eATP——植物细胞外的信使分子

对近年来植物细胞外ATP生理功能和信号转导机制的研究进展作介绍。     

细胞凋亡中的关键蛋白酶—Caspase—3

在哺乳动物细胞凋亡执行阶段起重作用的一系列半胱氨酸蛋白酶基因相继被克隆。Ｃａｓｐａｓｅ－３（又称ＣＰＰ３２,Ｙａｍａ,ａｐｏｐａｉｎ）被认为是各种凋亡刺激因子激活的ｃａｓｐａｓｅ家族中的关键蛋白酶,活性ｃａｓｐａｓｅ－３可作用于一些其他ｃａｓｐａｓｅ成员,并降解凋亡细胞中的某些蛋白质。Ｃａｓｅｐａｓｅ－３抑制物是细胞凋亡抑制剂,有希望成为治疗因细胞过度死亡所致相关疾病的重要分子。     

c—Myc和细胞凋亡

c-myc的表达产物c-Myc可诱导细胞凋 亡。c-Myc诱导的细胞凋亡发生在细胞周期的不同时期,并与细胞的种类、细胞的生长条件以及引起c-Myc不当表达的原因等相关。c-Myc起介导凋亡的作用,可能主要影响凋亡的起动。c-Myc先和Max结合形成异二聚体Myc-Max,再经Myc-Max和DNA结合控制诱导凋亡所需要的转录而对凋亡进行调控。c-Myc诱导凋亡的方式有“矛盾模型”和“双重信号模型”。另外,还受p53和ROS等的影响。     

NaveT细胞转变为记忆型细胞—T细胞自稳态

在自配体凋亡信号协同作用中过程中,会产生微弱的T细胞抗原受体(TCR)信号,它被白细胞介素7(IL-7)介导后,可激活休眠状态的Naive T细胞。在低于可诱导进入细胞周期的强度下,Naive T细胞中的TCR数量是由胸腺细胞TCR协调控制的。高浓度的IL-7和其他共同的g链细胞因子的共刺激下,就能介导T细胞经过自稳态增殖并转变为记忆细胞,许多记忆细胞都是由细胞自身免疫反应产生的。在生理状态正常的动物中,由休眠中的Naive T细胞向TCR依赖型记忆T细胞转化的分子机制,逐渐的开始被人们所认识。     

PHA—T细胞条件培养液对白血病细胞的作用

本文研究了培养18h收获的PHA-T细胞条件培养液(PHA-TCM)对人白血病细胞系HL-60和U937的作用。结果表明,PHA-TCM能够显著地抑制U937细胞的增殖,并能降低其~3H-TdR摄入能力和自发集落形成能力。而且,经PHA-TCM作用一定时间后,部分U937细胞获得了NBT还原能力和乳胶颗粒吞噬能力。与此相反,PHA-TCM对HL-60细胞无此作用,提示PHA-TCM对白血病细胞增殖的抑制具有某种选择性。     

SARS—CoV感染Vero E6细胞诱导细胞凋亡

为了确定SARS冠状病毒(SARS—CoV)感染Vero E6是否引起细胞凋亡,我们利用细胞DNA琼脂糖电泳,感染细胞的间接荧光染色和Hoechst 33258细胞核染色,以及流式细胞仪分析等方法证明了SARS-CoV感染的Veto E6具有典型的凋亡细胞学和生物化学特征。实验证明具有细胞凋亡特征的所有细胞均为处于感染晚期的细胞。表现明显细胞病变(CPE)的细胞大多已经出现核质凝缩或形成凋亡小体进入细胞凋亡的过程。可以断定SARS-CoV感染Vero E6细胞诱发了细胞凋亡。     

MMP—26及其抑制剂—4在正常人细胞滋养层细胞与绒癌细胞系JEG—3中的表达

基质金属蛋白酶（MMPs)及其组织抑制（TIMPs)的平衡对于维持正常生理过程（如胚胎植入）是至关重要的。MMPs和TIMPs之间平衡机制调节的缺失将会导致肿瘤的转移和发展,近年来,MMP－26和TIMP－4相继被克隆鉴定,但是它们的功能,尤其是在正常胎盘建成和绒癌的功能仍属空白,本应用免疫细胞化学,免疫印迹,酶谱分析,RTPCR和Northen blot等方法检测了二在人早孕细胞滋养层细胞（Cyto)和绒癌细胞系JEG－3中的表达,免疫细胞化学和免疫印迹研究显示,MMP－26在JEG－3中的表达显高于在Cyto中的表达,TIMP－4在JEG－3中的表达显高于在Cyto中的表达（P＜0．05）;酶谱分析表明：Cyto中MMP－26水解明胶的活性明显低于JEG－3中MMP－26和TIMP－4的mRNA表达,并且MMP－26 mRNA在JEG－3中的表达显高于在Cyto中的表达（P＜0．05）,以上结果表明,MMP－26和TIMP－4在与正常妊娠和肿瘤转移浸润等有关组织重建过程中起着一定的作用。     

叶绿体中的细胞色素b—559

细胞色素b-559是由叶绿体基因编码α,β亚基为单位构成的一种血红蛋白,是光系统II反应中心的重要组分。以叶绿体为实验材料的研究表明,细胞色素b-559可通过还原变化调节光系统Ⅱ的光抑制敏感性,并对发生在供体侧和受体侧抑制的光系统II反应中心具有保护作用,但对整体植物在生理条件下的作用却未得到证实,这也正是今后需要研究的问题。     

生物工程新工具—植物精细胞

随着现代生物技术的进步和发展,寻求新的生物工程工具是人们普遍关心的重要课题。植物原生质体是迄今建立的较理想的生物工程实验系统,以往这方面的研究着眼点在于体细胞原生质体。最近几年,植物生殖系统中的原生质体开发和利用受到了日益关注,其中,植物精细胞的离体操作是当前植物生殖细胞工程高技术研究的热点之一,迄今已从十多种被子植物中分离出生活精细胞。     

细胞色素c_3——生物体内的电子载体

五十年代初人们才认识到c型细胞色素不仅存在于好氧生物体内,也存在于光合细菌中。1954年Posgate和Ishimoto几乎同时在各自的实验室内,从硫酸盐还原细菌中(Desulfo-vibrio)获得一类新型细胞色素c,称之为细胞色素c_3,它与线粒体细胞色素c相比,具有以下显著特征:1)有较低的标准氧化还原电位,通常在-210mV左右;2)每分子细胞色素c_3至少含有两个血红素。随着研究的深入,人们相继在光合细菌和蓝绿细菌中也发现细胞色素c_3的存在,它的结构与细胞色素c有很大不同,在生理电子传递链上也行使不同的功能,特     

内体—溶酶体运输及其细胞功能

哺乳动物细胞中,内吞作用通过质膜内陷形成囊泡来摄取外界物质,经早内体到达晚内体/溶酶体降解或经再生循环回到质膜。内体运输网络参与细胞一系列重要生命活动,如信号通路调节、细胞器发生以及胞吐作用等。近年来发现Aps、BLOCs、HOPS和ESCRTs等复合体共同参与货物由胞内体到溶酶体或溶酶体相关细胞器的运送。该文主要就这些内体—溶酶体运输系统中重要蛋白复合体的组成和功能进行综述。     

P—gp和细胞容积调节

本实验用基因阻抑技术阻抑牛眼睫状体非色素上皮(NPE)细胞MDR1基因表达,在激光共聚焦显微镜下检测细胞MDRI基因产物P-gp免疫荧光,研究MDRI基因及P-gp与细胞容积调节的关系。结果表明:NPE细胞表达MDR1基因,存在P-gp蛋白。人反义MDR1特异性阻抑NPE细胞MDR1基因表达,剂量依赖性抑制P-gp免疫荧光(r=0.95,P<0.01),减少P-gp合成,导致细胞容积调节减弱,鼠反义MDR1对NPE细胞MDR1基因表达及容积调节没有影响。结果提示P-gp在细胞容积调节中起重要作用。     

IL—6诱导肝癌细胞BEL—7402细胞凋亡及其Ca^2＋转导机制

白细胞介素－6（interleukin-6,IL-6）具有直接或间接的抗肿瘤活性,本组在以前的体内外实验中证明其具有明显的抑制肝癌作用。本文主要报告应用流式细胞仪和共聚焦显微镜检测IL－6对肝癌细胞（BEL－7402）凋亡的作用和该过程中Ca^2 转导机制。生长曲线描绘以及MTT分析结果表明,IL－6（6000u/ml）作用于BEL－7402细胞24小时后,生长抑制率达12％左右,而流式细胞仪结果显示IL－60（6000u/ml）作用于BEL－7402细胞24小时后,BEL－7402细胞凋亡率达8.2％。流式细胞仪分析还表明,IL－60（6000u/ml）作用于BEL－7402细胞24小时后,对照组平均FTTC荧光值为1.03而IL－60（6000u/ml）组为0.759,也就是说,IL－6引起了bcl－2基因表达下降。激光共聚焦显微镜测定表明,IL－60（6000u/ml）作用于BEL－7402细胞后,胞浆[Ca^2 ]c升高达2倍。若事先加入TC（thapsigargin),15min后再加入IL－6,则抑制了胞浆内[Ca^2 ]c升高;事先10min或5min分别加入EGTA和普鲁卡因（procaine）也有同样的抑制作用。上述结果表明,IL－6在一定剂量下可以诱导肝癌细胞BEL－7402发生细胞凋亡,该凋亡过程可能与Ca^2 转导及bcl-2基因表达下调有关。     

人β干扰素重组质粒导入CHO—dhfr^—细胞

采用磷酸钙共沉淀技术,将人β干扰素编码区基因片段与pSV_2-dhfr载体质粒SV40早期启动子下游60碱基对(bp)处重组的pSVEHβ_1质粒导入中国仓鼠卵巢细胞二氢叶酸还原酶缺陷型株,简称CHO-dhfr~-细胞。共转化后,于选择培养基中长出的265个细胞克隆中随机挑出13株细胞克隆进行表达水平检测,其中7株细胞有表达,表达阳性细胞克隆株占54％,共转化率为1.33×10~(-4)。     

细胞社会学—从细胞生物学研究个体发育的一条途径

前言一、提出细胞社会学的实验基础1.过去关于决定和分化的理解2.我们的离体实验 a.解离实验 b.表皮囊实验3.为什么决定和分化要在细胞团之内进行? a.肌节发育中的细胞连接 b.佛波酯处理的实验4.由以上实验引出的一些理论思考     

受体相互作用蛋白3——细胞凋亡与坏死的调节阀

综述了受体相互作用蛋白(RIPs)蛋白结构和RIP3调控细胞凋亡与坏死机制的研究进展．受体相互作用蛋白3(receptor-interacting protein 3, RIP3)是丝/苏氨酸蛋白激酶家族成员之一,该蛋白质家族包含一类高度保守的丝/苏氨酸激酶结构域．RIP家族激酶作为细胞应激传感分子,在调控细胞凋亡、细胞坏死和存活通路中发挥重要作用．近年发现,RIP3参与肿瘤坏死因子TNFα诱导的细胞程序化坏死的生物学过程．认识RIP3调控TNFα诱导的细胞凋亡与坏死不同死亡途径转换的分子机制,有助于发现肿瘤治疗的新策略．     

酵母细胞生物转化反式—肉桂酸生产L—苯丙氨酸的研究

据文献调查,搜集了国内可能相关的30株酵母,进行生物转化反式-肉桂酸(t-Ca) 生产L-苯丙氨酸 (L-Phe) 的微生物筛选研究,并对部分菌株生物转化能力,即苯丙氨酸解氨酶 (PAL,EC _(4、3、1、5) 活性水平进行了初步评估。筛选结果是:22株酵母具有转化 t-Ca 生成 L-Phe 的能力,转化率在2—67％范围。选出7株酵母研究在液体培养条件下细胞生长和PAL活性的时间过程关系,PAL 活性范围在 2.3—14.4x10~(-s)u/m g细胞干重。深红酵母 (Rhodotorularubra) AS2.166作为生物转化制备实经菌株,在静止细胞和固定化细胞批式反应条件下,结果获得L-Phe分离产率分别为42.0％,28.7％。