典型的AQP蛋白(aquaporin)家族;系统进化树深入分析表明FaTRG-31为PIPs(plasma intrinsic proteins)亚家族1型蛋白。(2)草莓FaTRG-31在不同组织中均有表达,胚乳中的表达量最高,且在FaTRG-31基因上游克隆出的1989 bp启动子序列中发现含有与胚乳特异表达相关的作用元件,此外还有多种非生物胁迫响应元件和激素响应元件等。(3)草莓印记特性分析结果显示,FaTRG-31在胚乳中的SNP(single nucleotide polymorphism)位点处测序峰为单峰且是母本表达,即该基因在栽培草莓胚乳中为母本表达印记基因。(4)非生物胁迫处理后分析发现,草莓FaTRG-31基因能在不同程度上响应非生物胁迫。     

果实香气形成及其影响因素

综述了苹果(Malus domestica Borkh.)、草莓(Fragaria ananassa Duch.)、香蕉(Musa paradisiaca)、甜瓜(Cucumis melon L.)和番茄(Lycopersicon esculentum L.)等果实香气的化学成分、主要合成途径及其影响因素。果实的香气物质主要包括酯类、醇类、酮类、醛类、萜类和挥发性酚类物质等,这些物质主要由脂肪酸、氨基酸和次生代谢产生。品种、成熟度、乙烯、环境和栽培措施(光照、砧木、套袋和灌溉等)以及采后贮藏条件均影响果实香气的形成。     

干旱和复水对草莓叶片叶绿素荧光特性的影响

采用日本丰香草莓(Fragaria×ananassa Duch.cv.Toyonoka)品种进行实验,研究干旱和复水对其叶片叶绿素荧光特性的影响。结果表明,随着干旱胁迫程度的加剧,草莓叶片的最大荧光(Fm)、PSⅡ原初光能转化效率(Fv/Fm)、PSⅡ实际光化学效率(Yield)、光化学猝灭系数(qP)都随干旱胁迫的加剧而下降。干旱胁迫14d后,不同处理组草莓叶片的叶绿素荧光参数存在着显著的差异(P0.05)。复水后,低度胁迫和中度胁迫处理组能较快地恢复到正常水平,但重度胁迫组与对照组存在着显著的差异(P0.05)。     

红颜草莓叶盘再生及遗传转化体系的优化

草莓离体组织再生和遗传转化体系的研究对草莓分子育种至关重要。为了优化农杆菌介导草莓品种红颜(Fragaria×ananassa Duch.Benihoppe)的遗传转化体系,本研究以红颜草莓组培苗的离体叶盘作为试验材料,首先确定了其离体再生的最佳条件,对影响转化效率的因素进行优化,获得了稳定高效的再生及转化体系。结果表明,红颜草莓离体叶盘最佳暗培养时间为9 d,最佳愈伤诱导培养基为MS+TDZ(2. 0 mg/L)+IBA(0. 1 mg/L)+2,4-D(0. 1 mg/L),最佳愈伤分化培养基为MS+6-BA(0. 5 mg/L)+NAA(0. 1 mg/L),转化体系的最佳组合为预培养2 d、添加300μmol/L的AS、以OD600nm=0. 6的EHA105型的农杆菌浸染5 min、共培养5 d。经优化后的红颜草莓叶盘再生及遗传转化体系对该品种的进一步优化和选育有重要意义。     

不同品种南瓜POD及PPO同工酶的比较研究

采用垂直平板聚丙烯酰胺凝胶电泳技术,对美洲南瓜（Cucurbita pepo L.）和中国南瓜（C.moschata Duch.）共10个不同栽培品种的过氧化物酶（POD）及多酚氧化酶（PPO）同工酶进行了分析研究,并采用聚类分析法对其亲缘关系进行了比较和分类。结果表明,10个不同品种的南瓜根POD共分离出10条酶带,其中el、e4、e5、e6和e9为2个栽培种所共有;e4、e5、e6分离清晰,可作为2个栽培种的特征酶带;PPO同工酶分离出6条酶带,其中e′1和e′4分离清晰,为2个栽培种所共有。     

五倍体草莓及其十倍体的叶片差异表达蛋白分析

以二倍体绿色草莓(Fragaria viridis Duch.)为父本、八倍体栽培草莓‘房香’(F.×ananassa‘Fusanoka’)为母本杂交所得的五倍体草莓(株系代号:FxLs-11-37,2n=5x=35)及其染色体加倍而成的十倍体(株系代号:A3,2n=10x=70)草莓为试材,观察记载其部分农艺性状、SPAD值以及净光合速率,利用双向凝胶电泳技术对草莓染色体加倍后叶片蛋白质进行了分析,获得了分辨率高、重复性好的电泳图谱。结果表明:(1)与五倍体FxLs-11-37相比,十倍体A3的株型明显矮化、植株冠径变大、叶长叶宽增大、叶片增厚以及叶色浓绿,其叶片的SPAD值与净光合速率显著高于FxLs-11-37。(2)通过PDQuest软件对图谱分析表明,两者在等电点4~7、分子量14.4~66.2kD范围内蛋白质斑点分布最多,可识别的总蛋白质斑点数超过700个,其中蛋白质表达差异水平在1.5倍以上的有18个,2.0倍以上的有4个。利用MALDI-TOF-MS/MS质谱技术鉴定了这4个差异蛋白质,分别是草莓主要过敏原a 1-E、核内不均一核糖核蛋白1、叶绿体硫辛酰基合酶1、NAD(P)H脱氢酶(醌)FQR1类似蛋白质。这些差异蛋白质主要与抗逆、mRNA转运、物质与能量代谢相关。荧光定量PCR对上述4个蛋白编码基因的转录表达水平检测表明,与蛋白质表达差异的趋势一致。该研究获得了草莓染色体加倍后差异表达的蛋白质,为深入研究提供了线索。     

吉林省担子菌补记(八)

报道了6个吉林省新记录担子菌,即辅毛鬼伞[Coprinus radians(Desm.:Fr.)Fr.]、金黄拟蜡伞[Hy-grophoropsis aurantiaca(Wulf.:Fr.)Maire]、黄柄小菇[Mycena epipterygia(Scop.:Fr.)S.F.Gray]、黏柄小菇[Mycenarorida(Scop.:Fr.)Qu啨l.]、长齿白齿耳菌[Mycoleptodonoides aitchisonii(Berk.)Mass.]和大刷革[Xylobo-lus princeps(Jungh.)Boidin]。其中,黏柄小菇同时为中国新记录种,其他5种首次在我国东北地区发现,拟蜡伞属和白齿耳菌属为吉林省新记录属。标本保存于吉林农业大学菌物标本馆(HMJAU)。     

茉莉酸类物质在草莓果实发育中的作用及其分子机理分析

该研究以草莓‘红颜’(Fragaria ananassa Duch.‘Benihoppe’)为试材,于草莓花后15d采用注射法开始注射茉莉酸甲酯(MeJA,浓度为400μmol/L),分析MeJA对草莓果实发育进程的影响及其相关基因的表达,以揭示MeJA在草莓果实发育和成熟调控中的作用及其分子机理。结果表明:(1)MeJA处理草莓果实后,果实变红成熟期比对照显著提前,平均提前4d;(2)随着草莓果实发育成熟,MeJA处理的茉莉酸(JA)合成基因FaOPDA1的表达量迅速升高;(3)FaOPDA1基因在草莓果实中的超表达能够促进草莓果实提前成熟3~5d,且FaOPDA1基因的超表达能够诱导与草莓果实成熟相关的一系列基因的表达量升高,从而促进草莓果实提前成熟。     

基于体内外炎症模型研究羊耳菊提取物的抗炎活性

研究羊耳菊提取物的抗炎活性。通过D_(101)大孔树脂吸附法对羊耳菊粗提物进行富集分离,由此制备出不同极性的组分;采用体外抑菌实验对不同组分进行抑菌活性筛选,同时建立LPS刺激RAW 264.7细胞模型和小鼠耳肿胀动物模型,对不同组分进行抗炎活性评价。通过D_(101)大孔吸附树脂对粗提物进行富集分离,制备的五个不同组分:Fr.A、Fr.B、Fr.C、Fr.D和Fr.E。其中Fr.E组(60%乙醇组分)的抗炎效果优于其余各组。抑制NO和TNF-α的释放作用分别为53.32±1.14、56.46±2.02,小鼠耳肿胀实验的肿胀抑制率为54.81%。羊耳菊Fr.E组分(60%乙醇组分)为羊耳菊抗炎的主要有效组分。     

越桔红色素的初步研究

越桔(Vaccinium Vitis—idaea L·)也叫做红豆、牙疙瘩,属杜鹃花科(Ericaceae)越桔属(Vaccinium)植物。它主要分布于我国的东北,以及苏联、朝鲜、日本和北美州等十几个国家。目前美国有人工栽培,其他国家为野生状态。越桔果实成熟后呈红色,含有色素。据Sakamura报导,早熟蔓越桔(V·macrocarpon Ait)每克含粗制色素为70毫克(鲜重);Zapsalla等鉴定色素的主要成分为四种,它们是矢车菊甙元—3—单半乳糖甙、芍药     

小麦21条染色体RFLP作图位点遗传多样性分析

对来自世界11个国家的15个小麦品种(系)(Triticum aestivum L.AABBDD,2n = 42)472个RFLP位点的遗传多样性进行了检测,并进行了逐条染色体分析,结果发现:(ⅰ) 15个品种在各条染色体上的聚类各不相同.根据472个遗传位点遗传多样性数据,15个品种可聚类为4类,Synthetic,Hope, Timgalen各为一类,其余品种为一类,遗传距离远近恰与其所携带的小麦亲缘种染色体数目有关.(ⅱ)普通小麦遗传多样性非常贫乏,不同国家来源的品种相似系数高达0.8以上,多数品种间的大多数位点无遗传多样性,有53%的位点在供试的栽培品种中完全无多样性.(ⅲ)以四倍体小麦(AABB)和粗山羊草(DD)为亲本的品种(系)中,其对应的染色体上有较高的遗传多样性,其中有49.4%的等位变异在供试栽培种中没有发现,说明小麦的原始供体种是丰富现代栽培小麦遗传多样性的重要资源.(ⅳ) 根据遗传多样性位点及其作图位置, 可以检测到小麦栽培品种与其亲缘种杂交后代中亲缘种的染色体(片段).(ⅴ)在小麦的A,B,D3个基因组中, B基因组的遗传多样性最高,D基因组最差(尤以1D最甚),A基因组居中.(ⅵ)中国古老栽培品种中国春(CS)与国外栽培品种主要差异表现在染色体1B,3B和5A上,并发现了12个中国春的特异等位变异.认为现代栽培小麦遗传多样性狭窄是目前小麦育种难以取得突破的关键问题之一,并对如何丰富小麦的遗传多样性提出了建议.     

钠盐和钙盐胁迫对草莓光合作用的影响

以草莓(Fragaria ananassaDuch.)达塞莱克特品种为试材,采用盆栽法研究了NaCl、CaCl2、Ca(AC)2和Ca(NO3)2胁迫对其生长及光合特性的影响.结果表明,4种盐胁迫下草莓的生物产量、叶绿素含量、净光合速率、蒸腾速率和气孔导度显著降低,且盐浓度越高,下降幅度越大.其中,净光合速率、蒸腾速率和气孔导度的降幅由大到小依次为:Ca(AC)2>Ca(NO3)2>CaCl2>NaCl.与对照相比,NaCl胁迫下草莓根冠比减小,而钙盐胁迫下草莓的根冠比增大,且各盐处理内均随盐浓度增加而增大.钙盐胁迫对草莓光合作用的影响大于钠盐,其中,NaCl胁迫对植株的伤害最小,Ca(AC)2处理的伤害最大.     

利用GISH和RAPD检测黄毛草莓×凤梨草莓种间杂种

以地高辛(DIG)标记的黄毛草莓基因组DNA为探针、凤梨草莓基因组DNA为封阻对黄毛草莓×凤梨草莓杂种F1的五倍体植株根尖染色体进行基因组原位杂交(GISH),结果表明利用GISH可将黄毛草莓染色质从凤梨草莓中检测出来,从而证实了黄毛草莓与凤梨草莓种间杂交的真实性.利用RAPD技术对来自黄毛草莓与凤梨草莓不同品种的2个杂交组合获得的14个株系及其亲本的DNA指纹图谱进行分析.结果表明,不同株系之间在基因组水平上具有高度异质性,以引物S1371和S1405能将黄毛草莓×春霄组合的10个杂交后代株系加以区别,以单一引物S1371、S1380、S1397、S1404、S1405可使黄毛草莓×硕香后代株系之间相互区别.在杂交后代中观察到了亲本黄毛草莓与凤梨草莓不同栽培品种的特征带,从而进一步证实黄毛草莓与凤梨草莓种间杂交后代的真实性.     

中国球盖菇科(六):盔孢菌属

通过观察吉林农业大学菌物研究所标本馆(HMJAU)、中国科学院微生物研究所菌物标本馆(HMAS)、中国科学院昆明植物研究所标本馆隐花植物标本馆(HKAS)和广东微生物研究所标本馆(GDGM)及作者野外采集标本的宏观形态和微观结构,对中国盔孢菌属进行了分类学研究。对中国分布的16个种进行了形态学描述、显微线条图绘制,并编写了分组、分种检索表。其中,包括内蒙古新记录种2个:秋生盔孢菌[Galerinaautumnalis(Peck)A.H.Sm.&Singer]和单色盔孢伞[Galerina unicolor(Vahl)Singer];黑龙江省新记录种3个:异囊盔孢菌[Galerina heterocystis(G.F.Atk.)A.H.Sm.&R.Sin.]、黄褐盔孢伞[Galerina helvoliceps(Berk.&M.A.Curtis)Singer]和沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];吉林省新记录种2个:异囊盔孢菌[Galerina heterocystis(G.F.Atk.)A.H.Sm.&R.Sin.]和苔藓盔孢菌[Galerina hypnorum(Schrank)Kühner];辽宁省新记录种1个:黄褐盔孢伞[Galerina helvoliceps(Berk.&M.A.Curtis)singer];浙江省新记录种1个:沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];湖北省新记录种1个:沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];湖南省新记录种1个:秋生盔孢菌[Galerina autumnalis(Peck)A.H.Sm.&Singer];广西省新记录种1个:沟条盔孢菌[Galerina vit-tiformis(Fr.)Earle];四川省新记录种3个:苔藓盔孢菌[Galerina hypnorum(Schrank)Kühner]、条盖盔孢菌[Galerina sulciceps(Berk.)Singer]和沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];贵州省新记录种3个:单色盔孢伞[Galerina unicolor(Vahl)Singer]、毒盔孢菌(Galerina venenataA.H.Sm.)和沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];西藏新记录种3个:单色盔孢伞[Galerina unicolor(Vahl)Singer]、黄褐盔孢伞[Galerina helvoliceps(Berk.&M.A.Curtis)Singer]和沟条盔孢菌[Galerina vittiformis(Fr.)Earle];新疆新记录种1个:黄褐盔孢伞[Galerina helvoliceps(Berk.&M.A.Curtis)Singer]。     

吉林省延吉盆地早白垩世被子植物化石

吉林省延吉盆地大拉子组的被子植物化石约有10种。它们具有早白垩世较原始被子植物的形态特征,和北美早白垩世波托马克群的Ⅰ-Ⅱ带的植物分子相同,并与蒙古早白垩世(Neocomian)植物群有些接近,而与苏联、葡萄牙等地的早白垩世(Albian)的被子植物差别甚大,故大拉子组的时代可暂归于 Aptian。植物组合特征说明在早白垩世中期,北半球的欧亚和北美植物区系具有更为密切的关系。并从植物组合及沉积特征分析了古环境。