同工酶技术及其优化

同工酶电泳法是一种常用的遗传多样性分析方法,具有成本低、耗时少和操作简单等优点。主要介绍了同工酶电泳法,过氧化物酶、酯酶和超氧化物歧化酶的染色技术,以及同工酶电泳的优化方法,以促进同工酶电泳分析技术在生物学、食品和制药等各领域的应用。     

金针菇品系间酯酶同工酶标记筛选研究

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直板状电泳,研究了不同生长发育期,不同组织对金针菇酯酶同工酶电泳表型的影响,筛选出不受生长发育期及常规培养条件等影响的酯酶标记区带。标记区带分所有品系的出现的基本带和部分品系出现的识别带。酯酶同工酶标记区带电泳表型显示出多态性。     

家蚕不同组织酯酶同工酶的研究

本文报导采用聚丙烯酰胺板状电泳研究了八种家蚕品系分别对肠壁、外皮、脂肪体、丝腺、血液五种组织器官进行了酯酶的比较研究。且用岛津双波长薄层色谱扫描仪-CS-900电泳扫描。同一块凝胶板泳动率一致,重现性是获得良好结果的关键。     

北京鸭乳酸脱氢酶同工酶的研究——Ⅱ.薄层等电聚焦电泳鉴定北京鸭LDH同工酶

对薄层等电聚焦电泳所分离的北京鸭乳酸脱氢酶(LDH)同工酶11条电泳区带,经热稳定性实验和低浓度尿素抑制实验鉴定发现,LDH 1是由5条亚带组成的,LDH 2和LDH 3也各由两条亚带组成。对这种LDH同工酶亚带的产生原因,进行了初步探讨,认为可能是蛋白质亚基在翻译后受到某种化学修饰所造成的。     

AST同工酶的琼脂糖凝胶电泳NBT显色法

分布于细胞内线粒体及细胞质中的天门冬氨酸氨基转移酶(AST·EC·2·6·1·1)是人血清中含有的两种同工酶,分别称为AST-m和AST-c同工酶.AST-c电泳迁移率介于血清α-球蛋白与β-球蛋白之间.AST-m电泳迁移率相似于γ-球蛋白,琼脂糖凝胶电泳固蓝B染色法对m-AST检出率较低.用NBT显色法则可得到较好效果.     

冬瓜杂种一代及其亲本的同工酶比较研究

对冬瓜芽期子叶的酶提取液进行聚丙烯酰胺凝胶电泳,分析了过氧化物酶（ＰＥＲ）、酯酶（ＥＳＴ）、苹果酸脱氢酶（ＭＤＨ）同工酶以及蛋白质电泳结果．通过电泳结合光密度扫描研究,发现冬瓜杂种一代“粉杂”与其双亲的过氧化物酶同工酶差异显著．过氧化物酶同工酶可以作为鉴别冬瓜假杂种的生化指标．     

贝母属植物酯酶同工酶研究

用聚丙烯酰胺凝胶梯度电泳测定了采自甘的肃的贝母属植物,共８种１９个居群的酯酶工酶,结果表明,整个酶谱共显出２８条酶带,分成Ａ,Ｂ,Ｃ,Ｄ４个区域,共有的酶带是Ａ２,Ａ７,Ｃ２２。各种（变种）间在酶带数目,迁移率及酶谱扫描均有不同程度的差异,同一样品３次取材的电泳结果相同,说明同工酶谱有很好的重复性,可以作为贝母属亲缘关系稳定的生化指标,舟曲贝母的酶谱与太白贝母的酶谱差异较大,建议将其提和或到种级水     

LDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳分析植物过氧化物酶同工酶

以高粱和甘蓝型油菜叶片为材料,用十二烷基磺酸锂不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（LDS-PAGE）检测过氧化物酶同工酶的结果表明,LDS-PAGE的酶带条数比非变性不连续聚丙烯酰胺凝胶电泳（native PAGE）明显增加,分辨率大大提高,上样量少,胶片易保存;比复性电泳（G-PAGE）的步骤简单,电泳后无需除去LDS即可直接按常规活性染色方法染色。     

人胃液乳酸脱氢酶同工酶定量电泳测定方法

本文介绍一个琼脂糖凝胶电泳定量测定胃液乳酸脱氢酶(LDH)同工酶的简易方法。包括一个灵敏的染色程序和光密度扫描,或洗脱比色。并完全适用于血清和组织抽提液中LDH同工酶分析。血清和组织提取液LDH同工酶的分离检测,最初用淀粉凝胶和琼脂凝胶电泳,四氮唑蓝(NBT)染色,以后用醋酸纤维薄膜电泳1961年提出的琼脂糖凝胶电泳,优于纸电泳和琼脂电泳的是:(1)无吸附作用,(2)含荷电基团少,电     

太子参过氧化物酶同工酶分析

采用聚丙烯酰胺凝胶垂直电泳,分析了6个品种太子参的过氧化物酶同工酶,并运用相似关系R-链连接法进行了模糊聚类分析划分了类群,探讨类群之间的亲缘关系,从酶学水平的表型证实了宣参老品种是原生种,其它类群有一定程度分化,但都与宣参老品种有着密切的亲缘关系。     

中国胭脂鱼同工酶的研究

本文利用同工酶电泳方法,研究了中国胭脂鱼的种群关系。分析的五种酶均为单态,故中国胭脂鱼应为一个种。并根据重复基因表达(祖征)情况,认为它应属于较原始的种类。少数重复基因不表达,形成功能二倍体为离征。其酶谱表现了组织的异质性,伹无性别、年龄的差异。     

三种分析水稻F1代幼苗生长过程中酯酶同工酶变化的电泳方法比较

利用聚酯胶片作为凝胶支持物的超薄等电聚焦电泳(UTLIEF)研究水稻F1种子萌发过程中的酯酶同工酶多态性变化的结果表明,UTLIEF相比非变性不连续聚丙烯酰胺电泳(native-PAGE)和常规等电聚焦电泳(IEF)得到的酯酶同工酶图谱更清晰,酶带数目和强弱的多态性变化更高,用pH 2～9的两性电解质时等电聚焦的电泳效果较好.     

原鸡不同组织乳酸脱氢酶同工酶研究

本文对中国原鸡的血浆,心脏肌肉和肝脏等不同组织,用薄层等电聚焦电泳进行乳酸脱氢酶同工酶试验比较。结果表明,原鸡不同组织在ｐＨ３．５－９．５时,电泳图和相应的扫描图有显著差异。     

江豚MDH与ADH同工酶电泳研究

用琼脂糖凝胶载玻片电泳方法测定了江豚(Neophocaena phocaenoides)体内几种组织的MDH和ADH同工酶。测定结果表明,各组织MDH同工酶酶谱基本相同,ADH同工酶酶谱呈现一定的组织特异性,且各同工酶活性可因底物或pH的改变而变化。     

青鱼不同组织中同工酶的表达模式

采用聚丙烯酰胺垂直板状连续电泳的方法对青鱼（Mylopharyngodonpiceus）的脑、晶体、心脏、肾脏、肝脏、肌肉等六种组织进行了十种同工酶（α－AMY、EST、GOT、C6PDH、TDH、LDHMDH、ME、POX、SOD）的电泳研究,并对各种酶的同工酶位点表达及酶谱表型进行了分析。结果表明α－AMY、EST、TDH、LDH、MDH、ME、POX、SOD、C6PDH存在不同程度的组织特异性,COT无明显组织差异．并对同工酶的组织分布特异性的生理意义进行了讨论。     

柴胡及体细胞杂种愈伤组织酯酶同工酶技术的优化

为解决柴胡及其体细胞杂种愈伤组织中次生代谢物多,同工酶粗提液粘稠、杂质多且呈混浊态,同工酶电泳谱带不清晰及易拖尾的问题,通过增加离心次数、调整酶粗提液上样体积等方法,得到了理想的酯酶同工酶电泳谱带。该法广泛适用于其它植物的同工酶聚丙烯酰胺凝胶电泳分析。     

中国石龙子的同工酶

通过聚丙烯酰胺凝胶电泳方法,对浙江温州和福建宁德中国石龙子（Eumeces chinensis)两个地理种群的皮肤、肌肉、胃、小肠、肝脏、肺、肾、心脏、性腺等9种组织中的乳酸脱氢酶、过氧化物酶和醇脱氢酶同工酶进行了研究。结果表明,中国石龙子两种群的同工酶电泳结果具有明显的地理种群特异性,且9种不同组织中的同工酶谱亦表现出组织特异性。     

漆树漆酶割漆季节活性变化及同工酶研究

采用分光光度法、SDS-PAGE电泳及等电聚焦电泳法分析了陕西平利县高八尺和大红袍2个品种漆树漆酶的活性变化规律及同工酶组成.结果表明:漆酶的活性在割漆季节中呈现6～7月下降,7～9月上升,并且高八尺漆酶的活性高于大红袍漆酶活性;确定漆酶的分子量为110 kDa;分离得到4种漆酶同工酶组成,而这4种同工酶组成在两个品种中存在差异,可以作为漆树品种鉴定的生化指标.     

肌酸激酶同工酶电泳对窒息新生儿心肌脑组织损伤的意义

目的:探讨血清肌酸激酶同工酶电泳对于新生儿窒息后发生心肌、脑组织损伤中的应用价值。方法:回顾性分析2009年1月至12月我院儿科ICU送检的CK同工酶电泳检测结果,并按不同疾病诊断进行分组统计。结果:在HIE、新生儿窒息患儿血清中CK-BB分别占总CK的13.9±16.8%、2.6±3.1%,CK-MB分别占总CK的2.5±2.0%、8.2±7.5%;CK-MM分别占总CK的91.4±14.1%、94.0±5.8%。新生儿窒息组可见CK-MB增加,显著高于对照及HIE组(P<0.01);HIE组患儿血清中可见CK-BB增加,与对照组、新生儿窒息组比较均有显著性差异(P<0.01)。结论:CK同工酶电泳对诊断新生儿窒息后引起的心脑损伤有重要价值。     

金黄地鼠不同组织碱性磷酸酶同工酶研究

采用聚丙烯酰胺圆盘电泳方法,分析了金黄地鼠血清,肝脏,心脏和骨骼肌4种组织的碱性磷酸酶同工酶。结果表明,在同种动物中不同组织的碱性磷酸酶谱具有明显的组织特异性,并且各部门酶带有重叠现象。在不同组织中碱性磷酸酶具有特异性,这是与各组织的生理功能相适应的结果。