刺五加多糖提取过程中不同脱蛋白方法的比较研究

研究比较了Sevag法、三氯乙酸法(TCA)-Sevag法、壳聚糖絮凝法和酶法四种方法对刺五加多糖的脱蛋白效果.结果表明:Sevag法、三氯乙酸法(TCA)-Sevag法、壳聚糖絮凝法和酶法的蛋白脱除率分别为28%、83%、93.1%、93.1%;多糖损失率分别为18%、43%、47%、7%.比较这四种脱蛋白方法,酶法具有良好的脱蛋白效果.     

贵州野生甜藤多糖的提取与脱蛋白方法研究

以贵州野生甜藤干粉为原料,通过单因素试验,再通过正交试验优化甜藤多糖提取工艺,并采用Sevag法、TCA法、Sevag-TCA法、HCl O4法进行脱蛋白方法研究。结果表明,甜藤多糖最优提取工艺为:以水为溶剂,料液比1∶50,超声功率70 W,水浴温度70℃,超声提取时间110 min,提取2次;HCl O4法脱蛋白效果最佳,经3次脱蛋白处理后蛋白脱出率为94.78%,多糖损失率为15.14%,该法用于脱除甜藤植物多糖中的蛋白质,工艺简单,成本低,具有一定应用价值。     

三角帆蚌多糖的微波辅助提取及脱蛋白工艺

运用微波辅助处理、热水浸提、乙醇沉淀、Sevag法脱蛋白的方法提取制备三角帆蚌多糖。在单因素实验基础上,运用正交实验对三角帆蚌多糖微波辅助提取及Sevag法脱蛋白的工艺参数进行优化。结果显示:三角帆蚌多糖微波辅助提取的最优条件为:水料比15 mL/g、提取温度50℃、微波处理时间150 s、微波功率1080 W。在此条件下,多糖的提取得率为4.06%。三角帆蚌多糖Sevag法脱蛋白的最优参数组合为:正丁醇与氯仿体积比0.20、正丁醇-氯仿混合液用量占多糖溶液的体积百分比20%、脱蛋白振摇时间10 min、脱蛋白次数8次。在此条件下,多糖的蛋白去除率、多糖保留率分别是52.24%和65.13%。     

野生树舌多糖的脱色和脱蛋白

从野生树舌中提取水溶性多糖,经乙醇沉淀后得多糖,并分别用活性碳,苯酚,DEAE纤维素,H2O2等4种方法进行脱色,并以酵母聚糖为标准品比较脱色效果,用紫外和可见光谱扫描法检测有色杂质的去除效果;用Zn盐,胰蛋白酶,有机溶剂,胰蛋白酶加有机溶剂等4种方法脱蛋白,以比较不同方法脱色,脱蛋白的效果。结果表明用质量分数为0.75%的活性碳脱色后,有色杂质的去除效果最好,光谱吸收峰最接近标准品;单独使用有机溶剂的脱蛋白效果最好。     

酶法脱蛋白提取大枣多糖工艺的研究

讨论了从提取环磷酸腺苷后的枣汁中提取枣多糖的最佳工艺条件,包括枣汁浓缩4倍,加无水乙醇调枣汁中乙醇体积分数为60%,醇沉5 h;木瓜蛋白酶脱蛋白效果最佳,木瓜蛋白酶液与枣汁的体积比为0.4∶ 1,温度60℃、pH5.0,酶解90 min,蛋白脱除率可达91.8%;AB-8树脂脱色,脱色率为73.64%,多糖得率为94.4%.红外光谱显示,提取的多糖与常规方法提取的多糖成分相同.     

仙人掌多糖清除活性氧作用初探

从仙人掌中提取并纯化多糖,采用分光光度法在多种体系中研究了仙人掌多糖清除活性氧的作用,并用琼脂糖凝胶电泳法观察了该多糖对·OH导致DNA链损伤的抑制作用。结果表明,仙人掌多糖能够有效地清除O 2和·OH等活性氧,对·OH导致的DNA损伤具有良好的保护效果。     

塔拉种子多糖脱蛋白的正交优化及其抗氧化性研究

以塔拉（Caesalpinia spinosa）种子为原料,研究了塔拉种子多糖的脱蛋白工艺及塔拉多糖的抗氧化性质。以多糖损失率和蛋白脱除率为评价指标,比较Sevage法、三氯乙酸法和木瓜蛋白酶法对塔拉多糖的脱蛋白效果。利用正交优化组合实验设计原理,采用四因素三水平的正交分析法,对木瓜蛋白酶法脱蛋白进行正交优化。结果表明：塔拉多糖最佳脱蛋白工艺条件为酶添加量0.15mL、酶解时间90min、酶解温度60℃、酶解pH=6,蛋白脱除率95.19%,多糖保留率75.02%。通过对塔拉多糖抗氧化性的研究,发现塔拉多糖总抗氧化性较好,对DPPH自由基有较强的清除作用。     

复合酶解法提取香菇多糖蛋白的研究

存在于香菇中的多糖物质,具有增强人体非特异性免疫功能的作用。本文报道采用复合酶解和热水浸提法分离纯化香菇中多糖蛋白的综合程序。与单纯热水浸提法等其它方法相比,本法能显著提高香菇有效成分的浸提效果,总氨基酸与必需氨基酸百分比含量均提高２倍以上,香菇多糖含量提高了４倍,一些特殊成分及较高分子量的葡聚糖物质含量也明显提高。     

超声波及脱蛋白处理对猴头菌子实体多糖提取效果的影响

本研究以猴头菌子实体为供试材料,在采用水提醇沉法进行多糖提取的过程中,系统研究了超声波和脱蛋白处理两个关键工艺环节对多糖提取效果的影响。研究结果表明：采用超声波辅助处理可提高猴头菌多糖提取率,降低多糖的纯度,使部分由蒸馏水洗脱获得的HEFP-α组分与全部0.1mol/L NaCl洗脱获得的HEFP-β组分经Sephacryl-S400洗脱后的曲线的小峰面积增加,也使主峰处的吸光值出现偏移。3种脱蛋白方法中,复合法对蛋白的除去效率最高,但多糖的保留率最低;亚铁氰化钾-乙酸锌法操作简便且蛋白除去率与多糖保留率均较高,但会使HEFP-β-2组分的含量和回收率降低;Sevage法蛋白脱除效率最低,多糖组分的保留率相对较高,且柱洗脱后发现经Sephacryl-S400凝胶柱分离后获得的主峰整体峰值较高,该方法较为适合多糖活性组分未知时的蛋白脱除。这一研究结果将会为该类大型真菌子实体的大分子生物活性物质的提取以及相关产品的开发提供重要的参考依据。     

百尾参多糖脱色脱蛋白工艺及其免疫活性研究

以百尾参多糖脱色率、多糖损失率为指标,通过单因素和正交试验研究活性炭含量、时间、温度和pH对多糖脱色效果的影响,优化百尾参多糖最佳脱色条件;对Sevage法、三氯乙酸（TCA）法、蛋白质等电点法以及酶法4种脱蛋白方法进行比较,选择较好的脱蛋白方法。建立环磷酰胺免疫低下小鼠模型,研究百尾参多糖的免疫调节活性。结果表明活性炭脱色的最佳条件是活性炭加入量1%、温度60 ℃,时间45 min、pH 4.5;酶法为4种方法中较好的脱蛋白方法。百尾参多糖能加速恢复环磷酰胺致小鼠免疫器官萎缩,也能剂量依赖性地提高小鼠血清中的白介素-2（IL-2）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）等细胞因子含量,表明百尾参多糖对环磷酰胺的免疫抑制具有保护作用。     

花椒籽黑色素提取和脱蛋白技术研究

采用二次回归正交旋转组合试验优化了花椒籽黑色素的浸提工艺,并用蛋白酶酶解-Sevag法联用脱除花椒籽黑色素中的蛋白.结果表明:影响花椒籽黑色素提取效果的因素依次为温度>NaOH浓度>料液比,花椒籽黑色素提取的优化工艺参数为NaOH浓度为1.20 mol/L,料液比为1∶24.64,温度为70℃下提取2 h,共2次,所得花椒籽色素粗品为棕黑色无定型粉末,得率为6.1%,色价为201.62,蛋白质含量为44.83%~48.63%.碱性蛋白酶脱蛋白条件为温度50℃,pH 9,加酶量为粗色素溶液(浓度为1 mg/mL)体积的6%,再用Sevag法处理3次,蛋白质脱除率可达81.23%,花椒籽黑色素色价可提高1.5倍.     

海金沙草多糖分离纯化及空间结构初步研究

为了获得纯化多糖并对其空间结构进行研究,用煎煮法从海金沙草中提取水溶性粗多糖,考察了Savage法、TCA法、单宁法等方法对提取液中蛋白质去除率和多糖回收率的影响,用乙醇沉淀法获得精制多糖,紫外光谱扫描分析多糖纯度,刚果红结合实验分析多糖空间构象.结果表明,以TCA法蛋白质去除率和多糖回收率较高.紫外扫描图谱显示,纯化...     

仙人掌在美容化妆品行业中的应用及开发

简要介绍了仙人掌在美容化妆品行业的应用方向,仙人掌原料的制备工艺以及仙人掌化妆品的设计理念,以期为仙人掌在美容化妆品领域的应用开发提供一些建议.     

猪苓及猪苓多糖对BBN联合糖精作用Fisher-344大鼠肝脏代谢酶的影响

以BBN联合糖精作用Fisher-344大鼠,分别使用ELISA及RT-PCR方法测定样本中CYP450、GST和NQO1酶活性及Gstpi和NQO1 mRNA相对表达含量。结果表明,猪苓及猪苓多糖均可使样本中CYP450酶活性显著降低,其中猪苓对CYP450酶活性抑制呈剂量依赖性;猪苓及猪苓多糖对样本中GST无明显影响,猪苓可显著升高样本中NQO1酶活性;猪苓高剂量及猪苓多糖可上调GSTPi mRNA表达,猪苓及猪苓多糖对NQO1 mRNA表达无明显作用。研究表明猪苓及猪苓多糖抗癌作用与降低CYP450与升高NQO1酶活性有关,但机制有待进一步研究。     

微波协同酶法提取平菇柄多糖的工艺研究

为优化微波协同酶法提取平菇柄多糖的工艺条件,在单因素试验的基础上,选择提取时间、微波功率以及液料比为自变量,多糖得率为响应值,采用中心组合设计的方法,研究各自变量及其交互作用对多糖得率的影响。利用响应面分析方法,模拟得到二次多项式回归方程的预测模型,并确定平菇柄多糖提取工艺的最佳条件为:微波功率420 W,提取时间8 min,液料比55:1,在此条件下,最大得率达到6.05%。     

野生仙人掌多糖对肺鳞癌细胞SK-MES-1 生长的抑制作用

目的:探讨仙人掌多糖对体外肺鳞癌细胞(SK-MES-1)生长抑制作用。方法:体外培养SK-MES-1细胞,四甲基偶氮唑盐(MTT)法观察野生仙人掌多糖对其生长的抑制,计算最低抑制浓度及抑制率;观察不同浓度多糖对细胞形态的影响;SDS-PAGE凝胶电泳简析不同组别蛋白质表达的差异。结果:野生仙人掌多糖24 h和48 h对肿瘤细胞的最低抑制浓度和抑制率分别为0.0625 mg/ml.34.06%和0.0625 mg/ml 35.37%;不同组间蛋白质表达有差异。结论:野生仙人掌多糖对SK-MES-1肺鳞癌细胞有抑制作用。     

Functional Analyses of Resurrected and Contemporary Enzymes Illuminate an Evolutionary Path for the Emergence of Exolysis in Polysaccharide Lyase Family 2

Family 2 polysaccharide lyases (PL2s) preferentially catalyze the β-elimination of homogalacturonan using transition metals as catalytic cofactors. PL2 is divided into two subfamilies that have been generally associated with secretion, Mg²⁺ dependence, and endolysis (subfamily 1) and with intracellular localization, Mn²⁺ dependence, and exolysis (subfamily 2). When present within a genome, PL2 genes are typically found as tandem copies, which suggests that they provide complementary activities at different stages along a catabolic cascade. This relationship most likely evolved by gene duplication and functional divergence (i.e. neofunctionalization). Although the molecular basis of subfamily 1 endolytic activity is understood, the adaptations within the active site of subfamily 2 enzymes that contribute to exolysis have not been determined. In order to investigate this relationship, we have conducted a comparative enzymatic analysis of enzymes dispersed within the PL2 phylogenetic tree and elucidated the structure of VvPL2 from Vibrio vulnificus YJ016, which represents a transitional member between subfamiles 1 and 2. In addition, we have used ancestral sequence reconstruction to functionally investigate the segregated evolutionary history of PL2 progenitor enzymes and illuminate the molecular evolution of exolysis. This study highlights that ancestral sequence reconstruction in combination with the comparative analysis of contemporary and resurrected enzymes holds promise for elucidating the origins and activities of other carbohydrate active enzyme families and the biological significance of cryptic metabolic pathways, such as pectinolysis within the zoonotic marine pathogen V. vulnificus.     

酶法提取桑葚多糖的工艺研究

利用纤维素酶从桑葚中提取桑葚多糖,通过单因素实验和L9(34)正交实验研究酶用量、酶解时间、酶解温度对桑葚多糖提取率的影响。实验结果表明:纤维素酶能够显著提高桑椹多糖的提取率,并且提取温度是最重要的影响因素,其次是酶解时间,酶用量在此实验范围内对测定结果的影响最小,提取的最佳工艺条件为:酶解温度45℃,酶解时间150 min,酶用量4.0 mL。