植物微管特效解聚剂APM对紫露草雄蕊毛细胞胞质环流的影响

采用体外渗透和显微注射的方法。将植物微管特效解聚剂甲基氨草磷(APM)引入紫露草雄蕊毛细胞后,发现原来沿着胞质束运动的胞质颗粒运动速度渐慢,进而胞质束消失,颗粒运动停止。显微注射后,还发现APM可通过胞间通道由被注射的细胞向两侧细胞扩散,从而也导致两侧细胞胞质束消失,颗粒运动停止。APM对胞质环流的抑制作用是可逆的。结果表明微管可能是胞质束的重要组份之一,植物胞质环流与微管的聚合与解聚状态有密切关系。     

洋葱花粉母细胞中胞间连丝和胞质通道内的胞质骨架

用DGD包埋去包埋方法,观察了洋葱花粉母细胞中胞间连丝和胞质通道内的胞质骨架分布。结果发现,在花粉母细胞的胞间连丝内有胞质骨加分布,这些骨架纤维集结成束,穿过胞间连丝。在胞质通道内也有胞质骨架分布,但与胸间连丝内的骨困分布有所不同,主要表现为两种形式;骨架纤维致密或稀少。研究讨论了胞质骨架在胞间连丝和胞质通道内的作用。     

p21活化蛋白激酶2在卵母细胞成熟中的作用

研究p21活化蛋白激酶2（p21-activated kinase 2,PAK2）在爪蟾卵母细胞成熟中的作用。利用特异性抑制PAK2活性的PAK2-N端（PAK2-N terminal,PAK2-NT）片段显微注射爪蟾卵母细胞。荧光显微镜下比较PAK2-NT mRNA注射组和未注射对照组卵母细胞胚泡破裂发生。共聚焦显微镜下,时间延迟摄影法观察两组卵母细胞胞质分裂过程中肌动蛋白和纺锤体的变化。与未注射PAK2-N端mRNA的对照组卵母细胞相比,注射组卵母细胞胚泡破裂发生无异常,但未见胞质分裂发生和极体形成。结果提示PAK2可能参与爪蟾卵母细胞胞质分裂过程。     

小鼠艾氏腹水癌细胞内3'''',5''''-环腺苷酸(cAMP)的免疫荧光细胞化学定位和外源性cAMP对癌细胞内cAMP的影响

本工作用显示cAMP的免疫荧光细胞化学方法观察了小鼠艾氏腹水癌细胞内cAMP的分布,并发现经外源性cAMP及氨茶碱处理后,有使小鼠艾氏腹水癌细胞内cAMP荧光增强的效应。cAMP主要分布在胞质内。实验组动物从接种癌细胞的次日起,每日从腹腔注射2毫克的cAMP和1毫克的氨茶碱,发现在接种后第9天,大多数癌细胞胞质内的cAMP荧光增强,以核周区胞质内的荧光最显著。进一步证实了我室以前用生化测定癌细胞内cAMP含量的结果。本文并对显示cAMP的免疫荧光细胞化学方法进行了讨论,用cAMP荧光染色反应的特异性鉴定证明了方法的可靠性。     

内质网区蓖麻毒素的逆向转运

蓖麻毒素是植物来源的核糖体失活蛋白。蓖麻毒素必须通过细胞的内膜系统到达内质网,然后转位至胞质,才能作用于胞质内的核糖体。在内质网中毒素的两条链分离,具有催化活性的A链被内质网上的蛋白质识别,并被转位到胞质内催化核糖体失活。现对内质网在参与蓖麻毒素胞内转运过程中的作用进行综述。     

比格犬卵巢子宫内雌激素受体ERα、ERβ的免疫组织化学定位

目的研究雌激素受体α,β在比格犬卵巢及子宫内的定位。方法采用免疫组化SP法DAB显色结合BCIP/NBT及AEC显色检测ERα、ERβ在比格犬子宫及卵巢内的表达。结果比格犬ERα主要表达于卵泡颗粒细胞、卵巢间质腺腺上皮细胞及子宫内膜腺体腺上皮细胞胞核内,胞质内仅有少量表达,而在卵泡膜内膜的间质细胞,腺体周围的基质细胞及小动脉血管内皮细胞和平滑肌细胞、小静脉内皮细胞的胞核内有少量表达。而ERβ则以相同的组织特异性主要表达于上述组织细胞的胞质内,在胞核内有微弱表达。ERα表达于膜黄体细胞的胞核内,而在黄体颗粒细胞胞核与胞质内均有表达。而ERβ则仍特异表达于不同生理阶段黄体细胞的胞质内。BCIP/NBT与AEC双染未见ERα、ERβ在子宫内有明显的共表达现象。结论比格犬ERα、ERβ在子宫与卵巢组织内定位不同,ERα主要定位于胞核,在胞质内有微弱表达,而ERβ主要定位于胞质,在胞核内有零星表达。     

爪蟾p21活化激酶2参与卵母细胞胞质分裂过程不依赖于Cdc42

研究p21活化激酶2(p21-activated kinase2,PAK2)在卵母细胞成熟过程中的作用.以爪蟾卵母细胞为模型,分别向爪蟾卵母细胞显微注射PAK2-N端(PAK2-N-terminal,PAK2-NT)和PAK2-N端突变体(PAK2-N-terminal mutation,PAK2-NTm)mRNA,荧光显微镜下观察胚泡破裂发生.采用共聚焦显微镜,时间延迟摄影法观察正常卵母细胞、PAK2-NTmRNA注射组和PAK2-NTm mRNA注射组卵母细胞胞质分裂、极体形成及与Cdc42活性的关系.结果表明,PAK2-NTmRNA和PAK2-NTm mRNA注射组的卵母细胞与正常卵母细胞胚泡破裂发生相似,但PAK2-NTmRNA和PAK2-NTm mRNA注射组未见胞质分裂和极体形成.结果提示,PAK2参与卵母细胞胞质分裂和极体形成可能不依赖于Cdc42的调节过程.     

Cdc42和球形肌动蛋白在卵母细胞胞质分裂中的定位分析

研究活性Cdc42与球形肌动蛋白(G-actin)在爪蟾卵母细胞胞质分裂中的定位关系。分别用GFP-wGBDmRNA与罗丹明-594-微管蛋白、Alexa-488-球形肌动蛋白与罗丹明-594-微管蛋白、GFP-wGBDmRNA与Alexa-594-球形肌动蛋白共同显微注射爪蟾卵母细胞。利用共聚焦显微镜,时间延迟摄影方法,分别观察活体卵母细胞中活性Cdc42、球形肌动蛋白在胞质分裂过程中的定位,以及活性Cdc42与球形肌动蛋白在胞质分裂中的定位关系。在卵母细胞胞质分裂中,活性Cdc42与球形肌动蛋白存在空间上共定位现象,并且在时相上具有一致性。结果提示活性Cdc42和球形肌动蛋白在卵母细胞胞质分裂过程中密切相关。     

中华绒螯蟹血细胞的显微、亚显微形态结构及其分类

通过相差显微镜和电镜观察,根据中华绒螯蟹血细胞胞质内有无颗粒以及颗粒大小、染色反应、折光性和形成方式的特点,血细胞分为胞质内无颗粒的无颗粒细胞、胞质内只有具折光性和呈淡红色反应大颗粒的大颗粒细胞、胞质内只有无折光性和呈淡蓝色染色反应小颗粒的小颗粒细胞以及胞质内同时具有大颗粒和小颗粒二种颗粒特性的大小颗粒中间型细胞.小颗粒的形成方式是高尔基体成熟面小泡脱离后直接成为小颗粒,而大颗粒的形成方式是高尔基体成熟面小泡脱离后,数个小泡逐渐聚集成蜂窝状大颗粒,进一步发育成熟为均质大颗粒.实验结果表明:三种有颗粒的细胞是互相独立的,可能分别由无颗粒细胞分化而成.       

利用原位杂交技术检测免疫球蛋白重链mRNA在T和B淋巴瘤内的表达

应用原位杂交技术和免疫组织化学法对８例Ｂ淋巴瘤和４例Ｔ淋巴瘤进行了ＩｇＨｍＲＮＡ和ＩｇＭ,κ,λ的检测。结果显示,８例Ｂ淋巴瘤ＩｇＨｍＲＮＡ均为阳性,位于胞核周围,有的ｍＲＮＡ阳性反应成点状位于胞质的一侧。７例胞质中ＩｇＭ,κ或λ为阳性。１例胞质内无ＩｇＭ,κ或λ,但胞核内ＩｇＨｍＲＮＡ阳性反应成点状分布,可能是初级ＲＮＡ转录。在Ｔ淋巴瘤中,只有一例胞核内出现初级ＲＮＡ转录,因为早期Ｔ淋巴瘤,也有Ｄ、Ｊ基因片段的重排     

显著六鞭毛虫超微结构的观察

作者对显著六鞭毛虫作了超微结构的观察。两个胞核平行,靠近或稍旋转。两根Ｒ鞭毛的外侧具有发达的粗内质网。近内质网处的胞质向体外突出成两个小突起。胞质内具线粒体,高尔基体等胞器。     

增强UV-B辐射对小麦根尖细胞游离钙离子分布的影响

以小麦根尖为材料,利用低温装载法在根尖细胞中成功地装载了酯化形式的钙离子荧光指示剂fluo-3/AM,利用激光共聚焦显微技术检测了增强UV-B辐射后小麦根尖细胞内游离钙离子荧光强度的分布,并对胞质内游离钙离子浓度进行了测定.结果表明:(1)对照组小麦根尖细胞内钙离子荧光主要分布于细胞胞质周缘;而经UV-B辐射处理后,细胞内钙离子荧光不仅分布在胞质周缘,且在细胞壁与胞间隙可观察到大量钙离子荧光.(2)对单个细胞内钙离子荧光强度进行测定,发现UV-B处理使细胞胞质内游离钙离子浓度明显升高.     

小麦胚乳细胞中肌动蛋白纤丝分布格局的荧光显微观察

以异硫氰四甲基罗丹明－鬼笔环肽为探针,结合电视显微镜术对呈现原生质胞间运动的小麦（Ｔｒｉｔｉｃｕｍ ａｅｓｔｉｖｕｍ Ｌ．）胚乳细胞胞质中肌动蛋白纤丝（ＡＦｓ）的存在与分布格局进行了观察与分析。结果表明,ＡＦｓ以多种形式在胚乳细胞内呈区域性分布：胞核为ＡＦｓ网络所包围,ＡＦｓ成束由核周向四处辐射直抵周质层,大量纤细ＡＦｓ在胞质皮层内呈无序的密集分布以及腹沟区细胞内ＡＦｓ梭状体的大量汇集。联系胞质组分在胞间运动中的动态与胞质纤索对ＣＢ处理的反应,讨论了ＡＦｓ的不同存在状态与胞质纤索的伸缩穿越和细胞基质的集流迁移这两种胞间运动方式的关系     

胍基丁胺在成年大鼠组织中的表达和分布

目的观察胍基丁胺（agmatine,AGM）在成年Wistar大鼠全身组织的表达和分布。方法采用免疫组织化学法,用自制的抗胍基丁胺多克隆抗体检测胍基丁胺在成年Wistar大鼠全身组织中的表达分布情况。结果胍基丁胺在胃、十二指肠、空肠、回肠、结肠的粘膜腺上皮细胞胞质内呈强阳性表达;胍基丁胺在大脑皮层、丘脑、海马、延髓的神经元胞质和神经轴突内呈强阳性表达;胍基丁胺在子宫、输卵管、前列腺的腺上皮细胞和睾丸的生精细胞胞质内呈强阳性表达;胍基丁胺在肝细胞、肾上腺皮髓质细胞胞质内呈阳性表达,在肾脏、脾脏呈弱阳性表达;胍基丁胺在肺、阴茎的微血管平滑肌细胞胞质内呈强阳性表达,但在心脏、骨骼肌、食道、主动脉的肌细胞内未见其表达。结论胍基丁胺在成年Wistar大鼠体内广泛分布,可能具有重要的生理作用。     

广西巴马小型猪SAP真核表达载体的构建及胚胎水平表达

本研究的目的是构建广西巴马小型猪SAP真核表达载体并在胚胎水平对其进行验证。利用RT-PCR技术扩增并克隆SAP基因,再用T4连接酶将其连入P-Dsred-N1载体,构建P-Dsred-N1-SAP载体,并通过胞质注射生产转SAP的猪胚胎。结果表明,本研究成功构建了P-Dsred-N1-SAP重组载体,经胞质注射后在胚胎发育早期和囊胚期均有红色荧光表达。本研究为下一步研究SAP基因的功能和生产转SAP基因猪奠定基础。     

洋葱花粉母细胞细胞内、细胞间微梁骨架的超微结构观察(英文)

以洋葱(AlliumcepaL.)花粉母细胞为材料,采用DGD包埋去包埋原位技术,对花粉母细胞不同发育时期的细胞内、细胞间微梁骨架的超微结构进行了电镜观察。结果发现,花粉母细胞核内存在粗细不等的微梁骨架,与核仁和染色体紧密相连,随着发育的推移,其均一性发生改变。在核周有核纤层样的结构存在,与细胞核和胞质中的微梁骨架紧密相连,到前期结束时解体。洋葱花粉母细胞内具有发达的胞质微梁骨架,这种结构在减数分裂前期Ⅰ变化不明显。在胞间连接(胞间连丝和胞质通道)内,也有精细的微梁骨架分布,并且与两端细胞中的骨架相连。在凝线期的花粉母细胞中观察到细胞融合现象,有胞质或核内微梁骨架与穿壁转移的胞质小球和核小球内骨架相连。此时细胞核偏向一边,但细胞的其余部位仍充满了胞质微梁骨架。初步探讨了核微梁骨架与核仁和染色体之间的关系,核纤层与细胞核之间的关系,以及细胞内、细胞间微梁骨架与细胞融合之间的关系     

烟草花粉母细胞细胞融合过程中细胞骨架的超微结构观察

应用普通电镜和DGD去包埋技术 ,研究了烟草花粉母细胞中的细胞融合现象及细胞融合过程中细胞骨架的变化。观察发现 ,处于凝线期的花粉母细胞 ,其内含物 ,包括细胞器和染色质 ,主要通过胞质通道向相邻细胞发生转移。DGD去包埋观察发现 ,花粉母细胞中核骨架与细胞质内及胞间连丝和胞质通道内胞质骨架连接成一个整体。在整个细胞融合过程中 ,均有核骨架纤维与染色质相连。本文讨论了细胞骨架在细胞融合过程中的作用     

流感病毒的复制及期调控研究进展

流感病毒复制涉及一系列复杂的核几,外生物大分子转运过程。感染早期,进入胞质的ＶＲＮＰ转运到核内;晚期,病毒转录本向核外运输,新合成的结构蛋土随之运往核内,在核中完成ｖＲＮＰ装配,核中装配的子代ｖＲＮＰ又运往胞质。     

APE/REF-1在胃黏膜上皮细胞系的表达

目的研究人胃黏膜上皮细胞系无嘌呤无嘧啶核酸内切酶(APE)的表达状况。方法人胃癌细胞系SGC-7901细胞、MKN45细胞和正常胃黏膜上皮细胞系HFE145细胞、GES-1细胞分别进行爬片培养,用细胞免疫组织化学方法检测APE表达水平。结果APE在MKN45细胞主要是胞核弱阳性表达,部分胞质有轻度表达;SGC-7901细胞胞核强阳性表达,个别细胞有胞质表达;HFE-145细胞中绝大部分细胞核呈阳性表达,胞质呈弱阳性表达;GES-1细胞主要是分裂期的细胞呈胞核和胞质的阳性表达。结论APE在人胃黏膜上皮细胞系普遍表达,以胞核表达为主,其表达方式可能与细胞的增殖和分化状态相关。     

应用重组表达钙离子敏感蛋白YC2.1研究粟酒裂殖酵母细胞内钙离子浓度的分布

把重组表达钙离子敏感蛋白的YC2．1基因（yellow cameleon 2．1）导入了粟酒裂殖酵母中,观察了粟酒裂殖酵母细胞内钙离子浓度的分布。结果发现,钙离子敏感蛋白所指示的钙离子呈细胞周缘胞质较高浓度分布,而在细胞胞质中部的钙离子浓度相对低一些。通过DAPI染色实验证实这是由于胞质中部细胞核的填充而形成。fluo-3染色的裂殖酵母细胞,由于fluo-3进入到细胞器（房室化现象）,所以出现胞质的内部区域高的荧光信号,而在周缘的胞质区相对弱,不能真实反应胞质钙离子的分布。因此重组表达钙离子敏感蛋白测定钙离子的方法优于fluo-3荧光探针的方法,对于裂殖酵母细胞胞内钙离子的研究具有良好的应用前景。