棉铃虫中肠几种酶的组织化学研究

采用酶组织化学方法研究了棉铃虫中肠三磷酸腺苷酶、酸性磷酸酶和碱性磷酸酶的分布和活性。结果显示三种酶在棉铃虫中肠均有分布,但分布部位各不相同,其中,三磷酸腺苷酶在肠壁分泌细胞、肠壁细胞、环肌和纵肌均有分布,以肠壁分泌细胞活性较高;碱性磷酸酶主要分布于肠壁分泌细胞,在肠壁分泌细胞做绒毛处活性最高;酸性磷酸酶分布于肠壁细胞、环肌和纵肌,在肠壁细胞底膜处活性最高。这些酶可以作为棉铃虫中肠不同条件下的生理指标。     

异丙肾上腺素导致大鼠心肌损伤的酶组织化学及超微结构观察

健康成年Ｗｉｓｔａｒ大鼠５０只,雌雄各半,体重２１０±２０ｇ。正常对照组１０只,实验组４０只,每只大鼠皮下注射盐酸异丙肾上腺素（ＩＳＰ）５．０ｍｇ／ｋｇ,在注射后４、１２、２４、４８小时,分别处死１０只大鼠,取出心脏,进行（１）ＨＥ染色,（２）组化染色,按Ｐｅａｒｓｏｎ法显示ＳＤＨ,用物镜测微网计算每组ＳＤＨ活性产物的缺失面积;（３）超微结构观察,按立体学图像分析原理,用《多功能医学图像处理系统》微机计算各组电镜片中线粒体体密度值。本实验的观察表明：心肌细胞ＳＤＨ在注射ＩＳＰ后显示出不同的阶段性变化;ＳＤＨ的活性产物缺失部位与ＨＥ染色的心肌坏死部位一致;心肌ＳＤＨ的活性变化与线粒体的损伤同时出现,并与线粒体的破坏程度密切相关。     

牛心线粒体ATP酶抑制蛋白对酶的催化部位构象的影响

以标记在ＡＴＰ酶（Ｆ１）催化部位的ＴＮＰ－ＡＴＰ为荧光探针,比较测定了Ｆ１与其抑制蛋白（ＩＦ１）结合前后的ＴＮＰ－ＡＴＰ荧光光谱,荧光寿命和荧光偏振光谱,结果表明在ＩＦ１的作用下,酶分子催化部位的极性下降,ＴＮＰ－ＡＴＰ分子的自由度减小,提示ＩＦ１引起了Ｆ１催化部位的构象改变。     

紫红链霉菌对钉螺酶组织化学的影响

为研究紫红链霉菌灭螺作用的机理,将钉螺分别浸泡于紫红链霉菌培养液(含菌4×106/ml)及去氯水、培养基中36h后,用酶组织化学方法显示各组钉螺肝脏、中枢神经节、头足部及鳃的Mg2 激活的三磷酸腺苷酶(Mg2 ATPase)、胆碱脂酶(ChE)、一氧化氮合酶(NOS)、乳酸脱氢酶(LDH)、琥珀酸脱氢酶(SDH)并观察其变化。结果显示:菌液浸泡组钉螺的Mg2 ATPase活性在肝脏、中枢神经节、头足部及鳃部均明显减弱或完全失活,LDH在中枢神经节、头足部也有一定程度减弱,ChE、NOS、SDH在肝脏、中枢神经节、头足部及鳃部与去氯水组无明显差异;培养基组与去氯水组钉螺相应部位的Mg2 ATPase、ChE、NOS、LDH、SDH活性一致。结果提示:紫红链霉菌的灭螺作用机理主要在于破坏钉螺体内Mg2 ATPase和LDH活性,使ATP生成和利用障碍,最终因能量缺乏而丧失生命功能直至死亡     

克拉玛依大沙鼠体内利什曼原虫三种酶的组织化学观察

1989年，管立人等在新疆克拉玛依大沙鼠的体内发现了一种利什曼原虫，其大小及对实验动物的致病力均与苷肃及内蒙古地区大沙鼠体内寄生的沙鼠利什曼原虫有显著差别。为此，我们着重对其体内三种水解酶作了一些研究，并与杜氏利什曼原虫进行了比较，希冀作为了解该虫生理学的部分资料，现将结果初报如下。     

生物膜能量偶联ATP酶的研究牛心线粒体F1冷盐解离后各部分的亚…

纯化的牛心线粒体Ｆ１ＡＴＰ酶（Ｆ１）在有１ｍｏｌ／Ｌ ＫＣＬ的介质中，０℃保温１ｈ酶活性降到接近于零，经脱盐并在室温（２０－２５℃）保温，可恢复的６０％的酶活性。电泳结果表明，冷盐处理１ｈ的样品解离成了四个亚部分，这四个部分的亚基组成分别是Ⅰ, α，γ，δ，ε；Ⅱ，β，δ，ε；Ⅲ，β，ε，Ⅳ，β。经冷盐处理１ｈ和５ｈ的Ｆ１进行ＨＰＬＣ分析的结果有显著的差碑 ．     

几种鱼类线粒体ATP酶活性的比较研究

本文比较了草鱼(Ctenopharyngodon idellus)瓦氏雅罗鱼(Leucisous waleckii)和鲮鱼(Cirrhinus molitorella)在常、低温驯养时,肝细胞线粒体ATP酶活性;并采用吐温80处理线粒体,观察其对线粒体ATP酶活化能Arrhenius图折点温度的影响,讨论了线粒体ATP酶活性与鱼类低温适应能力的相关性。认为鱼类线粒体ATP酶活化能折点温度在常、低温驯养时的差异程度和鱼的抗寒性能有关;低温驯养时,线粒体ATP酶活化能折点温度的高低和鱼的低温耐受能力有关。     

Mg~(2+)对线粒体H~+-ATP酶的F_O在脂质体重建时的影响

线粒体ATP合成酶是由具有H~+转运活性的F_0亚基,可溶性的催化中心F_1和连接二者的致寡霉素敏感蛋白(OSCP)所组成. 将纯化的猪心线粒体H—ATP酶复合体的F_0亚基,用胆酸盐透析法在有Mg~(2+)和无Mg~(2+)条件下在大豆磷脂脂质体上重建得脂酶体(L·F_0).用探剂9-AA荧光淬灭法和电权法测定了两种脂酶体的质子转运活力.由两种方法所得的实验结果均表明,在透返介质中加入1mmolmg~(2+)条件下形成的脂酶体(L·F_0)+Mg~(2+)较无Mg~(2+)者的质子转运活性明显增加.前者的荧光强度变化较后者增加约30%;由电极法测得的质子转运的初速度,前者为5nmolH~+′sF_0,后者为3nmolH~+′s·nmolF_O,质子转运活性高约一倍.这进一步支持Mg~(2+)通过调节脂的物理状态而诱导F_O具有较适合的构象,并进而将这一影响传递至F_1,使整个H~+—AhP酶具有较高活性的假设.     

啤酒对肝影响的组织化学及酶组织化学研究

啤酒为营养丰富的低度酒精饮料。目的　探讨啤酒对肝功能的影响。方法　以小白鼠作为实验对象 ,用 2 0只刚断乳昆明种 (清洁级 )小鼠随机分为两组 ,A组 (10只 )饲以标准饲料 ,强制以啤酒为饮料。B组 (10只 )饲以标准饲料 ,自由饮清水。经 2周喂养后处死 ,取小鼠肝右叶作AcP、LDH、ChE、ATPase、SDH、PAS组织化学及酶组织化学检测。结果　 (1)A、B两组未见肝细胞变性。 (2 )A、B两组AcP为阳性 (+) ,LDH为阳性 (+)。 (3)A、B两组ChE为中等阳性 ( ) ,ATPase为阳性 (+)。 (4)A组SDH为阳性 (+) ,PAS为中等阳性 ( )。B组SDH为中等阳性( ) ,PAS为强阳性 ( )。将A、B两组PAS、SDH标本各随机抽五张 ,经IBAS图像分析系统作定量测定 (P <0 0 5 ,即抽样误差小于 5 % ,有统计学意义 )。A、B组小鼠肝均无明显组织学损害。A、B组小鼠肝蛋白质及糖原合成、胆汁分泌功能未受影响。结论　长期饮用啤酒对小鼠肝的组织结构、肝合成、分泌及代谢功能未产生明显的损害及影响。     

Mg~（2＋）对线粒体H~＋－ATP酶的阿霉素敏感性的拮抗效应──H~＋－AT

用生物膜的拆离与重建技术,研究了Ｍｇ２＋对阿霉素（Ａｄｒｉａｍｙｃｉｎ,ＡＤＭ）抑制猪心线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶及其重建脂酶体（Ｌ·Ｈ＋－ＡＴＰ酶）活性的影响。用胆酸盐透析方法将Ｈ＋－ＡＴＰ酶在大豆磷脂脂质体上重建。实验结果表明,重建Ｈ＋－ＡＴＰ酶的ＡＤＭ的敏感性较仅纯化而未重建者明显增加,这提示ＡＤＭ的抑制作用依赖于磷脂。但是,在有Ｍｇ２＋（１ｍｍｏｌ／Ｌ）条件下重建的Ｈ＋－ＡＴＰ酶对ＡＤＭ的敏感性较无Ｍｇ２＋者却又显著降低,这提示Ｍｇ２＋对ＡＤＭ抑制线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶的作用具有拮抗效应。Ｍｇ２＋的这种拮抗效应是与其在透析重建Ｈ＋－ＡＴＰ酶过程中诱导脂酶体的磷脂的物理状态的改变相关的。所得实验结果对于阐明ＡＤＭ抑制线粒体Ｈ＋－ＡＴＰ酶的作用机理与磷脂的相关性提供了较直接的实验证据。     

氦氖激光穴位照射对兔子宫和卵巢酸性磷酸酶（ACP）、碱性磷酸酶（ALP）的作用效应

用不同功率的Ｈｅ—Ｎｅ激光照射雌兔外生殖器,照射穴位,用生化方法分别测定兔子宫和卵巢的酸性磷酸酶（ＡＣＰ）、碱性磷酸酶（ＡＬＰ）的活性。激光照射后,子宫和卵巢的ＡＣＰ酶活性保持基本恒定状态,与正常对照组比较无显著差异;相反,ＡＬＰ酶活性显著提高。分析这两种酶在激光用射后表现出来的差异,作者认为是激光作用使细胞内环境改变之故,且这两种酶对Ｈｅ—Ｎｅ激光的耐受性有所不同。     

络泰对大鼠实验性急性心肌缺血的保护作用及抗脂过氧化作用

采用结扎大鼠冠脉造成急性心肌缺血模型,观察了络泰（三七总皂甙的新型剂）抗实验性心肌缺血作用。结果表明,络泰对大鼠实验性急性心肌缺血有一定程度的保护作用,本品50mg/kg显著减少心电图S－T段的上多（P＜0．01）;络泰5mg/kg、50mg/kg和100mg/kg均显著降低血清CPK（P＜0．05,P＜0．01）;在缩小心肌梗塞范围方面也有一定作用,但统计学上没有显著性。络泰三个剂量组能显著提高SOD活性（P＜0．01）,降低MDA水平（P＜0．05）;本品50mg/kg和100mg/kg还能显著增加心肌缺血时血中PGI2水平（P＜0．05）,提示络泰心肌缺血的保护作用与抗脂过氧化作用有关,其促进PGI2合成作用可能与其抗心肌缺血有关。     

白皮松茎次生韧皮部中蛋白细胞的细胞化学研究

蛋白细胞是裸子植物次生韧皮部中唯一与筛胞发生单侧筛域联系的一类特殊的薄壁组织细胞,并且具有相当高的代谢潜势。本文在白皮松次生韧皮部蛋白细胞解剖学和细胞学研究的基础上进行了蛋白细胞中酸性磷酸酯酶和 ATP 酶的定位,首次报道成熟蛋白细胞中存在相当高的 ATP 酶活性的研究结果。     

妊娠小鼠子宫腺细胞区的碱性磷酸酶与酸性磷酸酶的研究

小鼠子宫系膜三角区在妊娠后出现上皮样细胞群,群内的细胞称颗粒子宫腺细胞(granu-lated metriial gland cells,GMG细胞),该区改称子宫腺细胞区(metriial gland cell area,MGCA).取孕12～19天MGCA,液氮速冻,恒冷箱切片,偶氮偶联法显示碱性磷酸酶(ALP)与酸性磷酸酶(ACP).结果为,ALP主要分布于GMG细胞群间的疏松结缔组织中;GMG细胞为阴性反应.ACP主要位于GMG细胞内,群间结缔组织含量较少.两种酶的活性随胎龄增加而减弱.ALP与ACP的定位与活性变化特性显示它们与GMG细胞功能关系密切.     

神经生长因子促进坐骨神经再生修复的酶组织化学研究

目的研究对兔右坐骨神经损伤后局部给予蛇毒神经生长因子(NGF),观察坐骨神经酶活性变化和超微结构的恢复情况,探讨NGF对神经再生的影响.方法乙酰胆碱酯酶(AChE)、酸性磷酸酶(ACPase)的酶组织化学技术和电镜技术.结果神经损伤后:AChE活性明显下降,NGF组的AChE活性恢复快于盐水对照组;ACPase活性逐渐增高,NGF组的ACPase活性恢复时间短于盐水对照组.坐骨神经的超微结构在神经损伤后也发生变化,NGF组的变化程度小于盐水对照组,恢复时间短于对照组.结论NGF可通过影响酶物质的代谢而起到加快受损神经恢复的作用.为临床上应用蛇毒NGF治疗周围神经损伤提供形态学依据.     

重组葡激酶（r—Sak）在家兔体内的药代动力学研究

家兔静脉注射重组葡激酶(r-Sak)后,经用二室模型(权重系数1/C)计算。结果表明,该药分布相较短,t1/2α约为1.11±0.72 min,消除也快,t1/2β约为8.64±0.21min,但在胆汁及尿液中未测出r-Sak的生物活性。     

狗急性心肌缺血早期冠脉侧支血流量与血液流变学变化的关系

本实验在14只麻醉开胸狗身上观察了急性心肌缺血早期冠脉侧支血流量与血液流变学变化的关系。动物均分为两组:Ⅰ组,在不控制血压的情况下,观察心肌缺血早期单位压力差下冠脉侧支血管流量(CVC)的变化;Ⅱ组,在保持主动脉血压不变的条件下,根据 Wyatt 等公式计算流经缺血区末梢血管的有效侧支血流量(ECF)。实验结果表明,阻断冠脉血流30min时,低切变率下全血比粘度已明显增高,随后继续增加,60min 时Ⅰ、Ⅱ两组分别较对照值增高19.0%和11.4%(均为P<0.01)。血液粘度增高时,CVC 仅轻度降低(p>0.05),但 ECF却随着血液粘度的增高而逐渐明显降低,缺血60min 时较对照值降低12.1±2.6%(P<0.01)。血液粘度变化与 ECF 变化之间呈明显负相关(r=-0.796,p<002)。上述结果提示,心肌缺血早期血液流变学的异常变化虽然对冠脉侧支血管的血流阻力影响较小,但却使流经缺血区末梢血管的有效侧支血流量明显减少而加重心肌缺血。     

高氧预适应对大鼠心肌缺血─再灌注时自由基的影响

为了解决高氧预适应（ＨｙｐｅｒｏｘｉｃｐｒｅｃｏｎｄｉｔｉｏｎｉｎｇＨＯＰ）对大鼠心肌缺血再灌注时自由基的影响,本实验将实验组大鼠放入高压氧舱内,每日吸８０－８５％氧气（１ａｔｍ）６ｈ,连续７ｄ。利用Ｌａｎｇｅｎｄｏｒｆ装置做成心肌缺血再灌注模型,采用电子自旋共振技术测定自由基含量。实验动物随机分为二组,第一组为对照组：缺血１０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。第二组为ＨＯＰ组：缺血１０ｍｉｎ,再灌注６０ｍｉｎ。实验观察冠脉回流液中自由基ＰＢＮ加合物含量。结果表明：在再灌注过程中,１、５、１０ｍｉｎ３个时间点,ＨＯＰ组ＰＢＮ加合物含量较对照组明显减少。提示：ＨＯＰ能减少缺血再灌注时自由基的产生。     

MPG静注减轻清醒狗缺血后心肌顿抑

为了解自由基清除剂２巯基丙酰基甘氨酸（ＭＰＧ）能否减轻缺血后心肌顿抑,本文报告了在清醒狗模型中氧自由基清除剂ＭＰＧ对缺血后心肌顿抑的疗效。３９只清醒狗模型阻闭前降支１５ｍｉｎ后再灌注４８ｈ。治疗组（ｎ＝１７）于阻闭前１５ｍｉｎ始静脉给予ＭＰＧ（１００ｍｇ／ｋｇ·ｈ）,共持续６０ｍｉｎ,对照组（ｎ＝２２）给予生理盐水。结果表明,二组缺血区侧支血流、缺血区大小及血液动力学指标无显著差异,而治疗组室壁收缩增厚指数（一种局部心肌功能指标）于再灌注后２、３、４、５、６ｈ明显大于对照组,当侧支血流低于１０％时,改善更明显。指数回归分析结果显示,治疗组侧支血流越低,收缩功能恢复程度越明显。结论,ＭＰＧ可以促进缺血后心肌顿抑的恢复,这种有益的疗效在低侧支血流时更明显。     

内毒素致家兔氧提取障碍的实验模型

以小剂量大肠杆菌内毒素分次注射复制了家兔病理性氧供依赖性(POSD)模型。采用再呼吸法造成渐进性低氧以降低总氧运输量(To_2),从而考察氧耗量(Vo_2)随To_2降低而变化的规律。结果表明,在渐进性低氧过程,动、静脉血氧含量(Cao_2,Cvo_2)的下降趋势达显著水平(P<0.01,ANOVA),但内毒素组Cvo_2下降较为缓慢,故其动静脉血氧含量差(Cao_2-Cvo_2)越来越小,对照组则相反。在To_2-Vo_2的关系中,对照组可清楚地分为“非依赖”与“依赖”两部分,其总氧运输量临界值和临界氧提取率分别为10.18±1.69ml·min~(-1)·kg~(-1)和0.85±0.10;内毒素组从未出现坪区,表明从呼吸空气开始Vo_2对To_2即呈依赖关系。对照组依赖段的斜率,即氧提取率为0.730,内毒素组斜率为0.473,两者差别达显著水平(P<0.05)。本实验成功地复制出兔POSD模型及有效的研究途径。