肺炎链球菌荚膜多糖特异性IgG抗体定量ELISA检测及质量控制要求

检测肺炎链球菌荚膜多糖(PPS)特异性抗体的酶联免疫吸附试验多年来经历了两次主要改进。介绍了WHO推荐的人血清抗肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)荚膜多糖抗体IgG定量ELISA(Pn PS ELISA)检测方法、关键试剂、局限性以及方法验证等内容。ELISA定量检测法,为预防肺炎链球菌的婴幼儿侵袭性疾病提供准确的抗体水平,并对肺炎链球菌疫苗的临床评价提供血清学证据。人血清中肺炎链球菌荚膜多糖抗体IgG是判断肺炎链球菌疫苗效力的重要指标。     

肺炎球菌毒力因子Tu的免疫增强了抗肺炎链球菌感染的血清型非依赖性保护

疫苗接种是预防肺炎球菌疾病的一种有效方法。目前,肺炎链球菌上市疫苗包括多糖疫苗(PPSV)和结合疫苗(PCV),它们靶向以荚膜构成为基础的94种肺炎链球菌血清型中最常见的血清型。然而,据报道,PPSV对2岁以下儿童无效,并且PCV诱导了血清型替代,这意味着在广泛接种疫苗后肺炎链球菌菌群发生了变化,非疫苗血清型引起的侵袭性肺炎球菌病的案例增加。因此,开发新型肺炎球菌疫苗以替代或补充目前的基于多糖的疫苗十分必要。     

评价肺炎支原体疫苗效力的仓鼠攻击试验

<正> 在1964-1976年间,许多实验室研制了一系列的福尔马林灭活的肺炎支原体疫苗并进行了效力试验。有些疫苗是在众多的部队新兵中进行了现场试验,有些则给少数志愿受试者接种,然后用强毒株进行攻击试验。利用接种过疫苗者中支原体肺炎自然发病率的降低和感染过支原体人群中病情的减轻来进行评价,结果表明,这些疫苗的保护效力是很低的。当将疫苗加入明矾佐剂增强其抗原性或简单地增加疫苗剂量时,能提高用     

新型肺炎链球菌疫苗研究进展

肺炎链球菌(Streptococcus pneumoniae)是引发人类肺炎、中耳炎、脑膜炎的主要病原体。为了预防肺炎链球菌感染,人类已研制出了多种相关的疫苗。目前,常用23价肺炎球菌多糖疫苗(23-valent pneumococcal polysaccharide vaccine,PPV23)预防成人和2岁以上儿童肺炎链球菌的感染,用7价、10价、13价肺炎球菌结合疫苗来预防婴幼儿肺炎链球菌的感染。虽然荚膜多糖类疫苗能预防其所包含的肺炎链球菌血清型的感染,但非疫苗血清型的菌株还是可以在鼻咽部定植,并引起感染,而且结合疫苗研制工艺复杂、价格昂贵,在发展中国家使用还不普及。鉴于上述原因许多疫苗公司开始研发具有保护力强、价格低廉的新型疫苗。近年来,肺炎链球菌全细胞疫苗和肺炎链球菌纯化蛋白疫苗由于其血清非依赖性和较低的生产成本已成为人们关注的焦点。现对肺炎链球菌新型疫苗的研制及临床应用作一概述。     

肺炎链球菌疫苗研制进展

肺炎链球菌导致的疾病已成为全球一个重要的公共卫生问题。疫苗开发及使用成为重要的预防策略,目前肺炎球菌疫苗主要有多糖疫苗和多糖蛋白结合疫苗二类。对肺炎链球菌病原学、流行病学、所致疾病、疫苗研发进展及疫苗使用情况进行了综述。     

每次稀释后减少试验动物数量对人用狂犬病疫苗效力评价的影响

正狂犬病疫苗质控中最重要的参数是效力,效力参数是通过接种大量试验动物小鼠后检测得到的。因为目前全世界进行动物实验时普遍遵循"3Rs"原则[Reduction (减少) Replacement (替代) Refinement(优化)],所以有必要制定一个替代方法在保证疫苗具有生产持续性的同时还可以减少实验动物的用量。因此,本研究观察了在NIH实验中减少小鼠用量对疫苗效力评价的影响。     

黏膜抗体在疫苗免疫效力评价中的前景

简单介绍目前疫苗效力检验的方法、黏膜抗体的功能及其在实验室疫苗效果效力评价中的应用,提出了黏膜抗体作为疫苗免疫效力试验的替代指标或免疫监测的主要抗体的建议。     

以蛋白为基础的新型肺炎球菌疫苗的安全性、反应原性和免疫原性:Ⅰ/Ⅱ期随机临床研究

正背景:含有高度保守的肺炎球菌蛋白,例如肺炎链球菌溶血素类毒素(d Ply)和三联组氨酸蛋白D(Pht D)都正被开发出来以期提供抗肺炎球菌病的保护。这项研究评价了不同的含肺炎球菌蛋白的疫苗配方制剂的安全性、反应原性和免疫原性。试验在成人中进行。方法:在Ⅰ期双盲临床试验中,健康成人(18~40岁)被随机(1∶2∶2∶2∶2∶2∶2)分组,按2个     

流感-新冠混合疫苗的研究进展及展望

严重急性呼吸综合征冠状病毒2型（Severe acute respiratory syndrome coronavirus 2,SARS-CoV-2）和甲型流感病毒（Influenza A virus,IAV）均可引起严重的呼吸系统疾病，且二者存在共同感染从而导致病情加重的情况，疫苗接种是预防新冠肺炎和流感大流行的重要措施之一。基于两种疫苗的作用效果、生产成本以及就诊人群的依从性考虑，流感-新冠混合疫苗的研发具有重要意义。本文介绍了SARS-CoV-2与IAV的出现与发展以及流感-新冠混合疫苗的研究进展，包括疫苗的种类、免疫方法以及免疫效果，期望为流感-新冠混合疫苗的进一步研发提供具体思路。     

肺炎球菌结合疫苗研发策略

安全有效的肺炎球菌结合疫苗(pneumococcal conjugate vaccine, PCV)已成为预防婴幼儿肺炎球菌感染的主要手段。目前Prevenar7~?、Synflorix~?和Prevenar13~?的先后上市,仍不能满足全球婴幼儿及高危人群预防肺炎球菌感染的需求,这一需求促进了国内外对PCV疫苗的研发。各研究机构采用的结合技术各不相同,但在PCV制备中需考虑的因素有据可循。现对PCV研发策略中需考虑的血清型、多糖相对分子质量大小、载体蛋白、结合化学的选择,以及中间质控监测和结合物表征方法的选择等作一概述,为新型PCV研发提供参考。     

细菌性肠道传染病疫苗血清学评价研究进展

对于痢疾、伤寒、副伤寒和霍乱等肠道致病菌引起的肠道传染性疾病,其感染途径相同,感染机制相似,均能诱发肠道局部黏膜免疫反应。预防上述几种传染性疾病的疫苗,传统的评价方法是分析其肠黏膜分泌型IgA抗体水平。随着对上述几种肠道传染性疾病免疫学机制以及对感染者血清抗体水平与其肠黏膜抗体水平之间关系的深入研究,评价疫苗效力的方法逐渐改为测定血清抗体。对上述几种传染性疾病的感染机制以及血清学评价方法进行了综述。     

新型结核病疫苗及其评价方法的研究进展

结核病是由结核分枝杆菌感染引起的慢性传染病,严重危害人类健康,卡介苗对儿童粟粒性结核和结核性脑膜炎保护效果较好,但对成人肺结核保护效果却不确定。过去十余年,众多研究人员一直致力于新型结核病疫苗的研发,但至今尚未成功。结核病的致病和免疫机制还不完全清楚,缺乏可以预测临床保护效果的指标和动物模型,动物实验结果常与临床试验结果不符,临床试验耗时漫长、成本昂贵、且需要大量结核病患者,这些都严重阻碍了结核病疫苗的研发。近年来,研究人员研发了一些新方法进行结核病疫苗临床前评价,从而缩短了进入临床试验的时间,加快了结核病疫苗的发展。综述了新型结核病疫苗的研究进展及其保护力评价方法,特别是临床前评价新方法。     

双抗体夹心ELISA与NIH法在狂犬病疫苗抗原检测中的比较

通过用单克隆抗体制备双抗体夹心ELISA,快速检测狂犬病疫苗中狂犬病毒糖蛋白(G)的含量,将狂犬病疫苗的检定时间由28天缩短至2个工作日,以此缩短疫苗库存待检时间,提高疫苗的生产和销售效率,并最终替代NIH动物法.将待检的狂犬病疫苗样品在同一性别12～14g昆明鼠体内作效力检定试验(NIH),同时用双抗体夹心ELISA检测狂犬病疫苗中狂犬病毒G蛋白含量,用Microsoft Office Excel做出标准品和各样品疫苗的线性关系图并计算出疫苗效力值E-NIH.结果用双抗体夹心ELISA所得的E-NIH与对应的小鼠效力试验所得结果M-NIH之间呈正相关性;同一批狂犬病疫苗分次测得E-NIH值在2.41～5.85之间,而相应的M-NIH值在5.11～10.19之间.从而得出E-NIH与相应的M-NIH之间存在明显的线性关系;与NIH法比较,ELISA具有重复性好、成本低、快速等优点;用双抗体夹心ELISA替代小鼠效力试验是可能并可行的.     

13价肺炎球菌结合疫苗在老年人群中的免疫原性研究

老年人群对肺炎球菌疫苗的免疫应答不同于婴幼儿,在对老年人群肺炎球菌疫苗免疫原性的研究中,临床试验设计和判定标准均有所不同。现将美国13价肺炎球菌结合疫苗(13-valent conjugated vaccine,PCV13)在老年人群免疫原性研究的临床资料进行归纳和分析,为国内肺炎球菌疫苗在老年人群中的临床研究提供参考。     

孕妇免疫接种

<正>在孕期进行免疫接种可保护孕妇、胎儿及婴儿免受可通过疫苗预防的疾病之苦。母体中的免疫球蛋白G可穿过胎盘进行主动转运,在新生儿和婴幼儿对疫苗的主动免疫发挥效益之前,为其提供被动免疫保护。目前,推荐为孕妇接种流感灭活疫苗、破伤风类毒素和无细胞百日咳疫苗。其他几个疫苗,包括肺炎球菌疫苗、B型链球菌疫苗、b型流感嗜血杆菌疫苗和脑膜炎球菌疫苗在孕期的免疫效力进行     

炭疽活疫苗家兔免疫力与血清抗芽胞IgG关系的研究

炭疽疫苗是预防炭疽流行和炭疽生物恐怖的重要手段。已有动物实验表明,炭疽活疫苗的保护力优于以保护性抗原为主要成份的无细胞疫苗,但两类现行疫苗都有待重新评价和改进。炭疽疫苗的效力必须用适当的实验室方法进行检测与分析才能了解其性质和细节。试验中力图探寻炭疽活疫苗家兔免疫力与血清抗芽胞抗体水平的关系。用“皮上划痕人用炭疽活疫苗”免疫家兔,以特定制备的炭疽芽胞抗原用ELISA法检测血清抗炭疽芽胞IgG抗体水平,并用强毒炭疽杆菌攻击进行效力试验。免疫家兔血清几何平均抗芽胞IgG滴度在免疫后一个月内持续升高,14d达到206,28d时达到776,这时其抵抗20MLD毒菌攻击的保护率为80％,符合中国生物制品规程要求的保护力。一个月后抗体水平开始下降,42d时滴度降至223。实验所揭示的炭疽减毒活疫苗诱导的家兔抗芽胞IgG抗体与抗炭疽保护力之间的关系,既为评价现行疫苗提供了资料,也为研制新型疫苗建立了参考性指标。     

肺炎球菌结合疫苗接种前后儿童中血清型19A分离物的特性

此研究评估了希腊引入肺炎球菌结合疫苗(PCVs)前后,来自肺炎球菌疾病(PD)儿童的肺炎球菌血清型19A分离物的的流行率和特性。1986—2015年在一家大型儿科医院收集到的肺炎链球菌分离株,通过肺炎球菌荚膜肿胀试验进行血清分型,用Etest法测定其MICs。通过聚合酶链反应检测pbp基因的变化和mefA、 mefE、 ermB基因的存在与否。基因型通过多位点序列分型(MLST)进行评估。     

Sabin-IPV抗原性及免疫原性分析

目的比较3个不同厂家的Sabin-IPV抗原性及免疫原性特点。方法采用ELISA方法,利用血清型和抗原位点特异性的单克隆抗体检测Sabin株脊髓灰质炎病毒疫苗D抗原含量,分析疫苗相对D抗原含量和单克隆抗体的相对反应性,评估疫苗抗原性;利用大鼠体内效力试验分析Sabin株脊髓灰质炎病毒疫苗的免疫原性,评估疫苗效力。结果与英国国家c IPV标准品Pu91相比,3个厂家的Sabin株脊髓灰质炎病毒疫苗相对D抗原含量存在差异,其中C厂家的相对D抗原含量最高;3个厂家的血清Ⅰ型Sabin株脊髓灰质炎病毒疫苗抗原性差异无统计学意义;血清Ⅱ型中,除B厂家的Sabin株脊髓灰质炎病毒疫苗的抗原位点1的抗原性较弱以外,A、C其2个厂家的Sabin株脊髓灰质炎病毒疫苗抗原性差异无统计学意义;血清Ⅲ型中,3个厂家的Sabin株脊髓灰质炎病毒疫苗与抗原性差异有统计学意义。接种Sabin株脊髓灰质炎病毒疫苗的大鼠血清对Sabin株及Salk株病毒具有良好中和效力。结论除血清Ⅲ型外,血清Ⅰ型和Ⅱ型Sabin株脊髓灰质炎病毒疫苗的抗原性与疫苗免疫原性一致。ELISA检测疫苗抗原性的方法有望替代疫苗动物体内效力评价试验。     

MUTZ-3树突细胞对B型流感嗜血杆菌结合疫苗组分的应答

<正>对于疫苗注册和批签发而言,疫苗效力测定应该是指令性进行的,由于体内效力测定受到各种各样因素的限制,因此有必要采用相关的体外替代效力测定。这些替代试验应当最好包括来源于目标(人类)种系的细胞,针对人体体内发生的因免疫接种导致的一系列免疫应答是不可能通过使用单一细胞类型就可测定出来的,即使树突细胞能成为一种     

不同基础和加强免疫程序接种13价肺炎球菌结合疫苗的儿童体内抗荚膜多糖抗体量和功能性的比较

正不同国家会推荐使用不同的儿童13价肺炎球菌结合疫苗(PCV-13)的免疫程序,美国免疫实施咨询委员会(ACIP)已考虑将基础免疫3剂加1次加强免疫(3p+1 )改为基础免疫2剂加1次加强免疫(2p+1)来预防肺炎链球菌疾病。在本文中,作者报告了分别在2p、3p、15月龄时的前加强、18月龄时的后加强免疫后的血清样本通过ELISA和调理吞噬试验(OPA)测定IgG的结果。来自169名儿童4个研究时间点,每个时间点约100份,