5′-核苷酸的合成方法比较

5′-核苷酸在农业、食品和医药行业有着广泛的用途。比较了目前5′-核苷酸的工业和实验室合成方法,包括化学合成法,微生物发酵法,酶解法和酶催化法。     

用于肝癌检测的酶底物——5′-(5-碘吲哚酚-[3])胸腺嘧啶核苷酸的制备

检测人血清中5′-核苷酸磷酸二酯酶同工酶谱的变化,是诊断人类原发性肝癌的一个有效的血清酶学方法。和甲胎蛋白诊断法协同,可使肝癌的诊断符合率自80％提高到约94％。减少了甲胎蛋白诊断肝癌存在的假阴性问题,具有重要的临床诊断意义。 检测5′-核苷酸磷酸二酯酶(5′-NPDase)同工酶的底物,5′-(5-碘吲哚酚-[3])胸腺嘧啶核苷酸,我所潘禄兴等已有直接合成法报道。本文在潘禄兴等工作基础上对工艺作了改进,使产率有了明显提高。     

用固定化5′-磷酸二酯酶工业生产5′-核苷酸

自从固定化氨基酰化酶在日本获得工业应用以来,已引起各国广泛注意,至今已有近10个固定化酶在一些先进国家投入工业使用。我们自1970年开展固定化酶研究以来,已将我     

5＇-核苷酸的合成方法比较

5’-核苷酸在农业、食品和医药行业有着广泛的用途。比较了目前5’-核苷酸的工业和实验室合成方法,包括化学合成法,微生物发酵法,酶解法和酶催化法。     

麦芽根中5′-磷酸二酯酶和5′-磷酸单酯酶的提取

建立一种高效快速的从麦芽根中提取5′-磷酸二酯酶和磷酸单酯酶的方法。通过将麦芽根粉碎后,取一定粒度的麦芽根加一定量的去离子水浸泡,过滤后得粗酶液。用紫外分光光度法测定5′-磷酸二酯酶和5′-磷酸单酯酶的酶活,研究粉碎粒度、料液比、抽提温度、抽提时间等因素对麦芽根中5′-磷酸二酯酶和5′-磷酸单酯酶提取的影响。将原料粉碎至100目,以去离子水为提取剂,于4℃提取20h,料液质量比为1:10,5′-磷酸二酯酶的酶活力可达160U/ml。该法简单、快速、准确、适应性强,为5′-磷酸二酯酶的提取与检测提供了有效的工具。     

固定化5′-磷酸二酯酶及其在核苷酸生产中的应用

钛氯活化纤维素固定5’-磷酸二酯酶,使酶活回收率达到70%以上。用这种固定化酶在75℃、pH5.2的条件下降解0.5%浓度的酵母核酸(RNA),用酶量可减少到1.75u/ml底物,酶活利用率可提高6倍以上。核酸降解率可达70%以上。     

氚标记5′-尿苷一磷酸钠盐与5′-尿苷三磷酸钠盐的制备

[5-Br]5′-UMP 钠盐经催化氚化脱卤,纸层析分离得到[5-T]5′-UMP 钠盐。[5-T]5′-UMP 钠盐经酶促磷酸化后,纸层析分离得到[5-T]5′-UTP 钠盐(同时得到[5-T]5′-UDP 钠盐)。经鉴定紫外吸收光谱性质与标准样品一致,比放射性达10居里/毫克分子,放化纯度在98%以上。     

5'-核苷酸的合成方法比较

5'-核苷酸在农业、食品和医药行业有着广泛的用途.比较了目前5'-核苷酸的工业和实验室合成方法,包括化学合成法,微生物发酵法,酶解法和酶催化法.     

白地霉自溶生产5′-核苷酸的研究

新鲜白地霉菌体Geotrichum Candidum Link(菌株编号中科2.1035)于pH10硼砂缓冲液,33℃条件下,保温18～20小时,自溶破壁,菌体中的核糖核酸则降解成为5'-核苷酸溶于溶液中,核苷酸收率按菌体中核酸含量计算为80%左右。本法经过工厂几年来的生产实践,表明是切实可行的。     

利用6-磷酸-β-葡萄糖苷酶在低温条件下获得酶-底物复合物实际结构的方法

利用“酶晶体低温抑活底物固定”方法,在?20 ℃条件下,将6-磷酸-β-葡萄糖苷酶 (BglA) 晶体与底物对硝基苯-β-D-吡喃葡萄糖苷-6-磷酸 (pNPβG6P) 进行浸泡试验,通过X射线进行衍射数据收集并处理,获得了完整的底物电子密度图。研究结果表明,在不突变酶中关键基团使酶失活,以及不选用底物类似物替代原有底物的情况下,通过上述方法,可以获得酶与底物复合物的实际结构。该研究结果可为今后低温酶学及复合物中间态的进一步研究提供帮助。     

烟酰胺腺嘌呤二核苷酸合成相关酶有助于1,4-丁二醇转化为4-羟基丁酸

4-羟基丁酸(4-HB)不仅具有医学应用价值,而且是合成生物材料P3HB4HB的重要前体.在烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)参与情况下,大肠杆菌Escherichia coli S17-1(pZL-dhaT-aldD)可以把1,4-丁二醇(1,4-BD)转化为4HB.为提高4HB产率,通过过表达烟酸磷酸核糖转移酶(PncB)和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸合成酶(NadE)增加胞内NAD含量,从而加速1,4-BD转化反应的进行.结果表明,PncB-NadE的表达使1,4-BD转化率比对照组增加13.03％,由10g/L的1,4-BD得到4.87 g/L的4HB,单位细胞的4HB产量由1.32 g/g提高40.91％至1.86 g/g.因此PncB和NadE可用于促进1,4-BD转化为4HB.     

一种用于植物树胶酶产生菌筛选和酶学研究的不溶性产色底物

筛选产生植物树胶酶、特别是耐高温的植物树胶酶的微生物菌株,对采油工业有很大的实用意义。测定粘度变化或单糖含量的筛选方法,或则费时,或则专一性不强,需要探索更好的方法。一些多聚物如淀粉、纤维素、甲壳质,葡聚     

碱性磷酸酶底物的研究——兼介绍一种新底物: 萘酚AS-OL磷酸

本文研究了免疫组织化学方法中碱性磷酸酶（ＡＰ）的显色系统。本文以人扁桃体的石蜡切片为材料,以ＣＤ２０为标记,二抗为生物素标记的兔抗鼠抗体,选择了５种萘酚磷酸（ｎａｐｈｔｈｏｌＡＳ－ＯＬｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ｎａｐｈｔｈｏｌＡＳ－ＧＲｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ｎａｐｈｔｈｏｌＡＳ－ＴＲｐｈｏｓｐｈａｔｅ,ｎａｐｈｔｈｏｌＡＳ－ＭＸｐｈｏｓｐｈａｔｅ和ｎａｐｈｔｈｏｌＡＳ－ＢＩｐｈｏｓｐｈａｔｅ）与９种重氮化合物（ｆａｓｔｒｅｄＴＲｓａｌｔ,ｆａｓｔｂｌａｃｋＫｓａｌｔ,ｆａｓｔｂｌｕｅＢＢｓａｌｔ,ｆａｓｔｂｒｏｗｎＲＲｓａｌｔ,ｆａｓｔｓｃａｒｌｅｔＲｓａｌｔ,ｆａｓｔｂｌｕｅｓａｌｔＢＮ,ｆａｓｔｂｌｕｅＢ,ｆａｓｔｄａｒｋｂｌｕｅＲｓａｌｔ,ｆａｓｔｒｅｄｖｉｏｌｅｔＬＢｓａｌｔ）以及新品红为ＡＰ显色底物,相互配伍,根据形成的一系列显色反应,比较研究了不同的底物对。研究结果表明：在５种萘酚磷酸中,ｎａｐｈｔｈｏｌＡＳ－ＯＬｐｈｏｓｐｈａｔｅ具有良好的显色敏感性,当一抗为１∶１０００时,与常用ｎａｐｈｔｈｏｌＡＳ－ＢＩｐｈｏｓｐｈａｔｅ一样,具有较强的显色反应;该底物还具较好的配伍性,能与新品红和ＦａｓｔＢｌｕｅ