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动物线粒体DNA提取简易流程及其优化 总被引:9,自引:0,他引:9
目的:研究动物线粒体DNA(mtDNA)提取的简易流程,以提取到纯度高、结构完整的动物mtDNA。方法:采用SDS碱变性法,从动物的肝脏和性腺等组织中提取mtDNA,并增加了DNaseⅠ、RNase消化步骤,以除去核DNA及RNA的污染;用紫外分光光度计分析mtDNA的纯度和得率。结果:mtDNA的得率为0.5~0.8μg/g,D260nm/D280nm值为1.77~1.82,能满足对mtDNA进行RFLP分析、RAPD分析、测序分析等的要求。结论:改进的动物mtDNA提取方法简便可行,值得推广。 相似文献
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鼬科动物线粒体DNA控制区结构分析 总被引:1,自引:0,他引:1
利用PCR技术获得紫貂(Martes zibellina)和黄喉貂(Martes flavigula)线粒体DNA控制区全序列,并结合从GenBank中下载的9种鼬科动物相应序列,用ClustalX排序后对控制区结构进行分析,识别出延长终止序列区、中央区和保守序列区3个区域,指出了一个终止相关序列ETAS1及8个保守序列(CSB-F、E、D、C、B、1、2和3),并给出了序列通式,在CSB1和CSB2之间发现不同形式的短重复序列.此外,以狼为外类群,应用邻接法构建鼬科线粒体控制区全序列的系统进化树,结果表明:臭鼬亚科最先从鼬科中分化出来,随后剩余类群分为两大支系,即貂属种类与貂熊聚为一支,并与獾亚科的狗獾形成姐妹群;另一支为水獭亚科的物种与鼬属的林鼬形成姐妹群,再与虎鼬聚在一起,狗獾与貂属的紫貂亲缘关系最近,水獭亚科与鼬属亲缘关系最近. 相似文献
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线粒体DNA(mitochondrial DNA mtDNA)的异质性自从被发现以来,一直被遗传学、进化学、发育遗传学以及法医遗传学、分子生物学领域所重视。由于线粒体异质性的存在,使得很多涉及疾病、进化、系统发育线粒体基因组与核基因组的相互作用关系、线粒体DNA复制机制以及法医学运用线粒体DNA进行实际案件评估的问题变得复杂化。此外线粒体DNA异质性的发生原因以及对线粒体异质性的检测方法标准化问题还没有一个统一的答案。针对线粒体DNA异质性带来的种种问题,近年来国内外取得了不少研究进展。 相似文献
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高等植物的线粒体含有结构复杂的庞大基因组。线粒体DNA有较为特殊的重组行为和来源,也可向细胞核转移,在植物系统发育中有重要作用。 相似文献
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动物线粒体DNA在进化遗传学研究中的应用 总被引:9,自引:0,他引:9
介绍了进化遗传学研究的主要内容、基本的研究方法以及线粒体的结构和遗传特点;综述了近年来线粒体DNA在进化遗传研究上的主要应用情况。 相似文献
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动物线粒体DNA的分子生物学研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
动物线粒体DNA的分子生物学研究进展张方米志勇(中国科学院发育生物学研究所北京100080)绝大多数的真核生物中都含有线粒体(mi-tochrodria,mt)这种细胞器,它自身携带DNA,可自我复制、表达,并有核基因编码的蛋白质和酶从细胞质输入线粒体,共同完成生物氧化的生理功能。通过多年来对各种生物线粒体基因组结构和功能的研究,人们推测线粒体起源于紫色光合细菌,这种细菌入侵真核生物,与真核... 相似文献
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Fedorova S. A. Bermisheva M. A. Villems R. Maksimova N. R. Khusnutdinova E. K. 《Molecular Biology》2003,37(4):544-553
To study the mitochondrial gene pool structure in Yakuts, polymorphism of mtDNA hypervariable segment I (16,024–16,390) was analyzed in 191 people sampled from the indigenous population of the Sakha Republic. In total, 67 haplotypes of 14 haplogroups were detected. Most (91.6%) haplotypes belonged to haplogroups A, B, C, D, F, G, M*, and Y, which are specific for East Eurasian ethnic groups; 8.4% haplotypes represented Caucasian haplogroups H, HV1, J, T, U, and W. A high frequency of mtDNA types belonging to Asian supercluster M was peculiar for Yakuts: mtDNA types belonging to haplogroup C, D, or G and undifferentiated mtDNA types of haplogroup M (M*) accounted for 81% of all haplotypes. The highest diversity was observed for haplogroups C and D, which comprised respectively 22 (44%) and 18 (30%) haplotypes. Yakuts showed the lowest genetic diversity (H = 0.964) among all Turkic ethnic groups. Phylogenetic analysis testified to common genetic substrate of Yakuts, Mongols, and Central Asian (Kazakh, Kyrgyz, Uighur) populations. Yakuts proved to share 21 (55.5%) mtDNA haplotypes with the Central Asian ethnic groups and Mongols. Comparisons with modern Paleoasian populations (Chukcha, Itelmen, Koryaks) revealed three (8.9%) haplotypes common for Yakuts and Koryaks. The results of mtDNA analysis disagree with the hypothesis of an appreciable Paleoasian contribution to the modern Yakut gene pool. 相似文献
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动物mtDNA控制区及保守与异质 总被引:5,自引:1,他引:5
本文通过文献综述,对动物线粒体DNA控制区进行了阐述.从线粒体控制区(control region)基因组的研究出发,重点介绍了动物线粒体控制区基因组结构特点.主要结论:由于碱基替换、插入和缺失以及重复序列数目的变异致使D-loop成为mtDNA中变异最多的区域,但突变和结构重排并不是发生在整个D-loop区域,而是在高变区;大多研究集中在mtDNA D-loop保守区和异质方面:对D-loop序列分析,能较好地阐明动物的起源,在动物亲缘关系鉴定、系统进化和物种形成方式的研究等领域具有广阔的研究和应用前景. 相似文献
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线粒体DNA和疾病 总被引:5,自引:0,他引:5
蒋秉坤 《生物化学与生物物理进展》1995,22(1):18-22
人线粒体DNA是含有16569 bp的闭环双链分子.它为13种氧化磷酸作用酶的亚单位、结构rRNAs和tRNAs编码.近年来很多引起人类疾病的线粒体DNA突变已被确定,如眼盲、耳聋、心力衰竭和人类退行性疾病等.线粒体DNA疾病可能比先前想象的多. 相似文献
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一个母系遗传非综合征耳聋大家系mtDNA序列分析 总被引:3,自引:4,他引:3
通过分析本家mtDNA序列,探讨淮阴一非综合耳聋大家患病的分子遗传学机制。采用聚合酶链反应(PCR)扩增mtDNA与非综合征耳聋相关位点nt1555,nt7445的区域和人类种群研究的D-loop区,PCR-异源双链分析,PCR-RFLP、PCR产物克隆序列测定等技术对该家系进行了系统的研究。发现该家系中全部母系亲属有mtDNAA1555G突变,而家系中非母 个体,对照组(100例正常个体)的mtDNA1555位点均为A。该家系mtDNA7445位点无突变;该系属于Ⅱ型线性体;发现家系D-loop区存在未见报道的碱基插入。提示mtDNAA1555G位点突变可能是导致该家系患致聋的主要因素之一。遗传背景可能对家系疾病的表现存在一定程度的影响。 相似文献
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动物线粒体DNA作为遗传标记广泛用于从种内到高级阶元的许多生物学领域,这些应用是建立在线粒体DNA的严格母系遗传方式和不发生重组的基础上的。近年来的研究提出了一些能够证明动物mtDNA发生重组的直接和间接证据。动物mtDNA重组可能主要通过两条途径发生,一条途径是母系mtDNA与核基因组中mtDNA假基因间发生重组;另一条途径是通过父系渗漏引起的不同单倍型的双亲mtDNA间发生重组。父系渗漏是最可能的途径。如果动物界广泛存在线粒体DNA重组,将会对以mtDNA严格母系遗传为基础的许多应用领域产生重要影响。 相似文献
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水稻线粒体DNA的提取与分析 总被引:8,自引:0,他引:8
为了研究水稻细胞质雄性不育的分子基础,我们比较了各种提取线粒体DNA(mtDNA)的方法,并提出了一些改进措施。以丛广41A、丛广41B和杂种一代广优青为材料,对所提取的材料mtD-NA进行了紫外扫描、OD值测定、电泳、酶切等分析,结果表明,以新鲜材料进行不连续蔗糖密度梯度超速离心对提取高纯度的线粒体DNA效果较好。 相似文献