破坏乙肝病毒中草药筛选方法的研究──乙肝病毒颗粒模型的建立

乙型肝炎是由乙型肝炎病毒引起的严重传染病。本文建立了乙肝病毒颗粒模型,并应用于中草药破坏乙肝病毒的筛选,证明标准品大黄（含生药ｌｇ／ｍｌ）抗乙肝病毒可达到１：１６０以上,且不受ｐＨ影响,证明该模型稳定、简便,可应用于大量破坏乙肝病毒中草药的筛选。     

不同种雏鸭建立鸭乙肝病毒感染模型及抗病毒效果的实验

目的探讨不同种雏鸭建立鸭乙肝病毒感染模型的影响因素,观察应用该模型抗病毒的效果。方法采集鸭血清,应用PCR方法定性检测鸭血清中病毒DNA;定量PCR方法检测鸭血清中病毒DNA载量变化;用抗病毒药物处理,观察其在鸭DHBV感染模型中的抗病毒效果。结果不同种鸭DHBV自然感染率不同,樱桃谷鸭为8.75%,湖北麻鸭两个批次分别为17.80%和10.68%;静脉注射和腹腔注射两途径均能致雏鸭感染DHBV,静脉注射感染率80%,腹腔注射感染率65%;鸭感染DHBV后,体内病毒载量维持在106～108copies/mL,可持续20 d以上;抗病毒药物处理后,在不同DHBV模型中其抗病毒效果变化趋势一致。结论鸭的种类和人工感染途径可影响DHBV感染率;雏鸭感染DHBV后其体内有持续性的病毒血症;DHBV感染模型是药物抗病毒研究较好模型。     

使用ELISA技术检测中草药抗HBeAg的实验研究

使用ＥＬＩＳＡ技术对２５０种中草药水提取物进行抗ＨＢｅＡｇ的实验研究,共筛出有效药物７种（占总数的２．８％）。若按５种不同剂量（０．３、０．６、１．２、２．５、５．０ｍｇ／１００μｌ）的药物、２种不同浓度的ＨＢｅＡｇ（１０．９２、１４．２６Ｐ／Ｎ值）与３种不同接触时间（立即、１ｈ、２ｈ）的１０项Ｐ／Ｎ值均数来综合评价药效指数时,７种有效药物的次序为丹参（１．５５）、皂夹（２．３４）、黄莲（２．８１     

ELISA技术筛选200种中草药抗HBsAg的实验研究

使用ＥＬＩＳＡ技术对２００种中草药水提取物进行抗ＨＢｓＡｇ的实验研究,共筛出有效药物７种（占总数的３．５％）。若按５种不同剂量（０．３、０．６、１．２、２．５、５．０ｍｇ／１００μｌ）的药物、２种不同浓度的ＨＢｓＡｇ（１０．９２、１４．２６Ｐ／Ｎ值）与３种不同接触时间（立即、１ｈ、２ｈ）的１０项Ｐ／Ｎ值均数来综合评价药效指数时,７种有效药物的次序为青蒿（１．６７Ｐ／Ｎ值）、大蒜（２．１９Ｐ／Ｎ值）、红孩儿（２．３１Ｐ／Ｎ值）、仙鹤草（２．３１）、魔芋（２．３２Ｐ／Ｎ值）、冬瓜皮（２．６３Ｐ／Ｎ值）和猕猴桃（２．８９Ｐ／Ｎ值）。     

七种中草药提取物抗肿瘤活性部位的筛选研究初报

选取叶下珠、珠子草、千里光、鸦胆子、使君子、冬青和猫爪藤等7种中草药进行提取和初步分离,筛选出有抗肿瘤效果的活性部位,并对其进行初步分析。采用MTT法,以7种中草药醇提物的不同分离部位分别对人肝癌、胃癌、卵巢癌等肿瘤细胞株进行体外增殖抑制作用研究,并以人正常肝细胞株为模型对照跟踪筛选活性部位。结果表明,从7种中草药醇提物中,均获得对肿瘤细胞株具有体外增殖抑制作用的化学分离部位,其中叶下珠和珠子草的乙酸乙酯层和正丁醇层的活性最显著,千里光的乙酸乙酯层、鸦胆子的正丁醇层、使君子和冬青的氯仿层活性次之,猫爪藤氯仿层和冬青的乙酸乙酯层活性较差,其他部位无活性。     

桂西壮族人群乙肝病毒基因型研究

为了解广西西部壮族人群乙型肝炎病毒(Hepatitic B virus, HBV)基因型分布特点,本文运用PCR微板核酸杂交-ELISA技术对30例壮族慢性乙型肝炎病人进行了HBV基因型检测,现初步报告如下.     

乙肝病毒与原发性肝癌的相关风险研究

为了解慢性乙型肝炎病毒感染与原发性肝癌的关系,本文采用回顾性研究方法对 328 例原发性肝癌病人与同期收治的 340 例非肝癌的其他消化道肿瘤病人的乙型肝炎病毒感染血清标志物(HBV M)及肝功能检测结果进行对比分析。结果显示肝癌组乙肝表面抗原(HBsAg)阳性率(63.11%)显著高于非肝癌组(消化道其他肿瘤对照组)(11.47%)。肝癌组慢性乙型肝炎病毒感染“HBsAg、抗-HBe 和抗-HBc 三者均表达为阳性者”(37.2%)显著高于“HBsAg、HBeAg 和抗-HBc 三者均表达为阳性者”(6.4%)。肝功能检测结果,“HBsAg、HBeAg 和抗-HBc三者均表达为阳性组”与“HBsAg、HBeAg 和抗-HBc 三者均表达为阳性组”比较无显著性差异(P>0.05),而肝癌组与非肝癌组比较,肝癌组肝损害显著高于非肝癌组(P<0.01)。表明慢性乙型肝炎病毒感染在原发性肝癌病因学中起着十分重要的作用,“HBsAg、抗-HBe 和抗-HBc 三者均表达为阳性者”是原发性肝癌的高危人群。     

中草药食品抗氧化剂的筛选

为了寻找质优、价廉、丰富、易得的天然食品抗氧化剂资源,本文采用“扩散板法”和“永停法”从51种中草药中筛选出了二十三种活性较强的,其中大黄、牡丹皮、老鹳草、川续断、芡实,山茱萸核、马齿苋、八角回香、千里光和鹅不食草等10种抗氧活性最强(AI>70％)。     

乙肝病毒增强子对其基因表达的调控

本文构字线性化的含有从核心抗原启动子Ｃｐ起始的ＨＢＶ完整转录单元的基因组隆,以此为模型,通过增强子Ｉ和增强子ＩＩ的缺失或点突变分析,研究了ＥＮＩ和ＥＮＩＩ对ＨＢＶ基因组基因宾调控。结果用ＥＮＩＩ对Ｓ基因表达均有增强作用,且相互协同。     

中草药α-葡萄糖苷酶抑制剂研究进展

葡萄糖苷酶抑制剂在控制餐后高血糖方面具有重要的作用。目前已发现的中草药中的α-葡萄糖苷酶抑制剂包括:黄酮类,生物碱类、多糖、酚类等化合物以及一些活性成分尚未确定的中草药。本文对以中药为来源的α-葡萄糖苷酶抑制剂及其体内外抑制作用的评价进行了综述。     

乙肝病毒载量与血清标志物及ALT相关性研究

探讨了乙型肝炎病毒核酸(HBV-DNA)水平与乙型肝炎免疫标志物(HBVM)和丙氨酸氨基转移酶(ALT)的关系。分别采用实时荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR),酶联免疫法和连续监测法检测了345例血清标本HBV-DNA含量,HBVM(HBsAg、HBsAb、HBeAg、HBeAb、抗HBcIgM)表达及ALT水平。HBsAg、HBeAg(和抗HBcIgM)阳性患者HBV DNA阳性率要明显高于HBsAg、HBeAb(和抗HBcIgM)阳性患者、仅HBsAg阳性患者及HBsAb、HBeAb阳性患者(P<0.01)。血清HBeAg阳性标本HBV-DNA阳性率为98.7%,明显高于HBeAg阴性标本的61.6%(P<0.01),并且血清HBeAg阳性标本HBV-DNA含量(log值,7.42±1.43)也明显高于HBeAg阴性标本(4.36±1.73)(P<0.01);在HBV-DNA含量小于107copy/mL的标本中,ALT与HBV-DNA含量呈正相关(P<0.01)。血清中HBV DNA含量与乙型肝炎免疫标志物以及肝细胞损伤三者之间存在密切的关系,在临床工作中应对血清HBVM、ALT和HBV-DNA含量联合检测,这样才能更准确地判断患者病情、预后及指导抗病毒药物的应用。     

乙肝病毒与原发性肝癌的相关风险研究

为了解慢性乙型肝炎病毒感染与原发性肝癌的关系,本文采用回顾性研究方法对328例原发性肝癌病人与同期收治的340例非肝癌的其他消化道肿瘤病人的乙型肝炎病毒感染血清标志物(HBV M)及肝功能检测结果进行对比分析.结果显示肝癌组乙肝表面抗原(HBsAg)阳性率(63.11%)显著高于非肝癌组(消化道其他肿瘤对照组)(11.47%).肝癌组慢性乙型肝炎病毒感染"HBsAg、抗-HBe和抗-HBc三者均表达为阳性者"(37.2%)显著高于"HBsAg、HBeAg和抗-HBc三者均表达为阳性者"(6.4%).肝功能检测结果,"HBsAg、HBeAg和抗-HBc三者均表达为阳性组"与"HBsAg、HBeAg和抗-HBc三者均表达为阳性组"比较无显著性差异(P＞0.05),而肝癌组与非肝癌组比较,肝癌组肝损害显著高于非肝癌组(P＜0.01).表明慢性乙型肝炎病毒感染在原发性肝癌病因学中起着十分重要的作用,"HBsAg、抗-HBe和抗-HBc三者均表达为阳性者"是原发性肝癌的高危人群.     

应用RNAi文库筛选HBV复制相关基因

深入研究HBV复制机理,筛选参与HBV复制的基因,可能为开发抗乙肝病毒新药提供新 的靶点．本文拟建立一种筛选HBV复制相关基因的方法: RNAi文库感染HepG2.2.15细胞后,利用免疫磁珠收集HBsAg表达降低的细胞,提取DNA,PCR扩增siRNA编码序列,将PCR产物克隆入T-easy载体,随机挑选克隆测序,发现DDB1基因可能参与HBV复制．本试验建立了一种筛选HBV复制相关基因的方法,为大规模全基因组筛选参与HBV复制的基因奠定了基础．     

诱导Epstein—Barr病毒早期抗原表达的中草药和植物的筛选

应用Raji细胞筛选了268个科的1693种中草药和植物,共发现18个科的52种有诱导Epstein-Barr(EB)病毒早期抗原表达的作用,大戟科和瑞香科最多,分别有25种和7种,其中甘遂、芫花、黄芫花、了哥王、苦杏仁、怀牛膝和巴豆等是常用药物。本文还讨论了这些中草药和植物在体内对EB病毒的激活及其与鼻咽癌发生的关系。     

抗厌氧菌中草药的系列研究：Ⅰ,抗厌氧菌中草药的筛选

目前治疗厌氧菌感染的药物不够理想,仍需发掘新药。根据文献选出抗感染中草药389种,用水、乙醇和石油醚三种溶剂,分别提取和制备成含生药1g/ml的药液,对临床常见的脆弱类杆菌等12种厌氧菌进行平板打孔法的抑菌试验。结果显示诃子、茴香根、穿心莲、黄连、肉桂、大黄、五味子、木通等53种中草药的1～3种提取液能对二种以上的厌氧菌有直径20mm以上的抑菌环。反复试验显示肉佳、大黄、五味子、木通能稳定地对4种以上的厌氧菌有20mm以上的抑菌环。作者认为平板打孔法是筛选中草药抗菌作用的简便方法,并准备对选出的中草药作进一步研究。     

转基因小鼠在病毒学研究中的应用

本以乙型肝炎病毒,人免疫缺陷病毒和脊髓灰质炎病毒为例着重论述了转基因小鼠在病毒学研究中的应用,综述了近几年来以转基因小鼠为工具的病毒学研究成果。     

杂交瘤细胞磁性颗粒筛选方法的建立及探讨

本文报道一种新的杂交瘤细胞分离法——磁性颗粒筛选法,探讨了磁性颗粒的蛋白偶联量,磁性颗粒与细胞的作用比例、体积和时间对细胞分离效果的影响。对磁性颗粒对杂交瘤细胞的影响所作的初步研究表明,游离抗原或抗原包被的磁性颗粒对细胞的生长与成活有抑制作用,但磁性颗粒筛选到的杂交瘤细胞具有显著高于普通杂交瘤细胞的抗体分泌能力。