植物反义寡核苷酸的研究进展

本文介绍了近年来植物中反义寡核苷酸的研究现状,它包括反义ＤＮＡ、反应ＲＮＡ和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ。反义寡核苷酸能特异地拮抗内源或外源基因表达,这为研究某特定基因功能提供了更有效的方法,此外也为培育抗病植株,建立植物反向筛选系统,次生代谢调控及农艺性状改良提供了可能途径。     

植物反义寡核苷酸的研究进展

本文介绍了近年来植物中反义寡核苷酸的研究现状,它包括反义ＤＮＡ、反义ＲＮＡ和Ｒｉｂｏｚｙｍｅ。反义寡核苷酸能特异地桔抗内源或外源基因的表达,这为研究某特定基因功能提供了更为有效的方法。此外也为培育抗病植株、建立植物反向筛选系统,次生代谢调控及农艺性状改良提供了可能途径。     

反义寡核苷酸的抗病毒作用及其研究进展

根据靶核酸序列设计的具有一定长度的反义寡核苷酸可与靶核酸特异结合,从而发挥调节基因表达的功能。本文涉及反义寡核苷酸及其类似物的抗病特性、抗病毒机理、反义寡核苷酸的毒性和药物动力学以及未来的发展前景。     

反义寡核苷酸作用机制研究进展

近年来,由于多种化学修饰的反义寡核苷酸的出现,其作用机制已经不仅仅是诱导RNaseH的切割机制,多种核酸酶能被修饰的反义寡核苷酸诱导,如双链RNase,RNase P,RNase L等,而且利用反义寡核苷酸可以干扰mRNA的代谢过程中加帽,剪接,翻译起始和延长等步骤,随着对反义寡核苷酸作用的分子机制研究的深入,会使它有更为广阔的应用前景。     

反义寡核苷酸递送方法研究进展

如何将反义寡核苷酸 (AS ODNs)有效递送进入细胞是反义核酸领域面临的一大难题。近年来 ,出现了多种寡核苷酸 (ODNs)的递送方法。在培养细胞中 ,使用的递送方法包括阳离子载体包裹、特异受体的配体导向、ODNs偶联修饰、细胞膜辅助穿透以及利用逆转录病毒载体转染等 ,其应用有效增强了AS ODNs的作用效果 ,大幅度降低了AS ODNs的使用浓度 ;在体内 ,由于临床使用裸露AS ODNs连续给药能达到一定的反义效果 ,而使递送方法的研究和应用尚处于初步尝试和探索之中 ,迄今报道的递送方法有脂类和非脂类两类。     

反义寡核苷酸的化学修饰

反义寡核苷酸的功能在很大程度上取决于其稳定性、生物利用度及与靶基因结合或反应的特性．通过特定的化学修饰可以改变这些物理、化学特性,从而增加其抗病毒、抗肿瘤及对其他特定基因的表达抑制活性．     

锁核酸——一种新的反义寡核苷酸

1978年 ,Ｚａｍｅｃｎｉｋ等[1] 开创了根据碱基互补配对原理 ,设计反义寡核苷酸以用于基因治疗的研究。相当时间内 ,反义治疗成为研究领域的热点。至今该研究已经进行了2 0多年 ,但所取得的成果一直不令人满意。其中的一个关键问题是反义寡核苷酸的易降解及杂交结合力不强。所以 ,近十几年来 ,科学家们一直在找寻一种强有力的核苷酸替代物质。这种物质既要有强大的杂交亲合力及抗核酸酶能力 ,又必须对人体没有毒性[2 ] 。已经有很多关于各种核苷酸类似物被用于反义研究的报道 ,如硫代磷酸寡核苷酸、甲基化寡核苷酸、肽核酸 (ＰＮＡ)等。近…     

吗啉反义寡核苷酸在基因功能研究中的应用

吗啉反义寡核苷酸属于第三代反义寡核苷酸,主要通过阻断mRNA的剪接过程来抑制目的基因的功能。吗啉反义寡核苷酸技术现已广泛应用于发育过程中基因功能的研究;鉴于吗啉反义寡核苷酸能与病毒特异mRNA结合,形成的双链物可有效阻断病毒RNA的转录,从而抑制病毒的复制,所以该技术已应用于医学研究,如治疗病毒感染、癌症、肌营养不良症和早老综合症等疾病。主要阐述了吗啉反义寡核苷酸的结构特点、作用机制、与其它反义技术的比较,以及该技术的应用与展望。     

内皮素-1 mRNA反义寡核苷酸预防大鼠急性缺血性心律失常

本实验夹闭雄性ＳＤ大鼠冠状动脉左前降支（ＬＡＤ）造成急性心肌缺血,观察ＬＡＤ闭塞后１ｈ内缺血性心律失常的发生。在ＬＡＤ夹闭前２ｈ,静脉注射本室设计的人内皮素－１ｍＲＮＡ反义寡核苷酸（ＡＳ－ＯＤＮ）以阻断ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,观察ＡＳ－ＯＤＮ对血浆ＥＴ－１浓度和急性缺血性心律失常的影响。     

一种新型调控基因表达的反义寡核苷酸：LNA

LNA(lockedn ucleic acid)是新近发现的一种新型调控基因表达的反义寡核甘酸。它以RNA为骨架．亚甲基键连接核糖环中的2′-氧和4′-碳。这种锁套式的结构,增加了LNA与其互补序列的亲和力并为基因表达的调控和微阵列的研究提供了一个新的研究途径。     

反义脱氧寡核苷酸的抗SRS病毒活性

本文研究了合成的反义脱氧寡核苷酸片段,包括修饰的和非修饰的,同聚的和异聚的脱氧寡核苷酸对SRS病毒感染细胞的增殖,细胞群落形成,xc融合细胞产生和逆转录酶活性的抑制作用。结果表明上述寡聚物对病毒都有抑制活性。小鼠急性毒性试验在高剂量下未见毒性。各种寡聚物的作用机制不同。     

反义寡核苷酸在动脉平滑肌细胞和内皮细胞研究中的应用

动脉粥样硬化、再狭窄和高血压发展中都存在着动脉壁细胞增殖,反义寡核苷酸在抑制基因过量表达进而抑制细胞增殖方面取得了重要进展。现已从干预平滑肌细胞、内皮细胞生长因子的分泌、癌基因的过量表达、细胞同架蛋白的合成等方面广泛地运用了反义寡核苷酸技术。     

登革热病毒反义寡核苷酸的合成及抗病毒活性

根据碱基互补原理, 反义寡核苷酸可与特定病毒基因结合从而选择性地抑制该病毒的复制, 这是病毒性疾病治疗的新途径. 基于上述原理设计并合成了D2-04 RNA特异的6个5′末端脂肪链修饰的硫代反义寡核苷酸. 体外抗病毒活性评价显示互补于5′端起始密码、3′端重复序列和末端序列的3个反义寡核苷酸呈较强的抗病毒活性.     

肽缀合反义寡核苷酸的合成和性能

反义寡核苷酸可作为基因表达的抑制剂和潜在的治疗药物,但多种类型的寡核苷酸为聚阴离子化合物,难以跨过细胞膜.已知包括融合肽、信号肽在内的多种生物活性多肽具有跨膜与核定位能力.讨论了反义寡核苷酸-肽缀合物的合成和生物活性.     

胰腺癌反义寡核苷酸技术治疗的新靶点-survivin

survivin对维持肿瘤细胞恶性增殖具有重要功能,是目前发现IAP家族中唯一与细胞凋亡和周期调控都相关的成员,其机理是与caspase-3、caspase-7结合而阻止细胞凋亡的发生。反义寡核苷酸具有高特异性、靶向性、无毒性等特点。以互补的形式与DNA或RNA的特异靶序列结合,抑制其转录和翻译上特定基因的表达,干扰致病蛋白质的产生,从而使肿瘤基因无法表达。存活素在胰腺癌中的表达具有一定的肿瘤特异性,可能是胰腺癌治疗的一个理想靶目标。下面就着重以survivin作为治疗靶点在肿瘤发生中的作用机制、表达和Survivin ASODN在临床应用中的应用前景作一简要综述。     

反义寡核苷酸对丙型肝炎病毒调控基因表达的体外抑制活性研究

为探讨反义寡核苷酸对丙型肝炎病毒的抑制活性,研究和开发新型抗ＨＣＶ药物。采用ＨＣＶ５’ＮＣＲ调控荧光素酶基因的稳定表达细胞株ＨｅｐＧ２．９７０６,评价了３条针对ＨＣＶ调控基因的ＡＳＯＤＮ,即ＨＣＶ３６３,ＨＣＶ３４９及ＨＣＶ２７９。将Ｌｉｐｏｆｅｃｔｉｎ包封的ＡＳＯＤＮ与ＨｅｐＧ２．９７０６细胞株每天作用５小时,连续３天后检测荧光素酶活性。     

反义寡核苷酸的非反义作用

反义核酸作为一种调控特定基因表达的手段,是通过与特异ｍＲＮＡ分子上５′翻译区、ｍＲＮＡ启动－编码重叠区、核内ｈｎＲＮＡ剪接供点结合抑制ｍＲＮＡ的翻译、剪接、转运或通过形成ＲＮＡ－ＤＮＡ杂合双链,激活ＲＮａｓｅＨ,降解ｍＲＮＡ来达到抑制靶基因表达的目的...     

反义寡核苷酸片段可抑制鲫鱼视网膜电压依赖性钾离子通道的表达

爪蟾卵母细胞经注射鲫鱼视网总ＲＮＡ后,可表达大量电压依赖性钾离子通道。在此基础上,我们进一步发现,一个特定序列的寡核苷酸能专一地抑制该通道的表达。由于我们设计与合成的该片段与果蝇、小鼠中已克隆的钾通道中编码Ｎ端的一个多肽的ｍＲＮＡ完全互补,因此推测：鲫鱼视网膜中的Ｋ这个区域与其它物种的Ｋ通道有高度同源性,这为克隆该基因和研究它的功能提供了重要资料。     

反义寡核苷酸抑制Fas表达用于治疗肝脏疾病

Fas(CD95)是肿瘤坏死因子受体(TNFR)家族成员。在肝脏中,Fas激活的凋亡信号可能对调节肝细胞动态平衡起作用。但在很多炎症情况下,肝脏Fas的表达水平增高。在多种临床肝病发展过程中,肝损伤与Fas表达和细胞凋亡相关。因此通过对Fas表达进行调控,从而控制肝脏中过量和异常的细胞凋亡,是一种极具潜力的保护肝脏的治疗途径。反义寡核苷酸技术已被广泛用于在许多组织中抑制特定基因的表达。用反义寡核苷酸抑制肝脏Fas表达,可以保护动物避免由细胞凋亡而造成的肝损伤以及爆发性肝炎死亡。讨论了Fas在几种肝脏疾病中的病理作用和利用反义寡核苷酸技术阻止和控制这类肝脏疾病的病变。