大肠杆菌表达重组人生长激素的纯化

目的 :获得具有生物学活性的重组人生长激素 (rhGH)。方法 :PBV -GH/DH5α菌体经超声破菌、反复洗涤后获得包涵体。将包涵体变性、复性 ,用硫酸铵盐析 ,离子交换层析和凝胶层析进行纯化。产物经SDS -PAGE、HPLC、N末端 15个氨基酸序列检测验证。结果 :终产物rhGH纯度达 98.2 % ,比活性大于 3.0IU/mg。分子量为 2 2kDa ,N末端氨基酸序列与DNA序列推导的氨基酸序列完全一致。结论 :从自构建的PBV -GH/DH5α工程菌中获得高纯度、高活性重组人生长激素。其纯化工艺为中试生产提供可靠依据。     

三硝基苯磺酸法测定聚乙二醇化重组人生长激素的平均修饰度

目的：建立测定三种不同结构聚乙二醇化重组人生长激素（PEG-rhGH）平均修饰度的三硝基苯磺酸法（TNBS）。方法：采用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱（MALDI-TOF）测定PEG-rhGH的分子量,求得理论平均修饰度。既而通过正交试验、游离PEG干扰等方法学考察,建立TNBS法。结果：从质谱法可知PEG-rhGH的理论修饰度为10%,TNBS法测得三种PEG-rhGH的修饰度分别为为10%、12%及10%,与理论值相符。结论：TNBS操作简单,不需要专门的仪器,可作为测定PEG-rhGH平均修饰度的方法。     

三硝基苯磺酸法测定聚乙二醇化重组人生长激素的平均修饰度

目的:建立测定三种不同结构聚乙二醇化重组人生长激素(PEG-rhGH)平均修饰度的三硝基苯磺酸法(TNBS)。方法:采用基质辅助激光解吸附飞行时间质谱(MALDI-TOF)测定PEG-rhGH的分子量,求得理论平均修饰度。既而通过正交试验、游离PEG干扰等方法学考察,建立TNBS法。结果:从质谱法可知PEG-rhGH的理论修饰度为10%,TNBS法测得三种PEG-rhGH的修饰度分别为为10%、12%及10%,与理论值相符。结论:TNBS操作简单,不需要专门的仪器,可作为测定PEG-rhGH平均修饰度的方法。     

重组人类生长激素对胃癌细胞的体外增殖研究

目的：通过体外实验,研究重组人类生长激素对胃癌细胞的增殖的影响。方法：实验分为空白组,重组人类生长激素组,奥沙利铂组和重组人类生长激素＋奥沙利铂组。用不同浓度的重组人类生长激素处理SGC．7901细胞,采用MTT法和流式细胞仪检测人胃癌细胞株的细胞抑制率,细胞周期和DNA抑制率。结果：体外实验结果表明,重组人类生长激素对SGC．7901细胞株增殖没有明显的促进作用,重组人类生长激素组和空白组以及重组人类生长激素＋奥沙利铂组和奥沙利铂组之间没有统计显著性（P〉0．05）,细胞抑制率和停止生长的细胞在G0-G1期明显增加（P〈0．01）,同时重组人类生长激素＋奥沙利铂组和空白组以及奥沙利铂组在S期,细胞数依次下降,DNA抑制率依次增加。重组人类生长激素＋奥沙利铂组与奥沙利铂组相比,细胞抑制率有明显上升趋势。结论：体外实验表明,重组人类生长激素并不加快人类胃癌细胞的增殖,与抗癌药物一同使用时,有增加治疗功效的作用。     

重组人类生长激素对胃癌细胞的体外增殖研究

目的:通过体外实验,研究重组人类生长激素对胃癌细胞的增殖的影响。方法:实验分为空白组,重组人类生长激素组,奥沙利铂组和重组人类生长激素+奥沙利铂组。用不同浓度的重组人类生长激素处理SGC-7901细胞,采用MTT法和流式细胞仪检测人胃癌细胞株的细胞抑制率,细胞周期和DNA抑制率。结果:体外实验结果表明,重组人类生长激素对SGC-7901细胞株增殖没有明显的促进作用,重组人类生长激素组和空白组以及重组人类生长激素+奥沙利铂组和奥沙利铂组之间没有统计显著性(P>0.05),细胞抑制率和停止生长的细胞在G0-G1期明显增加(P<0.01),同时重组人类生长激素+奥沙利铂组和空白组以及奥沙利铂组在S期,细胞数依次下降,DNA抑制率依次增加。重组人类生长激素+奥沙利铂组与奥沙利铂组相比,细胞抑制率有明显上升趋势。结论:体外实验表明,重组人类生长激素并不加快人类胃癌细胞的增殖,与抗癌药物一同使用时,有增加治疗功效的作用。     

小剂量美托洛尔治疗扩张型心肌病充血性心力衰竭疗效评价

目的　评价小剂量美托洛尔治疗扩张型心肌病心力衰竭的临床疗效和安全性。　方法　将扩张型心肌病心力衰竭 4 0例 ,随机分为治疗组和对照组 ,对照组仅予常规治疗 ,治疗组在常规治疗的基础上加用美托洛尔 ;用超声心动图测定治疗前后左室射血分数 ( LVEF)和左室舒张末内径 ( LVDd) ,取治疗4周后的临床资料进行评价。　结果　治疗组总有效率 81 .8% ,明显高于对照组的 5 5 .6 % (χ2 =4 .71 ,P<0 .0 5 ) ,无严重不良反应 ,心功能、 LVEF、 LVDd治疗前后比较 ,治疗组优于对照组 ,治疗组具有显著或非常显著性差异 ( P <0 .0 5或 P <0 .0 1 )。　结论　小剂量美托洛尔能明显改善扩张型心肌病心力衰竭病人的心脏功能 ,安全有效。     

Heat-Induced Production of Human Growth Hormone by High Cell Density Cultivation of Recombinant Escherichia Coli

The temperature-induced, over-expression of the human growth hormone gene in a recombinant E. coli during high cell density cultivation is reported. Human growth hormone (hGH) production and stability were tested under different heat shock conditions. Cell densities were 25 and 60 g l(-1) in a pH-stat fed-batch mode in defined and complex medium, respectively, and the fermentation time was decreased from 41 to 32 h. hGH was produced at 2 g l(-1) in complex medium. By using glycerol as main carbon source in the complex medium with exponential feeding, cell density and hGH production were increased to 100 g l(-1) and 2.7 g l(-1), respectively.     

重组人脑利钠肽治疗慢性充血性心衰的临床疗效观察

目的:观察重组人脑利钠肽(rhBNP)治疗慢性充血性心力衰竭的临床治疗效果及安全性.方法:选取147例慢性充血性心衰患者,随机分为rhBNP治疗组(n=78)和硝普钠(SN)治疗组(n=69),观察治疗后2周两组的临床治疗效果,并检测治疗前后的心、肾功能及血清BNP水平的变化.结果:治疗后2周,rhBNP治疗组显效率(80.77％)及总有效率(94.87％)均高于SN治疗组(分别65.22％和86.96％;P＜0.05),差异有统计学意义;rhBNP组的左心室射血分数(LVEF)与治疗前相比显著升高(P＜0.05),与SN组相比有显著性差异(P＜0.05);而rhBNP组血清BNP水平较治疗前显著降低(P＜0.05),且较SN组比有显著性降低(P＜0.05).结论:rhBNP可以安全、有效地用于慢性充血性心衰患者的治疗,疗效优于硝普钠.     

重组人生长激素治疗特发性矮小患儿的疗效及生长速率预测模型的建立

摘要 目的：探讨重组人生长激素（rhGH）对特发性矮小（ISS）患儿的治疗效果,并建立rhGH治疗后生长速率（GV）的预测模型。方法：回顾性分析确诊为 ISS并应用rhGH治疗1年的130例患儿的疗效,以治疗12个月后的GV为因变量,采用多元逐步回归方法建立ISS患儿疗效的预测模型。结果：rhGH治疗6个月、12个月的身高、身高标准差分值（HtSDS）均逐渐升高（P<0.05）,治疗12个月的身高增长（△Ht）、GV 低于治疗 6个月（P<0.05）。治疗6个月、治疗12个月的GV 均与初始治疗时的生活年龄（CA）、骨龄（BA）、身高、体重及垂体高度呈负相关（P<0.05）。将治疗12个月GV 作为因变量,治疗前初始身高（X1）、治疗6个月GV（X2）被纳入方程建立预测模型：Y=7.631-0.035X1+0.567X2,R²=0.791,并通过内外部验证。结论：rhGH治疗对ISS患儿的身高增长具有良好效果,前6个月的效果更好。rhGH治疗后ISS患儿的GV与治疗前CA、BA、身高、体重及垂体高度呈负相关。治疗前的身高、治疗6个月的GV能够较好地预测治疗12个月的GV。     

人重组卵泡刺激素和表皮生长因子对性未成熟小鼠卵母细胞和颗粒细胞复合体体外发育的作用(英文)

卵泡刺激素(FSH)对有腔卵泡和排卵前卵泡的促生长作用已被普遍接受,但关于其对腔前卵泡发育的作用报道结果不尽相同。关于表皮生长因子(EGF)对腔前卵泡的作用尚不确切。本研究目的在于探讨人重组卵泡刺激素(rechFSH)和EGF对早期卵泡发育的作用。利用胶原酶消化法从12日龄的小鼠卵巢中分离得到卵母细胞-颗粒细胞复合体(OGCs)(Fig.1)。体外每孔30~40个培养物并分别添加胎牛血清(FBS)、rechFSH和EGF。培养物每4天测量卵母细胞和OGCs直径,并每天照相。结果显示rechFSH显著促进小鼠OGCs及其卵母细胞的体外发育,这一作用可被EGF进一步增强(p<0.05)(Fig.2)。但到第八天培养结束时,培养后的OGCs卵母细胞要显著小于体内同期生长对照组(p<0.05)(Fig.3)。说明FSH和EGF在卵泡早期发育中起重要作用。     

重度烧伤患者应用重组人生长激素治疗的临床效果

目的:研究重组人生长激素对重度烧伤的应用治疗效果。方法:选取重度烧伤患者42例。根据随机数表法,将所有患者分为观察组(n=21)和对照组(n=21),观察组在对照组的基础上给予重组人生长激素治疗。结果:对照组术后24 h血红蛋白及总蛋白水平均低于实验组,差异无统计学意义(P0.05);对照组术后1周血红蛋白水平为(95.57±11.41)g/L,低于实验组的(137.91±14.29)g/L(t=3.726,P0.001);对照组术后2周血红蛋白水平为(80.89±11.38)g/L,低于实验组的(131.28±13.47)g/L(t=3.917,P0.001);实验组术后1周总蛋白水平为(61.47±5.19)g/L,高于对照组的(39.18±2.76)g/L(t=3.927,P0.001);实验组术后2周总蛋白水平为(55.78±6.38)g/L,高于对照组的(36.81±5.17)g/L(t=3.847,P0.001)。实验组术后24h的TNF-α和IL-6高于对照组,差异无统计学意义(P0.05);实验组术后2周的TNF-α、IL-6均明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.001);实验组术后2周的TNF-α、IL-6均明显低于对照组,差异有统计学意义(P0.001);观察组的住院时长为(47.82±7.46)天,显著低于对照组的(79.36±8.10)天(t=4.275,P0.001);观察组的供皮区、植皮区、深Ⅱ度痂下愈合时间均显著低于对照组的,差异有统计学意义(P0.001)。结论:rh GH对重度烧伤的疗效非常显著,值得在临床中推广。     

B-型利尿钠肽在冠心病所致慢性充血性心力衰竭的诊断、治疗和愈后评估中的作用

冠心病的发病率在我国呈逐年上升的趋势,因冠心病心肌供血不足造成心肌损害最终导致心力衰竭。慢性心力衰竭特别是症状不典型的心力衰竭至今仍然是临床诊断上的一个难点,临床医生根据临床症状及体征所作出的诊断往往准确性偏低,应同时根据客观指标加以判断。BNP是近年来国内外研究的热点激素,在CHF的诊断、治疗和预后评估上受到广泛的重视,2003年被美国心脏病学会列为医学十大进展之一。本文就B-型利尿钠肽在冠心病所致慢性充血性心力衰竭的诊断、治疗和愈后评估中的作用作一全面的介绍。     

两种早期心衰大鼠模型的建立和心功能的比较

目的比较两种不同方法建立大鼠心衰模型心功能的特点,寻找大鼠模型早期心衰阶段。方法用冠脉结扎法及腹主动脉结扎法建立不同的心衰模型,用血流动力学及心脏称重的方法比较其心功能的各项指标。结果冠脉结扎组术后2周没有心功能的改变,2周后收缩和舒张功能均下降,4周达最低。腹主动脉结扎组术后14周没有心功能的下降,16周出现了舒张功能的衰竭。结论冠脉结扎法及腹主动脉结扎法均可以造成早期心衰,冠脉结扎法术后2周为早期心衰阶段,2周后同时出现收缩和舒张功能衰竭,腹主动脉结扎法术后14周为早期心衰阶段,14周后出现了舒张功能衰竭。     

新活素与多巴酚丁胺治疗急性心力衰竭的疗效比较及对血浆Gal-3、CysC、ET-1水平的影响

目的:分析和比较新活素(Lrh-BNP)与多巴酚丁胺(Dob)治疗急性心力衰竭(AHF)的临床效果及对其血浆半乳糖凝集素(Gal)-3、胱抑素C(CysC)、内皮素(ET)-1水平的影响。方法:选取我院2015年2月~2017年2月收治的114例AHF患者,采用随机数字表法均分为两组。Dob组给予Dob治疗,Lrh-BNP组予以Lrh-BNP治疗。比较两组治疗前后心功能参数,血浆Gal-3、CysC、ET-1水平,临床综合疗效及不良反应的发生情况。结果:与治疗前相比,两组治疗72h后FS、LVEF值均显著升高(P0.01),LVEDD、血浆Gal-3、CysC、ET-1水平均显著降低(P0.01),且Lrh-BNP组以上指标较对照组改善更显著(P0.01)。治疗72h后,Lrh-BNP组总有效率为89.5%,较Dob组明显上升(73.7%,P0.05)。两组不良反应发生率相比差异无统计学意义(P0.05)。结论:与多巴酚丁胺相比,新活素治疗急性心力衰竭的疗效更好,安全性相当,可能与其有效降低患者血浆Gal-3、CysC、ET-1水平有关。     

重组人生长激素治疗儿童特发性矮小症的疗效及对血清Ghrelin和IGF-1水平的影响

目的:探讨重组人生长激素(rhGH)治疗儿童特发性矮小症(ISS)的疗效及对血清饥饿激素(Ghrelin)、胰岛素样生长因子-1(IGF-1)水平的影响。方法:选取2014年1月-2016年8月期间我院收治的ISS患儿114例为研究对象。按照随机数字表法分为实验组(n=57)与对照组(n=57)。其中对照组给予常规治疗,实验组在对照组基础上联合rhGH治疗,两组疗程均为12个月。比较两组患儿的临床疗效,同时观察并对比两组患儿治疗前后血清Ghrelin以及IGF-1水平。结果:治疗后两组患儿身高、生长速率均较治疗前升高,且实验组高于对照组,差异有统计学意义(P0.05);治疗后两组患儿体重、总甲状腺素、骨龄、空腹血糖水平较治疗前比较差异无统计学意义(P0.05)。治疗后两组患儿血清Ghrelin水平较治疗前降低,且实验组低于对照组,血清IGF-1水平较治疗前升高,且实验组高于对照组,差异均有统计学意义(P0.05)。实验组不良反应发生率为5.26%,与对照组的0.00%比较,差异无统计学意义(P0.05)。结论:ISS患儿应用rhGH治疗效果满意,可明显改善ISS患儿体内血清IGF-1、Ghrelin水平,安全无副作用,促进患儿健康成长。     

人的重组促黄体生成素对小鼠卵母细胞体外受精的影响

目的探讨人的重组促黄体生成素(r-hLH)对性成熟前的小鼠卵母细胞体外受精(invitrofertilization,IVF)后的分裂、以及IVF胚的体外培养(invitroculture,IVC)过程中发育状况的影响.方法选用性成熟前的清洁级昆明小鼠,分别用r-hFSH(人的重组促卵泡素20IU),r-hFSH+r-hLH(各20IU)或20IUr-hLH对其进行超排处理,通过对从各处理组小鼠卵巢中手工器械分离出来的卵丘-卵母细胞复合体(cumulusenclosedoocyte,CEO)进行体外受精之后,进一步观察这些CEO经IVF后的受精分裂状况,以及IVC后的发育情况.结果r-hFSH+r-hLH处理组小鼠卵母细胞IVF率(72.2%)极显著高于r-hFSH单独处理组(39.9%)或r-hLH单独处理组(37.2%)的相应指标;r-hFSH+r-hLH处理组和r-hFSH单独处理组的IVF胚,发育至8～16细胞阶段的比例(8～16细胞率)趋于一致(25.15%∶27.18%),但是都极显著高于r-hLH处理组的8～16细胞率(17.24%);r-hFSH处理组IVF胚发育至16～32细胞阶段的总比例(16～32细胞率∶33.01%),极显著高于r-hFSH+r-hLH处理组及r-hLH单独处理组的指标(1.75%和0).结论在IVF条件下,r-hLH对小鼠卵母细胞的受精有明显的促进作用,同时却对相应IVF胚的进一步发育产生明显的抑制作用.     

The Study of the Metal-Binding Region in Human Growth Hormone Using Immobilized Metal Ion Affinity Gel-Electrophoresis

The zinc(II)-binding affinities of recombinant human growth hormone and two its mutants, 14–33 and 14–95, were studied using Immobilized Metal Ion Affinity Gel-electrophoresis (IMAG). The mutant hormones, composed of polypeptide chain segments of the human and porcine growth hormones, lacked His18, which may be crucial for binding of the intact hormone to the transition metal ions. The mutations did not affect the affinity of human growth hormone to immobilized zinc ions; the structural analysis implied that the human growth hormone contains two IDA–Zn(II) potential sorption sites formed by amino acid residues His21, Asp171, and Glu174 and/or His18 and Glu174.     

The Effectiveness of Thyroid Hormone Replacement Therapy on Heart Failure and Low-Triiodothyronine Syndrome: An Updated Systematic Review and Meta-analysis of Randomized Controlled Trials

ObjectiveThe purpose of this study was to conduct a systematic review and meta-analysis evaluating the role of thyroid hormone therapy in patients with heart failure and low-triiodothyronine syndrome.MethodsThe electronic databases PubMed, Embase, Cochrane Library, China National Knowledge Infrastructure, China Science and Technology Journal Database, Wanfang Database, and China Biology Medicine disc were systematically searched to identify eligible studies published before November 27, 2021. The mean difference was pooled for randomized controlled trials using a random-effects model.ResultsThe meta-analysis showed that thyroid hormone treatment improved the left ventricular ejection fraction (weighted mean difference [WMD] 5.61, 95% confidence interval [CI]: 4.38 to 6.85, I² = 63.12%, P < 0.01). The cardiac output improved with thyroid hormone therapy (WMD 0.65, 95% CI: 0.42 to 0.89, I² = 84.28%, P < 0.01). The early-to-late diastolic transmitral flow velocity in the thyroid hormone group was also improved compared to the control group (WMD 0.29, 95% CI: 0.15 to 0.42, I² = 95.08%, P < 0.01). The left ventricular diastolic dysfunction was decreased with thyroid hormone treatment (WMD ?5.17, 95% CI: ?7.47 to ?2.88, I² = 90.18%, P < 0.01). The brain natriuretic peptide decreased with thyroid hormone treatment (standardized mean difference ?1.49, 95% CI: ?2.15 to ?0.84, I² = 90.18%, P < 0.01). Noradrenaline decreased with thyroid hormone therapy (WMD ?349.86, 95% CI: ?401.05 to ?298.67, I² = 0%, P < 0.01). Free triiodothyronine increased with thyroid hormone treatment (standardized mean difference 2.18, 95% CI: 0.75 to 2.60, I² = 98.20%, P < 0.01).ConclusionThis meta-analysis showed that thyroid hormone replacement therapy was effective in patients with heart failure and low-triiodothyronine syndrome.     

重组人酸性成纤维细胞生长因子改构体发酵的补料-分批策略研究

人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)是一类对来源于中胚层和神经外胚层的多种类型的细胞具有广泛生物学活性的细胞生长因子。研究了乙酸浓度对重组人酸性成纤维细胞生长因子(rhaFGF)改构体表达体系Escherichia coliBL21(DE3)/pET3C-haFGF的生长和表达的影响,探索了几种高密度培养重组大肠杆菌的流加分批发酵技术。通过比较几种不同的补料策略间歇流加、间歇-静态DO平衡、静态溶氧平衡-葡萄糖饥饿法、静态pH,有效的避免了发酵过程中,尤其是诱导表达阶段乙酸的积累。菌体密度OD600nm=22左右,可溶性重组人酸性成纤维细胞生长因子纯化后水平为450mg/L。     

参附注射液联合新活素对老年慢性心力衰竭患者心功能及血清BNP、MMP-9、CypA水平的影响

目的:研究参附注射液联合新活素对老年慢性心力衰竭患者心功能及血清B型利钠肽(Brain natriuretic peptide,BNP)、基质金属蛋白酶-9(matrix metalloprotein-9,MMP-9)、亲环素(cyclophilin,CypA)水平的影响。方法:选择2015年6月至2017年5月在我院进行治疗的慢性心力衰竭患者100例,根据治疗方案不同分为观察组和对照组,对照组给予新活素治疗,观察组以对照组为基础联合参附注射液治疗。治疗后,观察和比较两组的临床疗效、不良反应的发生情况及治疗前后血清BNP、MMP-9、CypA、SCr和BUN水平、LVEF、SV、LVEDD的变化。结果:观察组总有效率显著高于对照组(P0.05),治疗后,观察组血清BNP、MMP-9、CypA、SCr、BUN、LVEDD水平及不良反应发生率均显著低于对照组(P0.05),LVEF、SV均明显高于对照组(P0.05)。结论:参附注射液联合新活素治疗慢性心力衰竭可有效改善患者心功能,降低血清BNP、MMP-9、CypA水平,提高临床疗效,减少不良反应。