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1.
核蛋白体上有3个tRNA的结合位点,A位、P位和E位。蛋白质合成过程中,核蛋白体移位,脱氨酰tRNA只从P位点移到E位点,而不脱落,只有当A位点与新的氨酰tRNA结合后,脱氨酰tRNA才与E位点脱离。如果错误的氨酰tRNA进入A位,则结合不稳定,就会脱落下来,这样保证蛋白质合成的准确性。 相似文献
2.
RNA在翻译中的功能关键词RNA,翻译mRNA翻译为蛋白质需要氨酰tRNA与mRNA上的相应密码子相互作用。密码子和反密码子间的Watson-Crick碱基配对的稳定性不足以保证有效、准确的解码,而要有核糖体的帮助。这种功能是由核糖体蛋白还是核糖体R... 相似文献
3.
生物体内蛋白质合成过程中 ,当核糖体遇到mRNA上的终止密码时 ,新合成的多肽链从肽酰 tRNA上释放出来 ,释放因子在这个过程中起着重要的作用 .释放因子有两类 ,第一类为密码子特异性因子 ,原核生物有RF1和RF2两种 ,RF1识别UAA/UAG ,RF2识别UAA/UGA终止密码子 ;真核生物中eRF1识别三个终止密码子 .第二类释放因子为密码子非特异性因子 ,原核生物中为RF3,真核生物中为eRF3.第一类释放因子识别终止密码子 ,并促进肽酰 tRNA酯键的水解 ,但要使这个反应进行得更有效 ,并使GTP水解 ,还需要第二类释放… 相似文献
4.
采用高表达大肠杆菌tRNALeu菌株提取、纯化了亮氨酸等受体转移核糖核酸tRNALeu1和tRNALeu2.利用稳态动力学手段研究了tRNALeu1及脱镁tRNALeu1在不同稀土离子作用下与纯化亮氨酰-tRNA合成酶的氨酰化作用.tRNALeu1与亮氨酰-tRNA合成酶的结合及催化效率均受参与稀土离子的影响,表观Km值有较明显的变化.结果表明,亮氨酰-tRNA合成酶催化的tRNALeu1氨酰化反应所需Mg2+能够被稀土离子取代,但亲合性能不同. 相似文献
5.
色氨酰tRNA合成酶 (TrpRS)在蛋白质合成系统中具有非常重要的地位。通过蛋白质同源模建得到了枯草杆菌 (Bacillussubtilis)色氨酰tRNA合成酶的三维结构。模建结果对色氨酰tRNA合成酶可能与tRNATrp结合的方式给出了预测。tRNATrp是跨亚基与TrpRS相互作用的。一个tRNATrp分子的反密码环和氨基酸接受茎分别与一个TrpRS的两个亚基相互作用。图中所示 ,红色和黄色分别代表两个tRNATrp分子 ,绿色和蓝色分别代表TrpRS的两个亚基。 TheFrontCoverSh… 相似文献
6.
tRNA个性研究进展 总被引:1,自引:0,他引:1
tRNA参与蛋白质生物合成中至关重要的两个功能上相连的生物化学事件。一种是由氨基酰-tRNA合成酶(aaRS)催化的tR-NA的氨基酰化(tRNA的个性),通过aaRS对tRNA的序列和结构元件的专一识别和氨基酰化,使tRNA转化为氨基酰tRNA。另... 相似文献
7.
合成的编码大肠杆菌tRNAArg2的基因,嵌入受IPTG诱导启动子控制的质粒pTrc99B中。用上述含目的基因的质粒转化大肠杆菌MT102,得到tRNAArg2基因序列正确的克隆。诱导表达后,与受体菌相比,转化子中的tRNAArg的含量高出10倍,tRNAArg2的含量高出30倍,占总tRNA的70%。DEAESephacel柱层析后,tRNAArg2的纯度即可达到88%。再用benzylDEAEcelulose柱层析可得到纯度为99%、精氨酸接受活力为1600pmole/A260单位的tRNAArg2。从4升过夜培养液中得到的40mg总tRNA。从中可得到18mg纯tRNAArg2,产率为62%。首次精确地测定了精氨酰tRNA合成酶催化tRNAArg2时的动力学常数。 相似文献
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蛋白质的豆蔻酰化许正平李伯良(浙江大学生物科学与技术系,杭州310027)(中国科学院上海生物化学研究所,上海200031)蛋白质豆蔻酰化是指真核细胞中豆蔻酰基在豆蔻酰CoA:蛋白质N端豆蔻酰转移酶(MyristoylCoA:proteinNmyr... 相似文献
9.
tmRNA是细菌体内一种代谢上稳定的RNA[1、2]。它的结构独特,其5′和3′末端序列有一个类似丙氨酰tRNA的结构,中间序列编码标记肽(tagpeptide)。与其独特的结构相适应,tmRNA兼有tRNA和mRNA的双重功能,在细胞中参与一种特殊... 相似文献
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构建了3种来源于水稻、人和啤酒酵母的线粒体tRNA^Trp基因。实验表明这些线粒体tRNA^Trp的体外转录产物具有被枯草杆菌色氨酰-tRNA合成酶(TrpRS)氨酰化的能力,但是不能被鼠肝来源的氨酰tRNA合成酶粗酶所催化。动力学资源常数测定表明枯草杆菌TrpRS对线粒体tRNA^Trp的亲和力为野生型tRNA^Trp的一半,而在催化效率上,水稻和啤酒酵母线粒体tRNA^Trp的色氨酰化能力比野 相似文献
11.
tRNA在相应的氨酰合成酶(以下简称合成酶)的催化作用下与其对应的氨基酸发生特异性连接是保证蛋白质正确翻译的首要前提。这种特异性主要是由tRNA上的一个或几个非连续的碱基或碱基对所组成的个性元件(identityelement)决定的。这些个性元件是... 相似文献
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RNA催化肽键生成的实验证据祁国荣(中国科学院上海生物化学研究所,上海200031)关键词RNA肽键生成氨酰-tRNA合成酶肽基转移酶当今生物界,从氨基酸到蛋白质的总步骤已基本阐明,示意图如下:图中IF、EF和RF分别为参与蛋白质合成的起始因子、延伸... 相似文献
13.
为研究tRNATrp 与色氨酰tRNA合成酶(TrpRS) 的相互识别及其结构、功能关系, 纯化了枯草杆菌TrpRS并用溴化氰活化的Sepharose 4B 将TrpRS固定化, 固定化TrpRS的蛋白质回收率为95 .5 % , 活力回收率为31.3% 。研究了固定化TrpRS的酶学性质, 其热稳定性和贮存稳定性方面均比液相TrpRS有了较大的提高, 最适温度、最适pH 均有一定程度的增大, 工作稳定性良好。以固定化TrpRS为亲和层析介质, 对含有20 个核苷酸随机序列、长度为56 个核苷酸的单链RNA 随机库进行了3 轮筛选,RNA 群体亲和固定化TrpRS的比例从4 .3 % 上升至14 .7 % 。筛选得到了与tRNATrp 氨基酸接受茎类似的RNA二级结构。实验结果表明固定化TrpRS可以作为SELEX 亲和层析介质, 进行模拟tRNATrp 分子的RNA 随机库的SELEX 筛选。 相似文献
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膜上tRNA结合蛋白的分离与初步鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
用TritonX-114分相法分离啤酒酵母的膜总蛋白,经过酵母tRNA分子交联的Sepharose4B亲和层析,用0-0.8mol/L(NH402SO4梯度缓冲液洗脱tRNA结合的蛋白质。凝胶阻滞电泳实验室鉴定出两种主要的与tRNA分子特异性结合的蛋白质。 相似文献
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精胺对牛肝tRNA^lle氨基酰化的刺激作用 总被引:3,自引:0,他引:3
本实验用纯化的牛肝异亮氨酸tRNA(tRNA^Ile)和异亮氨酰tRNA合成酶,研究了精胺对Ile-tRNA复合物形成及IleRS活性的作用。结果表明:精胺能特异地促使牛肝tRNA^Ile氨基酰化反应;对IleRS活性无影响;能明显地增加形成Ile-tRNA复合物反应的Vmax和tRNA^Ile的Km值。 相似文献
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蓖麻毒素是植物来源的核糖体失活蛋白。蓖麻毒素必须通过细胞的内膜系统到达内质网,然后转位至胞质,才能作用于胞质内的核糖体。在内质网中毒素的两条链分离,具有催化活性的A链被内质网上的蛋白质识别,并被转位到胞质内催化核糖体失活。现对内质网在参与蓖麻毒素胞内转运过程中的作用进行综述。 相似文献
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磷酸泛酰巯基乙胺基转移酶(phosphopantetheinyl transferases,PPTase)可催化脂肪酸合酶(fatty acid synthases,FAS)、聚酮合成酶(polyketide synthases,PKS)以及非核糖体肽合成酶(non-ribosomal peptide syntethases,NRPS)的酰基载体蛋白(acyl carrier protein,ACP)及肽酰载体蛋白(peptidyl carrier protein,PCP)等的翻译后修饰反应,将辅酶A(coenzyme A,CoA)上的磷酸泛酰巯基乙胺基转移到ACP及PCP的保守丝氨酸残基上,从而激发ACP及PCP的活性,由此脂肪酸、聚酮、非核糖体肽得以合成。在大部分真菌及细菌中都存在着PPTase,且其在生物代谢中起到重要的作用。现对其研究进展进行阐述。 相似文献
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人酪氨酰tRNA合成酶(TyrRS)在蛋白质合成时能催化酪氨酸共价结合到相应的tRNA分子上。新近美国Scripps研究所的Wakasugi和Schimmel证明,TyrRS能被断裂成两种具有不同细胞因子活性的片段,从而揭示了TyrRS的新功能[1]。人TyrRS在正常情况下存在胞浆里,不能分泌到胞外,但能从凋亡细胞里释放出来,保持完整长度。胞外弹性蛋白酶能激活人TyrRS使之断裂成两个片段:C末端片段或C末端结构域和N末端片段或催化N末端结构域(小TyrRS)。羧端结构域与人内皮单核细胞活化多肽II(EMA… 相似文献
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大鼠肝tRNA^Ile基因的克隆与体外转录 总被引:1,自引:1,他引:0
采用PCR扩增出大鼠肝tRNA^Ile基因,构建了重组质粒pGWIW,并用T7RNA聚合酶/启动子系统对其进行了体外表达。经过对转录产物片段大小及运用Northermblot鉴定,证明了获得了不含修饰核苷酸的大鼠肝tRNA^Ile。生物学活性检测显示:合成基因体外转录产物氨基酰经活性是天然tRNA的40%,提示修饰核苷酸在哺乳动物Ile-tRNA合成酶的识别过程中起重要作用。 相似文献
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识别位碱基G73,为tRNA^Trp的主要个性元件之一,tDNA^Trp-NCCrA的氨酰化活力测定及圆二色谱均表明在相同的pH条件下,识别位碱基的改变将影响到tRNA3′端的构象,而具有同一识别位碱基的tDNA^Trp在不同pH条件下,亦显示出不同的构象及氨酰化活力,tDNA^Trp的研究表明,是tRNA的构象而不是碱基本身决定了tRNA与其相应合成酶之间的精确识别。 相似文献