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血链球菌拮抗可疑牙周病原菌机理探讨Ⅱ细菌素的产生及影响因素 总被引:1,自引:0,他引:1
血链球菌产生细菌素(血链素)至培养上清液中,无论是需氧或厌氧环境,血链球菌均可产生血链素。采用无水乙醇沉淀法提取血链球菌培养上清液中的蛋白质,运用SDS-PAGE分析其蛋白成份,发现有130kd、120kd、74kd、和56kd四条蛋白区带,通过电泳凝胶弥散法抑菌试验显示,56kd蛋白带具很强的抑菌活性,提示此蛋白质可能为血链素的所在位置。 相似文献
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本研究建立一种敏感的抑菌试验,微量琼脂糖弥散法,分析血链球菌培养上清液的抑菌作用。结果发现,牙周病原菌在血链球菌培养上清液中孵育30min,菌落形成数低于对照组,微量琼糖弥散法测定血链球菌培养上清液的抑菌活性,显示血链球茵培养12h后,培养上清液出现抑菌活性,72h达高峰。在有蔗糖及pH8.5TPY培养基中培养的血链球菌上清液可形成较大抑菌环,厌氧环境培养的血链球菌上清掖抑菌活性略高于需氧环境。 相似文献
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血链球菌拮抗可疑牙周病菌要同理探讨:Ⅰ.血链球菌培养上清… 总被引:1,自引:0,他引:1
本研究建立一种敏感的抑菌试验,微量琼脂糖弥散法,分析血链球菌培养上清液的抑菌作用。结果发现,牙周病原菌在血链球菌培养上清注保孵育30min,菌落形成数低于对照组;微量琼糖弥散法测定血链球菌培养上清液的抑菌活性,显示血链球菌培养12h后,培养上清液出现抑菌活性,72h达高峰。 相似文献
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嗜热链球菌CGMCC 1.1864所产的一种新型细菌素ST9 总被引:2,自引:1,他引:1
本文利用琼脂扩散法测定嗜热链球菌(Streptocccus thermophilus) CGMCC 1.1864发酵上清液的抑菌效果, 结果表明此菌能够产生抑菌物质, 且在排除有机酸和过氧化氢的影响后上清液不但能抑制革兰氏阳性菌, 对革兰氏阴性菌也有抑制能力。此抑菌物质具有热稳定性, 于100°C处理
2 h及121°C处理20 min仍保留抑菌活性, 但若将其在100°C处理2 h的上清液立即置于?20°C保存, 其抑菌活性有较大损失。常温下(37°C), 该抑菌物质在pH 2.0?9.0范围内有很好的稳定性。发酵上清液经各种蛋白酶及?-淀粉酶处理后抑菌活性完全消失, 而对过氧化氢酶不敏感, 表明此抑菌物质为多肽, 属于细菌素, 本文初步将其命名为嗜热链球菌素ST9。由于ST9对其产生菌具有吸附作用, 选择pH吸附释放法对该嗜热链球菌素进行粗提, 然后经SephadexG-25凝胶层析柱除去杂蛋白, 最后冷冻干燥得纯品。通过Tricine-SDS-PAGE分析得到其分子量约为5.0 kD。 相似文献
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厌氧条件下微量琼脂糖弥散法抑菌试验的建立及应用 总被引:1,自引:0,他引:1
作者建立了在厌氧条件下两种微量而敏感的抑菌试验,可用于鉴定蛋白质或多肽类抑菌物质。(1)琼脂糖弥散法:可检测抗菌蛋白抑菌活性,(2)电泳凝胶弥散法:可直接确定存在于PAGE凝胶中抗菌蛋白条带。应用这两种方法,作者首次鉴定出血链球菌培养上清液中存在抑制牙周可疑致病菌的抗菌蛋白。 相似文献
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血链球菌细菌素抑菌活性研究 总被引:2,自引:0,他引:2
检测分离纯化的血链球菌细菌素对牙周可疑致病菌的抑制作用。通过羟基磷灰石(HA)柱层析、SephadexG-150凝胶柱层析、中空纤维柱超滤脱盐、浓缩纯化提取血链球菌细菌素,以具核梭杆菌为指示菌,洞平板法检测细菌素的抑菌活性。经HA柱层析得到4个相互分离的组分,经洞平板法检测,第Ⅱ峰的蛋白具有抑菌活性,冻干后得纯化后的细菌素,终产率为0.082%;1mg/mL的细菌素溶液可形成17mm的抑菌环,最小抑菌浓度为62.5μg/mL。血链球菌细菌素对牙周可疑致病菌具有较强的拮抗作用。 相似文献
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目的:研究血链球菌A19培养上清液对脑膜炎球菌的定量抑菌作用。方法:将血链球菌A19培养上清液抽滤除菌,加入含一定浓度脑膜炎球菌培养液37℃作用24、48、72小时后分别进行活菌计数。结果:作用24小时后对照组细胞数增加,而试验组细菌数减少,抑菌率为98.93%;48小时后为84.10%;72小时后为66.67%;结论:血链球菌A19对脑膜炎球菌的抑菌作用是由于其代谢产物中含有抑菌成分,若提纯此成 相似文献
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本文合成了一种腺苷亲和层析凝胶,并采用亲和层析法从牛脑细胞膜上分离出了几种膜上结合的腺苷结合蛋白质。这些蛋白质在SDS-PAGE电泳凝胶上为单一或主要的蛋白带,分子量分别为64kd,45kd,35kd。腺苷转运体抑制剂潘生丁和NBMPR对64kd蛋白与^3h-腺苷的结合抑制作用远强于腺苷受体的激动剂NECA和R-PIA;这表明64kd蛋白为牛脑细胞膜上结合的腺苷转运体。 相似文献
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目的研究罗伊乳杆菌对变形链球菌的拮抗作用,初步了解产生拮抗作用的原因。方法利用罗伊乳杆菌无菌上清液,应用双层平板打孔法测定其抑菌效果,再通过滤纸片抑菌法对罗伊乳杆菌发酵的酸乳制品与普通酸乳制品对变形链球菌的抑菌作用进行比较,用饱和硫酸铵沉淀法分析产生拮抗作用的原因。结果罗伊乳杆菌有显著抑菌活性(P〈0.05),仅罗伊乳杆菌的发酵乳样品对变性链球菌产生直径为6.3mm抑菌圈,80%饱和硫酸铵沉淀的细菌素抑菌活力最强,蛋白酶K处理后无明显抑菌圈。结论本研究证明了罗伊乳杆菌的代谢产物以及罗伊乳杆菌发酵的酸奶制品对致龋菌变形链球菌有着明显的拮抗作用。 相似文献
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目的对唾液乳杆菌(Lactobacillus salivarius)ZDY159a的产酸能力和体外抑菌影响因素进行初步研究。方法采用共培养法和牛津杯法,以大肠埃希菌(Escherichia coli O157:H7)NCTC 12900和金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)CMCC 26003作为指示菌。结果唾液乳杆菌ZDY159a发酵产生的乳酸和乙酸均具有较强抑菌活性;发酵全液的抑菌活性强于发酵上清液;低p H与发酵上清液的抑菌活性呈正相关;蛋白酶和过氧化氢酶处理可降低发酵上清液的抑菌活性。结论唾液乳杆菌ZDY159a的抑菌活性与发酵过程中产生的有机酸、细菌素(蛋白或多肽类物质)和过氧化氢有关,且菌体可提高发酵上清液的抑菌活性。 相似文献
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丝瓜种籽,经捣碎,抽提,硫酸铵分级沉淀,CM-52离子交换层析,Sephacryl S-100分子筛,阳离子交换FPLC等步骤,分离到两种单链蛋白质生物合成抑制蛋白:Luffin-A和Luffin-B。它们都是等电点接近10的碱性蛋白,SDS-PAGE测定分子量分别约为27kd和28kd,氨基酸组成分析表明两者具有很大同源性,但免疫双扩散及ELISA检测证明两者的免疫原性有差异。Luffins对兔 相似文献
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目的:测定不同浓度PABA对牙龄卟啉单胞菌胰酶样蛋白酶(TLP)活性的影响,以探讨血链球菌在龈下菌微生态平衡中的作用。方法:在1/2浓度的BH培养基中加入不同浓度的PABA和一定浊度的P.gingivalis,行常规培养。测定培养物上清液和菌细胞中TLP活性及蛋白质含量,计算TLP的比活。结果:PABA对P.gingivalis TLP的比活产生促进作用。结论:PABA影响P.gingivalis TLP的活性提示血链球菌可能对龈下菌斑的微生态平衡具调节作用。 相似文献
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猪精子凝集素的纯化,性质及其作用 总被引:3,自引:1,他引:2
用胎球蛋白-Sepharose亲和层析和凝胶过滤层析从精子和精浆中分离纯化了猪精子凝集素(简称BSL)。BSL的血凝活性只被若干糖蛋白和聚糖所抑制。BSL的分子量为56kd,由分子量分别为13.6kd(β)和16.0kd(α)的两个不同的亚基以α1β3所组成。BSL为糖蛋白,含中性糖3.2%,不含唾液酸。用ELISA法测定猪精子中BSL的含量及分布,表明70%嵌入在精子膜中,25%结合在精子表面, 相似文献
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张丽娟 《微生物学免疫学进展》1988,(3)
<正> 早在80年前就已发现肺炎链球菌溶血素是肺炎链球菌产生的一种巯基激活的细胞溶素,但对其性质和在肺炎链球菌致病性中起的作用一直不清楚。生长在血琼脂平板上的肺炎链球菌菌落可以形成绿色的α溶血环,这种α溶血与肺炎球菌溶血素无关,已经证明加一滴纯化的肺炎球菌溶血素到血琼脂板上可以产生透明的β溶血。目前尚未有准确数据说明肺炎链球菌产生溶血素的频率,但发现从临床分离到的肺炎链球菌99%以上能产生这种溶血素。 相似文献
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丝瓜籽中蛋白质生物合成抑制蛋白的分离、纯化及性质研究 总被引:3,自引:2,他引:3
丝瓜(Luffacylindrica)种籽,经捣碎、抽提、硫酸铵分级沉淀,CM-52离子交换层析,Sephacry1S-100分子筛,阳离子交换FPLC等步骤,分离到两种单链蛋白质生物合成抑制蛋白:Luffin-A和Luffin-B。它们都是等电点接近10的碱性蛋白,SDS-PAGE测定分子量分别约为27kd和28kd,氨基酸组成分析表明两者具很大同源性,但免疫双扩散及ELISA检测证明两者的免疫原性有差异。Luffins对兔网织红细胞裂解液的蛋白质生物合成有强烈的抑制作用,IC50分别为1.4×10-11mol/L和2.0×10-11mol/L,比TCS的2.9×10-10mol/L低得多。因而,Luffins很有可能成为肿瘤导向药物的高效"弹头"。 相似文献
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天花粉同工凝集素-1经巯基乙醇还原,碘代乙酰胺保护,其链间二硫键被打开,但仍非共价结合在一起。我们利用尿素变性的Q-Sepharose离子交换层忻分离了此凝集素的两条链。氨基酸组成测定与其他3种肽链作一比较,它们都含有较多的酸性和羟基氨基酸。蛋白质印迹显示TKL的抗血清不仅能与TKL-1的两条链分别反应,也能与天花粉毒蛋白及蓖麻毒蛋白的A链起作用。溴化氰裂解的SDS-PAGER肽谱表明天花粉凝集素的两条链与天花粉毒蛋白含有类似的裂解片段,在分子量16kd左右有相同的电泳条带。TKL-1两亚基的N末端序列已经测定,同源性比较发现其33kd亚基的N末端序列与天花粉毒蛋白、蓖麻毒蛋白的一些肽段类似。迄今已有的证据表明TKL与TCS等是一些非常相关的蛋白质。 相似文献
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【目的】分析乳杆菌代谢产物对化脓性链球菌的抑制作用。【方法】基于双层平板打孔法,通过测量抑菌圈大小来检测乳杆菌代谢产物对化脓性链球菌的抑菌作用;然后分别采用高效液相色谱法和4-氨酰安替比林法检测乳杆菌代谢产物中的有机酸和H2O2含量;最后,检测乳酸、乙酸和H2O2对化脓性链球菌的最小抑菌浓度(MIC)、最小杀菌浓度(MBC)。【结果】对化脓性链球菌的抑菌效果以植物乳杆菌KLDS1.0667最好,副干酪乳杆菌KLDS1.0342-1次之,瑞士乳杆菌KLDS1.0203抑菌效果最差;乳酸和乙酸产量KLDS1.0667>KLDS1.0342-1>KLDS1.0203;H2O2产量KLDS1.0203>KLDS1.0667>KLDS1.0342-1。在抑菌试验中,乳杆菌的发酵上清液经去除H2O2处理后抑菌圈直径都减小;将发酵上清液的p H调至7.0后均检测不到抑菌圈。结果表明,乳杆菌代谢产物中对化脓性链球菌起抑制作用的主要物质为有机酸和H2O2,其中乳酸是产生抑菌作用的最主要物质。乳酸、乙酸和H2O2对化脓性链球菌的最小抑菌浓度(MIC)分别为1.28、0.64和0.008 g/L,对化脓性链球菌的最小杀菌浓度(MBC)分别为5.12、2.56和0.032 g/L。【结论】乳杆菌可利用其代谢产物对化脓性链球菌产生抑制作用,主要抑菌物质为有机酸和H2O2。 相似文献
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前期研究表明枯草芽孢杆菌HAINUP40能够有效拮抗罗非鱼无乳链球菌,是潜在的益生菌。为了进一步优化其培养条件,并探索其其抑菌机理,本研究通过普通平板扩散法和单因素变量控制法,探究了培养条件的改变对菌株HAINUP40发酵的影响,同时确定发酵上清液抑菌活性成分及其稳定性。结果表明菌株HAINUP40的最宜培养条件为:普通淡水培养基,pH值为7.0~7.5,温度34℃,培养时长24 h,转速为50~150 r/min。HAINUP40发酵上清液中抑菌活性物质可以被80%(NH_4)_2SO_4溶液析出,对蛋白酶K敏感,不耐高温,pH4或8时失去抑菌活性,可以耐受短时间(180 s)紫外线照射。综上证明枯草芽孢杆菌HAINUP40所分泌的抑菌活性物质为大分子蛋白质,且非小分子抗菌肽。本研究为枯草芽孢杆菌HAINUP40在生物防治方面的大规模应用提供了重要的参考依据。 相似文献
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筛选产类细菌素乳酸菌及类细菌素特性研究 总被引:1,自引:0,他引:1
从健康鸡肠道内容物及新鲜粪便中分离到21株乳酸菌,通过单层琼脂平板扩散实验,筛选出1株对藤黄微球菌(Micrococcus luteus)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)和枯草杆菌(Bacillus subtilis)等革兰氏阳性菌和大肠杆菌(Escherichia coli)等革兰氏阴性菌有明显抑菌活性代谢产物的乳酸菌,经细菌鉴定为乳杆菌属。排除酸和过氧化氢的干扰后,发酵液上清对指示菌仍有抑菌活性;用胰蛋白酶和蛋白酶K处理后抑菌活性明显降低,而胃蛋白酶对其活性无影响;用过氧化氢酶作用上清液,抑菌效果不变,说明过氧化氢未起作用;pH在2.0~7.0时,发酵上清液有抑菌活性;培养液粗提物经120℃处理20 min仍有部分活性,表明培养上清中有蛋白质类细菌素。 相似文献
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抗生物素蛋白结合蛋白的发现及分离纯化 总被引:2,自引:0,他引:2
本文报道了在日本血吸虫感染的兔血清及日本血吸虫卵中,存在一种能与抗生物素蛋白(又称亲和素)专一性结合的蛋白质,称为抗生物素蛋白结合蛋白。该蛋白质与亲和素的结合与生物素及亲和素的糖链部分无关,并能在高PH、高浓度盐及去污剂等条件下与亲和素结合。利用DEA-52离子交换柱及偶联有亲和素的Sepharose4B亲和层析柱,从日本血吸虫感染的兔血清中,分离纯化了该蛋白质。提纯的亲和素结合蛋白在SDS-PA 相似文献