小儿肝豆状核变性41例临床分析

目的:分析小儿肝豆状核变性的临床特点.方法:对41例小儿肝豆状核变性患儿的临床表现和治疗作回顾性分析.结果:(1)首发症状以肝功能受损为主者36例,以神经系统受累为主者4例;同时以肝病和神经系统为主者1例(2)41例检查角膜K-F环,阳性3例,阳性率7.32%.(3)实验室检查谷丙转氨酶和24h尿铜均有不同程度的升高,铜蓝蛋白均降低.(4)肝损害严重时血氨常升高、尿有机酸分析、血氨基酸分析常有异常表现.结论:本病临床表现复杂多样,易被误诊,加深对本病的认识,对提高诊断水平及争取早期治疗具有重要意义.血氨、尿有机酸分析和血浆氨基酸分析可作为反映病情的指标.     

Wilson病基因产物及铜转运P型ATP酶的研究进展

肝豆状核变性（ＷＤ）基因已被克隆,序列分析表明,其基因产物（ＡＴＰ７Ｂ）编码的是一种衾中１４１１个氨基酸的铜转运Ｐ型ＡＴＰ酶。ＡＴＰ７Ｂ具有这些酶所独有的功能结构区：金属离子结合位点、阳离子转导区、ＳＥＨＰ序更及跨膜区等,ＷＤ基因高频突变位点多与这些结构有密切关系。对ＡＴＰ７Ｂ的深入研究将为探讨ＷＤ的发病机制及诊断和治疗提供帮助。     

基于转录组的肝豆状核变性调控网络的构建和分析

本研究旨在利用生物信息学方法构建经铜诱导的ATP7B基因敲除HepG2细胞系的转录调控网络。探讨关键转录因子在肝豆状核变性发生、发展中的潜在作用机制。收集公共基因表达数据库(gene expression omnibus, GEO)中包含野生型、ATP7B基因敲除型、铜诱导的野生型和铜诱导的ATP7B基因敲除型HepG2细胞系数据。筛选由铜诱导产生的差异表达基因(differentially expressed genes,DEGs)后进行基因本体论(gene ontology,GO)、京都基因和基因组百科全书(Kyoto encyclopedia of genes and genomes, KEGG)富集分析。基于蛋白相互作用网络,识别疾病关键基因和功能模块,并对关键功能模块中的基因进行富集分析。最后,构建转录调控网络,筛选核心转录因子。共筛选出1 034个差异表达基因,其中上调525个,下调509个。上、下调关键功能模块分别包括了3785个和3931个基因。关键功能模块中的基因主要定位于细胞-基质连接、染色体、剪接复合体、核糖体等区域,共同参与了mRNA加工、组蛋白修饰、RNA剪切...     

肝豆状核变性的不同临床表现

本文旨在通过对近一年来遇到的6例肝豆状核变性患儿的描写。指出该病的某些早期临床表现,从而早诊断,早治疗,改善愈后。 本组6例中男性1例,女性5例。年龄6—12岁。起病类型:神经系统症状者2例,肝炎者1例,溶血性贫血者1例,无症状者2例。6例中有1例的临床经过与暂时性血管内溶血伴急性肝脏衰竭相符。5例K-F环(+),全部病例的血清铜氧化酶活力测定均明显降低。病程半月至5年不等。2例死亡,1例症状改善,治疗后能上学,1例因家长放     

蛤蚧豆状核的结构及其与顶盖前端的纤维联系

运用Nissl法和辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)追踪标记技术,研究蛤蚧(Gekko gecko)豆状核的结构及其与顶盖前端的纤维联系。Nissl染色显示,蛤蚧豆状核细胞大小没有明显差别,由背内侧细胞密集部和腹外侧细胞稀疏部组成。将HRP注射于顶盖前端,结果豆状核背内侧部和腹外侧部分别接受同侧顶盖前端脑室内、外侧纤维的传入,核内标记有浓密的神经丛和大量纤维末梢,并在该核腹外侧部及其邻近区域发现少量大胞体标记细胞。推测豆状核腹外侧部的大胞体细胞及其邻近区域的大胞体细胞可能具有相同的功能,且该核可能形成离顶盖通路和副视系统相联系的交通要道。     

大鼠肝再生相关基因MafF与EGFP融合表达研究

以大鼠再生肝为材料成功克隆到肝再生相关基因MafF的开放阅读框(ORF).该ORF全长471 bp,编码由157个氨基酸组成的蛋白质.基因芯片研究表明,MafF 基因在部分肝切除后表达水平迅速升高.为了研究该基因在肝再生进程中的作用,构建其真核表达载体pEGFP-N1-MafF,在肝再生模型中进行融合表达.结果表明,转...     

人胚肝核基质的制备及发育过程中组分的动态变化

<正> 核基质(Nucleic matrix,NM)是指细胞核内的不溶性网络状骨架结构。随着细胞分裂与增殖;分化与癌变发生结构与功能的改变。研究表明,核基质与基因的复制、转录、RNA转运、修饰等重要核内过程密切相关;一些类固醇激素的受体亦定位在核基质上。本文以人胚肝为材料制备出核基质,对这一亚核结构作超微结构观察,并对处于发育过程中的人胚肝核基质非组蛋白(NHP)进行动态分析。     

重组HGF可抑制大鼠肝硬变的发生和发展

大阪大学医学部教授中村敏一等小组用大鼠实验证明,通过使用基因重组人肝细胞生长因子(rHGF)能抑制纤维变性和肝硬变,促进没有纤维化的肝再生。在大阪召开的第67届日本生化学会上发表了此成果。对人也一样,HGF能抑制慢性肝病患者晚期病态-肝纤维变性和肝硬变的发生、发展,有可能成为防止肝硬性盱功能不全的治疗药。 该小组给肝硬变模型大鼠(在腹腔内使用了低浓度的二甲基亚硝胺(DMN)而制成的)在改变条件的同时静脉注射用CHO细胞分泌生产的rHGF,探讨其在生存率、组织学、血液生化学等方面有无差异。与开始使用DMN同时连续使用rHGF,可明显地抑制肝纤维变性的发生。另外,在使用DMN导致肝纤     

B型尼曼-匹克病一例附文献复习

目的:报道一例B型尼曼-匹克病患者的病例资料,提高对该病的认识。方法:观察1例B型尼曼-匹克病患者的临床表现、骨髓涂片及骨髓活检结果,并进行相关的文献复习。结果:B型尼曼-匹克为自幼发病,无神经系统受损表现,伴有肝脾肿大、外周血三系降低,骨髓涂片及活检结果可见尼曼-匹克细胞。结论:尼曼-匹克病是一种罕见的鞘磷脂沉积性遗传性疾病,临床表现多样,骨髓、肝脾淋巴结病理及基因检测是确诊的关键方法,此病预后差,无特效治疗药物。     

Mmp2基因克隆及其对肝癌细胞的作用

克隆人基质金属蛋白酶-2基因(Mmp2)编码区并构建重组真核表达载体pEYFP-Mmp2,研究其在肝癌细胞中的作用。以肝癌细胞Hep G2的总RNA为模板,通过RT-PCR获得cDNA,并通过PCR获得Mmp2基因编码区。经TA克隆和测序鉴定将无任何突变的Mmp2基因编码区插入到真核表达载体pEYFPN1中,构建p EYFP-Mmp2重组真核表达载体并进行酶切鉴定和测序鉴定。pEYFP-Mmp2稳定性转染肝癌细胞,经G418筛选获得Mmp2稳转单克隆细胞株,并用Western blotting分析鉴定。用实时无标记细胞增殖分析技术(RTCA)分析Mmp2基因对肝癌细胞生长增殖的作用,细胞划痕愈合实验分析Mmp2基因对肝癌细胞迁移的作用。结果证明成功构建重组真核表达载体pEYFP-Mmp2,Western Blotting证实稳转株中高表达外源融合蛋白MMP2-YFP。细胞增殖和迁移结果表明,Mmp2基因可以抑制肝癌细胞增殖但能够促进肝癌细胞迁移。以上研究表明,Mmp2基因能够促进肝癌细胞迁移。     

何谓基因疗法?

问 :何谓基因疗法 ?答 :所谓基因疗法 ,就是采用分子遗传学技术 ,以相应的正常基因去代替有缺陷的基因 ,或选择地使有害基因失活。基因疗法有如下几种 :1)显微注射法　用显微注射 ,将脱氧核糖核酸(DNA)注入到靶细胞的核内 ,所注入的 DNA只要达到被注射细胞的 10 % ,即可形成稳定的新基因型 ;2 )同源重组　是通过基因交换 ,直接用新的基因片段 ,来代替有缺陷的基因片段 ;3)反转录病毒载体　是目前最盛行的 ,利用反转录病毒作载体 ,进行基因转移 ;4 )磷酸钙沉淀法　用于体外生物系统基因转移。基因治疗的首选对象是单基因遗传病 ,其中最主…     

视网膜色素变性遗传吗？

问:视网膜色素变性男方有,女方没有,对小孩的遗传几率有多大?在怀孕期间可以检查出来吗?患有视网膜色素变性的患者后期会怎样?目前可以治疗吗?     

研究发现：基因诱导让癌细胞“弃恶从善”

采用肝细胞核因子4a对肝肿瘤细胞进行诱导分化．通过基因疗法可使肝癌细胞“弃恶从善”．变成正常细胞。二军医大附属长征医院谢渭芬教授领衔的课题组首次提出肝细胞核因子4a（HNF4a）可诱导肝肿瘤细胞转化的思想．在治疗肝癌方面取得突破性进展。     

小蘖碱抑制游离脂肪酸诱导小鼠肝实质细胞脂肪变性

目的:探讨小蘖碱(Berberine)对游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)诱导的小鼠肝实质细胞脂肪变性的影响。方法:胶原酶灌注分离BALB/c小鼠原代肝实质细胞并体外培养。分对照组,高脂组,高脂加小蘖碱处理组。体外测定细胞内甘油三酯的含量。利用油红染色观察细胞的脂肪样变性。通过Western印迹法检测肝实质细胞内MAPK相关信号通路磷酸化的变化。实时定量PCR检测肝实质细胞中与脂肪化密切相关的mi R-122的表达和相关靶基因的表达改变。结果:与高脂组比较,小蘖碱处理组肝实质细胞内甘油三酯含量降低,脂肪颗粒减少,脂肪变性明显改善,并具有明显的剂量效应,小蘖碱能够抑制FFAs诱导的JNK通路磷酸化。Q-PCR结果表明小蘖碱能够促进肝实质细胞内mi R-122的表达,并降低脂肪化相关基因Dgat2的表达。结论:小蘖碱能够显著改善高脂诱发的肝脂肪变性,抑制JNK通路磷酸化,其机制可能同mi R-122通路相关。     

模拟强日光短时间照射导致兔视网膜细胞凋亡的实验研究

目的:探讨模拟强日光短时间照射导致兔视网膜细胞凋亡的病理学改变的特征及其发生机制。方法:10只健康新西兰白兔按是否给予30000lx模拟日光照射30min随机均分为正常组和光照组;采用常规HE染色与TUNEL技术对光损伤后视网膜细胞的病理学改变进行观察。结果:光照组2d时视网膜细胞发生退行性变性,TUNEL标记结果显示光损伤后视网膜内、外核层出现大量阳性着色细胞。结论:模拟强日光短时间照射可导致视网膜细胞发生退行性变性,凋亡是视网膜内、外核层细胞退行性变性的重要发生机制。     

核质互作型雄性不育的机理

雄性不育性,其中一种是由于核基因和胞质基因共同作用决定的,故称为核质互作型雄性不育性. 这种雄性不育性的遗传物质基础是细胞质中胞质基因发生了突变,也就是Pr~+(能育)突变成Pr~-(不育).核基因Rf(能育)突变rf(不育).基因组合Pr~-(rf rf). 胞质基因与核基因如何互作而使雄性不育呢?学者们研究得比较深入的还是玉米雄性不育性遗传.核基因在玉米的第一对染色体上位点是23,为隐性遗传.胞质基因有的是在线粒体上.线粒体的化学成分有单链环状DNA,据有人研究,有mRNA,还有rRNA.他们相互关系的模型如图1. 线粒体蛋白M是保证线粒体结构的正常蛋白质;Ps是线粒体上合成M的结构基因;pr~+是     

核受体相关因子1的研究进展

核受体相关因子 1(nuclearreceptor relatedfactor 1,Nurr1)是一种转录因子 ,属于核受体超家族成员 ,主要表达于中脑黑质与腹侧被盖区 ,作为基因转录调控蛋白而参与了中脑多巴胺能神经元的发育与存活、长时记忆、肝再生及炎症等多种生理和病理过程。本文总结和讨论了有关Nurr1的编码基因、分子结构、组织表达及生物学功能等方面研究的新近进展     

大鼠肝tRNA^Ile基因在大肠杆菌中的表达及分离纯化

利用Ｔ７ＲＮＡ聚合酶／启动子表达系统在大肠杆菌ＪＭ１０９（ＤＥ３）中表达化学合成的大鼠肝ｔＲＮＡ＾Ｉｌｅ基因,经酚抽提,ＤＥＡＥ－５２离子交换柱层极及ＰＬＣ层析,分离纯化大鼠肝ｔＲＮＡ＾Ｉｌｅ,变性聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｎｏｐｒｔｈｅｒｎ－ｂｌｏｔ鉴定表明,大鼠肝ｔＲＮＡ＾Ｉｌｅ基因成功地获得表达,氨酰化活性检测表明,纯化后,每１Ａ２６０（４０μｇ）的ｔＲＮＡ＾Ｉｌｅ可负载约６５０ｐｍｏｌ的Ｉｌｅ     

染色质研究的过去和将来

第一,分化的真核细胞中转录基因和不转录基因有什么不同?基因为正常核小体结构,该基因不转录。不过正在进行转录的基因(例如卵管的卵清蛋白基因),已转录的基因(例如红血球的珠蛋白基因)的     

排除法PCR加变性梯度凝胶电泳鉴别未知基因

通过鉴别未知的cry4亚组基因来确定排除法PCR加变性梯度凝脉电泳新方法。方法：应用排除法PCR的组基因和亚组基因引物扩增杀蚊毒素基因,cry4。这些引物是根据已知的cyr4基因的共有或特有DNA片段来设计的。组基因引物扩增产物被用于变性梯度凝胶电泳。平行变性梯度凝胶是由8％的聚丙烯酰胺加上20％到80％的变性剂组成。结果：已知的和未知的cry4来组基因被组基因引物扩增的产物在变性梯度凝胶电泳被分离开。尽管它们之间仅有两个碱基对不同（T在位置224和G在位置394）。应用组基因和亚组基因引物扩增,新发现的基因可被分类到次亚组基因水平。从5个苏云金芽孢杆菌亚菌中发现三个未发表的cry4亚组基因。结论：排除法PCR加变性梯度凝胶电泳是一个高度敏感、特异性和可靠性强的新方法,可用于鉴别各种未知的亚组基因。