聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦

等电聚焦也曾称为等电点分离、等电点划分、等电点分析、聚焦电泳等。1966年瑞典学者Vesterberg和Svernsson首先合成了两性载体电解质,并成功地用于肌红蛋白分离,使这方法具有实用价值。等电聚焦的先决条件就是要求有稳定的pH梯度。按照支持pH梯度的介质不同,可     

聚丙烯酰胺凝胶薄层等电聚焦

自Awdeh和Leaback等以聚丙烯酰胺凝胶作抗对流支持介质进行薄层等电聚焦以来,又出现过以Sephadex、Agarose、醋酸纤维素等作抗对流介质的报道。当前应用最多的是聚丙烯酰胺凝胶和Agarose凝胶,现以前者为例介绍方法的原理、操作和应用。     

一种简单、快速、微量聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法

Bio-Rad公司的微量聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳(ModelⅢ Mini IEF Cell),不需要使用电极缓冲液,聚焦电泳时间仅用1.5小时,效果甚佳,但要使用该公司专有的凝胶支持薄膜,难于推广应用,我们经过试验,建立了一种简单、快速的微量凝胶等电聚焦电泳方法,40min完成等电聚焦过程,采用快速染色、脱色和干燥,将电泳图谱制成透明的薄膜,整个过程可以     

一种改进的超薄聚丙烯酰胺等电聚焦电泳实验

目的:介绍一种自制、简易、高效的平板微型聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳方法。方法:将载玻片黏合作为制胶模具,剪滤纸制成上样芯子进行等电聚焦电泳。结果:电泳条带清楚,样品容量大,电泳时间短,操作性强。结论:此方法简单、有效、实用,所需凝胶量少,节约成本,值得推广。     

用银染色显示的rHuIFN-αD垂直板聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦电泳测定法

本文报道了用聚丙烯酰胺垂直凝胶板进行蛋白质等电聚焦的方法,用改进的银染法使测定灵敏度达到ng水平。通过分析蛋白质等电聚焦的影响因素,建立了稳定的电泳条件,并用该方法发现了重组人αD型干扰素(rHu IFN-αD)基因表达产物的带电荷不匀一性。     

豆血红蛋白的分离——聚丙烯酰胺凝胶板电泳方法

豆科植物根瘤的红色素是一种类似于血红球蛋白,Virtanen等把它定名为豆血红蛋白(leghemoglohin用缩写号Lb代表)。Lb存在于植物界中,     

人胎γGT的浓度梯度聚丙烯酰胺凝胶电泳与等电聚焦电泳分析

自Hanes描述γ-谷氨酰转肽酶(γ-Glutamyltranspeptidase),简称γ-GT,E.C.(2、3、2、2)以来,许多作者对哺乳动物、特别是对人(包括病人)的血清和某些组织的γ-GT进行了大量研究。但除人胎肝外,肾、脾、胰、十二指肠和胆汁中γ-GT,迄今国内、外报道尚少。本文比较了人胎肝、     

等电聚焦

蛋白质分子是带有电荷的两性生物高分子,其正、负电荷的数量是随分子所在环境的酸碱度而变化的。在电场存在下的一定pH缓冲液中,带正电荷的蛋白质分子将向负极移动;带负电荷的蛋白质分子将向正极移动,这就是电泳过程。在某一pH下,蛋白质分子在电场中     

超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法——介绍一种高效、快速的生物同工酶分析方法

介绍了一种简易、高效、快速的生物同工酶分析方法－－超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳 方法。该方法与目前国内外市场销售的同种用途等电聚焦产品（如ＢＩＯ－ＲＡＤ公司的ｍｏｄｅｌ１１Ｍｉｎｉ ＩＥＦ Ｃｅｌｌ）相比,具有以下优点：实验操作灵知,用途更广;谱带清晰;每次可实验的样本量大;电泳所需时间短;实验费用低;适用于多种酶系统的同工酶和等位酶分析;凝胶干燥不需任何设备且能长期保存;样本用量少。     

超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法--介绍一种高效、快速的生物同工酶分析方法

介绍了一种简易、高效、快速的生物同工酶分析方法——超薄平板微型聚丙烯酰胺凝胶的等电聚焦电泳方法。该方法与目前国内外市场销售的同种用途等电聚焦的产品 (如BIO- RAD公司的 model1 1 1 Mini IEF Cell)相比 ,具有以下优点 :实验操作灵活 ,用途更广 ;谱带清晰 ;每次可实验的样本量大 ;电泳所需时间短 ;实验费用低 ;适用于多种酶系统的同工酶和等位酶分析 ;凝胶干燥不需任何设备且能长期保存 ;样本用量少。     

简易聚丙烯酰胺凝胶干燥法

这里我们介绍一种简易聚丙烯酰胺凝胶干燥法,该法无需特殊设备,操作条件可灵活掌握。比已报道的凝胶干燥简易方法更为简便易行。操作如下: 1.用三合板或五合板锯成一个内边长为17厘米,外边长为23厘米的正方形木框。     

聚丙烯酰胺凝胶的蛋白质荧光染色法

十二烷基硫酸钠-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE),经常用于分离、鉴定蛋白质,测定肽链分子量。蛋白质在聚丙烯酰胺凝胶电泳后,一般用考马斯亮蓝法染色,其优点是操作简易,灵敏度较高。据我们的经验,最低检出量约为每一蛋白带0.5μg。此法的缺点是费时,染色及脱色要一昼夜,且染色后,许多蛋白质丧失抗原性及其它生物学活性。最近我们研究出蛋白质PAGE的荧光染色法,蛋白质样品在上胶前用荧光素标记,电泳后可立即在紫外光灯下看到清晰的蛋白带,其灵敏度不低于考马斯亮蓝法。现介绍如下。一、样品的荧光标记蛋白质样品用牛血清白蛋白(68,000)、卵白蛋白(44,000)、肌红蛋白(16,800)、溶菌酶(14,600)的混     

聚丙烯酰胺凝胶—并列抗体凝胶交叉免疫电泳

聚丙烯酰胺凝胶—琼脂糖凝胶交叉免疫电泳具有设备简单,操作方便和分辨力高等优点,为分析鉴定抗原,抗体以及它们之间的相互关系提供了较灵敏的手段。Van DerRiet 和 Viljoen 报告了另一种简便的免疫电泳法,从杂有多种抗原的混合物中检出特异性抗原:混合抗原在含有相应抗体的凝胶中电泳时产生免疫沉淀物,游离抗原继续自由地“滤过”该抗体凝胶,到达相邻的另一块空白凝     

北京鸭乳酸脱氢酶同工酶的研究 Ⅰ.薄层等电聚焦电泳分离北京鸭LDH同工酶

采用薄层等电聚焦电泳方法,把北京鸭乳酸脱氧酶同工酶区分为11条电泳区带,发现它们是一组等电点十分邻近的、范围在pH 6.0至8.0的中性蛋白质。     

微量聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳

聚丙烯酰胺凝胶作为电泳分离的支持物于1959年首次得到应用,而聚丙烯酰胺凝胶盘状电泳则是于1964年发展起来的。同年在分离脑蛋白时,首先应用了微量聚丙烯酰胺凝胶电泳。1965年有人将毛细管用于微量盘状电泳技术并报道了毫微克(ng)蛋白的分离及定量。     

单克隆抗体的等电聚焦

本文采用聚丙烯酰胺凝胶等电聚焦和Phast-system仪等电聚焦测定12份HBsAg McAb IgG的等电点,并对两种方法测定的误差和优缺点进行了讨论。