脱卤脱亚太酸菌脱氯呼吸链的遗传分析

以携有结合转座子Ｔｎ９１６的ＥｎｔｅｒｏｃｏｃｃｕｓｆａｅｃａｌｉｓＪＨ２－２为供体,脱卤脱亚硫酸菌ＨＳＳ１为受体,在厌氧条件下,通过滤膜杂交,结合转移,将Ｔｎ９１６转并插入到受体菌的染色体上,其转移频率为：１．１＊１０＾－７－３＊１０＾－８。     

芋的组织培养

１植物名称芋（Ｃｏｌｏｃａｓｉａｅｓｃｕｌｅｎｔａ）品种江汉芋（多子芋类型）。２材料类别茎尖及微芽。３培养条件分化培养基：（１）ＭＳ＋６－ＢＡ３．０～５．０ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）＋ＮＡＡ０．５;（２）ＭＳ＋６．ＢＡ１．０～２．０＋ＮＡＡ０．５。诱导生根培养基：（３）ＭＳ＋６－ＢＡ１．０～２．０＋ＮＡＡ０．１。培养基（１）、（２）中另加蔗糖３０ｇ·Ｌ－１,培养基（３）中加蔗糖１０ｇ·Ｌ１,琼脂６～７ｇ·Ｌ－１,ｐＨ５．８～６．０,１２１℃高温高压灭菌１５ｍｉｎ左右。光照度１５５～２０００ｌｘ,光…     

2.5次微分伏安法对生物品中丙二醛的测定

以０．１ｍｏｌ／ＬＮＨ４Ｃｌ溶液为介质,用２．５次微分伏安法测定了丙二醛,线性范围为１．０＊１０＾－６至１．０＊１０＾－３ｍｏｌ／Ｌ,检测限达１．０＊１０＾－７ｍｏｌ／Ｌ。并测定了细胞培养液介质中新生ＳＤ大鼠室肌细胞样品的丙二醛。     

菜心下胚轴原生质体培养和植株再生

以萌发３—４ 天（长约４ ｃｍ ）的菜心（Ｂｒａｓｓｉｃａ ｃａｍｐｅｓｔｒｉｓ ｖａｒ．ｐａｒａｃｈｉｎｅｓｉｓ）无菌苗苍白下胚轴为材料,酶解分离原生质体。经纯化的原生质体,在含０．５ ｍ ｇ／ＬＺＴ、０．５ ｍ ｇ／Ｌ２,４－Ｄ、１．０ ｍ ｇ／ＬＮＡＡ 和０．４ ｍ ｏｌ／Ｌ葡萄糖的Ｋ８ｐ 培养基中,进行微滴培养。在起始培养１４—１８小时,原生质体再生新的细胞壁。３６ 小时再生细胞开始第一次分裂。第三天分裂细胞频率可达３５％ 。培养第８—９ 天,可见含８—１６个细胞的小细胞团,植板率为１５％ —１８％ 。３ 周后将发育成直径为２ ｍ ｍ 的白色小愈伤组织,转到含０．３ ｍ ｇ／Ｌ ２,４－Ｄ并用ｇｅｌｒｉｔｅ半固化的培养基上,增殖成４—５ ｍ ｍ 直径的愈伤组织。在ＭＳ＋ ３．２（或１．６） ｍ ｇ／Ｌ ＢＡ＋ １．６（或０．８） ｍ ｇ／ＬＺＴ＋ ０．０１ ｍ ｇ／Ｌ ＮＡＡ＋ ０．１ ｍ ｇ／ＬＧＡ３ 和０．２％ 蔗糖的分化培养基上,获得芽的分化。切下约２ ｃｍ 长的芽苗,转移到含０．２ ｍ ｇ／ＬＩＡＡ 和２％ 蔗糖的培养基上,生根形成完整植株     

凤眼莲根分泌物氨基酸组分对根际肠杆菌属F_2细菌的趋化作用

凤眼莲（Ｅｉｃｈｈｏｒｎｉａｃｒａｓｓｉｐｅｓ）的根分泌物中含有Ｍｅｔ等多种氨基酸,其中Ｍｅｔ、ＧＡＢＡ、Ｇｌｙ、Ａｌａ、Ａｓｐ、Ｓｅｒ、Ｖａｌ和Ｌｅｕ（１０－７～１０－２ｍｏｌ·Ｌ－１）均对凤眼莲的根际肠杆菌属Ｆ２（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｓｐ．Ｆ２）细菌有强烈的正趋化作用;Ｇｌｕ、Ｔｈｒ和Ｈｉｓ（１０－７～１０－３ｍｏｌ·Ｌ－１）也对该菌有一定的正趋化作用;而Ｌｙｓ、Ｃｙｓ、Ａｒｇ、Ｔｙｒ、Ｐｒｏ、Ａｓｎ、Ｇｌｎ、Ｉｌｅ、Ｐｈｅ和Ｔｙｐ则对该菌表现出一定的负趋化作用．对细菌的正趋化作用存在一个趋化物的最适浓度范围．具有正趋化作用的氨基酸在凤眼莲根际的浓度都较高,而具有负趋化作用的浓度则较低,这正是凤眼莲与该根际细菌结合为根际微生态系统的原因之一．     

桐粮间作林带的配置方式与农作物产量关系的研究

以桐粮间作为例,研究了林带的不同配置结构、林带冠覆盖率及小麦产量之间的关系。结果表明,林带距（Ｘｄ）、小麦相对产量（Ｙ）及间作年（Ａ）之间的关系为：Ｙ＝９０．３２９０－１．９９８２Ａ＋１．１９２４Ｘｄ－０．３３４９Ａ＾２＋０．２９１０ＡＸｄ－０．００３２ＡＸｄ＾２;林带冠覆盖率（Ｘｃ）与小麦相对产量（Ｙ）之间的关系为：Ｙ＝－０．０４６Ｘｃ＾２＋１．１５３９Ｘｃ＋９８．１７３（Ｘｃ≤２８％）,Ｙ＝ｅ     

凤眼莲根分泌物氨基酸对根际肠杆菌属F2细菌降酚的影响

研究２种有代表性的凤眼莲（Ｅｉｃｈｈｏｒｎｉａｃｒａｓｓｉｐｅｓ）根分泌物Ｍｅｔ、Ｌｙｓ对其根际肠杆菌属Ｆ２细菌（Ｅｎｔｅｒｏｂａｃｔｅｒｓｐ．Ｆ２）降酚的影响．结果表明,具有正趋化作用的Ｍｅｔ的不同浓度对细菌的生长动态、细菌降酚酶活性、细菌降酚效率基本没有影响;而具有负趋化作用的Ｌｙｓ在高浓度（１０－２、１０－３ｍｏｌ·Ｌ－１）下延滞细菌的生长,抑制细菌的降酚酶活性,随着Ｌｙｓ浓度的降低各种抑制作用相应减弱,凤眼莲根分泌物氨基酸作为根际微生态系统的信息流,影响着该系统的降酚功能     

杜氏盐藻细胞质膜氧化还原系统

杜氏盐藻细胞质膜具的氧化ＮＡＤ（Ｐ）Ｈ,还原Ｆｅ（ＣＮ）＾３－６和Ｏ２的氧化还原系统。当Ｆｅ（ＣＮ）＾３－６浓度为０．６ｍｍｏｌ／Ｌ,氧化ＮＡＤＨ的Ｋｍ为９６μｍｏｌ／Ｌ,Ｖｍａｘ为１５９ｎｍｏｌ１０＾－８ｃｅｌｌｓｍｉｎ＾－１,最适ｐＨ为８．５。ＴｒｉｔｏｎＸ－１００可促进ＮＡＤＨ和Ｆｅ（ＣＮ）＾３－６的氧化还原活性。ＮＡＤＨ能促进藻细胞的氧吸收,最适ｐＨ为８．５。在无外源电子供体存在时,细胞质     

高血压大鼠红细胞膜Ca^2＋,Mg^2＋—ATP酶对Ca^2＋反应的变...

本实验观察了正常及高血压大鼠红细胞膜Ｃａ＾２＋,Ｍｇ＾２＋－ＡＴＰ酶对不同浓度Ｃｕ＾２＋Ｍｇ＾２＋的反应。结果表明：（１）在自发性高血压大鼠（ＳＨＲ）,此酶最适反应的Ｃａ＾２＋浓度为１０＾－６ｍｏｌ／Ｌ;ＷＫＹ大鼠为１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ;两肾一环型肾性高血压大鼠（ＲＨＲ）为１０＾－７ｍｏｌｇ／Ｌ,Ｗｉｓｔａｒ大鼠为１０＾－４ｍｏｌ／Ｌ;Ｃａ＾２＋高于以上各相应浓度时该酶活性受到抑制;（２）作为该酶     

细胞内外钙离子浓度对鲎腹神经感光器光适应的影响

用细胞内记录的方法研究了由微弱持续光刺激（６×１０＾６￣９×１０＾６光子／ｃｍ＾２,１０ｓ引起鲎（Ｌｉｍｌｕｓ ｐｏｌｙｐｈｅｍｕｓ）腹神经光器膜电流的变化－－光碰击。结果表明,在生理盐水（１０ｍｍｏｌ／ＬＣａ＾２＋）中光碰击的平均面积为（３９．５±１．７６）ｐＣ,微弱光适应（记录前２．５ｓ加１次光闪,９×１０＾９光子／ｃｍ＾２）使得光碰击的面积下降至（１０．５±２．２９）ｐＣ（ｎ＝４）。在低钙溶     

费氏中华根瘤菌HN01DL在大豆根圈能定殖动态与结瘤研究

以发光酶基因luxAB为标记,在根盒缩影条件下研究了费氏中华根瘤菌HN01DL在大豆根圈的定殖动态、分布范围及其结瘤情况．结果表明,HN01DL在根盒．灭菌土壤和非灭菌土壤缩影中的大豆全根系定殖动态与水平明显不同,前者在第12d时达到最高定殖密度(8．65log cfu·g^-1),而后者的早期定殖数量下降较快,且于第15d时达到最高定殖密度(6．88log cfu·g^-1)．HN01DL在大豆播种5d后在大豆根部的A(0～4cm)区根段上达到最高定殖密度(7．05log cfu·g^-1),然后开始缓慢下降,至第19d时仍维持相对稳定,在第33d时又开始回升．至播种后第46d时HN01DL可散布至种子下方16cm处的根段部位．HN01DL在A区根段的定殖密度持续较高,所形成的发光根瘤总数(16．3个)及发光比例(68．8％)最高,且发光根瘤主要集中于该区段主根上．发光根瘤比例沿A-E区段逐渐下降,在E区段未检测到发光根瘤．     

费氏中华根瘤菌HN01DL在大豆根圈的定殖动态与结瘤研究

以发光酶基因luxAB为标记,在根盒缩影条件下研究了费氏中华根瘤菌HN01DL在大豆根圈的定殖动态、分布范围及其结瘤情况.结果表明,HN01DL在根盒灭菌土壤和非灭菌土壤缩影中的大豆全根系定殖动态与水平明显不同,前者在第12d时达到最高定殖密度(8.65logcfu·g^-1),而后者的早期定殖数量下降较快,且于第15d时达到最高定殖密度(6.88logcfu·g^-1).HN01DL在大豆播种5d后在大豆根部的A(0～4cm)区根段上达到最高定殖密度(7.05logcfu·g^-1),然后开始缓慢下降,至第19d时仍维持相对稳定,在第33d时又开始回升.至播种后第46d时HN01DL可散布至种子下方16cm处的根段部位.HN01DL在A区根段的定殖密度持续较高,所形成的发光根瘤总数(16.3个)及发光比例(68.8%)最高,且发光根瘤主要集中于该区段主根上.发光根瘤比例沿A-E区段逐渐下降,在E区段未检测到发光根瘤.     

硅酸盐细菌NBT菌株在小麦根际定殖的初步研究

对硅酸盐细菌NBT菌株进行了耐药性标记,得到稳定的链霉素抗性标记菌NBT菌株,采用选择性培养基分离计数,通过琼脂平板和盆栽试验,研究了标记菌NBT在小麦根际的定殖动态及影响因素。结果表明,在灭菌土盆栽中,播种后9d左右NBT菌株在小麦根际的定殖水平达最高(1．4×10^8cfu·g^-1根土),播种后54d左右趋向稳定,NBT菌株细胞数量为2．4×10^3cfu·g^-1根土;未灭菌土盆栽中,播种后9d左右NBT菌株的定殖水平达最高(3．8×10^8cfu·g^-1根土),60d左右趋向稳定,菌数为3．1×10^3cfu·g^-1根土,牛物和非牛物因素对NBT菌株定殖小麦根系有影响。     

利用发光酶基因标记技术跟踪棉花根圈中的绿针假单胞菌PL9L

采用细菌转化和杂交的方法,成功地将全套发光酶基因标记系统Tn7luxCDABE引入绿针假单胞菌(Pseudomonas chlororaphis)PL9,得到稳定的发光标记菌PL9L。采用发光菌落平板计数法和X射线胶片自显影法,通过盆栽试验和盒裁试验,研究了发光标记菌PL9L在棉花根圈的定殖动态和分布规律。盆栽试验结果表明,在灭菌土盆栽中,播种后6d左右PL9L在棉花根圈的定殖水平达最高(31×109cfu/g根土),播种后56d左右趋向稳定,PL9L数量为17×102cfu/g根土;未灭菌土盆载中,播种后8d左右PL9L的定殖水平达最高(11×109cfu/g根土),46d左右趋向稳定,菌数为14×102cfu/g根土。盒栽试验结果表明,PL9L可从种子向根尖方向扩散,但并不与根的伸长生长同步,播种后36d,灭菌土盒栽中PL9L可扩散至种子下方120cm以内,而未灭菌土盒栽中PL9L扩散至110cm以内。在棉花根尖区域均未检测到PL9L。     

小麦土霉素抗性内生细菌分离、鉴定及分布

研究通过培养的方法研究了小麦根际土壤、根、茎、叶各部位的土霉素抗性内生菌数量、种类和分布特征.结果表明,小麦内生菌数目在1×104cfu g-1～1.95×106 cfu g-1 之间,土霉素抗性内生菌数目介于6.9×103cfu g-1和5.67×105 cfu g-1,从中分离出22株土霉素抗性内生菌,包括15株G+和7株G-,经16s rRNA基因序列分析,它们与Bacillaceae,Alphaproteobacteria 和Gammaproteobacteria 三大类微生物聚在一起,其中Bacillaceae类细菌最多,占59.1%.土霉素抗性的Bacillus licheniformis在小麦根际土壤、根、茎等器官中都分离得到表明该抗性菌种在小麦内生系统中具有较高的传播性;具有土霉素抗性的人类机会致病菌Bacillus cereus和Stenotrophomonas属的细菌在小麦的根际土壤、根以及叶子中也均分离到,但是在小麦种子中没有分离到任何土霉素抗性的内生菌.     

恶臭假单胞细菌与紫花苜蓿在泥炭培养体中结合定殖研究

在植物根系定殖外源微生物是促进植物健康生长和污染土壤修复的重要方法,而植物根部存在适宜的生长空间是外源微生物定殖的关键。利用泥炭是植物和微生物优良的培养基质的特点,将泥炭作为外源微生物和植物根部的结合体,研究在播种时期接种和露根时期接种条件下,恶臭假单胞细菌(AB-92019)在泥炭与苜蓿根系构成的定殖环境中的定殖动态和定殖密度。结果表明:2种定殖时期在泥炭体的定殖效果有明显不同,露根时期接种后第20 d的定殖密度为6.10 logcfu/g干泥炭;播种时期接种定殖密度下降较快,第20 d的定殖密度为5.62 logcfu/g干泥炭。而在苜蓿根系20 d后的定殖密度,播种时期接种(3.90 logcfu/g鲜根)高于露根时期接种(3.03 logcfu/g鲜根)。并且2种时期定殖都不影响苜蓿正常的生长。     

Nisin and ALTATM 2341 inhibit the growth of Listeria monocytogenes on smoked salmon packaged under vacuum or 100% CO2

The effects of nisin and ALTA 2341 on the growth of Listeria monocytogenes were assessed on smoked salmon packaged under vacuum or 100% CO2. Smoked salmon slices (pH 6.3) were inoculated with a cocktail of seven L. monocytogenes isolates at a level of approximately 2.5 log10 colony forming units (cfu) g-1. After inoculation, the surface of the smoked salmon slices was treated with either nisin (400 or 1250 IU g-1) or ALTA 2341 (0.1 or 1%). The smoked salmon was packaged and stored at 4 degrees C (28 d) or 10 degrees C (9 d). On untreated vacuum-packaged smoked salmon, L. monocytogenes grew by 3.8 log10 cfu g-1 at 4 degrees C and 5.1 log10 cfu g-1 at 10 degrees C. Growth was reduced on nisin- and ALTA 2341-treated vacuum-packaged smoked salmon. On the nisin-treated samples, L. monocytogenes increased by 2.5 (400 IU g-1) and 1.5 (1250 IU g-1) log10 cfu g-1 at 4 degrees C, and by 4.3 (400 IU g-1) and 2.7 (1250 IU g-1) log10 cfu g-1 at 10 degrees C. With the ALTA 2341-treated samples, L. monocytogenes increased by 2.8 (0.1%) or 1.6 (1.0%) log10 cfu g-1 at 4 degrees C, and 3.3 (0.1%) or 3.6 (1.0%) log10 cfu g-1 at 10 degrees C. The growth of L. monocytogenes was retarded by packaging the smoked salmon in 100% CO2. On untreated smoked salmon, only a 0.8 log10 cycle increase was observed at 10 degrees C. Under all the other conditions tested with 100% CO2, L. monocytogenes was detected but growth was prevented.     

LuxAB标记的N2106-L在小麦根圈的定植动态

目的研究小麦PGPR（植物根际促生菌）菌株的个体生态学及其在小麦根圈的定植动态。方法采用三亲本杂交法将发光酶基因luxAB转人具有固氮能力的小麦根际促生菌Azotobacter N2106菌株中,获得标记菌株N2106-L,将标记菌株接种到灭菌和非灭菌的黄褐土、红壤和黄潮土中研究其存活状况,采用根盒试验追踪标记菌株在小麦根圈的定植动态。结果标记菌株N2106-L具有发光活性和对km、str、tet三种抗生素的抗性,且具有较好的遗传稳定性。N2106-L在灭菌土壤中的数量稍高于非灭菌土壤;在3种土壤中的数量依次为：黄褐土〉黄潮土〉红壤。N2106-L在小麦根表定植密度大于根际定植密度;在小麦根际,小麦播种10d时标记菌株在0-2cm深度根际土壤定植达到最大值（2．17±0．25）×10^6CFU／g土,20d时在2-4cm深度的根际土壤中达到最高定植水平（3．92±0．47）×10^5CFU／g土;在小麦根表,标记菌株在小麦播种10d时在所有深度的根段均达到最高定植水平,0-2cm根段定植密度为（3．60±0．60）×10^6CFU／g鲜根,12cm以下根段达到（2．78±0．56）×10^4CFU／g鲜根。结论标记菌株随着根的伸长不断向根尖方向扩散,且较为稳定地在小麦根圈定植,研究结果为小麦PGPR菌株的应用提供了可靠实验数据。     

The use of phospholipid fatty acids (PL-FA) in the determination of rhizosphere specific microbial communities (RSMC) of two wheat cultivars

To determine differences in microbial community structure, phospholipid fatty acids (PL-FA) from rhizosphere bacteria of two different wheat cultivars Triticum aestivum L. (cv. Bohouth-6 and cv. Salamouni) were extracted and analyzed by gas chromatography. This approach was used to overcome the methodological underestimation of microbial densities obtained with isolation, culture techniques and microscopic observations. Our objective was to verify differences in PL-FA profiles from two wheat cultivars grown under controlled environmental conditions. Principal component analysis (PCA) and cluster analysis were used to detect dissimilarities between rhizosphere microbial communities of the two wheat cultivars and signature fatty acids (FA) were used to determine specific differences in the community structures. PCA of the two cultivars explained 79.18% of the variance on principal component 1 (PC1), which accounted for Bohouth-6 rhizosphere soil. The rhizosphere soil of Salamouni accounted for 11.66% of the variance on principal component 2 (PC2). The results demonstrated repeatedly the clustering of the samples into two distinct groups; each group belonging specifically to one of the two wheat cultivars. Profiles of Bohouth-6 showed higher amounts of cyclopropane acid 19:0cy and Sif 7 (Sum in feature 7) than Salamouni. Those FA are known as signature molecules for Gram-negative bacteria. This was also reflected by the higher bacterial counts (cfu g^–1 fresh root weight) of Gram-negative bacteria from the rhizosphere of the former than the latter. The results indicated that under controlled environmental conditions, wheat cultivars of different genotypes exhibit distinct microbial colonization in their rhizosphere.