INOS和ET在脊髓损伤组织中的表达

目的:探讨脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)后,诱生型一氧化氮酶(Inducible nitric oxide synthase,INOS)与内皮素(Endothelin,ET)的表达情况.方法:Wistar大鼠36只,随机分成3组,为正常对照组、轻(中)度损伤组和重度损伤组.大鼠在脊髓损伤后14天处死.应用S-P免疫组化法检测INOS和ET表达情况.结果:正常组几乎未见INOS和ET表达.在损伤14天后,轻(中)度脊髓损伤和重度脊髓损伤中的INOS的阳性率分别为14.8%和59.3%,两组有显著性差异(P=0.004). ET的阳性率分别为11.1%和51.9%,两组有显著性差异(P=0.013).结论:INOS与ET参与了大鼠脊髓损伤过程,并且与损伤程度相关.     

慢性溴氰菊酯摄取对大鼠胃黏膜损伤及P物质的表达的影响

目的:探索溴氰菊酯慢性中毒对大鼠胃黏膜的病理损伤及损伤后P物质表达的影响.方法:实验组大鼠分别给予不同荆量溴氰菊酯灌胃,对照组仅给予橄榄油.取胃体部组织,制成石蜡切片,HE及免疫组织化学染色,镜下观察胃黏膜损伤及胃黏膜组织P物质的表达情况,并对损伤程度进行累计积分、壁细胞计数.结果:高剂量组大鼠胃粘膜慢性损害病理积分与各组相比差异均有显著性(P＜0.05);壁细胞计数与对照组相比较其差异有P＜0.05).免疫组化发现SP在实验组大鼠胃黏膜组织中呈强阳性表达,在对照组则呈弱阳性表达;平均光密度(OD)值显示高、中剂量组之间及与其余各组之间差异均有显著(P＜0.05l.结论:溴氰菊酯对大鼠胃黏膜有较明显的慢性损伤,SP可能参与胃黏膜局部病变.     

姜黄素对大鼠脊髓损伤后后肢功能恢复的作用机制

目的:观察姜黄素(CUR)对大鼠脊髓损伤后的运动功能的影响,并探讨其对大鼠脊髓损伤的神经保护作用机制,为临床治疗脊髓损伤提供理论和实验依据。方法:采用HI-0400脊髓打击器制备脊髓急性打击损伤动物模型。将105只SD健康清洁级大鼠随机分为3组:假手术组(Sham)、脊髓损伤组(SCI)、姜黄素组(SCI+CUR),在脊髓损伤模型建立后30 min灌胃,以后每天灌胃1次,直到处死为止。SCI+CUR组0.5%羧甲基纤维素钠制备姜黄素(100 mg/kg)灌胃,Sham组与SCI组同等剂量的0.5%羧甲基纤维素钠灌胃。应用BBB评分评估大鼠术后3d,7 d,14 d,21 d和28 d后肢运动功能恢复的情况;分别在术后12 h、1 d、3 d和7 d天取脊髓组织和血液,通过免疫荧光法检测NF-κB,免疫组化发检测Bcl-2、Bax及Caspase-3蛋白,Elisa法检测Bcl-2、Bax蛋白的表达。结果 :BBB评分中3 d时SCI+CUR组与SCI组时无明显差异,7 d、14 d、21 d和28 d SCI+CUR组得分高于SCI组,其差异具有统计学意义(P0.05);炎症因子NF-κB的表达于脊髓损伤后12 h出现,1 d达高峰,3 d下降。SCI+CUR组中NF-κB在各个时间点的表达与SCI组出现的时间点相对应,SCI+CUR组少于SCI组;Sham组无明显的Bax及Bcl-2蛋白染色。SCI+CUR组中Caspase-3及Bax染色明显较SCI组减弱,而Bcl-2较SCI组增强。结论:姜黄素可以促进大鼠脊髓损伤后后肢运动功能的恢复,其作用机制是通过抑制NF-κB而阻止炎症发生;并通过抑制Bax、Caspase-3的表达,促进Bcl-2的表达来抑制细胞凋亡,从而促进了大鼠脊髓损伤后的运动功能恢复。     

环氧化酶-2和CD44v6蛋白在宫颈鳞癌中表达及临床意义

探讨环氧化酶-2(cyclooxy-genase-2,COX-2)和CD44v6蛋白在官颈上皮内瘤样病变(CIN)和浸润宫颈鳞癌(ICC)中的表达及其意义.应用免疫组织化学方法,检测45例ICC、25例CIN和10例正常宫颈组织(NCE)中COX-2和CD44v6蛋白的表达水平,并结合临床病理特征进行分析.结果表明,在ICC、CIN和NCE中,COX-2蛋白表达阳性率分别为82.2%(37/45)、40%(10/25)和0%(0/10),差异有显著性(P＜0.05);CD44v6蛋白表达阳性率分别为88.9%(40/45)、44%(11/25)和20%(2/10),差异有显著性(P＜0.05).COX-2和CD44v6蛋白表达与ICC的分化程度和淋巴结转移相关(P＜0.05),但与临床分期无关(P＞0.05).COX-2和CD44v6可能参与了调控ICC的发生、发展过程,其高表达预示ICC预后不良.     

蛇毒神经生长因子对大鼠脊髓损伤后Caspase-3表达影响

目的 探讨大鼠脊髓损伤后应用蛇毒神经生长因子对Caspase-3表达的影响.方法 将55只成年SD雄性大鼠随机分为蛇毒神经生长因子组（A组）、生理盐水组（B组）、假手术组（C组）,按改良Allen打击法建立大鼠脊髓不完全损伤模型,通过动物神经运动功能BBB评分评价神经损伤程度及神经功能恢复情况;脊髓损伤后不同时间点（6 h、1 d、3 d、7 d、14 d）取材,HE染色观察损伤脊髓组织病理变化,免疫组化染色检测Caspase-3阳性细胞的表达,来比较分析两组的差异性.结果 HE染色镜检发现脊髓组织病理学改变A组明显轻于B组;BBB评分A组相对B明显提高,差异有显著性意义（P〈0.05）.A组和B组均发现凋亡细胞及Caspase-3表达,神经细胞凋亡指数及Caspase-3表达均为B组〉A组（P〈0.05）.结论蛇毒神经生长因子能抑制大鼠脊髓损伤后Caspase-3表达及细胞凋亡,能改善脊髓损伤后的功能表现.     

hMLH1、P27、P53的表达及其在宫颈癌发病中的意义

目的 了解宫颈癌中hMLH1、P27、P53表达情况及其与宫颈癌发生和发展的关系.方法 采用免疫组织化学技术SP法检测临床资料较完整的72例子宫颈鳞癌和31例慢性宫颈炎组织hMLH1、P27、P53蛋白表达.结果 （1）hMLH1在宫颈炎及宫颈癌组的表达率分别为61.3%和58.3%,差异无显著性（P＞0.05）;hM-LH1在宫颈癌各期中表达率分别为Ⅰ期60.0%,Ⅱ期52.6%,Ⅲ期33.3%,差异无显著性（P＞0.05）;hMLH1表达率与宫颈癌分级无关（P＞0.05）;（2）P27在宫颈炎及宫颈癌组的表达率分别为74.2%%和76.4%,差异无显著性（P＞0.05）;P27的表达率与宫颈癌分级和分期无关（P＞0.05）;（3）P53在宫颈炎及宫颈癌组的表达率分别为32.3%和65.3%,差异有显著性（P＜0.05）;P53在宫颈癌各级中的表达率分别为Ⅰ级36.4%,Ⅱ级73.0%,Ⅲ级67.9%,Ⅰ级与Ⅱ、Ⅲ级的表达率差异有显著性（P＜0.05）;P53表达率与宫颈癌分期无关（P＜0.05）;（4）hMLH1表达阳性与阴性的宫颈癌中P27的表达率为94.6%和60.0%,差异有显著性（P＜0.05）;P53的表达率为62.8%和62.1%,差异无显著性（P＞0.05）.结论 P53基因突变与宫颈癌的发生和组织分化程度有关;hMLH1与P27表达缺失和宫颈癌发生的关系尚不确切.hMLH1可能使宫颈癌中P27表达上调,而对p53基因突变累积无明显抑制作用.     

新生儿缺氧缺血性脑病患儿外周血CD25表达

目的 探讨新生儿缺氧缺血性脑病(HIE)患儿外周血CD25表达.方法 应用生物素-链霉亲和素(BSA)法检测新生儿HIE患儿及足月正常新生儿出生后第1、7天外周血CD25水平.结果 HIE患儿生后第1天静息期和诱导期CD25水平分别为(3.7±1.2)%和(22.4±6.5)%,与正常对照组相比,差异有显著性(P＜0.05);随着通气、换气等综合性治疗时间的延长,患儿缺氧缺血症状逐步改善,生后第7天静息期和诱导期CD25水平分别为(4.1±1.5)%和(25.3±7.2)%,与正常对照组相比,差异无显著性(P＞0.05).其中HIE(重度)患儿静息期和诱导期CD25水平均较低,与正常对照组相比,差异有显著性(P＜0.01,P＜0.05).结论 HIE患儿存在一定程度的细胞免疫功能紊乱,主要表现为外周血CD25水平降低,并与HIE严重程度有关.     

免疫球蛋白G(IgG)对急性颈髓损伤大鼠模型神经炎症反应的抑制效应

目的:探讨免疫球蛋白(immunoglobulinG,IgG)对大鼠脊髓损伤(spinal cord injury,SCI)模型神经炎症的抑制效应.方法:60只雌性Wistar大鼠接受C7-T2椎板切除术后随机分为三组,空白对照组,盐水安慰剂组,IgG治疗组,每组各20只动物.创建盐水安慰剂组和IgG治疗组动物的C7-T1节段脊髓损伤模型,空白对照组动物不进行SCI模型的创建.盐水安慰剂组以单剂量0.4g/kg体重在SCI模型重建后15 min静脉注射入动物体内,而安慰剂组动物静脉注射lmL无菌盐水.实验动物SCI模型创建后4h处死动物进行细胞因子和趋化因子的酶联免疫检测,24 h处死动物采用westem blot技术进行MMP-9的蛋白表达检测分析.结果:SCI后4h,相比空白对照组,盐水安慰剂组动物的TNF-α,IL-1β及IL-6等炎性介质的表达水平显著升高,IgG治疗组的炎性介质水平也有一定程度升高,但均显著低于盐水安慰剂组,差异有统计学意义(P＜0.05);盐水安慰剂组和IgG治疗组的MCP-1和CINC-1的蛋白表达水平均显著高于空白对照组(P＜0.05),但相比IgG治疗组,盐水安慰剂组的MCP-1的蛋白表达水平显著更高(P＜0.05)而CINC-1的蛋白表达水平在安慰剂组和IgG治疗组间差异无统计学意义(P＞0.05).SCI后24 h,安慰剂组动物的MMP-9水平显著升高,而空白对照组动物标本中未检测到MMP-9表达.而IgG治疗组动物的MMP-9水平显著低于盐水安慰剂组,差异有统计学意义(P＜0.05).结论:SCI大鼠采用IgG治疗后会显著降低TNF-α,IL-1β,IL-6,MCP-1以及MMP-9等介质的表达水平,表明IgG在SCI中可能具有神经保护效应.     

Neuritin对大鼠急性脊髓损伤后神经中丝作用的研究

目的:探讨Neuritin对大鼠脊髓损伤后神经元突起再生的作用.方法:分为Neuritin组,His组和假手术组.使用改良Allen's打击法打击Neuritin组和His组大鼠T10或T11节段脊髓.Neuritin组和His组经蛛网膜下腔置管局部连续给予Neuritin和His蛋白(6ug/d)一周.假手术组仅咬除椎板不损伤脊髓,经蛛网膜下腔置空管而部损伤脊髓.术后6h、3d、7d、14d、28d、56d分别观察:①运动功能评分(BBB评分)观察大鼠后肢运动功能恢复情况;②HE染色观察脊髓组织形态学变化;③免疫组织化学染色和Western blotting检测损伤段脊髓神经中丝蛋白(NF200)的修复与再生.结果:①BBB评分,Neuritin组和His组在一周内没有明显差别,但Neuritin组和His组的评分均低于假手术组,从术后第14d,实验组评分明显高于对照组(P＜0.05);②HE染色可见损伤段脊髓出血、坏死及炎性细胞浸润;③免疫组化检测,Neuritin组的NF200平均光密度值(IOD/AREA)较His组明显增高(P＜0.05);Western blotting检测的NF200灰度值(GMD)较His组明显增高(P＜0.05),结论:持续外源性Neuritin能促进大鼠脊髓损伤后伤区神经元突起的再生,并能促进大鼠后肢运动功能的康复.     

姜三七对子宫肌瘤大鼠子宫组织细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响

目的:探究姜三七对子宫肌瘤大鼠子宫组织细胞凋亡及Bcl-2、Bax蛋白表达的影响。方法:选取SPF级雌性SD大鼠60只,随机分为对照组、模型组、姜三七组,每组20只。模型组和姜三七组给予黄体酮注射液和苯甲酸雌二醇注射液腹腔注射,16周后建立大鼠子宫肌瘤模型,对照组给予等量生理盐水腹腔注射。模型建立后,姜三七组予0.1 g/ml的姜三七混悬液10 ml/kg灌胃,正常对照组和模型组给予等量生理盐水,每日一次,4周为一个疗程,治疗3个疗程。治疗结束后,对比各组大鼠子宫湿重、子宫系数、子宫组织ER(雌激素受体)、PR(孕激素受体)、细胞凋亡率以及Bcl-2、Bax蛋白的表达情况。结果:(1)与对照组比较,模型组大鼠的子宫湿重、子宫系数明显升高,而姜三七组大鼠子宫湿重、子宫系数明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05);(2)与对照组(30%)比较,模型组大鼠子宫组织ER的阳性表达率(90%)明显较高,姜三七组大鼠子宫组织ER的阳性表达率(75%)明显低于模型组,差异均有统计学意义(P0.05);(3)模型组大鼠子宫组织PR的阳性表达率(80%)明显高于对照组(30%),而姜三七组大鼠子宫组织ER的阳性表达率(35%)明显低于模型组,差异有统计学意义(P0.05);(4)模型组大鼠子宫组织细胞凋亡率低于对照组、Bax阳性细胞表达明显低于对照组,Bcl-2的阳性表达明显高于对照组,姜三七组大鼠子宫组织Bax的阳性表达与模型组比较明显增强,Bcl-2的阳性表达及细胞凋亡率明显降低,差异有统计学意义(P0.05)。结论:姜三七能够降低子宫肌瘤大鼠子宫组织细胞凋亡、ER、PR及Bcl-2的表达,增强Bax蛋白表达。