基于16S rRNA序列推断红蹼树蛙、棱皮树蛙和白斑小树蛙的非单系性

测定了4个种（红蹼树蛙、黑蹼树蛙、白斑小树蛙和红吸盘小树蛙）共11个种群的16S rRNA基因片段。双斑树蛙、马来棱皮树蛙、越南棱皮树蛙以及日本溪树蛙的同源序列通过GenBank检索获得。去除所有插入、缺失及模糊位点后，比对序列长度为500 bp, 其中变异位点115个, 简约信息位点92个。以日本溪树蛙为外群，运用Bayesian法、MP法和ML法构建了系统发育树。结果表明红蹼树蛙和白斑小树蛙在种级水平上均不是单系。红蹼树蛙海南种群与双斑树蛙亲缘关系更近，并且来自云南不同地理种群的红蹼树蛙可以分为两大支系；越南棱皮树蛙与红吸盘小树蛙聚为一支，马来棱皮树蛙嵌套在白斑小树蛙不同地理种群中。进而认为白斑小树蛙是马来棱皮树蛙的同物异名，建议将红吸盘小树蛙并入棱皮树蛙属。     

红吸盘棱皮树蛙新纪录及其分布区扩大

2010年到2013年间分别在广西大瑶山、广东南昆山、江西九连山和江西三百山共采集到8个红吸盘棱皮树蛙(Theloderma rhododiscus)标本,为江西省的新纪录。结合已有的资料,红吸盘棱皮树蛙已知分布点共有10个,红吸盘棱皮树蛙的分布区域可从原先的广西金秀、龙胜和南宁,向南扩展至越南北部和云南东南部,向东沿南岭山脉扩展至福建武夷山中段的广大连片的区域。     

湖南省两栖类新纪录——红吸盘棱皮树蛙

<正>红吸盘棱皮树蛙Theloderma rhododiscus隶属树蛙科Rhacophoridae棱皮树蛙属Theloderma,其模式产地在广西金秀大瑶山,分布于福建、广西和越南(费梁等,2009)。目前,该物种栖息地质量下降,种群数量较少(费梁等,2012),已被列为近危物种(NT;IUCN,2004)。John等(2000)在广东南岭国家级自然保护区首次发现了红吸盘棱皮树蛙的蝌蚪和卵,是该物种在广东省的新纪录。曾昭驰等(2017)在江西省也发现了红吸盘棱皮树蛙,并根据该物种在各地区的分布,估算了其在全国的潜在分布     

红蹼树蛙繁殖期鸣声特征及鸣叫节律

鸣叫是无尾两栖类声音通讯的重要环节之一。许多蛙类的鸣叫行为具有节律性,且受温度和湿度的影响。为研究红蹼树蛙(Rhacophorus rhodopus)的鸣声特征和鸣叫节律,2016年5—6月,采用录音机和指向性话筒,在野外录制了61只雄性红蹼树蛙的鸣声,并通过悬挂录音笔和自动温湿度记录仪研究其鸣叫节律(22 d)。结果发现:红蹼树蛙的鸣声分为单音节和多音节(音节数2~20;平均6.27±2.94)2种类型。与多音节鸣声的主频(2213.32±106.95 Hz)、音节时长(14.83±1.27 ms)和音节间隔(60.66±8.56 ms)相比,单音节鸣声的主频(2289.87±120.14 Hz)、音节时长(16.93±1.68 ms)和音节间隔(610.99±178.48ms)显著升高(P0.05),而2种鸣声的基频(单音节鸣声:212.51±21.63 Hz;多音节鸣声:225.39±26.80 Hz)无显著差异(P0.05)。红蹼树蛙每晚19:00至次日03:00具有鸣叫行为,22:00为高峰期。结果表明:红蹼树蛙主要通过改变鸣声的主频、音节时长、音节间隔以及音节数提高声音通讯效率。红蹼树蛙的鸣叫行为具有昼夜节律,且在一定程度上受温度和湿度的影响。     

中国两栖纲树蛙科一新纪录——绿背树蛙

2011年2月和3月在云南省红河州屏边县境内大围山国家级自然保护区采集到绿背树蛙Rhacophorus dorsoviridis Bourret,1937,为中国两栖纲新纪录.主要特征为:外侧3指蹼较发达,介于1/3蹼到1/2蹼之间;后肢较短,前伸贴体时胫跗关节仅达肩部;体背面绿色为主,体侧近胯部和股前后有近椭圆形黑斑;雄性具单咽下内声囊.绿背树蛙与黑点树蛙虽形态相似,但黑点树蛙外侧3指仅具1/4蹼,雄性具单咽下外声囊,喉部皮肤薄而松弛,故其应为关系较近的两个独立种.     

北部湾棱皮树蛙外周血细胞显微结构观察

本文以人们极少关注的两栖动物北部湾棱皮树蛙(Thelodermacorticale)为研究对象,采用瑞氏-姬姆萨混合染色法与血细胞计数法观察并统计了北部湾棱皮树蛙外周血细胞的形态特征和数量比例。结果显示,北部湾棱皮树蛙的外周血由红细胞、嗜中性粒细胞、嗜碱性粒细胞、嗜酸性粒细胞、淋巴细胞(包括大、小淋巴细胞)和单核细胞、血栓细胞7种细胞组成。其中,红细胞的数量最多,平均含量为2.43×10⁵个/mm³,多呈椭圆形或卵圆形,少数呈泪滴形、梨形、逗号形、梭形,具椭圆或圆形核,核染色质密集,偶尔可观察到正在进行直接分裂或有丝分裂的红细胞。白细胞的数量比红细胞少,平均含量为1.74×10⁴个/mm³,其中,小淋巴细胞占40.02%±1.77%、大淋巴细胞占10.83%±2.53%、单核细胞占23.17%±3.16%、嗜中性粒细胞占10.08%±4.62%、嗜碱性粒细胞占9.25%±2.69%、嗜酸性粒细胞占6.72%±1.50%。血栓细胞呈纺锤形和梭形,常单独存在,或者呈圆形和不规则圆形,数个集合在一起。     

浙江安徽交界处（淳安-黄山）张树蛙属物种归属问题初探

安徽树蛙（Zhangixalus zhoukaiyae）与丽水树蛙（Z. lishuiensis）自发表以来一直存在分类争议。为进一步探讨这两个物种的分类问题,本研究在浙江省和安徽省交界处（浙江淳安-安徽黄山）开展了长期的野外监测,采集到张树蛙属标本5号,并将该5号标本与安徽树蛙及丽水树蛙模式产地标本进行形态学比较和系统发育分析。结果表明,上述5号标本形态差异小,与安徽树蛙及丽水树蛙模式标本进行比较后,未发现显著形态学差异。基于16S rRNA基因的系统发育分析表明,本研究样本与安徽树蛙和丽水树蛙模式标本序列聚成一单系支;本研究样本与安徽树蛙模式标本遗传距离1.3%,与丽水树蛙模式标本遗传距离0.8%。基于本研究的分析结果,进一步厘清了丽水树蛙和安徽树蛙的分类争议,丽水树蛙可能是安徽树蛙的同物异名,它们应为不同的地理种群,彼此之间尚未达到种间差异水平。     

海南岛蛙类新纪录——广西棱皮树蛙

2007年3月30日在海南省尖峰岭自然保护区采得雄性广西棱皮树蛙(Theloderma kwangsiensis)1只,为海南岛蛙类新纪录.标本的形态特征与文献描述稍有差异.     

大壁虎不同地理居群的遗传变异与分化

以线粒体细胞色素b(Cytb)基因作为分子标记,对中国广西12个地区,以及越南和老挝大壁虎(Gekko gecko)进行序列测定,获得Cytb基因424bp的序列片段,共有7个单倍型。以白脊壁虎和沙虎为外群,用邻接法和最大简约法构建了大壁虎不同地理种群的系统发育关系,其结果显示中国广西4个不同单倍型黑大壁虎之间的平均遗传距离为0.20%—1.20%,越南红大壁虎与老挝红大壁虎之间的平均遗传距离为0.50%,广西宁明红大壁虎与越南红大壁虎和老挝红大壁虎之间平均遗传距离分别为1.70%和2.20%。广西黑大壁虎种群与红大壁虎种群之间的平均遗传距离为8.60%—9.50%,达到了亚种或种分化的差异。     

广西棱皮树蛙Theloderma kwangsiensis生物学初步研究

2010年至2012年对海南鹦哥岭两栖类动物进行了调查,野外采集到广西棱皮树蛙Theloderma kwangsiensis的蛙卵,对蛙卵进行了人工孵化,对蝌蚪与幼蛙进行了人工饲养。结果显示:该蛙繁殖时间为3月中旬,蛙卵孵化时间为14 d,6个月左右完成变态,蝌蚪唇齿式为Ⅰ∶2+2/1+1∶Ⅱ。该蛙种群数量极其稀少,建议加强保护。     

Phylogenetic relationships among Rhacophorinae (Rhacophoridae, Anura, Amphibia), with an emphasis on the Chinese species

The partial nucleotide sequence of mitochondrial 12S and 16S rRNA genes was determined for 23 Chinese species of Rhacophoridae (Amphibia: Anura), representing four of the eight recognized genera. Using Buergeriinae as the outgroup, phylogenetic analyses (maximum parsimony, maximum likelihood, and Bayesian inference) were performed in combination with already published mitochondrial 12S and 16S sequences of Rhacophorinae frogs. In all cases, Philautus romeri Smith, 1953 is recovered as the sister taxon to all other Rhacophorinae, although the support values are weak. Chirixalus doriae Boulenger, 1893 is closer to Chiromantis [ Chiromantis rufescens (Günther, 1868) and Chiromantis xerampelina Peters, 1854] than to Chirixalus vittatus (Boulenger, 1887). The clade { Philautus odontotarsus Ye & Fei, 1993, [ Philautus idiootocus (Kuramoto & Wang, 1987), Kurixalus eiffingeri (Boettger, 1895)]} is recovered with strong support. The monophyly of Theloderma and Rhacophorus rhodopus Liu & Hu, 1959 is not supported. It is suggested that Philautus albopunctatus Liu & Hu, 1962 should be placed into the synonymy of Theloderma asperum (Boulenger, 1886), and that Philautus rhododiscus Liu & Hu, 1962 should be assigned to Theloderma , so as to correct the paraphyly. Additionally, the monophyly of ' Aquixalus ' is not supported, and this requires further examination. Results also indicate that the Rhacophorus leucomystax (Gravenhorst, 1829)/ Rhacophorus megacephalus (Hallowell, 1861) complex needs further revision. Studies employing broader sampling and more molecular markers will be needed to resolve the deep relationships within the subfamily Rhacophorinae.  © 2008 The Linnean Society of London, Zoological Journal of the Linnean Society, 2008, 153 , 733–749.     

云南省日本三角涡虫不同地理种群mtDNA COⅠ基因序列分析及其系统发育

对采自中国云南省的日本三角涡虫(Dugesia japonica)13个地理种群的细胞色素C氧化酶I亚基基因(CO I)的部分片段进行PCR扩增、克隆和测序,以采自河南省的日本三角涡虫Luoyang种群为外群,用Clustal X 1.80、MEGA 4.0、PAUP*4.0、MrBayes 3.1.1等程序对其进行序...     

三种不同科属蛙类外周血细胞的比较

采用快速瑞氏-姬姆萨(Wright's-Giemsa's)染色法对斑腿泛树蛙(Polypedates megacephalus)和沼水蛙(Hylarana guentheri)的外周血细胞进行观察,并与北部湾棱皮树蛙(Theloderma corticale)己有的数据进行了比较.结果显示,三种蛙的血细胞均由红细胞、白...     

从线粒体基因探讨中国大头蛙群的分类及其属内地位

Partial sequences of the mitochondrial 12S rRNA and 16S rRNA gene were determined for 8 populations of three species of Chinese Limnonectes, and aligned with the published sequences of Limnonectes from other parts of the world. When Nanorana parker, Paa boulengeri, Fejervarya limnocharis and Hoplobatrachus rugulosus was used as outgroup taxa (Accession Nos. AY158705, AY313685, AF206111, AF206491, AY322311). The sequences of the 12S rRNA and 16S rRNA genes totaled 950 nueleotide positions with gaps including 510 variable sites. We reconstructed phylogenetie trees using Clustal X 1.8, Mega 2.1 and PHYLIP 3.5e software, and using the maximum parsimony and maximum likelihood methods, respectively. Our analyses suggest that these fanged frogs from China are another monophyletie group in addition to the four monophyletie groups identified by previous studies. The Chinese Limnonectes were grouped into three elades (BCL 55% ). The first elade contains one species (BCL 100% ), from a population of Limnoneetes fragilis from Hainan Province. The second contains four individuals (BCL 100% ), i. e. two populations of Limnonectes kuhlii from Yunnan Province. The third contains one species (BCL 100% ), i. e. five populations of Limnonectes fujianensis from Fujian Province and 1 from Taiwan Province. The resulted phylogenetie trees indicate L. fragilis is basal to L. kuhlii L. fujianensis 。     

海南鹦哥岭自然保护区两栖动物区系及属种海南新纪录

2003～2008年,多次对海南省中部山区鹦哥岭自然保护区及其周边进行两栖爬行动物多样性调查,共记录到39种两栖动物(有尾类1种,无尾类38种),隶属于2目7科23属。其中,包括海南属种新纪录小姬蛙属的德力小姬蛙(Micryletta inornata)和新纪录种马来棱皮树蛙(Theloderma asperum)。另外,还采集到2个待定种,分别为小蟾属物种(Parapelophryne sp.)和一种大型的棱皮树蛙属物种(Theloderma sp.),但需要进一步研究鉴定。鹦哥岭调查中共记录到39种(88.6%)已知在海南有分布的两栖动物,包括11个海南特有种,占海南13种特有两栖动物的84.6%,这说明鹦哥岭自然保护区在海南岛两栖动物多样性的保护中具有不可替代的地位。     

云南地方稻waxy基因序列多样性分析

利用特异引物Wx-F/AG-2对来源于云南省16个州市64个县的252份地方稻种waxy基因中含有微卫星序列(CT)n和第一内含子的序列进行PCR扩增并测序。结果表明在268个碱基的序列内检测到4个变异位点:第一内含子上游56位处(CT)n存在(CT)10、(CT)11、(CT)12、(CT)14、(CT)16、(CT)17、(CT)18、(CT)19、(CT)20、(CT)21等10种变异;(CT)11、(CT)18、(CT)17、(CT)12、(CT)10等5种单倍型是云南优势类型,合计占供试材料的92.85%;籼稻以(CT)10、(CT)11、(CT)12为主,而粳稻以(CT)11、(CT)12、(CT)17和(CT)18为主;第一内含子+1位存在G/T变异,81.75%品种是G,T只出现在(CT)16、(CT)17、(CT)18和(CT)20的品种中,其频率在籼稻中为13.48%,粳稻20.86%,水稻16.17%,陆稻22.35%,粘稻10.47%,糯稻42.62%。+86-88位存在ATA/GTA/A--3种变异;+128位处存在(AATT)5和(AATT)6 2种变异。根据这4个变异位点,可将252个云南地方稻种归为16种单倍型,其中Wx4(32.54%)、Wx9(13.89%)、Wx12(12.7%)、Wx5(12.3%)、Wx1(8.33%)、Wx11(7.94%)是主要类型,合计87.7%,其他类型频率较低。籼/粳亚种、水/陆稻和粘/糯中存在单倍型种类和单倍型频率两方面的差异,籼稻/粳稻、水/陆稻和粘/糯稻各亚种或生态型均有独享的单倍型,共享单倍型频率也存在差异,表明亚种间或生态型间发生了一定的遗传分化。单倍型地理分布分析表明,临沧、普洱单倍型种类最丰富,以之为中心向外扩展,单倍型种类有减少的趋势,第一内含子+1位的T主要分布在临沧、普洱、西双版纳、德宏等南部地区。本研究揭示了云南地方稻种群体waxy基因的变异和分布特点。     

Molecular phylogeny of Rhacophoridae (Anura): A framework of taxonomic reassignment of species within the genera Aquixalus, Chiromantis, Rhacophorus, and Philautus

Phylogenetic relationships among representative species of the family Rhacophoridae were investigated based on 2904bp of sequences from both mitochondrial (12S rRNA, 16S rRNA, the complete t-RNA for valine), and nuclear (tyrosinase, rhodopsin) genes. Maximum parsimony, maximum likelihood, and Bayesian analyses were employed to reconstruct the phylogenetic trees. This analysis, combined with previous phylogenetic studies, serves as a framework for future work in rhacophorid systematics. The monophyly of Rhacophorus is strongly confirmed except for the species R.hainanus, which is the sister taxon to A.odontotarsus. The non-monophyly of the newly designated genus Aquixalus by Delorme et al. [Delorme, M., Dubois, A., Grosjean, S., Ohler, A., 2005. Une nouvelle classification générique et subgénérique de la tribu des Philautini (Amphibia, Anura, Ranidae, Rhacophorinae). Bull. Mens. Soc. Linn. Lyon 74, 165-171] is further confirmed. Aquixalus (Aquixalus) forms a well-supported monophyletic group within Kurixalus, whereas, Aquixalus (Gracixalus) is more closely related to species of Rhacophorus, Polypedates, and Chiromantis. Philautus as currently understood, does not form a monophyletic group. Philautus (Kirtixalus) is the sister group to the clade comprising Kurixalus and Aquixalus (Aquixalus), and more remotely related to Philautus (Philautus). Chiromantisromeri does not cluster with species of Chiromantis, and forms a basal clade to all rhacophorids save Buergeria. We propose some taxonomic changes that reflect these findings, but further revision should await more detailed studies, which include combined morphological and molecular analyses, with greater species sampling.     

云南西花蓟马rDNA-ITS2遗传多态性及其种群扩张

应用rDNA-ITS2基因序列对云南各地理种群西花蓟马Frankliniella occidentalis(Pergande)的遗传结构和遗传分化程度进行初步研究。经过比对112条序列,共发现了59个变异位点,定义了30种单倍型。云南省西花蓟马的单倍型多态性较高(Hd=0.90219),而核酸多态性较低(Pi=0.00891)。各地理种群西花蓟马的遗传分化指数Fst为0.00810,基因流Nm为30.61,表明各地理种群间遗传分化程度非常低,种群间存在充分的基因交流。对群体进行中性检验、错配分析表明西花蓟马群体曾经历过近期的种群扩张。分子方差分析(AMOVA)表明,云南西花蓟马的遗传变异主要来自于种群内部,种群间的遗传变异水平还非常低。从分子生物学的角度上也证实了西花蓟马近期入侵云南的事实。     

云南四个瓜实蝇地理种群的遗传关系分析

对云南个不同地理区域的瓜实蝇种群(Bactrocera cucurbitae)共23个个体的线粒体DNA细胞色素b基因中的部分序列进行测定和分析,并以桔小实蝇(B.dorsalis)、番石榴实蝇(B.correct)和南瓜实蝇(B.tau)为外群种构建了不同单倍型的N-J分子系统树.在获得的26bp序列中,A+T含量约占65.0%,有个多态位点,无任何碱基插入和缺失.这些位点共定义5种单倍型,其中一种为共享单倍型.对个瓜实蝇地理种群进行Fst值和基因流动统计,Fst值为0.16667～0.20000(P＞0.05),Nm值为2.00～2.50.5种单倍型共形成了3个聚类簇.可以认为,个地理种群间均存在一定程度的遗传分化,但分化程度不高,导致遗传分化的主要因素是地理隔离,而种群遗传分化程度低与瓜实蝇所在环境条件相似有关.